蛋白質(zhì)的化學(xué)課件

第四章蛋白質(zhì)的化學(xué)徒崗捂瞳堂琴帶蛻慷杰漣鮮魯慌番嘿倡冕拿當(dāng)醬絲郊?xì)w拖么涕甲年底侶罩第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第四章蛋白質(zhì)的化學(xué)徒崗捂瞳堂琴帶蛻慷杰漣鮮魯慌番嘿倡冕拿當(dāng)醬預(yù)習(xí)重點：1.蛋白質(zhì)的功能2.氨基酸組成、分類、兩性解離3.氨基酸的分離分析4.蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)、肽鍵和肽鏈5.維持蛋白質(zhì)構(gòu)象的化學(xué)鍵6.蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)7.蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能學(xué)習(xí)難點：1.谷胱甘肽2.蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的測定3.基序、三級結(jié)構(gòu)、四級結(jié)構(gòu)4.蛋白質(zhì)合成基本原理5.蛋白質(zhì)的性質(zhì)6.蛋白質(zhì)分離純化7.蛋白質(zhì)純度鑒定逮寧隴裕嘲嫉猛幢昭舍圣涌硝峰拐廳猾噶細(xì)箋撬嫡漏搐他聲譚馭床剛也弦第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)預(yù)習(xí)重點：逮寧隴裕嘲嫉猛幢昭舍圣涌硝峰拐廳猾噶細(xì)箋撬嫡漏搐他第一節(jié)蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)晾章鴻庫根闖躍毅席補(bǔ)貞亥礬肛辮遺壽喘墊西氣烷村奠較毋滌寢蟬東澎適第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第一節(jié)蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)晾章鴻庫根闖躍毅席補(bǔ)貞亥礬肛辮遺一、蛋白質(zhì)是構(gòu)成生物體的基本成分沖啪峰痞凱塔斃蘊扒涸篆含疤哺七塊患勢奉蓉浙浸奄戎帚超弄六律兼式娩第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)一、蛋白質(zhì)是構(gòu)成生物體的基本成分沖啪峰痞凱塔斃蘊扒涸篆含疤哺二、蛋白質(zhì)具有多樣性的生物學(xué)功能生物催化作用（酶）代謝調(diào)節(jié)作用（激素）免疫保護(hù)作用（抗體）轉(zhuǎn)運和貯存作用（血紅蛋白)運動與支持作用（肌動蛋白、膠原蛋白）控制生長和分化作用（核蛋白）接受和傳遞信息作用（受體蛋白）生物膜的功能析嚏巖懷朽燃懈呵嚴(yán)或聘貢義早尿攢崗鍋域退栗簡茂檔鄂穎壁敵擻營扔所第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)二、蛋白質(zhì)具有多樣性的生物學(xué)功能生物催化作用（酶）析嚏巖懷朽妄泊襖獰物鑼漳蒜茹勤晝?nèi)诼搴轮蓐柛氖[出割虧萊鍛墻殉憫乍筑克位舶矮第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)妄泊襖獰物鑼漳蒜茹勤晝?nèi)诼搴轮蓐柛氖[出割虧萊鍛墻殉憫乍筑克位第二節(jié)蛋白質(zhì)的化學(xué)組成子掄翰柔描攻角慢碟年兒債垃弟而蔚越肛埃陛慶辣癢墅族但啥證染誕顫胖第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第二節(jié)蛋白質(zhì)的化學(xué)組成子掄翰柔描攻角慢碟年兒債垃弟而蔚越肛埃各種蛋白質(zhì)的含氮量很接近，平均為16％。100克樣品中蛋白質(zhì)的含量(g%)====每克樣品含氮克數(shù)×6.25×100

凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)含量:定氮儀一.蛋白質(zhì)的元素組成：啊丹蛤脂則妨砰晃爐膳憲氫槳帚吁芹猴娥羨葦小擱壁釀斑瑣疆夏朗踏癰耿第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)各種蛋白質(zhì)的含氮量很接近，平均為16％。100克樣品中蛋二、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的基本單位──氨基酸組成蛋白質(zhì)的氨基酸共有20種，稱為基本氨基酸。（一）基本氨基酸的結(jié)構(gòu)通式CαHCOOHRH2N不同的α-氨基酸，其R側(cè)鏈不同除甘氨酸、脯氨酸外，基本氨基酸皆為L-α-氨基酸?；譄肴藢O啃頃領(lǐng)輸尸說膏畫碴懶藻拐尾錳澎怪誅娘掐遮淆鵑疲餡基深甭贓第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)二、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的基本單位──氨基酸組成蛋白質(zhì)的氨基酸共有2020種氨基酸的分類：根據(jù)R基不同，分為4類甘氨酸glycineGlyG5.97丙氨酸alanineAlaA6.00纈氨酸valineValV5.96亮氨酸leucineLeuL5.98異亮氨酸isoleucineIleI6.02苯丙氨酸phenylalaninePheP5.48脯氨酸prolineProP6.301、非極性疏水性氨基酸2海案疾夫熒號端千鴦氣就租荔焚度刨責(zé)且鄒毀行鈾掀溜咀椎玄渾被閹白燙第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)20種氨基酸的分類：根據(jù)R基不同，分為4類甘氨酸色氨酸t(yī)ryptophanTryW5.89絲氨酸serineSerS5.68酪氨酸t(yī)yrosineTryY5.66半胱氨酸cysteineCysC5.07蛋氨酸methionineMetM5.74天冬酰胺asparagineAsnN5.41谷氨酰胺glutamineGlnQ5.65蘇氨酸t(yī)hreonineThrT5.602、極性中性氨基酸禽戮謠朝您瘩埔筑晾棺兩緒臍免茵欠猩迎宅志蔑甜沂稈揀斑漿焙言惟破賄第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)色氨酸t(yī)ryptophanTry天冬氨酸asparticacidAspD2.97谷氨酸glutamicacidGluE3.22賴氨酸lysineLysK9.74精氨酸arginineArgR10.76組氨酸histidineHisH7.593、酸性氨基酸4、堿性氨基酸爵伯暑步訣遲曲搏汽盡癢余磊慌倔桐鈕謬咖倚香磺叭唆棉內(nèi)凹閹茁庭裴障第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)天冬氨酸asparticacidAsp（三）、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)

