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生物化學實用技術主講老師:劉名江生物與生態(tài)工程學院(一)生物大分子的制備和保存技術

——蛋白質、核酸的分離和提純

研究生物大分子,首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質?;驹聿煌夂鮾煞矫妫阂皇抢没旌衔镏袔讉€組分分配率的差別,把它們分配到可用機械方法分離的兩個或幾個物相中,如鹽析、有機溶劑提取、層析和結晶等;二是將混合物置于單一物相中,通過物理力場的作用使各組分分配于不同區(qū)域而達到分離的目的,如電泳、超速離心、超濾等。(二)色譜分離技術色譜分離技術,又稱層析分離技術或色層分離技術,是一種分離復雜混合物中各個組分的有效方法。它是利用混合物中各組分的理化性質(溶解度、吸附力、分子極性、分子形狀和大小等)的不同,使各組分以不同程度在兩個相中,其中一個相是固定的。不同物質在由固定相和流動相構成的體系中具有不同的分配系數(shù),當兩相作相對運動時,這些物質隨流動相一起運動,并在兩相間進行反復多次的分配,從而使各物質達到分離色譜分析法的由來1906年,俄國植物學家Tsweet將CaCO3固體粉末裝入豎立的玻璃管中,從頂端倒入植物色素的石油醚浸出液,并用石油醚連續(xù)地沖洗。結果在柱中出現(xiàn)了顏色不同的色帶。因此,Tsweet把這種方法稱為色譜法。如今,色譜法不僅用于有色物質的分離,而且大量用于無色物質的分離。所以色譜法已經(jīng)失去原來的含義。但是,現(xiàn)在仍沿用色譜法這個名稱。色譜法具有分離及分析兩種功能。它是分析混合物最有力的手段。色譜分離是目前應用最廣泛的分離方法。已廣泛地用于石油化工、有機合成、生理生化、醫(yī)藥衛(wèi)生、環(huán)境監(jiān)測、刑事偵查、生產(chǎn)在線控制,乃至空間探索等許多領域,以解決各種分離分析課題。凝膠色譜分離技術原理3、色譜分類流動相與固定相聚集態(tài)(1)按兩相所處的物態(tài)分類(3)按固定相的外型分類固定相裝于柱內的色譜法,稱為柱色譜。固定相呈平板狀的色譜,稱為平板色譜,它又可分為薄層色譜和紙色譜。(4)按照展開程序分類

按照展開程序的不同,可將色譜法分為洗脫法、頂替法、和迎頭法。洗脫法也稱沖洗法。工作時,首先將樣品加到色譜柱頭上,然后用吸附或溶解能力比試樣組分弱得多的氣體或液體作沖洗劑。由于各組分在固定相上的吸附或溶解能力不同,被沖洗劑帶出的先后次序也不同,從而使組分彼此分離。流出曲線下圖AB

這種方法能使樣品的各組分獲得良好的分離,色譜峰清晰。此外,除去沖洗劑后,可獲得純度較高的物質。目前,這種方法是色譜法中最常用的一種方法。頂替法是將樣品加到色譜柱頭后,在惰性流動相中加入對固定相的吸附或溶解能力比所有試樣組分強的物質為頂替劑(或直接用頂替劑作流動相),通過色譜柱,將各組分按吸附或溶解能力的強弱順序,依次頂替出固定相。很明顯,吸附或溶解能力最弱的組分最先流出,最強的最后流出。頂替法的流出曲線如下圖AB

此法適于制備純物質或濃縮分離某一組分;其缺點是經(jīng)一次使用后,柱子就被樣品或頂替劑飽和,必須更換柱子或除去被柱子吸附的物質后,才能再使用。迎頭法是將試樣混合物連續(xù)通過色譜柱,吸附或溶解能力最弱的組分首先以純物質的狀態(tài)流出,其次則以第一組分和吸附或溶解能力較弱的第二組分混合物,以此類推。流出曲線如下圖該法在分離多組分混合物時,除第一組分外,其余均非純態(tài),因此僅適用于從含有微量雜質的混合物中切割出一個高純組分(組分A),而不適用于對混合物進行分離。分類按流動相分氣相色譜(GC)液相色譜(LC)超臨界流體色譜(SFC)按機理分吸附色譜分配色譜離子交換色譜排阻色譜

