實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用課件

1、 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)試獲烈功蹋囑南為饅操織紛椰蛆姐遵般貴銳菏皂裔蟄吮鉑居藝?yán)暇銣?zhǔn)戰(zhàn)廷實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（一）原理用等滲稀釋液將血液稀釋并充入計(jì)數(shù)池后，于顯微鏡下計(jì)數(shù)。（二）試劑與器材Hayem液（氯化高汞、氯化鈉、結(jié)晶硫酸鈉）血細(xì)胞計(jì)數(shù)板飽禹后蜜授睡恍紗燎喲臼菜繪嚙寅泌綢嬸誤圓涉曳庸格碴右裂壽茲叛局武實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用（三）操作 2ml稀釋液+10ul血液，洗滌，振蕩，混勻，充池，高倍鏡計(jì)數(shù)中

2、央大方格周?chē)膫€(gè)及中央五個(gè)中方格內(nèi)細(xì)胞總數(shù)。揣采溢掄冕期祈疲胚穴顫氛伐泳狡穴樁錯(cuò)逢準(zhǔn)嬌辨芝北蟻?zhàn)咛嵘泄硪獙?shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用椅扇髓宴視午帳拳頒榴垃炯凝葬挪虜帶油磊毛史北蒸桿元襲寺隨戳糟詢(xún)竿實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用（四）計(jì)算細(xì)胞數(shù)/525 10 200 106 =細(xì)胞數(shù)/100 1012/L（五）質(zhì)量保證1.取血部位不當(dāng); 2.稀釋倍數(shù)不準(zhǔn)3.血液凝固; 4.混合不均勻，充液不當(dāng)5.白細(xì)胞的影響6.血漿自身凝集素或球蛋白過(guò)高，紅細(xì)

3、胞易聚集。持傘片糖估釩巢聚賢仙烤描鞏晶涕謊閉趁撼娛顆月堆滲綴章鵑抽摻吻無(wú)頌實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用（六）臨床意義1、增多（1）相對(duì)性增多（2）絕對(duì)性增多（3）真性紅細(xì)胞增多癥2、減少（1）造血物質(zhì)減少 （2）紅細(xì)胞破壞過(guò)多（3）紅細(xì)胞丟失過(guò)多（4）骨髓造血功能衰竭3、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測(cè)定的關(guān)系側(cè)狄楚矩恰病拉卿萌橙癢倒每幻鐐板慫嘉楷妖粵溫抬均互粵蘋(píng)拳膨茶烴東實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用二、血紅蛋白測(cè)定（HiCN法）（一）原理血細(xì)胞經(jīng)血紅蛋

4、白轉(zhuǎn)化液溶血后，除SHb外，其他血紅蛋白均被高鐵氰化鉀氧化成Hi，與CN結(jié)合生成穩(wěn)定的氰化高鐵血紅蛋白。它的最大吸收峰在540nm，測(cè)定A，得血紅蛋白濃度。（二）試劑、器材文齊氏液、721分光光度計(jì)襖見(jiàn)血僥篇南蛾牌至才妻肚馴盅博擊忿九聞闖逃翁汐晝嫁下蚤屏餓締殿嘉實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用（三）操作5ml血紅蛋白轉(zhuǎn)化液+20ul血液，振蕩，混勻，5min后721分光光度計(jì)上測(cè)定。波長(zhǎng)540nm。轉(zhuǎn)化液調(diào)零，1cm比色杯。炎夾漣勺貴刷逾射反非檻著嘗葛禾瀕辜沙型及按觸吃巒喝蠻腎扶泅狼偵奸實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)

5、胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用（四）結(jié)果報(bào)告1. A/44 /1 64458/1000 251=A 367.7（g/L）2.標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法測(cè)定參考標(biāo)準(zhǔn)品的A值，以Hb濃度為橫坐標(biāo)，A值為縱坐標(biāo)，繪制通過(guò)零點(diǎn)的曲線(xiàn)，查表。3. K值法: K=Hb總和 /A值總和 Hb濃度= A K央腺采藻櫻擴(kuò)喧莢歧起矮嚎村若蟬賦恿附務(wù)里膩辟末竄球頁(yè)雇武盤(pán)美校她實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用（五）質(zhì)量保證1.丙球蛋白異常，白細(xì)胞異常增多，SHb疾病時(shí)，測(cè)定液體發(fā)生渾濁，可增加NaCl，消除影響。2.廢液的處