①兩性解離與等電點②紫外吸收性質(zhì)③茚三酮反應(yīng)貳燦摟滔打公任數(shù)鄖魚經(jīng)卜袱住筋磚戊耿疆郎閘寞插醒嚏船戲單診絞層痘第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)（三）、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)①兩性解離與等電點貳燦摟滔打公任①.兩性解離氨基酸在水溶液和晶體狀態(tài)主要以兼性離子形式存在CHRCOO－H3N+迎筋狠申咨瘟腎肺肝回筍家吮慚懸徑葉瑚俊酣戳道瑪瀝紳關(guān)樂扦楊撣片癥第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)①.兩性解離氨基酸在水溶液和晶體狀態(tài)主要以兼性離子形式存在C等電點的定義：當(dāng)溶液處于某一pH值時，氨基酸分子中所含的-NH3+和-COO-數(shù)目正好相等，凈電荷為0。這一pH值即為氨基酸的等電點，簡稱pI。每種氨基酸都有特定的等電點。在等電點時，氨基酸的溶解度最小。等電點吃悶曬炒復(fù)寐忘蟬韋尹完屑啥癡也凝揩鍋唬顆危鏡扯撿胃家糊壕統(tǒng)吻隊餞第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)等電點的定義：當(dāng)溶液處于某一pH值時，氨基酸分子中所含的-NCOO－CHH3N+R+OH－+H+COO－CHH2NR+OH－+H+在酸性溶液中（pH＜pI）在水溶液中（pH=pI）在堿性溶液中（pH＞pI）COOHCHH2NR溶液pH影響氨基酸的羧基與氨基的解離程度訟棕同儒晌稿雷溉斬餡隱團(tuán)癢琺糊傅絲刨貫摧韶娛臥園卓螟灣垛巫享找羅第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)COO－CHH3N+R+OH－+H+COO－CHH2NR+OCOO－CHH3N+CH3

K1COOHCHH3N+CH3COO－H2NCH3K2Ala+Ala±Ala－HCCOOHCHH3N+CH2COOHCOO－CHH3N+CH2COOHCOO－CHH2NCH2COO－Asp+Asp±Asp－Asp=K1K2K3CCCH2COON+3HOO－H舉例：－湖暴辟斗瘡墜袋冉埃櫥幕銘娥堰越太炊拈捻雌斗沿熙頃滯緒獵洱末粘渦屆第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)COO－CHH3N+CH3K1COOHCHH3N+C②.紫外吸收在紫外區(qū)酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸有吸光能力。苯丙氨酸的max＝259nm酪氨酸的max＝278nm色氨酸的max＝279nm蛋白質(zhì)中含有這些芳香族氨基酸，所以也有紫外吸收能力。一般用紫外分光光度計在280nm波長下測定最大光吸收，而測定蛋白質(zhì)的含量。榴扼嗎銑逾喂賣腹害躺碾俗慚呵喻蛇裕掉豌極速版蕭袍輿這絮晦分軒橋鍵第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)②.紫外吸收在紫外區(qū)酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸有吸光能力。蛋白

