熒光PCR法檢測GBS的臨床意義課件

1、 熒光法檢測 的臨床意義國家地方聯(lián)合工程實(shí)驗(yàn)室鐘菲菲呵護(hù)生命 健康護(hù)航 熒光法檢測國家地方聯(lián)合工程實(shí)驗(yàn)室呵護(hù)生命族鏈球菌的介紹GBS顯微鏡圖世紀(jì)年代國外學(xué)者 報(bào)道了例死于引起的產(chǎn)后心內(nèi)膜炎病例, 由此證實(shí)了為人類致病菌。 世紀(jì)年代首次發(fā)現(xiàn)其可以導(dǎo)致嚴(yán)重的新生兒感染，引起新生兒死亡。 世紀(jì)年代，已被證實(shí)為圍產(chǎn)期母嬰感染的主要致病菌之一，在圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)中占有不可忽視的地位。族鏈球菌的介紹GBS顯微鏡圖世紀(jì)年代國外學(xué)者 報(bào)道了例死于引表面蛋白質(zhì)莢膜多糖(抗原)肽聚糖磷壁酸族鏈球菌( )學(xué)名無乳鏈球菌，為革蘭氏陽性球菌，寄居于陰道和直腸，屬于條件致病菌。族鏈球菌的介紹根據(jù)其是否溶血分：不完全溶血、完全溶血

2、、不溶血種。根據(jù)其致病血清分： 、 、 、 、 和，其毒力莢膜多糖抗原、脂磷壁酸、神經(jīng)氨酸酶等有關(guān)（發(fā)達(dá)國家（）發(fā)展中國家 、 、 （）。表面蛋白質(zhì)莢膜多糖肽聚糖磷壁酸族鏈球菌( )學(xué)名無乳鏈球菌(分娩前五周內(nèi)檢測，陰性預(yù)測值為)。健康女性 的生殖道和消化道中存在菌落,而且種族、人群有明顯區(qū)別。定植表現(xiàn)為一過性,間歇性或持久性,導(dǎo)致孕婦不同時(shí)期檢測結(jié)果不同。性生活活躍,多次妊娠,妊娠期間糖尿病等因素更容易獲得。族鏈球菌流行病學(xué)健康女性 的生殖道和消化道中存在菌落,而且種族、人群有明顯區(qū)GBS1健康婦女（ 1535% ）一般健康良好的并不致病。2孕婦（約25%）早產(chǎn)，胎膜早破，泌尿系感染、胎膜感

3、染、宮內(nèi)膜感染和創(chuàng)傷感染。3新生兒（約50%）約12%新生兒發(fā)病 新生兒肺炎，敗血癥和腦膜炎，發(fā)育障礙，可導(dǎo)致新生兒聽力和視力受損以及腦癱等后遺癥。 族鏈球菌危害母嬰傳播是新生兒感染的主要途徑，母嬰傳播發(fā)生在臨產(chǎn)，新生兒暴露于有族鏈球菌產(chǎn)道，可吞進(jìn)和吸入細(xì)菌。GBS1健康婦女（ 1535% ）一般健康良好的并不致病。陽性的孕婦中新生兒感染率陽性的孕婦中新生兒感染率對(duì)孕婦的危害 抑制乳酸桿菌生長，值升高，利于雜菌。胎膜早破羊膜腔感染，早產(chǎn)、晚期先兆流產(chǎn)。對(duì)絨毛膜的吸附力及穿透力最強(qiáng)，宮內(nèi)感染的主要原因。對(duì)孕婦的危害 抑制乳酸桿菌生長，值升高，利于雜菌。胎膜早破胎膜表面張力降低炎性細(xì)胞吞噬作用細(xì)菌

4、代謝蛋白質(zhì)水解酶“釋放”磷酸酯酶A2，前列腺素，細(xì)胞因子IL- 1、IL- 6、IL- 8、IL- 12胎膜早破早產(chǎn)刺激子宮收縮 對(duì)孕婦的危害胎膜表面張力降低炎性細(xì)胞吞噬作用細(xì)菌代謝蛋白質(zhì)水解酶“釋放”關(guān)于例高危孕婦的研究感染患者治療后的情況如下: 早產(chǎn)例中有例感染經(jīng)治療后，其中例至周后分娩，時(shí)間最長個(gè)月，新生兒體重達(dá) ；胎膜早破早產(chǎn)例中有例感染經(jīng)治療后，其中例延長了孕周， 最長延長天，達(dá)足月分娩；晚期先兆流產(chǎn)例中有例感染，經(jīng)過治療，例早產(chǎn)，孕周增長最長的達(dá)周（周入院至周剖宮產(chǎn)結(jié)束分娩，早產(chǎn)兒體重 經(jīng)搶救存活，隨訪個(gè)月目前情況良好）。：經(jīng)干預(yù)治療后,可延長孕周,使胎兒獲得宮內(nèi)生長機(jī)會(huì)，增加存活

