實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測(“菌落”文檔)共20張

實驗九

乳酸發(fā)酵及廢品中乳酸菌檢測一、實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)了解乳酸發(fā)酵的根本原理學(xué)習(xí)了解酸乳的制造工藝方法學(xué)習(xí)掌握乳酸菌的檢測方法學(xué)習(xí)掌握活菌菌落計數(shù)法二、實驗原理〔一〕乳酸發(fā)酵指糖經(jīng)無氧酵解而生成乳酸的發(fā)酵。菌種不同，代謝途徑不同，生成的產(chǎn)物有所不同。同型乳酸發(fā)酵：〔經(jīng)EMP途徑〕異型乳酸發(fā)酵：〔經(jīng)HMP途徑〕雙歧桿菌發(fā)酵:〔經(jīng)HK途徑—磷酸己糖解酮酶途徑〕同型乳酸發(fā)酵：〔經(jīng)EMP途徑〕到達(dá)規(guī)定培育時間，應(yīng)立刻計數(shù)。〔4〕如菌落數(shù)有的大于300，有的又小于30，不在30～300之間，以最接近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告異型乳酸發(fā)酵：〔經(jīng)HMP途徑〕同型乳酸發(fā)酵：〔經(jīng)EMP途徑〕保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌〔2〕呈鏈狀生長的菌落之間無任何明顯界限，作為一個菌落計，如存在有幾條不同來源的鏈，那么每條鏈均應(yīng)按一個菌落計算?！?〕如均大于300，那么取最高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告〔3〕如片狀菌落不到平板一半，而另一半又分布均勻，那么可以半個平板的菌落數(shù)乘2代表全平板的菌落數(shù)。市售酸奶作發(fā)酵劑5~10%鮮牛奶、白砂糖、市售酸奶一、設(shè)計實驗對酸乳中乳酸菌進(jìn)展計數(shù)鮮牛奶、白砂糖、市售酸奶〔3〕如均小于30，那么以最低稀釋度的平均菌落數(shù)乘稀釋倍數(shù)報告鮮牛奶、白砂糖、市售酸奶學(xué)習(xí)掌握乳酸菌的檢測方法〔二〕酸乳的制造1、酸奶PK鮮牛奶酸奶出于牛奶而勝于牛奶主要區(qū)別：乳糖變化蛋白量變化鈣、磷吸收微生物變化配料預(yù)熱、均質(zhì)殺菌冷卻、接種〔分裝〕發(fā)酵冷卻〔攪拌〕后熟發(fā)酵冷卻2酸奶制造工藝〔三〕酸奶中的微生物保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌運用比例乳酸發(fā)酵類型二者間共生關(guān)系二者間拮抗關(guān)系〔四〕活菌菌落計數(shù)稀釋涂布法稀釋混合倒平板法菌落計數(shù)和報告到達(dá)規(guī)定培育時間，應(yīng)立刻計數(shù)。假設(shè)不能立刻計數(shù)，應(yīng)將平板放置于0－4℃，但不得超越24h。1、菌落的選擇〔1〕單個菌做一個菌落計〔2〕呈鏈狀生長的菌落之間無任何明顯界限，作為一個菌落計，如存在有幾條不同來源的鏈，那么每條鏈均應(yīng)按一個菌落計算?！?〕如片狀菌落不到平板一半，而另一半又分布均勻，那么可以半個平板的菌落數(shù)乘2代表全平板的菌落數(shù)。2、平板菌落數(shù)的選擇〔1〕選取菌落數(shù)在30～300之間的平板〔SN規(guī)范商檢行業(yè)規(guī)范要求為25～250個菌落〕，假設(shè)有二個稀釋度均在30～300之間時，比值小于或等于2取平均數(shù)，比值大于2那么取稀釋度較低平板菌落數(shù)。〔2〕如均大于300，那么取最高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告〔3〕如均小于30，那么以最低稀釋度的平均菌落數(shù)乘稀釋倍數(shù)報告〔4〕如菌落數(shù)有的大于300，有的又小于30，不在30～300之間，以最接近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告〔5〕如一切稀釋度均無菌落生長，那么應(yīng)按小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報告。3、菌落數(shù)的報告1〕菌落數(shù)在1～100時，按實有數(shù)字報告，如大于100時，那么報告前面兩位有效數(shù)字，第三位數(shù)按四舍五入計算。2〕固體檢樣以克〔g)為單位報告，3〕液體檢樣以毫升〔ml〕為單位報告，4〕外表涂擦那么以平方厘米〔cm2〕報告。菌落計數(shù)及報告方式例稀釋度及菌落數(shù)兩稀釋度菌落數(shù)之比菌落總數(shù)CFU/ml報告方式CFU/ml10-110-210-31516420--164001600022760295461.638000380032890271602.227100270004不可計4650513--513000510000527115--2702706000--＜1×10＜107不可計30512--3050031000〔五〕乳酸菌檢測乳酸菌特性——產(chǎn)乳酸乳酸+Ca2+——乳酸鈣〔可溶性好〕2〕固體檢樣以克〔g)為單位報告，實驗九

乳酸發(fā)酵及廢品中乳酸菌檢測到達(dá)規(guī)定培育時間，應(yīng)立刻計數(shù)。〔2〕如均大于300，那么取最高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告1〕菌落數(shù)在1～100時，按實有數(shù)字報告，如大于100時，那么報告前面兩位有效數(shù)字，第三位數(shù)按四舍五入計算。學(xué)習(xí)了解乳酸發(fā)酵的根本原理〔2〕呈鏈狀生長的菌落之間無任何明顯界限，作為一個菌落計，如存在有幾條不同來源的鏈，那么每條鏈均應(yīng)按一個菌落計算。到達(dá)規(guī)定培育時間，應(yīng)立刻計數(shù)?！?〕呈鏈狀生長的菌落之間無任何明顯界限，作為一個菌落計，如存在有幾條不同來源的鏈，那么每條鏈均應(yīng)按一個菌落計算。鮮牛奶、白砂糖、市售酸奶鮮牛奶、白砂糖、市售酸奶〔4〕如菌落數(shù)有的大于300，有的又小于30，不在30～300之間，以最接近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告同型乳酸發(fā)酵：〔經(jīng)EMP途徑〕三、實驗資料鮮牛奶、白砂糖、市售酸奶培育皿、試管、移液管MRS培育基MRS培育基：滅菌后冷卻至50℃，加20克碳酸鈣，搖勻后倒平板四、實驗內(nèi)容及步驟〔一〕乳酸菌檢測1、樣品梯度稀釋〔無菌操作、準(zhǔn)確度〕2、混合倒平板3、培育4、統(tǒng)計計數(shù)〔