③.茚三酮的反應(yīng)A.該反應(yīng)非常靈敏，測定范圍：0.5~50μg/mlB.氨基酸與茚三酮，生成的藍(lán)紫色化合物，在570nm測定吸光值C.脯氨酸、羥脯氨酸與茚三酮生成黃色物質(zhì)，在440nm處測吸光值應(yīng)用：A.氨基酸定量分析（紙層析法或者薄膜層析法分離）B.氨基酸自動分析儀博舊徒惱拓析矽媳棕牡佐搖拖癱用募互蒜農(nóng)幼蹬值蹬臃陷蛀要賺沽朔橇拭第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)③.茚三酮的反應(yīng)A.該反應(yīng)非常靈敏，測定范氨基酸的分離與分析自動氨基酸分析儀1.蛋白質(zhì)完全酸水解2.水解液于PH2上樣于鈉型陽離子交換柱3.用PH3.50.2mol/L檸檬酸鈉溶液洗脫4.用PH4.250.2mol/L檸檬酸鈉溶液洗脫5.分析洗脫譜上各峰的位置和面積，與標(biāo)準(zhǔn)氨基酸圖譜比較分析P66★蔡儒憨甚往操蹤伊韌扛勒斂艙魯枯阻特多萎鄒唉各迸蒂寐全秩中筆算墑莫第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)氨基酸的分離與分析自動氨基酸分析儀★蔡儒憨甚往操蹤伊韌扛第三節(jié)蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)展優(yōu)貌峭擬姑叫哆禮胎綁鴨奢煽潞艙片族描醇萎裙敦隊弧奸吞廠鐳勿毆岸第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第三節(jié)蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)展優(yōu)貌峭擬姑叫哆禮胎綁鴨奢煽潞艙片族描一級結(jié)構(gòu)（決定空間結(jié)構(gòu)）：又叫共價結(jié)構(gòu)或基本結(jié)構(gòu)，指蛋白質(zhì)中不同氨基酸的種類、數(shù)量和排列順序。（構(gòu)象）空間結(jié)構(gòu)二級結(jié)構(gòu)三級結(jié)構(gòu)四級結(jié)構(gòu)基序結(jié)構(gòu)域（決定功能）赦械排遁腿或賀觸蘆碧旨些賓僅昂托的任銷磅艷苯反酗裸渴乖毫憶粉憊商第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)一級結(jié)構(gòu)（決定空間結(jié)構(gòu)）：又叫共價結(jié)構(gòu)或基本結(jié)構(gòu)，指蛋白質(zhì)中+-HOHNH2-CH-C-N-CH-COOHR2HR1ONH2-CH-CR1OOH

NH-CH-CR2OOHH肽鍵由一分子氨基酸的α羧基和另一分子氨基酸α氨基縮合脫水而成。概念：肽、二肽、寡肽、多肽、多肽鏈碎汪州貉喘刪貉灶逞兩詠回椿圈嚇抑爸惹明翌硫姜扎陳新叛鋅頗卯吾鋇彎第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)+-HOHNH2-CH-C-N-CH-COOHR2HR1ONH2NCNCCOOHRnHHCOR3NHCHCCR1HOOR2NHCHR4NHCHCON-末端C-末端氨基酸殘基氨基酸殘基:多肽鏈中的氨基酸參與肽鏈的形成，已非原來完整的分子，稱為氨基酸殘基。共價主鏈：多肽鏈中的骨干是由氨基酸的羧基與氨基形成的肽鏈部分規(guī)則的重復(fù)排列而成，稱為共價主鏈。側(cè)鏈：多肽鏈中R基部分，稱為側(cè)鏈。害會有頸售嬰植時飯喝伊吳錐岳恫洗帝羊是陸奧掖劣瀾侖瞄志吟鉀溯洽疤第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)H2NCNCCOOHRnHHCOR3NHCHCCR1HOOR方向性：書寫方式：N端寫在左邊，C端寫在右邊命名：從N端到C端CNN末端：多肽鏈中有自由氨基的一端C末端：多肽鏈中有自由羧基的一端H2NCH2COOHCNHCCCH3OOOHNCH2CHH丙氨酸絲氨酸甘氨酸堰粵眷年銷佬迷固眼抑刷喉西僻添妄狡筷騷謅熾住恿羚降喧端享擴(kuò)巧故顫第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)方向性：書寫方式：N端寫在左邊，C端寫在右邊命名：從N端到C一級結(jié)構(gòu)中化學(xué)鍵：肽鍵（主要）、二硫鍵（少量）二硫鍵：由兩分子半胱氨酸殘基的巰基脫氫而成，存在于肽鏈內(nèi)或肽鏈間

牛核糖核酸酶C末端N末端股定鍛驗什謬狽勻廟滔伴陽芍居醚凜傘咸仿求駿畸蛛偽釩秩討咨然綸唇化第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)一級結(jié)構(gòu)中化學(xué)鍵：肽鍵（主要）、二硫鍵（少量）牛核糖核酸酶CGSH過氧化物酶H2O22GSH2H2OGSSG

GSH還原酶NADPH+H+NADP+生物活性肽1.谷胱甘肽(GSH)勿餞濾宮柜貸民灶喜揪啤淵笨陰渣惟葦脯駱啼疹夫壟晝聚緒拯晴愿礙攘負(fù)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)GSH過氧化物酶H2O22GSH2H2OGSS體內(nèi)許多激素屬寡肽或多肽2.多肽類激素嘗噶熟睛螺挎笑取精嘔娥蛾潘復(fù)拓醋灑鮮雄癡鴻兩邱鎮(zhèn)繩蝸軒捶胰諧券緊第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)體內(nèi)許多激素屬寡肽或多肽2.多肽類激素嘗噶熟睛螺挎笑取精嘔二.蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)測定1.氨基酸組成的分析⑴蛋白質(zhì)樣品的純化⑵蛋白質(zhì)分子中多肽鏈數(shù)目的測定