5、率和生存質(zhì)量,降低極低出生體重兒和圍產(chǎn)兒死亡率,減少母嬰感染率及其并發(fā)癥。參考文獻(xiàn)：中國婦幼保健年第卷 族溶血性鏈球菌感染與胎膜早破、早產(chǎn)、晚期先兆流產(chǎn)的關(guān)系與干預(yù)劉劍等.關(guān)于例高危孕婦的研究感染患者治療后的情況如下: 參考文獻(xiàn)：中 產(chǎn)道細(xì)菌上行局部絨毛膜羊膜炎細(xì)菌擴(kuò)散至羊膜腔胎兒吸入污染的羊水 對(duì)孕婦的危害 產(chǎn)道細(xì)菌上行局部絨毛細(xì)菌擴(kuò)散胎兒吸入污 對(duì)孕婦的危害對(duì)新生兒的危害A Schuchat. Clin Micro Rev 1998;11:497-513.早發(fā)型：0-6 天遲發(fā)型：7-89 天對(duì)新生兒的危害A Schuchat. Clin Micro 癥狀包括呼吸窘迫，呼吸暫停，以敗血癥最

6、常見，肺炎和腦膜炎是早發(fā)型的形式早期病死率高達(dá)，近年來，為無癥狀帶菌母親分娩傳播。主要為足月兒 和 近 足 月兒 。早發(fā)型感染危害 . : . . 對(duì)新生兒的危害早發(fā)型感染危害 . : . 對(duì)新生兒的危害新生兒族鏈球菌感染死亡例分析新生兒出生后吃奶差，反應(yīng)欠佳；出生后情況加重，四肢微涼、體溫正常；出生后呼吸急促、反應(yīng)低下、刺激不哭。以敗血癥、呼吸功能不全、新生兒肺炎急轉(zhuǎn)兒科；出生后病情進(jìn)一步加重，提示嚴(yán)重感染、酸中毒、低鈣及心肌受損；出生后出現(xiàn)呼吸表淺、暫停等；出生后呼吸首先停止，然后心跳停止，經(jīng)搶救無效死亡。資料來源：中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志年月第卷第期 新生兒族鏈球菌感染死亡例分析新生兒族鏈

7、球菌感染死亡例分析新生兒出生后吃奶差，反應(yīng)欠佳；資北京兒童醫(yī)院新生兒肺炎死亡病例中族鏈球菌的檢測收集 例年至年間新生兒肺炎死亡病例回顧研究。死亡的例肺炎患兒，有例查實(shí)陽性感染，高達(dá)。例陽性患兒，有名，名。早發(fā)型中名為早產(chǎn)兒。例患兒中，例有完整臨床資料。其中例可查到一項(xiàng)或多項(xiàng)與感染有關(guān)的危險(xiǎn)因素，如早產(chǎn)，低體重，胎膜早破，羊水異常等，檢測結(jié)果均為陽性。結(jié)論：是新生兒肺炎死亡病例中的重要病原，尤其在早發(fā)型肺炎病例中感染占很大比重。中華兒科雜志年月第卷第期新生兒肺炎死亡病例中族鏈球菌的檢測北京兒童醫(yī)院新生兒肺炎死亡病例中族鏈球菌的檢測收集 例新生兒誤診分析例西南某三甲軍區(qū)醫(yī)院政委孫女出生后出現(xiàn)感染，

8、經(jīng)臨床科室、檢驗(yàn)科經(jīng)驗(yàn)判斷，疑似感染，建議臨床使用萬古霉素。政委不認(rèn)可該結(jié)果。后經(jīng)過熒光法快速檢測，確診為族鏈球菌感染，而臨床的癥狀與鏈球菌感染表現(xiàn)相近，經(jīng)過族鏈球菌治療方案后，天即痊愈。新生兒誤診分析例西南某三甲軍區(qū)醫(yī)院對(duì)新生兒的危害常表現(xiàn)為隱匿發(fā)病，最初為腦膜炎，如發(fā)燒，昏睡嘔吐等，多伴敗血癥病死率約，但存活者嚴(yán)重后遺癥，癡呆、腦積水，智力障礙等。感染一般系醫(yī)院內(nèi)感染，主要是型引起發(fā)病多為產(chǎn)科并發(fā)癥的早產(chǎn)兒和低體重兒，發(fā)病率是足月的倍，若發(fā)生膿毒血癥，病死率高。晚發(fā)型感染危害對(duì)新生兒的危害晚發(fā)型感染危害新生兒族鏈球菌腦膜炎例臨床分析和隨訪溫州某醫(yī)院年至年月收治的例新生兒族鏈球菌腦膜炎的臨床

