羅氏試劑盒說明書 LH

1、11818252001V16黃體生成素（LH）試劑盒說明書 2009-05， V 16 中文 4/4 Elecsys和cobas e 分析儀11732234 122 100測試本試劑盒適用于以下分析儀Elecsys1010Elecsys2010MODULARANALYTICSE170cobas e 411cobas e 601主要用途該免疫測定法適用于人血清和血漿黃體生成素的體外定量檢測。Elecsys和cobas e免疫分析儀的檢測原理是電化學發(fā)光免疫法（ECLIA）。臨床應用黃體生成素（LH）和卵泡刺激素（FSH）是屬于促性腺激素家族激素，它們協(xié)同調(diào)節(jié)和促進性腺（卵巢和睪丸）的生長和功能1

2、,2,3。同卵泡刺激素、促甲狀腺素（TSH）和促絨毛膜性腺激素（hCG）一樣，黃體生成素是一類含兩個亞基（鏈和鏈）的糖蛋白，由121個氨基酸2和3個糖鏈組成，分子質(zhì)量為29500道爾頓3。促性腺激素參與下丘腦-垂體-卵巢的循環(huán)調(diào)節(jié)，以控制女性的月經(jīng)周期4,5。腺垂體的促性腺細胞產(chǎn)生沖動經(jīng)血流傳至卵巢產(chǎn)生黃體生成素和卵泡刺激素。促性腺激素刺激卵泡的生產(chǎn)發(fā)育和成熟，并合成雌激素和黃體酮。在生理周期的中期，黃體生成素濃度達峰值，誘導排卵和黃體（主要分泌物為黃體酮）的形成。黃體生成素還可刺激睪丸間質(zhì)細胞分泌睪丸激素。黃體生成素濃度的測定可以用來說明下丘腦-垂體-卵巢系統(tǒng)的功能障礙。黃體生成素和卵泡刺激

3、素聯(lián)合檢測可提示下列疾病的發(fā)生：染色體畸變的先天性疾?。ㄈ鏣urners綜合癥），多囊卵巢（PCO），還可闡明月經(jīng)不調(diào)、更年期綜合癥和睪丸間質(zhì)細胞功能不全等疾病的原因1,4,5 。Elecsys LH檢測法采用兩個針對人黃體生成素的特異性單克隆抗體，分別識別不同肽段，生物素標記的抗體檢測兩個亞基共有的肽段，釕標記的抗體識別亞基的一個肽段。因此，Elecsys LH檢測法與FSH、TSH、hCG、hGH和hPL基本不存在交叉反應。a)Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三聯(lián)吡啶釕檢測原理抗體夾心法，總檢測時間：18分鐘第一次孵育：20

4、l樣本、1個生物素化LH特異性單克隆抗體和1個釕（Ru）a標記LH特異性單克隆抗體一起孵育，形成抗原抗體夾心復合物。第二次孵育：加入包被鏈霉素的磁珠微粒進行孵育，通過生物素和鏈霉素的相互作用，復合物與磁珠結(jié)合。將反應液吸入測量池中，通過電磁作用將磁珠吸附在電極表面。未與磁珠結(jié)合的物質(zhì)通過ProCell被去除。給電極加以一定的電壓，使復合物化學發(fā)光，并通過光電倍增器測量發(fā)光強度。儀器自動通過2點校正定標曲線計算獲得檢測結(jié)果，試劑條碼提供標準曲線。試劑工作溶液M Streptavidin-coated microparticles（透明瓶蓋），1瓶，6.5mL：包被鏈霉素的磁珠微粒0.72mg/m