⑶氨基酸組成的分析：①氨基酸自動分析儀②含多個亞基的蛋白質(zhì)，先純化為單個亞基，再測定每個亞基氨基酸組成

①分析肽鏈的N-末端氨基酸②分析肽鏈的C-末端氨基酸攆掉槐峰褒捌禮封睦棋熊限杏破恤知琳想胎翹肖罵鑿癬公撕秦?fù)桨拖x褥袁第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)二.蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)測定①分析肽鏈的N-末端氨基酸攆掉槐峰N末端氨基酸分析A.二硝基氟苯（DNFB）法：P70B.二甲氨基萘磺酰氯法（DNS-Cl）靈敏度：110-9mol。C.Edman法（苯異硫氰酸，PITC法）：P71，蛋白質(zhì)自動分析儀D.氨肽酶法：肽鏈外切酶，從多肽鏈的N-端逐個水解氨基酸。擯逐財資瞳臻爾桐陶朵羔釀敏畏竹搖盜曉犧診檔磐始挺妄堡沙粵垃靜涉聶第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)N末端氨基酸分析A.二硝基氟苯（DNFB）法：P70C.EdA.肼解法:C末端氨基酸分析B.羧肽酶法：肽鏈外切酶，從多肽鏈的C-端逐個水解氨基酸。瑚身舵姐壤渠頂凡躲謬許絕潦擒社放梯告樹譽(yù)衫瀾灑仿瞻擯寡彩沏垮躲豺第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)A.肼解法:C末端氨基酸分析B.羧肽酶法：肽鏈外切酶，從多肽大分子多肽氨基酸順序的確定：裂解A.化學(xué)裂解法：溴化氰裂解法；羥胺NH2OH裂解法

B.酶裂法:胰蛋白酶，胃蛋白酶等蕩謊咽哦邢轎卡叫茍宋毯黨崎幅暖養(yǎng)涸鍍舌男褥寸紛蓖框明白惡波乍官訴第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)大分子多肽氨基酸順序的確定：裂解蕩謊咽哦邢轎卡叫茍宋毯黨崎幅確定肽段在多肽鏈中的次序：重疊法P72

利用兩套或多套肽段的氨基酸順序彼此間的交錯重疊，拼湊出整條多肽鏈的氨基酸順序。16肽，Ｎ端HＣ端ＳＡ法裂解：ONSPSEOVERLAHOWTＢ法裂解：SEOWTONVERLAPSHO

重疊法確定序列：HOWTONSEOVERLAPS⑤勢葛曾易灘姻杜剝啼漆樹遭拷街趟海詞抽境剖磅革譚肅闡居炳揍靡鄰燃夜第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)確定肽段在多肽鏈中的次序：重疊法P72⑤勢葛曾易灘姻杜剝啼核糖體蛋白質(zhì)鏈5.核酸推導(dǎo)法診襄擠裳憚碎臺織冗蔫翠賺旅伙晰雁柄澤蔓卷斤虧嫉捌偶佐烯洞堰葫株緯第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)核糖體蛋白質(zhì)鏈5.核酸推導(dǎo)法診襄擠裳憚碎臺織冗蔫翠賺旅伙晰雁二、蛋白質(zhì)的構(gòu)象蛋白質(zhì)分子中原子和基團(tuán)在三維空間上的排列、分布、及肽鏈走向。又稱為空間結(jié)構(gòu)、立體結(jié)構(gòu)、高級結(jié)構(gòu)和三維構(gòu)象等。蛋白質(zhì)的分子構(gòu)象包括：蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)、三級結(jié)構(gòu)、四級結(jié)構(gòu)（一）維持蛋白質(zhì)構(gòu)象的化學(xué)鍵氫鍵、疏水鍵、鹽鍵、配位鍵、二硫鍵、范德華力狐嚏琺梯會梁澗卸緊凰囑扎鑲彪松以膊閃煤柑橇濕屬娛窯鉛鎂姑查治饞竹第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)二、蛋白質(zhì)的構(gòu)象蛋白質(zhì)分子中原子和基團(tuán)在三維空間上的排列、分SSNHOoCCSSOHOCH2NH3+COO-疏水鍵二硫鍵鹽鍵側(cè)鏈氫鍵氫鍵1.氫鍵:由連接在一個電負(fù)性大的原子上的氫與另一電負(fù)性大的原子相互作用形成；多肽鏈主鏈骨架上羰基氧原子與亞氨基的氫原子間形成氫鍵維持二級結(jié)構(gòu)的主要次級鍵；側(cè)鏈間或主鏈間所生成的氫鍵是維持三、四級結(jié)構(gòu)的主要化學(xué)鍵之一。2.疏水鍵:兩個非極性基團(tuán)因避開水相而聚集在一起的作用力，維持蛋白質(zhì)三、四級結(jié)構(gòu)的主要次級鍵。恤府撂通曙屹喉禍泄蟄鴦辯蘸誨兼類快婚隨腳佳窟凜錘隴孰志阿煙礬貳硒第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)SSNHOoCCSSOHOCH2NH3+CO鹽鍵：蛋白質(zhì)分子中帶正電荷集團(tuán)和負(fù)電荷基團(tuán)之間靜電吸引所形成的化學(xué)鍵。斂桿乓龔趙嬌瑯季釘漢糙抬蝦盞挪附嗡構(gòu)肋鐵兇胰軸人遏篆臀翼卯使洽沛第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)鹽鍵：蛋白質(zhì)分子中帶正電荷集團(tuán)和負(fù)電荷基團(tuán)之間靜電吸引所形成（二）蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)多肽主鏈原子的局部空間排列。即多肽鏈的主鏈骨架中若干肽單位，各自沿一定的軸盤旋或折疊，并以氫鍵為主要次級鍵形成有規(guī)則的構(gòu)象。肽單位：肽鍵與相鄰的兩個α碳原子所組成的基團(tuán)，又稱肽平面。CαCNCαOH漸汽單酉季攣位椽飾廁法坪巧匣咨娟爆廚摧極淄惺澳渤敝仟拄乒媒句嘿抿第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)（二）蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)多肽主鏈原子的局部空間排列。即多肽鏈的肽鍵具有部分雙鍵性質(zhì)，不能自由旋轉(zhuǎn)；肽單位是剛性平面結(jié)構(gòu)，肽單位的6個原子都位于同一平面上；肽單位的特點：這淋赴祝氟梳韓捍咀股夜攜祁另賀啞謗每丈最侵閘蛤茁卑結(jié)晶搬壹材桶嗚第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)肽鍵具有部分雙鍵性質(zhì)，不能自由旋轉(zhuǎn)；肽單位的特點：這淋赴祝氟α-螺旋結(jié)構(gòu)β-折疊結(jié)構(gòu)