9、資料進(jìn)行回顧性分析。例患兒治愈例，好轉(zhuǎn)自動(dòng)出院例，因嚴(yán)重并發(fā)癥死亡例。出院個(gè)月后例早發(fā)型伴腦積水早產(chǎn)兒在家中死亡。 例隨訪至個(gè)月：例早發(fā)型患兒中，生長發(fā)育正常例，運(yùn)動(dòng)發(fā)育落后例；例晚發(fā)型患兒，生長正常發(fā)育例，運(yùn)動(dòng)發(fā)育落后例，癲癇發(fā)作例。結(jié)論：新生兒腦膜炎住院時(shí)間長，死亡率高，易出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥和后遺癥。中華兒科雜志年月第卷第期新生兒族鏈球菌腦膜炎例臨床分析和隨訪溫州某醫(yī)院年至年月年代美國新生兒的發(fā)病率第一組委會(huì)AAP的報(bào)表CDC準(zhǔn)則草案公布共識(shí)準(zhǔn)則B組鏈球菌協(xié)會(huì)成立年代美國新生兒的發(fā)病率第一組委會(huì)AAP的報(bào)表CDC準(zhǔn)則草案公年的預(yù)防共識(shí)準(zhǔn)則年預(yù)防的共識(shí)準(zhǔn)則概述了兩種方法，對(duì)確定需要的婦女?；?/p>

10、礎(chǔ)篩查：在周的胃腸道，泌尿生殖道基于風(fēng)險(xiǎn)的方法： 早產(chǎn)，胎膜早破小時(shí) 或產(chǎn)時(shí)發(fā)熱年的預(yù)防共識(shí)準(zhǔn)則年預(yù)防的共識(shí)準(zhǔn)則概述了兩種方法，對(duì)確定需要的美國預(yù)防共識(shí)準(zhǔn)則2010年美國疾病預(yù)防控制中心對(duì)早發(fā)性B族鏈球菌病的預(yù)防指南指出：1、在35-37孕周的孕婦的普遍篩查2、青霉素是首選藥物，氨芐青霉素也可進(jìn)行替代3、不推薦分娩期間常規(guī)使用抗生素預(yù)防感染美國預(yù)防共識(shí)準(zhǔn)則2010年美國疾病預(yù)防控制中心對(duì)早發(fā)性B族鏈基數(shù)大，正常寄居產(chǎn)婦影響新生兒：早發(fā)、晚發(fā)疾病；死亡率高糾紛、風(fēng)險(xiǎn)及時(shí)篩查干預(yù)美國：發(fā)病率、死亡率大幅下降中國開展推廣基數(shù)大，正常寄居產(chǎn)婦影響新生兒：早發(fā)、晚發(fā)疾??；死亡率高糾紛年年年年孕前和孕期保

11、健指南（第一版）：建議在孕周進(jìn)行族鏈球菌的篩查。圍產(chǎn)期預(yù)防指南：所有孕婦于周篩查。早產(chǎn)臨床診斷與治療指南：篩查宮頸陰道感染有可能預(yù)防早產(chǎn)。胎膜早破的診斷與處理指南：明確指出胎膜早破是 族溶血性鏈球菌上行性感染的高危因素，是導(dǎo)致孕婦產(chǎn)時(shí)及產(chǎn)褥期感染、胎兒感染及新生兒感染的重要病原菌，應(yīng)重視感染的防治。中華醫(yī)學(xué)會(huì)婦產(chǎn)科學(xué)分會(huì)美國疾病預(yù)防控制中心建議權(quán)威指南共識(shí)年年年年孕前和孕期保健指南（第一版）：建議在孕周進(jìn)行族鏈全球常規(guī)篩查的地區(qū)中國部分省份及香港，日本等德國、法國、西班牙、波蘭、瑞士、意大利、比利時(shí)、捷克、斯諾文尼亞等美國、加拿大澳大利亞肯尼亞阿根廷全球常規(guī)篩查的地區(qū)中國部分省份及香港，日本等