液-固色譜1、概念分光光度法(AbsorptionPhotometry)是一種基于物質對光的選擇性吸收而建立起來的一種分析方法。是利用物質所特有的吸收光譜對物質進行定性或定量分析的一項技術。包括可見吸光光度法、紫外-可見吸光光度法和紅外光譜法等。(二)分光光度技術3、光的本質與溶液顏色的關系(1)光的基本性質光是電磁波。通常用波長、頻率來描述。(2)物質的顏色與吸收光的關系從光本身來說、有些波長的光線,作用于眼睛引起了顏色的感覺,我們把人眼所能看見有顏色的光叫做可見光,其波長范圍大約在400-760nm之間。實驗證明:白光(日光、白熾電燈光、日光燈光等)是由各種不同顏色的光按一定的強度比例混合而成的。如果讓一束白光通過三棱鏡,就分解為紅、橙、黃、綠、青、藍、紫七種顏色的光,這種現(xiàn)象稱為光的色散。每種顏色的光具有一定的波長范圍。我們把白光叫做復合光;把只具有一種顏色的光,叫做單色光。

實驗還證明,不僅七種單色光可以混合成白光,如果把適當顏色的兩種單色光按一定的強度比例混合,也可以成為白光。這兩種單色光就叫做互補色。如綠光和紫光互補,藍光和黃光互補,等等。對固體物質來說,當白光照射到物質上時,物質對于不同波長的光線吸收、透過、反射、折射的程度不同而使物質呈現(xiàn)出不同的顏色。如果物質對各種波長的光完全吸收,則呈現(xiàn)黑色;如果完全反射,則呈現(xiàn)白色;如果對各種波長的光吸收程度差不多,則呈現(xiàn)灰色;如果物質選擇性地吸收某些波長的光,那么,這種物質的顏色就由它所反射或透過光的顏色來決定。4、光的吸收定律(1)透光率和吸光度當一束單色光透過均勻、無散射的溶液時,一部分被吸收,一部分透過溶液,即I0=Ia+It式中:I0為入射光的強度,Ia為溶液吸收光的強度,It為透過光強度。透光率,用符號T表示,即:T=It/I0×100%透光度率的倒數(shù)反映了物質對光的吸收程度,應用時取它的對數(shù)做為吸光度,用A表示。即:

A=lgI0/It=lg1/T=-lgT(2)光的吸收定律:朗伯-比爾定律當一束平行的單色光通過均勻、無散射現(xiàn)象的溶液時,在單色光強度、溶液的溫度等條件不變的情況下,溶液吸光度與溶液的濃度及液層厚度的乘積成正比。

A=KcL朗伯-比爾定律不僅適用于有色溶液,也適用于無色溶液及氣體和固體的非散射均勻體系;不僅適用于可見光區(qū)的單色光,也適用于紫外和紅外光區(qū)的單色光。(3)吸光系數(shù)摩爾吸光系數(shù)指波長一定時,溶液的濃度為1mol/L時,液層厚度為1cm的吸光度,單位為L/(mol·cm),用ε表示。

ε=A/cL比吸光系數(shù)指波長一定時,溶液濃度為g/L,液層厚度為1cm的吸光度,單位為L/(g·cm),用表示。α=A/cL可以通過下式換算:ε=αM

M為摩爾質量6、定量分析方法

(1)單組分的定量A、標準曲線法測定時,先取與被測物質含有相同組分的標準品,配成一系列濃度不同的標準溶液,置于相同厚度的吸收池中,分別測其吸光度。然后以溶液濃度c為橫坐標,以相應的吸光度A為縱坐標,繪制A-c曲線圖,如果符合比爾定律,該曲線為通過原點的一條直線-標準曲線,如右圖所示。在相同條件下測出樣品溶液的吸光度,從標準曲線上便可查出與此吸光度對應的樣品溶液的濃度。標準曲線(A-c曲線)B、對照法對照法又稱比較法。在相同條件下在線性范圍內配制樣品溶液和標準溶液,在選定波長處,分別測量吸光度。根據(jù)比爾定律

A樣=K樣·c樣·L樣

A標=K標·c標·L標因是同種物質,同臺儀器,相同厚度吸收池及同一波長測定,故K樣=K標,L樣=L標,所以:c樣=A樣/A標·c標為了減少誤差,比較法配制的標準溶液濃度常與樣品溶液的濃度相接近。當測定不純樣品中某純品的含量時,可先配制相同濃度的不純樣品溶液(c原樣)和標準品溶液,即c原樣=c標,c樣為c原樣溶液中純被測物的濃度。在最大吸收峰處分別測定其吸光度A值,便可直接計算出樣品的含量。(2)多組分的定量