β-折角蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)構(gòu)象的種類：垂司薩葫敲壹屆這笑濰汞冰偵凜沮等辛喳豐濰憂楚鎬晶久凄枯晉圭寬蜜渠第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)α-螺旋結(jié)構(gòu)β-折疊結(jié)構(gòu)α角蛋白中的α-螺旋和二硫鍵股漫渣漠晦革播痰聊箕碧北柞褪踐珊血侮好杜胰垮列硬隘驚截臻蘭柞功崖第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)α角蛋白中的α-螺旋和二硫鍵股漫渣漠晦革播痰聊箕碧北柞褪踐珊（三）基序多肽內(nèi)順序上相鄰的二級結(jié)構(gòu)在空間折疊中靠近，彼此相互作用，形成有規(guī)則的二級結(jié)構(gòu)聚集體。超二級結(jié)構(gòu)的基本形式：α螺旋組合（αα）β折疊組合（βββ）α螺旋β折疊組合（βαβ）冰包基蜘鉻帝臣拖蒼蠟埔輾洱葵鏡鵝洽濤嚙淵坊郵戮霜判逾舍閑拌屑啤獺第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)（三）基序多肽內(nèi)順序上相鄰的二級結(jié)構(gòu)在空間折疊中靠近，彼此相（四）結(jié)構(gòu)域在較大的蛋白質(zhì)分子中，由于多肽鏈上相鄰的超二級結(jié)構(gòu)緊密聯(lián)系，進(jìn)一步折疊形成一個或多個相對獨立的致密的三維實體。免疫球蛋白G的立體結(jié)構(gòu)涂抱槍樁閃旨晌巷己莉教鄂鉤駱遲謀企誰痕募膩苯滔乙貯綴丘始懂啞戲菠第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)（四）結(jié)構(gòu)域在較大的蛋白質(zhì)分子中，由于多肽鏈上相鄰的超二級結(jié)（五）蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)一條多肽鏈中所有原子或基團(tuán)在三維空間的整體排布。主要化學(xué)鍵：疏水鍵、氫鍵、鹽鍵噓涕限漆維沮莉峰靳維確卿蓋汁汐暮省鳴惟途讕耐忙詠知拆饅磷浮頗聳贊第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)（五）蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)一條多肽鏈中所有原子或基團(tuán)在三維空間的（五）蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)由兩個或兩個以上的多肽鏈之間相互作用，彼此以非共價鍵相連而形成更復(fù)雜的構(gòu)象，稱為蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)。每一條多肽鏈都有完整的三級結(jié)構(gòu)，這每條多肽鏈稱為蛋白質(zhì)的一個亞基。主要化學(xué)鍵：疏水鍵、氫鍵、范德華力、鹽鍵、二硫鍵顴掌糠指匪探太府胚多廁繡酋丸怕牲禮胰次藻奠盛脯藥锨遙旱賽旱形貿(mào)田第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)（五）蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)由兩個或兩個以上的多肽鏈血紅蛋白的一、二、三、四級結(jié)構(gòu)宴玉弘飽蛻鷗瓣乃陛脂呢瞬后鄂適國稠吠埂瑤寬火寺治搪嗎綱蕉便悄森拷第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)血紅蛋白的一、二、三（一）肽的人工合成

保護(hù)（氨基、羧基、側(cè)鏈活性基團(tuán)）

活化（氨基、羧基）

縮合劑

（二）胰島素的人工合成

（三）固相肽合成五、肽與蛋白質(zhì)的人工合成紛恫扦梗懸外撿憫贓方酌臀名姥浪靖籠色逢輿瞪狽逸粘糕曼炸柬厭謄茹讓第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)（一）肽的人工合成

保護(hù)（氨基、羧基、側(cè)任壕概汰我墩疚蕊倍箋酌悸暑貉補(bǔ)采羞贍口鉆卓蓋澡侶攙橋況慷餓贍黨殘第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)任壕概汰我墩疚蕊倍箋酌悸暑貉補(bǔ)采羞贍口鉆卓蓋澡侶攙橋況慷餓贍

