實(shí)驗(yàn)三 蠶豆細(xì)胞微核試驗(yàn)在環(huán)境監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用

1、實(shí)驗(yàn)三 蠶豆細(xì)胞微核試驗(yàn)在環(huán)境監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用 植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)植物生態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)部分1前言隨著社會(huì)的發(fā)展，工業(yè)化水平的不斷提高，大量有毒有害的廢棄物排放到大氣、水體和土壤中，給環(huán)境帶來(lái)巨大危害，控制環(huán)境污染就需要一些行之有效的檢測(cè)手段。應(yīng)用蠶豆根尖微核試驗(yàn)監(jiān)測(cè)環(huán)境致突變物，簡(jiǎn)便可靠，經(jīng)濟(jì)易行，是國(guó)際上廣泛使用的環(huán)境監(jiān)測(cè)方法。2微核如何產(chǎn)生？誘變因素如射線、重金屬污染的水體與土壤、有機(jī)廢水等導(dǎo)致的DNA鏈的初級(jí)損傷如堿基交聯(lián)、聚合、取代基的結(jié)合或DNA鏈斷裂，或經(jīng)過(guò)一次S期的錯(cuò)誤復(fù)制，或經(jīng)過(guò)G2期的一次錯(cuò)誤修復(fù)便可出現(xiàn)畸變，再經(jīng)過(guò)一次細(xì)胞分裂，方形成微核。3為何蠶豆根尖微核試驗(yàn)可用于環(huán)境監(jiān)測(cè)？隨著誘變因

2、素水平的升高，錯(cuò)誤復(fù)制與錯(cuò)誤修復(fù)機(jī)率增加，微核形成機(jī)率也增加了。反之，高的微核發(fā)生率也就意味著環(huán)境中高的誘變因素水平。4應(yīng)用舉例評(píng)估污水處理廠污水處理效率：對(duì)污水處理前后的微核千分率進(jìn)行比較，可有效指示污水處理效果。對(duì)化妝品致突變作用的檢測(cè)：嵇慶等（1994）用蠶豆根尖微核法檢測(cè)了10種脂溶性面霜的致突變性，結(jié)果其中的3種有致突變作用。5為什么要以蠶豆根尖為試驗(yàn)材料？染色體數(shù)較少（2n=12）且形體大，便于觀察對(duì)誘變物的反應(yīng)較敏感，微核本底值較低根尖分生組織有大量的細(xì)胞同步進(jìn)行有絲分裂便宜6如何在顯微鏡下判斷微核？在400倍顯微鏡下，凡小于主核1/4以下的，同主核有相同染色效果的，圓形、橢圓形或其他類似形狀的染色物質(zhì)都可以算作微核。 7微核千分率與微核細(xì)胞千分率的區(qū)別一般情況下，有微核的細(xì)胞中只有一個(gè)微核存在，但也有極少數(shù)的例外，一個(gè)細(xì)胞中含有兩個(gè)、三個(gè)甚至更多的微核。微核細(xì)胞千分率是指每一千個(gè)細(xì)胞中含有微核的細(xì)胞個(gè)數(shù)。微核千分率是指每一千的細(xì)胞中所含微核數(shù)。8實(shí)驗(yàn)步驟蠶豆培養(yǎng)（約5-6天）待測(cè)液處理（1天）恢復(fù)培養(yǎng)（1天）根尖固定（1天）解離（15-20分鐘）染色（5分鐘）制片觀察、微核計(jì)數(shù)9微核千分率與鎘離子濃度的關(guān)系1011蠶豆（Vicia faba ）12使用顯微鏡觀察微核的注意事項(xiàng)不要隨意挪動(dòng)顯微鏡鏡頭臟了要使用鏡頭紙擦拭調(diào)整焦距時(shí)不要一直使用粗螺旋先用低倍鏡確定視野