根據(jù)吸光度的加和性,可以在同一試樣中不經(jīng)分離同時測定兩個以上的組分上圖(a)表明,A、B組分互不干擾,因此可分別在處測定A、B組分的吸光度,從而求出各自的含量。上圖(b)則說明溶液中A、B組分彼此相互干擾,這時可在波長處分別測定A、B兩組分的總的吸光度A1和A2,然后再根據(jù)吸光度的加和性聯(lián)立方程7、吸光度的測量原理

分光光度計實際上測得的是光電流或電壓,通過轉換器將測得的電流或電壓轉換為對應的吸光度A。測定時,只要將待測物質推入光路,即可直接讀出吸光度值。測定步驟:(1)調節(jié)檢測器零點,即儀器的機械零點。(2)應用不含待測組分的參比溶液調節(jié)吸光零點。(3)待測組分吸光度的測定。附:吸光光度法的儀器

一般由光源、單色器(分光系統(tǒng))、吸收池、檢測系統(tǒng)和信號顯示系統(tǒng)等五部分組成。(1)光源常用的光源為6-12伏低壓鎢絲燈,電源由溫器供給,為了保持光源強度的穩(wěn)定,以獲得準確的測定果,電壓必須穩(wěn)定。(2)單色器(分光系統(tǒng))

單色器的作用從光源發(fā)出的復合光中分出所需要的單色光。單色器通常由由入射狹縫、準直鏡、色散元件、聚焦鏡和出射縫組成。(3)吸收池(比色皿)比色皿是用透明無色的光學玻璃制作的。大多數(shù)比色皿為長方形,也有圓柱形的。一般厚度為0.5、1、2和3厘米。(4)檢測系統(tǒng)(又叫光電轉化器)

在光度計中,常用的是硒光電池。曬光電池和眼睛相似,對于各種不同波長的光線,靈敏度是不同的。對于波長為500-600nm的光線最靈敏。而對紫外線,紅外線則不能應用。光電管和光電倍增管用于較精密的分光光度計中。具有靈敏度高、光敏范圍廣及不易疲勞等特點。(5)信號顯示系統(tǒng)早期使用的是檢流計、微安表、電位計、數(shù)字電壓表、自動記錄儀等。現(xiàn)代的分光光度計廣泛采用數(shù)字電壓表、函數(shù)記錄儀、示波器及數(shù)據(jù)處理臺等。測量光電流的檢流計常用懸鏡式檢流計(也稱作直流復射式檢流計),其靈敏度可達10-9安培/格。為了保護檢統(tǒng)計,使用中要防止震動或大電流通過。檢流計標尺上有兩種刻度,等刻度的是表示百分透光率(T%),對數(shù)刻度表示吸光度(A)。根據(jù)透光率T,如果把入射光強度IO當作IO光強單位,透過光強度當作100光強單位中的一部分,這一數(shù)值為百分透光度,亦稱為百分透光率。(四)電泳技術

電泳技術是一種先進的檢測手段,與其它先進技術相配合,能創(chuàng)造出驚人的成果,可使人們用較少代價獲得最優(yōu)效益。比如它對解決當前人類所面臨的食品、能源、環(huán)境和疾病等一系列迫切問題,都有積極作用,顯示出強大的生命力。因此電泳技術正越來越多地為人們所重視,廣泛應用于各個領域。電泳(electrophoresis)是指帶電荷的溶質或粒子在電場中向著與其本身所帶電荷相反的電極移動的現(xiàn)象。利用電泳現(xiàn)象將多組分物質分離、分析的技術叫做電泳技術(electrophoresistechnique)??梢詫崿F(xiàn)電泳分離技術的儀器稱之為電泳儀(electrophoresister)。

臨床常用的電泳分析方法主要有醋酸纖維素薄膜電泳、凝膠電泳、等電聚焦電泳、雙向電泳和毛細管電泳等。目前,電泳技術已廣泛用于蛋白質、多肽、氨基酸、核苷酸、無機離子等成份的分離和鑒定,甚至還用于細胞與病毒的研究。

第一節(jié)電泳原理

一、電泳的基本原理物質分子在正常情況下一般不帶電,即所帶正負電荷量相等,故不顯示帶電性。但是在一定的物理作用或化學反應條件下,某些物質分子會成為帶電的離子(或粒子),不同的物質,由于其帶電性質、顆粒形狀和大小不同,因而在一定的電場中它們的移動方向和移動速度也不同,因此可使它們分離。