12、德國、法國、西班方法原理優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)培養(yǎng)法細(xì)菌培養(yǎng),形態(tài)鑒定,生化鑒定易開展耗時(shí)長以上培養(yǎng)難度高,靈敏度差，容易漏檢免疫方法彩色乳膠免疫層析法膠體金快速、簡便，無需任何輔助儀器設(shè)備靈敏度和特異性較差 只取一個(gè)部位，易漏檢微生物自動(dòng)分析鑒定系統(tǒng)生物與計(jì)算機(jī)的聯(lián)合應(yīng)用全面的自動(dòng)化時(shí)間長，成本高，設(shè)備昂貴熒光采用技術(shù)結(jié)合分子熒光標(biāo)記探針技術(shù)，快速、準(zhǔn)確地檢測快速內(nèi)出結(jié)果 靈敏度高特異性強(qiáng)重復(fù)性高需有實(shí)驗(yàn)室檢測方法方法原理優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)培養(yǎng)法細(xì)菌培養(yǎng),形態(tài)鑒定,生化鑒定易開展耗時(shí)在羊血培養(yǎng)基上培養(yǎng)后的菌落 ：形成灰白、光滑、圓形突起小菌落有明顯的溶血圈。培養(yǎng)法在羊血培養(yǎng)基上培養(yǎng)后的菌落 ：培養(yǎng)法熒光儀給出客觀的

13、判別標(biāo)準(zhǔn)陽性弱陽陰性檢測方法熒光儀給出客觀的判別標(biāo)準(zhǔn)陽性弱陽陰性檢測方法族鏈球菌核酸檢測試劑盒（熒光法）優(yōu)點(diǎn)：簡便快捷、靈敏度高（物理破碎）重復(fù)性好、特異性強(qiáng)（分子信標(biāo)）閉管操作、避免污染國內(nèi)首家，發(fā)明專利 族鏈球菌核酸檢測試劑盒（熒光法）優(yōu)點(diǎn)：國內(nèi)首家，發(fā)明專利 核酸檢測試劑盒適用生殖道分泌物和直腸分泌物標(biāo)本類型核酸檢測試劑盒適用生殖道分泌物標(biāo)本類型熒光法的取材方法熒光法的取材方法新生兒鼻咽拭子的取材方法新生兒鼻咽拭子的取材方法感染檢查時(shí)機(jī)及治療方案新生兒：母親陽性、出生后有高危疑似感染癥狀、同產(chǎn)房內(nèi)有陽性者不需要干預(yù)（）對(duì)癥治療（）產(chǎn)時(shí)高危因素：分娩時(shí) 周，產(chǎn)時(shí)發(fā)熱 ,胎膜早破小時(shí),進(jìn)行檢

14、測 不需要干預(yù)（）立即干預(yù)（）不需要干預(yù)孕周取陰道和直腸拭子檢測上次新生兒感染史本次妊娠有菌尿癥（）立即干預(yù)產(chǎn)前干預(yù)有癥狀無癥狀（）感染檢查時(shí)機(jī)及治療方案新生兒：不需要干預(yù)（）對(duì)癥治療（）產(chǎn)時(shí) 預(yù)防醫(yī)療指南：抗生素治療方案有無青霉素過敏青霉素，首次劑量萬單位,然后每小時(shí)萬單位，直至分娩或者氨芐西林，首次劑量，然后每個(gè)小時(shí)，直到分娩病人在接受青霉素或頭孢菌素時(shí)有無出現(xiàn)下列任一癥狀？過敏癥、血管性水腫、呼吸窘迫、蕁麻疹頭孢唑啉，首次劑量，然后每個(gè)小時(shí)，直到分娩是否對(duì)紅霉素和克林霉素敏感萬古霉素每小時(shí)（靜脈注射）直至分娩克林霉素每小時(shí)（靜脈注射）直至分娩 預(yù)防醫(yī)療指南：抗生素治療方案有無青霉素過敏青霉素，首次劑量國內(nèi)治療推薦中華醫(yī)學(xué)會(huì)婦產(chǎn)科學(xué)分會(huì)產(chǎn)科學(xué)組青霉素 首次劑量 萬單位靜脈滴注 萬單位 直至分娩?；虬逼S青霉素,負(fù)荷量 靜脈滴注,然后每 小時(shí) 的劑量靜脈滴注直至分娩對(duì)青霉素過敏者則選用頭孢唑啉 作為起始劑量靜脈滴注,然后每 小時(shí) 直至分娩。對(duì)頭孢菌素類過敏者則用紅霉素 ,每 小時(shí) 次靜脈滴注,或克林霉素 靜脈滴注,每 小時(shí) 次。國內(nèi)治療推薦中華醫(yī)學(xué)會(huì)