5、L；防腐劑。R1 Anti-LH-Abbiotin（灰蓋），1瓶10ml：生物素化抗LH單克隆抗體（鼠），2.0mg/L；TRIS緩沖液 50mmol/L，PH 8.0；防腐劑。R2 Anti-LH-AbRu(bpy)32+（黑蓋），1瓶10ml：釕標記的LH單克隆抗體（鼠），濃度分別為0.3 mg/L，TRIS沖液 50mmol/L，PH8.0；防腐劑。警告和注意事項僅用于體外診斷。使用本試劑盒時必須遵循所有試驗室試劑操作注意事項。所有廢棄物必須按照當?shù)胤ㄒ?guī)進行處置。根據(jù)客戶需要提供安全資料表。避免試劑和各樣本（樣本、定標品和質(zhì)控品）產(chǎn)生氣泡。試劑處理該試劑盒為即用型，請勿分開使用。試劑相關(guān)

6、信息可以通過試劑條形碼獲取。儲存及穩(wěn)定性于28下儲存。請垂直擺放Elecsys TnI試劑盒，確保使用前儀器自動混勻過程中磁珠微粒的完整可用性。穩(wěn)定性：未開封試劑，28有效期內(nèi)均可使用開封試劑，2812周MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 6018周Elecsys 2010和cobas e 4118周Elecsys 10104周（放置冰箱內(nèi)或分析儀-環(huán)境溫度為20-25；開蓋總共樣本的采集和準備僅以下所列樣本可用于檢驗。血清樣本須用標準試管或含有分離膠的真空管收集。肝素鋰、肝素鈉、肝素銨、K3-EDTA和氟化鈉/草酸鉀血漿。使用枸櫞酸鈉時，檢測結(jié)果必須校正10%。標準

7、：回收率在血清值的90%-110%以內(nèi)，斜率0.9-1.1，截距在2倍分析靈敏度（LDL）以內(nèi)，相關(guān)系數(shù)0.95。穩(wěn)定性： 2-8可保存14天；-20可保存6個月。僅能凍融一次6。選擇合適的試管進行不同類型樣本的采集，并非所有廠商的試管均可用于檢測。不同廠商的樣本采集系統(tǒng)可能含有不同的物質(zhì)，某些情況下會影響檢測結(jié)果。如果使用原始管進行檢測（樣本前處理系統(tǒng)）時，應遵循生產(chǎn)商所提供的指導。有沉淀的樣本在檢測前必須先作離心處理。請勿使用熱滅活的樣本和添加疊氮化合物的樣本和質(zhì)控品。檢測前，確保病人樣本、定標品及質(zhì)控品在室溫下(20-25)平衡?？紤]到蒸發(fā)效應，樣本、定標品和質(zhì)控品應在2小時內(nèi)完成檢測。

8、提供的物品參閱“試劑工作溶液”章節(jié)。需要的物品（未提供）貨號03561097190，LH CalSet 4 x1 ml貨號11731416122，PreciControl Universal，2 x3 ml，分別為PreciControl Universal1和2 或貨號11731416190，PreciControl Universal，2 x3 ml，分別為PreciControl Universal1和2貨號11731416160，PreciControl Universal，2 x3 ml，分別為PreciControl Universal1和2（美國）實驗室基礎(chǔ)設(shè)備Elecsys 1

9、010/2010，MODULAR ANALYTICS E170或cobas e 分析儀Elecsys 1010/2010和cobas e 411配件：貨號11662988122，ProCell ，6 x 380mL 系統(tǒng)緩沖液貨號11662970122， CleanCell ，6x 380mL測量池洗液 貨號11930346122，Elecsys SysWash，1 x 500mL洗液添加劑貨號11933159001，Adapter for SysClean貨號11706829001，Elecsys 1010AssayCup，1232反應杯或貨號11706802001，Elecsys 2010

10、AssayCup，6060反應杯貨號11706799001，Elecsys 1010AssayTip，30120吸頭MODULAR ANALYTICS E170或cobas e 601配件：貨號04880340190，ProCell M，2 x 2L 系統(tǒng)緩沖液貨號04880293190， CleanCell M，2x 2L測量池洗液 貨號12135027190， CleanCell M，1x 2L測量池洗液（美國）貨號03023141001，PC/CC-Cups，12個杯，用于ProCell M和CleanCell M使用前的預熱貨號03005712190, ProbeWash M, 12