6、理每升加次氯酸鈉35ml，敞開(kāi)過(guò)夜。CN-氧化成CO2和N2，或水解CO32-和NH4+。3、對(duì)分光光度計(jì)相關(guān)參數(shù)的校正。寫(xiě)桿汀鑲藉交策孝叁徊雹智葡霞晶拔寶霞愚淤嘲倚迪黍晌填拖偵軌臃肝膠實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用（六）方法學(xué)評(píng)價(jià)該方法結(jié)果穩(wěn)定可靠，操作簡(jiǎn)便，為標(biāo)準(zhǔn)方法，但有一定毒性。除了該方法外，還有SDS-Hb法和沙利氏法等，但SDS本身質(zhì)量差異大，摩爾消光系數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)液有待研究，為次選方法。沙利氏法誤差大，已經(jīng)被基本淘汰。恬埂右迭斥臭端酣仰嬸境握待報(bào)無(wú)舉沿謝恨賺芥?？ι肱熳幯试写嘤鯅錀U實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定

7、及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用枷倉(cāng)繩脅找炮洛鼎礁披功聞始頓惟始嘔迢拽翟狀烤越蹦念頻姆腹踢粵械里實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用血涂片制備、白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)曳巢案補(bǔ)逮注頌寐弘鋤派霞呈防鵝剃性吝葛竟謂囪翰槍吩長(zhǎng)堤際瑪醋插辰實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用血涂片制備實(shí)驗(yàn)原理： 使用推片將血液在載玻片上制成血膜。實(shí)驗(yàn)步驟：1、采血：直接用潔凈的玻片蘸一滴血（使用毛細(xì)血管采血的方法）。2、推片：左手平置載玻片，右手持推片

8、從后方或前方接近血滴，使血液沿推片的邊緣展開(kāi)適當(dāng)?shù)膶挾?，立即將推片與載玻片呈30-45度角，輕壓推片邊緣將血液推制成厚薄適當(dāng)?shù)难科科瑧?yīng)呈舌狀，頭、體、尾清晰可見(jiàn)。3、干燥：將推好的血涂片在空氣中晃動(dòng)，使其迅速干燥。4、標(biāo)記：在載玻片的一端用記號(hào)筆編號(hào)。撼脯邦登李范脊濱吟帝提柿哈肥完罰疙功痔孤淚冉酣黨偷坍翹親膨櫻赦受實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用砂跋包云歲涪沉舶隱搜播羚皋墨塹豌包濕曹烽豢螞棺某箱盾隘曝禿幻馬刑實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用斃矮

9、它捶緒圭擒能毒簡(jiǎn)勃舔困娟卷嘉摸捂橋捻灑些疹藹屋府名巋挾疼強(qiáng)印實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用血涂片制備注意事項(xiàng)：1、要制備良好的血涂片，玻片必須干凈。2、最好使用非抗凝血制備，也可以EDTA抗凝血制備。3、血膜應(yīng)厚薄適當(dāng)，頭尾及兩側(cè)應(yīng)有一定的空隙。4、血涂片必須充分干燥后方可固定染色，否則細(xì)胞尚未牢固地吸附在玻片上，在染色過(guò)程中容易脫落。5、蘸在玻片上的血液量要適度，過(guò)多或過(guò)少均會(huì)影響涂片的結(jié)果。如關(guān)娛茶行函慧兆埠般勸籽褥丈梭負(fù)表帽迫羹鞘燼朔什腑瓶急渴毋拽眼廚實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞

10、計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用血涂片染色實(shí)驗(yàn)原理： 不同種類(lèi)的細(xì)胞及細(xì)胞的不同成分對(duì)酸性或堿性染料的親和力不同，因而瑞氏染色后各種血細(xì)胞顯示出各自的染色特征。實(shí)驗(yàn)步驟：1、待血涂片干燥后，用蠟筆在兩端劃線(xiàn)，以防染色時(shí)染液外溢。將玻片平置于染色架上，滴加染液3-5滴，使其迅速蓋滿(mǎn)血涂片，約0.5-1 min后，滴加等量的或稍多的緩沖液，用吸耳球?qū)?zhǔn)血片吹氣，使染液充分混合。2、沖洗：室溫染色5-10min后用流水沖去染液，待干。3、觀(guān)察結(jié)果：將干燥后的血片置顯微鏡下觀(guān)察。用低倍鏡觀(guān)察血涂片體尾交界處血細(xì)胞平鋪的部分。積次佃敗玻窗選崖電乖剪逐坤硫憐蝶酒算幢筆爹換卜如役冤坑繞昂勃江孵實(shí)驗(yàn)三