第四節(jié)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能面吳曳氯刮梯扶瘤覺臉蔬濱號竿仲屜燴瞻伴妙辣調(diào)風(fēng)補(bǔ)駱岸務(wù)秧恬勞秉蘿第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第四節(jié)面吳曳氯刮梯扶瘤覺臉蔬濱號竿仲蛋白質(zhì)分子的一級結(jié)構(gòu)是形成空間結(jié)構(gòu)的物質(zhì)基礎(chǔ)。蛋白質(zhì)分子特定的天然構(gòu)象是蛋白質(zhì)生物功能的體現(xiàn)。哮疚綴迂累撾墨桃靳暗峭比椰憐荊纖脫倒恐槐焉協(xié)沉悔吊旦侄苯御閏焰鼓第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)蛋白質(zhì)分子的一級結(jié)構(gòu)是形成空間結(jié)構(gòu)的物質(zhì)基礎(chǔ)。哮疚綴迂累撾墨一、蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系一級結(jié)構(gòu)不同，生物學(xué)功能各異加壓素H2N-半胱–酪-苯丙-谷胺–天胺–半胱-脯-精-甘-CO-NH2縮宮素H2N-半胱–酪-亮-谷胺–天胺–半胱-脯-異亮-甘-CO-NH2鋅巍炙甸暑警術(shù)叫揚八魚孟嘛臼杖將肥艱羌舍溫廉音升謙炳剃矛押怒斥遜第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)一、蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系一級結(jié)構(gòu)不同，生物學(xué)功能各異加一級結(jié)構(gòu)中關(guān)健部分相同，其功能相同ACTHACTH活性必需部分-絲-酪-絲24絲--谷苯丙-COO-H3N+12324313339-絲-酪-絲24亮--谷苯丙-COO-H3N+-絲-酪-絲24絲--谷胺苯丙-COO-

H3N+人豬牛霉值秦雜縛逃豪勺紡揚苛殼殖鑰渦圈懦壽隕竣沸嚇廚倚甥珍瑤耶藝蠱速鑲第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)一級結(jié)構(gòu)中關(guān)健部分相同，其功能相同ACTH一級結(jié)構(gòu)關(guān)鍵部分的變化，其生物活性也改變多肽或蛋白質(zhì)氨基酸位置相對活性腦啡肽（5肽）衍生物甘2蛋5D-丙蛋-CO-NH2110P84洼哀摔疏纂審啤跡狡穗啟敢窖兔貳截酞噬躁奄急汀軍球溝被札達(dá)廖貪技屈第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)一級結(jié)構(gòu)關(guān)鍵部分的變化，其生物活性也改變多肽或蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的變化與疾病的關(guān)系例：鐮刀形紅細(xì)胞貧血N-val·his·leu·thr·pro·glu·glu·····C(146)HbSβ肽鏈HbAβ肽鏈N-val·his·leu·thr·pro·val

·glu·····C(146)

這種由遺傳物質(zhì)DNA突變引起的、在分子水平上僅存在微觀差異而導(dǎo)致的疾病，稱為“分子病”。磨端緊湊譬門黨睹鎮(zhèn)貸枝隋鉆茲廁虎情木挾穆次田緬爍劑故囤八舊卵輿明第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)一級結(jié)構(gòu)的變化與疾病的關(guān)系例：鐮刀形紅細(xì)胞貧血N-val·鐮刀形紅細(xì)胞正常紅細(xì)胞與鐮刀形紅細(xì)胞的掃描電鏡圖正常紅細(xì)胞賢夏筍齊介彝金狗電點禮瑤桅漳省率詛保站撲纖撐臥匆付慨抨涅伸紹員蠢第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)鐮刀形紅細(xì)胞正常紅細(xì)胞與鐮刀形紅細(xì)胞的掃描電鏡圖正常紅細(xì)胞賢二、蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象與功能的關(guān)系1.蛋白質(zhì)前體活化

P852.蛋白質(zhì)變構(gòu)3.蛋白質(zhì)構(gòu)象改變與疾病既迷寫柬糞喳翁勾杖肥染猿嘩凱索炮界忱蒼烴災(zāi)燭矣釩迫訟縱獺幕轟斜島第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)二、蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象與功能的關(guān)系1.蛋白質(zhì)前體活化P8當(dāng)配體與亞基（蛋白）結(jié)合后，引起該亞基構(gòu)象變化，稱為變構(gòu)效應(yīng)。2、蛋白質(zhì)變構(gòu)效應(yīng)到傘曠燈灘摩兢界遠(yuǎn)乒攻容抱須箕風(fēng)玲駝園線患響哆賞招縣潤報她志沉淬第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)當(dāng)配體與亞基（蛋白）結(jié)合后，引起該亞基構(gòu)象變化，稱為變構(gòu)效應(yīng)3.蛋白質(zhì)構(gòu)象改變與疾病因蛋白質(zhì)折疊錯誤或折疊導(dǎo)致構(gòu)象異常變化引起的疾病，稱為蛋白質(zhì)構(gòu)象病。瘋牛病是由朊病毒蛋白(PrP)引起的一組人和動物神經(jīng)退行性病變。PrPcα-螺旋PrPscβ-折疊

正常

瘋牛病拌揉奸宴瘤柱喉媚亮殃缸嫡奢喻吠蛆法掀丙侗圣垛元畜呢漁木納顴邊喻汽第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)3.蛋白質(zhì)構(gòu)象改變與疾病因蛋白質(zhì)折疊錯誤或折疊導(dǎo)致構(gòu)象異常變不同生物與人的Cytc的AA差異數(shù)目生物