電泳現(xiàn)象和電滲流現(xiàn)象第一節(jié)電泳原理

若將帶凈電荷Q的粒子放入電場,則該粒子所受到的電荷引力為:F引=EQ(16-1)在溶液中,運動粒子與溶液之間存在阻力F阻

F阻=6πrηV(16-2)當F引=F阻時EQ=6πrηVV=EQ/6πrη(16-3)由上式可以看出,粒子的移動速度(泳動速度V)與電場強度(E)和粒子所帶電荷量(Q)成正比,而與粒子的半徑(r)及溶液的粘度(η)成反比。第一節(jié)電泳原理

二、影響電泳的外界因素(一)電場強度(二)溶液的pH值(三)溶液的離子強度(四)電滲作用(五)粒子的遷移率(六)吸附作用V=EQ/6πrη第二節(jié)常用電泳方法一、紙電泳指用濾紙作為支持載體的電泳方法。是最早使用的區(qū)帶電泳。

將濾紙條水平地架設在兩個裝有緩沖溶液的容器之間,樣品點于濾紙中央。當濾紙條被緩沖液潤濕后,再蓋上絕緣密封罩,即可由電泳電源輸入直流電壓(100V~1000V)進行電泳。

平臥式電泳槽裝置示意圖第二節(jié)常用電泳方法二、醋酸纖維素薄膜電泳電泳時經(jīng)過膜的預處理、加樣、電泳、染色、脫色與透明即可得到滿意的分離效果。此電泳的特點是分離速度快、電泳時間短、樣品用量少。因此特別適合于病理情況下微量異常蛋白的檢測。

血清蛋白的電泳圖譜第二節(jié)常用電泳方法三、凝膠電泳由區(qū)帶電泳中派生出的一種用凝膠物質作支持物進行電泳的方式。凝膠電泳中的瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳是普通電泳中應用最多的兩種形式。目前,這種辦法被廣泛用來分析蛋白質和核酸。

凝膠電泳圖第二節(jié)常用電泳方法四、等電聚焦電泳

1.等電聚焦電泳過程一種利用有pH值梯度的介質,分離等電點不同的蛋白質的電泳技術。在一個穩(wěn)定連續(xù)的線性pH梯度的溶液(兩性載體電解質)中進行分離,每一種被分離的兩性物質都移向與它的等電點相一致的pH位置,在那里不再移動(稱為聚焦)。

凈電荷與PH的關系曲線第二節(jié)常用電泳方法2.等電聚焦電泳的特點①使用兩性載體電解質,在電極之間形成穩(wěn)定、連續(xù)、線性的pH梯度;②由于“聚焦效應”,即使很小的樣品也能獲得清晰、鮮明的區(qū)帶界面;③電泳速度快;④分辨率高;⑤加入樣品的位置可任意選擇;⑥可用于測定蛋白質類物質的等電點;⑦適用于中、大分子量(如蛋白質、肽類、同工酶等)生物組分的分離分析。第二節(jié)常用電泳方法五、等速電泳采用兩種不同濃度的電解質,一種為前導電解質,充滿整個毛細管柱;另一種為尾隨電解質,置于一端的電泳槽中。前導電解質的遷移率高于任何樣品組分,尾隨電解質則低于任何樣品組分,被分離的組分按其不同的遷移率夾在中間,在強電場的作用下,各被分離組分在前導電解質與尾隨電解質之間的空隙中移動,實現(xiàn)分離。

等速電泳示意圖

第二節(jié)常用電泳方法六、雙向凝膠電泳(二維電泳)第一向采用等電聚焦根據(jù)復雜的蛋白質成分中各個蛋白質的PI的不同,將蛋白質進行分離。第二向采用了十二烷基硫酸鈉一聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS)就是按蛋白質分子量的大小使其在垂直方向進行分離。其結果不再是條帶狀,而是呈現(xiàn)為斑點狀。等電聚焦儀

雙向凝膠電泳示意圖第二節(jié)常用電泳方法第一向IEF第二向SDS18cm玻璃板MarkerIPG膠條等電聚焦電泳槽六、雙向凝膠電泳(二維電泳)第二節(jié)常用電泳方法六、雙向凝膠電泳儀器結構制膠板、電泳槽、電源、計算機、掃描儀等第二節(jié)常用電泳方法七、免疫電泳免疫電泳是瓊脂平板電泳和雙相免疫擴散兩種方法的結合。將抗原樣品在瓊脂平板上先進行電泳,使其中的各種成分因電泳遷移率的不同而彼此分開;然后加入抗體做雙相免疫擴散,把已分離的各抗原成分與抗體在瓊脂中擴散而相遇,在二者比例適當?shù)牡胤?,形成肉眼可見的沉淀弧?/p>