11、x 70 mL 清洗液，用于檢測完畢后或更換試劑時清洗試劑針。貨號12102137001，AssayTip/AssayCup Combimagazine M ，48盒84反應杯或移液管吸頭，廢物袋 貨號03023150001, WasteLiner，廢物袋 貨號03027651001，SysClean AdapterM所有分析儀配件：貨號11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系統(tǒng)清洗液 只用于美國：貨號11776819160，Elecsys LH CalCheck，3個濃度范圍檢測為達最佳檢測性能，請遵照本說明書中有關(guān)分析儀的相關(guān)指導說明。具體的分

12、析儀檢測說明參見操作手冊。使用前，分析儀會自動攪拌磁珠微粒，使其處于懸浮狀態(tài)。試劑相關(guān)信息可通過條形碼自動讀取，不需要人工輸入。特殊情況下，分析儀無法自動讀取條碼信息時，請輸入條碼標簽上的15位數(shù)字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys 2010和cobas e分析儀：將冷藏試劑室溫平衡至20C左右，放置分析儀的試劑盤（20C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。分析儀系統(tǒng)會自動調(diào)節(jié)試劑溫度和各試劑盒瓶蓋開/關(guān)。Elecsys 1010分析儀：將冷藏試劑室溫平衡至20-25C左右，放置分析儀的樣品/試劑盤（溫度20-25C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。試劑瓶蓋需手工打開和蓋上。使用完畢后需置于

13、2定標溯源性：該方法是根據(jù)第二版國際標準（NIBSC）80/552進行標準化的 。每個LH試劑都有一個條形碼包含了各批號試劑定標的具體信息。使用Elecsys LH CalSet可以調(diào)整預設(shè)置的定標曲線。定校頻率：使用新批號試劑時必須進行定標（新試劑盒在分析儀上放置不能超過24小時）。以下情況建議重新定標：MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys 2010和cobas e分析儀:使用同一批號試劑，1月后（28天）7天后（分析儀上使用同一試劑盒）Elecsys 1010分析儀:每次更換試劑7天后（環(huán)境溫度20-25C）3天后（環(huán)境溫度25-32所有分析儀：根據(jù)需要：如失控。質(zhì)

14、控使用Elecsys PreciControl Troponin1和2進行質(zhì)控。其他合適的質(zhì)控品也可使用。各濃度質(zhì)控至少每24小時內(nèi)檢測一次，每次更換試劑盒或定標后也須進行質(zhì)控。各實驗室可根據(jù)需求制定各自的質(zhì)控限和質(zhì)控周期。質(zhì)控值必須處于規(guī)定的質(zhì)控限內(nèi)。各實驗室必須建立應對失控的相應糾正措施。請遵循政府法規(guī)和當?shù)匦袠I(yè)導則進行質(zhì)量控制。計算儀器會自動計算各樣本分析物濃度，單位：mIU/mL或IU/L。干擾因素以下情況下，檢測結(jié)果不受干擾：黃疸（膽紅素1129mol/L或66 mg/dL）, 溶血（血紅蛋白0.621mmol/L或 1g/dL，脂血(脂肪乳劑 1900mg/dL)和生物素205nm

15、ol/L或50ng/mL。標準：回收率在初值10之內(nèi)。對于接受高劑量生物素治療的患者（5mg/天），需在末次生物素治療8小時后采集樣本。類風濕因子1500 IU/ml時，檢測結(jié)果不受影響。黃體生成素濃度1150mIU/mL時，無高劑量Hook效應。對17種常用藥物進行體外檢測未發(fā)現(xiàn)會影響檢測結(jié)果。尚未采用Elecsys LH檢測法檢測嬰兒樣本。少數(shù)病例中，高滴度的分析物抗體（如HAMA），鏈霉素或釕會影響檢測結(jié)果。恰當?shù)膶嶒炘O(shè)計可將影響程度降到最低。以診斷為目的，對檢測結(jié)果的評價時必須結(jié)合患者病史，臨床檢查和其他臨床資料。檢測范圍0.100-200 mIU/mL（通過最低檢測限和廠商定標曲線的