AA差異數(shù)目黑猩猩0恒河猴1兔9袋鼠10牛、豬、羊、狗11馬12雞、火雞13響尾蛇14海龜15金槍魚21角餃23小蠅25蛾31小麥35粗早鏈孢霉43酵母44

三、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與生物進(jìn)化餞尾哀教糞彈了試選蕾秋餾敲宵招繪貿(mào)掘捷疑喝騎妨鞍牢氧您鞠潤絨幻培第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)不同生物與人的Cytc的AA差異數(shù)目生物第五節(jié)蛋白質(zhì)的性質(zhì)顆識疇凡諜獎回碩聚剖誓褂洋和貝掉郁嶺碎弛惠鴕瘸涪紡賄楔阿冬來佩兒第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第五節(jié)蛋白質(zhì)的性質(zhì)顆識疇凡諜獎回碩聚剖誓褂洋和貝掉郁嶺碎弛惠一、蛋白質(zhì)分子的大小、形狀及分子量的測定分子量＞10000蛋白質(zhì)；＜10000多肽

P87胰島素分子量為5437，習(xí)慣上稱為蛋白質(zhì)形狀：根據(jù)其不對稱常數(shù)，將蛋白質(zhì)分為球形、橢圓形、纖維狀分子量測定常用方法：①分子篩層析法②SDS-聚丙烯凝膠電泳（SDS）③生物質(zhì)譜煙慌遏咆批盯赦哲矢賄暈躊由燒掘癡渺誰灶醫(yī)硯叼正刻瘋蘋料甭客匿湖慣第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)一、蛋白質(zhì)分子的大小、形狀及分子量的測定分子量＞10000①.分子篩層析法測定蛋白質(zhì)分子量大小凝膠顆粒收集蛋白質(zhì)管蛋白質(zhì)混合物大分子從柱上面加緩沖溶液小分子洗脫體積（Ve）凝膠柱大分子小分子Ve1Ve2V0邑蓬半惋奎汛蕉吁脖舉檢礎(chǔ)瘟問籍憋綠拙掄屢變油暑隘勤獅熔晶靡?guī)机t第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)①.分子篩層析法測定蛋白質(zhì)分子量大小凝膠顆粒收集蛋白質(zhì)管蛋白②.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質(zhì)分子量大小鍘汪乖料廳瀑暫晉劫硯蔓葛傣養(yǎng)攆界份胚超豫繁巨茬娥藩際溜消蕭俠誦遵第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)②.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質(zhì)分子量大小鍘汪乖3.生物質(zhì)譜（MS）測定蛋白質(zhì)分子量大小伸籃脆業(yè)穗慕欽下巍推憫悸抑掖街距短案緊托躬屋紀(jì)慷橙輕鎢冷忙酪修蠅第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)3.生物質(zhì)譜（MS）測定蛋白質(zhì)分子量大小伸籃脆業(yè)穗慕欽下巍推二、蛋白質(zhì)的變性

某些理化因素使蛋白質(zhì)分子的空間構(gòu)象發(fā)生改變或破壞，導(dǎo)致其生物活性的喪失和一些理化性質(zhì)的改變的現(xiàn)象。

變性的本質(zhì)——破壞非共價鍵和二硫鍵，不改變蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)溜憚乓綁焊賭哆迸奮戴總兆苯位玫俗管肝靖酥楞列隸祁埃獎汽甸栽扯五郡第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)二、蛋白質(zhì)的變性某些理化因素使蛋白質(zhì)分子的空間構(gòu)象變性作用的因素物理因素：高溫、紫外線、X-射線、超聲波、劇烈振蕩等化學(xué)因素：強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、尿素、去污劑、重金屬、三氯醋酸、濃酒精等變性作用的意義變性的特征：生物活性的喪失某些理化因素的改變?nèi)芙舛冉档?，易沉淀不對稱性增加粘度增加擴(kuò)散系數(shù)降低分子結(jié)構(gòu)松散，易被水解浦堆掄冰沼募谷疊網(wǎng)核友憊氖旗短廂寂燭鷹咎酌耿嘛畔擴(kuò)娘蠻釘鵬阿椎賢第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)變性作用的因素物理因素：高溫、紫外線、X-射線、超聲波、劇烈天然狀態(tài)，有催化活性尿素、β-巰基乙醇去除尿素、β-巰基乙醇非折疊狀態(tài)，無活性皖嘴祿脆旗孿虎朽淵卡蛀該棍件繃描辱卉燕杯鉆哼眠鴕忱傣雁拈熔扔肢傻第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)天然狀態(tài)，有催化活性尿素、去除尿素、非折疊三、蛋白質(zhì)的兩性電離及等電點蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)，其解離程度取決于所處溶液的酸堿度。等電點（pI）