第三節(jié)常用電泳儀的基本結構及技術指標一、常用電泳設備的基本結構(一)電源(二)電泳槽(三)附加裝置

垂直電泳儀器裝置示意圖實驗室常用電泳槽和電泳

第三節(jié)常用電泳儀的基本結構及技術指標垂直板電泳槽和電源水平電泳槽、電泳儀凝膠鋪在水平的玻璃或塑料板上,將凝膠直接浸入緩沖液中。常用于瓊脂糖電泳分離核酸。電泳槽中間是夾在一起的兩塊玻璃板,在玻璃平板中間制備電泳凝膠。垂直板式電泳常用于聚丙烯酰胺凝膠電泳中蛋白質的分離。

第三節(jié)常用電泳儀的基本結構及技術指標二、電泳儀的主要技術指標

1.輸出電壓6.功率穩(wěn)定度

2.輸出電流7.連續(xù)工作時間

3.輸出功率8.顯示方式

4.電壓穩(wěn)定度9.定時方式

5.電流穩(wěn)定度

第四節(jié)常用電泳儀簡介一、穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀是穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀是目前國內中、低壓電泳實驗中應用最廣泛的電泳儀之一。其輸出電壓的調節(jié)范圍為0V~600V、輸出電流為0mA~100mA。這種電泳儀工作穩(wěn)定性好、調節(jié)范圍寬,并設有完善的短路保護電路和過流保護電路。

穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀第四節(jié)常用電泳儀簡介二、全自動醋纖膜電泳儀全自動醋纖膜電泳儀為全自動電泳儀,有可見光單系統(tǒng),使用醋酸纖維薄膜電泳片,優(yōu)點為自動化程度高。只需將樣品、試劑、電泳片放好,人員可離機完成實驗并得到結果。第四節(jié)常用電泳儀簡介三、全自動熒光/可見光雙系統(tǒng)電泳儀全自動熒光/可見光雙系統(tǒng)電泳儀只需將樣品、試劑和瓊脂糖凝膠電泳膠片放好后,其最大優(yōu)點是熒光系統(tǒng)全自動,只需要20min即可完成電泳分析,速度非???。操作人員可離機完成實驗并得到結果。

第四節(jié)常用電泳儀簡介四、全自動瓊脂糖電泳儀全自動瓊脂糖電泳儀,有可見光單系統(tǒng),使用瓊脂糖凝膠電泳膠片。靈敏度高,可適用于低濃度蛋白檢驗,如尿蛋白、腦脊液蛋白、同工酶的分離。但其自動化程度較差。由于這類電泳儀所能做的項目較多,且靈敏度較高,仍為許多實驗室所接受。第四節(jié)常用電泳儀簡介五、全自動電泳分析系統(tǒng)全自動電泳分析系統(tǒng),將上述儀器的優(yōu)點集于一身,儀器自動點樣、電泳、呈色(或染色、脫色)、烘干,自動化程度非常高。可用各種電泳片,包括瓊脂片、醋酸片、聚丙烯酰胺等,采用可見光及熒光呈色雙系統(tǒng),是一種較理想的電泳儀。

全自動電泳儀第五節(jié)毛細管電泳一、毛細管電泳的基本工作原理溶液中的帶電粒子以高壓電場為驅動力,沿毛細管通道,以不同速度向與其所帶電荷相反的電極方向遷移,并依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現(xiàn)分離。

高效毛細管電泳儀第五節(jié)毛細管電泳

毛細管電泳儀裝置示意圖第五節(jié)毛細管電泳三、毛細管電泳的特點

1.高靈敏度2.高速度3.高分辨率

4.樣品少5.自動化程度高

6.應用范圍廣

TriSepTM-2010GVpCECSystem第五節(jié)毛細管電泳三、毛細管電泳的分離模式(一)毛細管區(qū)帶電泳它是通過在充滿電解質溶液的毛細管中,不同質荷比大小的組分,在電場的作用下,依遷移速度的不同而進行分離。根據(jù)組分的遷移時間進行定性,根據(jù)電泳峰的峰面積或峰高進行定量分析。