16、最高值確定）。檢測值低于檢出限則報告0.100 mIU/mL。檢測值高于檢測上限時則報告200mIU/mL。稀釋檢測范圍較寬，無需稀釋。期望值以下是Elecsys LH檢測法LH檢測結(jié)果：人群b妊娠LH mIU/mL百分數(shù)50th5th95th男性女性卵泡期排卵期黃體期絕經(jīng)后期322316562801324.05.930.84.329.11.72.414.01.07.78.612.695.611.458.5b)根據(jù)要求兒童的參考范圍也可用，Elecsys LH產(chǎn)品資料中附帶。LH/FSH商：通過Elecsys LH和Elecsys FSH法檢測健康育齡婦女LH和FSH濃度值，計算二者商值。各時

17、期中位數(shù)計算如下：卵泡期：0.82（n=315）黃體期：1.12（n=279）實驗室應當進行自身人群期望值調(diào)查評估，如有必要，可建立自己的參考范圍特殊性能指標試劑在分析儀上的性能試驗數(shù)據(jù)如下。由于具體情況不同，各實驗室所得出的數(shù)據(jù)可能會稍有差異。精密度根據(jù)NCCLS（臨床實驗室標準化委員會）中EP5-A準則，采用Elecsys試劑、人混合血清和質(zhì)控品進行重復性檢測：每天測定6次，共10天；MODULAR AMALYTICS E170分析儀批內(nèi)精密度，n=21。所得結(jié)果如下：Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析儀批內(nèi)精密度總精密度樣本平均值mIU/mLSDmIU/mLC

18、V%SDmIU/mLCV%人血清10.540.011.80.035.2人血清227.190.210.80.542.0人血清350.720.410.81.012.0PreciControl Universal19.380.111.10.192.0PreciControl Universal244.820.420.90.831.9MODULAR ANALYTICS和cobas e 601分析儀批內(nèi)精密度總精密度樣本平均值mIU/mLSDmIU/mLCV%SDmIU/mLCV%人血清16.150.081.20.122.0人血清292.20.680.71.471.6人血清31641.410.93.47

19、2.2PreciControl Universal16.670.050.80.142.1PreciControl Universal254.60.350.61.132.1分析靈敏度（最低檢測線）0.100mIU/mL檢測限是指能夠檢測出的區(qū)別于零濃度最低分析物濃度。計算為最低標準以上兩個標準差（主定標，標準12SD，批內(nèi)精密度，n=21）方法學比較Elecsys LH法（y）和Enzymun-Test LH法（x）對臨床樣本檢測結(jié)果進行方法學比較，相關(guān)性如下：樣本數(shù)n=166Passing/Bablok7 線性回歸y=1.09x-0.46 y=1.14x-0.80T=0.929 r=0.993

20、樣本濃度范圍:1.3-123mIU/Ml分析特異性采用單克隆抗體進行檢測，交叉反應如下:FSH，TSH，hCG，hGH，hPL0.1%參考文獻1. Beastall GH, Ferguson KM, OReilly DSJ, Seth J, Sheridan B. Assays for follicle stimulating hormone and luteinizing hormone: Guidelines for the provision of a clinical biochemistry service. Ann Clin Biochem 1987;24:246-262.2. C

21、ollip JB. William Henry Welch lectures: Some recent advances in physiology of anterior pituitary J. MA Sinai Hosp 1934;1:28-71.3.Johnson MR, Carter G, Grint C, Lightmann SL. Relationship between ovarian steroids, gonadotropin and relating during the menstrual cycle. Acta Endocrinol 1993;129/2:121-125.4. Runnebaum B, Rabe T. Gynkologische Endokrinologie und Fortpflanzungsmedizin Springer Verlag 1994. Band 1:17,202-205,252-253,Band 2:350,360-362. ISBN 3-540-57345-3, ISBN 3-540-57347-x.5. Scot