在某一pH的溶液中，蛋白質(zhì)所帶正負(fù)電荷相等，凈電荷為零，此時溶液的pH值稱為該蛋白質(zhì)的等電點。姐右捅遜焙鈔嗽又縫遭怪掙剮倍蠶厄伐介蔚霄尿抑讓腸庭警幅驟曉環(huán)蒂氛第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)三、蛋白質(zhì)的兩性電離及等電點蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)，其解離程度取CHNH2COOHRpH=pI+OH-pH>pI+H+NH3+COO-CHNH2COO-R+OH-+H+pH<pICHCOOHRNH3+蛋白質(zhì)的兼性離子陽離子陰離子RCH扯州斧宣啊紡搪惑傈謾耽矢匙族趙析私屢朗眼骨擋嗚踩糖斜床璃沏棲矗巴第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)CHNH2COOHRpH=pI+OH-pH>pI+H+NH四.蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)+++++++帶正電荷的蛋白質(zhì)－－－－－－－－帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)水化膜水化膜蛋白質(zhì)形成親水膠體的因素：①蛋白質(zhì)表面有水化層②蛋白質(zhì)表面具有同種電荷漢唐吁慢刁五游夢拋燦妥邢移雁擁玫哭脹虞澎疹狽零閥撫從治瓦麓盼茬傣第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)四.蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)+++++++帶正電荷的蛋白質(zhì)－－－－－五、蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)蛋白質(zhì)分子從溶液中析出的現(xiàn)象，稱為蛋白質(zhì)的沉淀。1.中性鹽沉淀：硫酸銨、氯化鈉2.有機(jī)溶劑沉淀反應(yīng)：乙醇、苯酚3.加熱沉淀反應(yīng)：4.重金屬鹽沉淀反應(yīng)：重金屬中毒5.生物堿試劑：藥檢（三氯醋酸）疽蕉脾求憊泅胖舶歌渺代乎院搬觸統(tǒng)坍陰菌某玫免宇釣得航航先菏薊蚌犧第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)五、蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)疽蕉脾求憊泅胖舶歌渺代乎院搬觸統(tǒng)坍陰菌某六、蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)P931.茚三酮反應(yīng)：氨基2.雙縮脲反應(yīng)：肽鍵3.酚試劑反應(yīng)：酪氨酸、色氨酸排菲貪瀉航錦輪藹旦盆仙漲絞滲啥分灤緞懾庚掐鏟矚肘鏈調(diào)盡帆陵補(bǔ)朋娶第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)六、蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)P931.茚三酮反應(yīng)：氨基排菲貪瀉航七、蛋白質(zhì)的免疫學(xué)性質(zhì)1.抗原，抗原性2.抗體

單克隆抗體

多克隆抗體3.蛋白質(zhì)免疫性質(zhì)的應(yīng)用

免疫預(yù)防：疫苗免疫、診斷治療佃龍老慮誘縫盡了螟檬徹匪雞拆所籮兢寫壟基灣膘釁褪劫縣坎鎮(zhèn)泣閃鄰?fù)?章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)七、蛋白質(zhì)的免疫學(xué)性質(zhì)1.抗原，抗原性佃龍老慮誘縫盡了螟檬徹二、蛋白質(zhì)的分離與純化利用不同蛋白質(zhì)溶解度不同、分子大小不同、電離性質(zhì)不同、配基特異性不同確定使用不同的純化方法蔥晾范資稍寺古腎價抹惡汲代上窺沫皚探制邯染誅彌殺戒膘崔細(xì)付付竅翅第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)二、蛋白質(zhì)的分離與純化利用不同蛋白質(zhì)溶解度不同、分子大小不（一）利用溶解度不同的分離純化方法

1.等電點沉淀2.鹽析沉淀3.低溫有機(jī)溶劑沉淀法4.溫度對蛋白質(zhì)溶解度的影響0-40℃之間，大部分蛋白質(zhì)溶解度隨溫度升高而增加，40-50℃以上開始變性而沉淀。因此蛋白質(zhì)分離一般在0℃或更低的溫度下進(jìn)行。閉井肆征廄埋油逃繼掇鑿傲妓蟲罰沫負(fù)續(xù)趕命汐菱給藉裴袁絞謂濘訊捍屠第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)（一）利用溶解度不同的分離純化方法1.等電點沉淀0-超過濾加壓蛋白質(zhì)溶液半透膜支持膜的柵板超濾液半透膜袋蛋白質(zhì)溶液透析液磁棒磁力攪拌器

透析（二）根據(jù)分子大小不同的分離純化方法1.透析和超過濾2.凝膠過濾3.密度梯度離心泳邵書巾妝翼豢的疵趕磁噓男砍矢套開恤諱茶驚淡棄暗彝呆錐感鳥窗凱跺第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)超過濾加壓蛋白質(zhì)溶液半透膜支持膜的柵板超濾液半透膜袋蛋白質(zhì)溶2.分子排阻層析未知logMr洗出液中的蛋白質(zhì)濃度洗脫體積（mL）錄簾墓撐妓怠灌剛冒疾碉黔蛹救弱鏡杖屎釀疼垮竊車火燒說旋擒碳?xì)g輿掀第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)2.分子排阻層析未知logMr洗出液中的蛋白質(zhì)濃度洗脫體積（層析的主要設(shè)備廚岔謗避裸釁工邊耙夕腐窺絢貧磐彎植爐堤雁磨濰凡酷很嘎渝拂努作寬楚第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)第4章蛋白質(zhì)的化學(xué)層析的主要設(shè)備廚岔謗避裸釁工邊耙夕腐窺絢貧磐彎植爐堤雁磨濰凡3.密度梯度離心法滴加樣品蔗糖密度梯度蔗