毛細血管區(qū)帶電泳原理圖第五節(jié)毛細管電泳(二)毛細管凝膠電泳毛細管凝膠電泳(CGE)常用聚丙烯酰胺在毛細管內交聯(lián)制成凝膠柱,依據(jù)分離支撐物的分離作用不同,CGE又分為非變性CGE和變性CGE,前者以分子篩、電荷/質量比的作用進行分離;后者則以質量、分子篩的作用進行分離。適用于分離、測定肽類、蛋白質、DNA類物質的分離。

第五節(jié)毛細管電泳(三)毛細管膠束電動色譜(MECC)MECC系統(tǒng)中存在兩個相:流動的水相和起到固定相作用的膠束相。在含有膠束的流動相中,溶質在“水相”和“膠束相”(準固定相)之間進行分配,即使是中性溶質,因其本身疏水性不同,在二者之間的分配也會有差異,疏水性強的溶質在“膠束相”中停留時間長,遷移速度就慢。反之,親水性強的溶質遷移速度就快,最終中性溶質將依其疏水性不同而得以分離。第五節(jié)毛細管電泳

毛細管膠束電動色譜原理圖第五節(jié)毛細管電泳(四)毛細管等電聚焦電泳不同等電點的分子分別聚集在不同的位置上,不作遷移而彼此分離,這就是等電聚焦分離過程。毛細管的等電聚焦是在毛細管內實現(xiàn)的等電聚焦過程,具有極高的分辨率,通??梢苑蛛x等電點差異小于0.01pH單位的兩種蛋白質,例如肽類、蛋白質的分離。第五節(jié)毛細管電泳(五)毛細管等速電泳毛細管內首先導入具有比被分離各組分高電泳淌度的前導電解質,然后進樣,隨后再導入比各分離組份低電泳淌度的尾隨電解質,在強電場的作用下,各被分離組分在前導電解質與尾隨電解質之間的空隙中發(fā)生分離。

第五節(jié)毛細管電泳

(六)毛細管電色譜它包含了電泳和色譜兩種機制,是在毛細管中填充或在毛細管壁上鍵合(或涂壁)固定相,從而構成毛細管色譜柱,依靠電滲流推動流動相,攜帶樣品遷移,根據(jù)樣品分子的質荷比、分子尺寸及分配系數(shù)的差別而分離。

CEC-加壓毛細管電色譜儀第五節(jié)毛細管電泳(七)毛細管電泳芯片毛細管電泳芯片是在常規(guī)毛細管電泳的原理和技術基礎上,利用微加工技術在平方厘米級大小的芯片上加工出各種微細結構,如通道和其它功能單元,通過不同的通道、反應器、檢測單元等的設計和布局,實現(xiàn)樣品的進樣、反應、分離和檢測,是一種多功能化的快速、高效和低耗的微型實驗裝置。第五節(jié)毛細管電泳四、毛細管電泳儀的基本結構毛細管電泳儀的結構并不復雜,主要有高壓毛細管柱、檢測器,以及兩個供毛細管兩端插入而又可和電源相連的緩沖液槽。(一)毛細管柱(二)檢測器(三)毛細管電泳法的進樣技術

毛細管電泳儀

第六節(jié)電泳儀的維護保養(yǎng)及故障排除

一、電泳儀的維護保養(yǎng)(一)每日維護(二)每周維護(三)每月維護(四)按需進行的維護TriSep毛細管電泳儀

第六節(jié)電泳儀的維護保養(yǎng)及故障排除二、電泳儀的故障排除電泳儀是精密儀器,在操作過程中要嚴格遵守操作規(guī)程,但不可避免會出現(xiàn)各種各樣的故障,當儀器提示有故障時,應立即處理。

BECKMANCOULTER毛細管電泳儀

第六節(jié)電泳儀的維護保養(yǎng)及故障排除故障信息引起故障可能原因解決方法轉盤識別錯誤細微灰塵吸附在燈上儀器關機,用潔凈棉簽輕輕拭去燈上面的灰塵。儀器開機后再進行測定。

樣品識別錯誤血清分離不好或者有灰塵吸附關機狀態(tài),拆開儀器內透明有機玻璃,用無水乙醇擦拭加樣針外壁,然后安裝好,再用儀器內程序進行加樣針清洗,洗完1~2次后,進行加樣針加樣感應定位。儀器報警出現(xiàn)缺少稀釋杯或稀釋杯感應錯誤儀器稀釋杯位置錯誤觀察稀釋杯位置,如果沒有處

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