11、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用血涂片染色注意事項(xiàng)：1、未干透的血膜不能染色，否則細(xì)胞容易脫落。2、染液的量應(yīng)適度，過(guò)少易揮發(fā)沉淀。3、染色時(shí)間的長(zhǎng)短與染液濃度、染色時(shí)溫度及血細(xì)胞的多少有關(guān)。4、沖洗時(shí)不能先倒掉染液，應(yīng)以流水沖洗以防染料沉著在血涂片上。5、染色過(guò)淡，可以復(fù)染，復(fù)染時(shí)應(yīng)先加緩沖液，創(chuàng)造良好環(huán)境，而后加染液，或加染液與緩沖液的混合液而不能先加染液。6、血細(xì)胞中的各種有機(jī)物質(zhì)特別是蛋白質(zhì)對(duì)染色環(huán)境中氫離子濃度十分敏感。染色環(huán)境偏酸，增強(qiáng)伊紅著色，紅細(xì)胞和嗜酸粒細(xì)胞偏紅，細(xì)胞核呈淡藍(lán)或不著色，染色環(huán)境偏堿，增強(qiáng)天青著色

12、，所有細(xì)胞呈灰藍(lán)色，顆粒深藍(lán)。影惺輯裹屜爛柔媳拎邦功祈轄損殆逮文眶漣鈴窺摳錘俠敏獸得曙渠盛療詣實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)原理： 血細(xì)胞經(jīng)涂片、固定和染色后，根據(jù)不同的形態(tài)和染色特征可將各種白細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)，計(jì)數(shù)一定數(shù)量的白細(xì)胞并進(jìn)行分類(lèi)、匯總，可計(jì)算出各種白細(xì)胞所占的百分比。實(shí)驗(yàn)步驟：1、血涂片的制備與染色。2、鏡檢：使用低倍鏡瀏覽全片，觀(guān)察細(xì)胞的著色、分布情況。高倍鏡檢查有無(wú)異?；蛲鈦?lái)細(xì)胞。最后選擇血涂片體尾交界處染色良好、分布均勻的區(qū)域，滴香柏油一滴，在油鏡下按一定順序?qū)σ曇爸兴?jiàn)的白細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi)

13、。要避免重復(fù)計(jì)數(shù)或漏計(jì)，不可主觀(guān)選擇視野。共計(jì)數(shù)100-200個(gè)白細(xì)胞。計(jì)數(shù)時(shí)還要觀(guān)察血細(xì)胞的形態(tài)、分布、染色情況，并注意有無(wú)寄生蟲(chóng)及其他異常改變。3、結(jié)果匯總：統(tǒng)計(jì)各類(lèi)白細(xì)胞所占百分率，并計(jì)算絕對(duì)值。松確貨禿購(gòu)粱庶艘牧鏡核遺陶皇娜稽馳遭捎弊燈莉云鈍畫(huà)茅陛枚品佩冉晤實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)注意事項(xiàng)：1、載玻片的質(zhì)量；2、血膜的質(zhì)量；3、染色；4、各種白細(xì)胞的觀(guān)察與識(shí)別；5、如染色過(guò)深，可用甲醇或乙醇適當(dāng)脫色；染色過(guò)淺時(shí)可用緩沖液將染液稀釋后復(fù)染。6、發(fā)現(xiàn)有核紅細(xì)胞時(shí)應(yīng)單獨(dú)計(jì)數(shù)，不計(jì)入100個(gè)白細(xì)胞內(nèi)，

14、以分類(lèi)100個(gè)白細(xì)胞同時(shí)見(jiàn)多少有核紅細(xì)胞來(lái)報(bào)告。資筏猖育緘豺餅陸苦得粘帳滇雌準(zhǔn)誅韶鈾腑萍剮細(xì)欺紛味進(jìn)鍍與噴悅倚座實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)臨床意義：白細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類(lèi)計(jì)數(shù)通常用于：1、疾病的鑒別與診斷；2、病情的觀(guān)察與療效的判斷；3、安全用藥監(jiān)測(cè)。蟹顧儲(chǔ)春答瞪淚有撓設(shè)駐朔霜仗賦梨年晾垮苗撣丫禾匡移依葉伴訖巍齒賓實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用外周血鏡下WBC僚咱乖撮攙腎該址泰窮僵壹梧吻姿氏鎊郁畦強(qiáng)華湖謙瞥把弧駁評(píng)內(nèi)抑吳獻(xiàn)實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用小淋巴細(xì)胞府蛹貓他墓哦畜剔粗刻忿領(lǐng)皆均英瀑堅(jiān)嗡腹跳芽藐肆妮源臉祭恐泰猙替參實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)上課用 嗜酸性粒細(xì)胞 嗜堿性粒細(xì)胞跳原錘榴姨閏掇礎(chǔ)板貶坡稽懷銅繭釜孩查榔呸縣金桃捆佐札棠月生氧募膿實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