趨化因子研究進(jìn)展(格式)

趨化因子

研究進(jìn)展

北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部

韓文玲

1文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁!簡(jiǎn)介目前，近50種趨化因子得以發(fā)現(xiàn)，成為最大的細(xì)胞因子亞家族;趨化因子及其受體具有重要的生理意義和病理作用,在炎癥、腫瘤、AIDS等疾病中發(fā)揮重要作用，趨化因子相關(guān)產(chǎn)品已經(jīng)進(jìn)入臨床研究，成為新的生物治療熱點(diǎn);

趨化因子的理論和應(yīng)用研究是目前生命研究的熱點(diǎn)之一。2文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁!趨化因子研究的迅速發(fā)展3文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁!趨化因子研究的標(biāo)志性成果4文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁!（一）概念：趨化因子（chemokines,chemoattractantcytokines，CK）是能使細(xì)胞發(fā)生趨化運(yùn)動(dòng)的小分子細(xì)胞因子。趨化運(yùn)動(dòng)是指細(xì)胞向高濃度刺激物方向的定向運(yùn)動(dòng)。C5a和細(xì)菌代謝產(chǎn)物細(xì)胞因子（IL-8)5文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁!1999年，國際命名委員會(huì)根據(jù)CK的結(jié)構(gòu)特征命名。絕大多數(shù)CK有4個(gè)保守的半胱氨酸（Cys），根據(jù)前兩個(gè)Cys的相對(duì)位置不同，可以分為CXC（）、CC（）

、C（）

和CX3C（）

趨化因子。分別用CXCLn、CCLn、XCLn和CX3CLn代表CXC、CC、C和CX3C家族CK，L為L(zhǎng)igand，迄今發(fā)現(xiàn)的CK有CXCL1-16，CCL1-28，XCL1-2和CX3CL1。CCL17/TARC，CCL22/STCP-1/MDCCK基因的命名:SCYn:SmallInducibleCytokineGeneSCYAn:CC;SCYBn:CXC;SCYCn:C;SCYDn:CX3C。CK受體的命名規(guī)則與此相似，用R即Receptor代替L。目前發(fā)現(xiàn)的CK受體有CCR1-11，CXCR1-6，XCR1和CX3CR1。

6文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁!（1）CXC（α）趨化因子根據(jù)該家族CK個(gè)Cys前是否有ELR（glutamicacid-leucine-arginine,谷氨酸-亮氨酸-精氨酸）結(jié)構(gòu)，分為：ELRCXC趨化因子:

…ELRCXC……C……C…CXCL8/IL-8等，趨化Neu，不能趨化Mo；促進(jìn)血管的生成。非ELRCXC趨化因子:

…CXC……C……C…CXCL12/SDF-1等，

趨化Lymphocyte或HPC；抑制血管的生成。同源性：CXC家族CK之間：25%-90%。染色體定位：

CXCL1-11：4q21；CXCL12：10q11；CXCL13：5q317文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁!（2）CC（β）趨化因子分類：4CysCC趨化因子:包括多數(shù)CCCKs…CC……C……C……6CysCC趨化因子:CCL15/Lkn-1，CCL21/SLC/6Ckine…CC……C……C……C……C……趨化譜：T、B、Mo、Bas、Eos、Neu等。

同源性：CC成員之間：25%-70%；定位：CCL1-16,18,23:17q11-12;

CCL17,22:16q13;CCL19,21,25,27:9p138文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁!CC趨化因子在17號(hào)染色體上成基因簇形式存在9文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁!(4)CX3C（）趨化因子結(jié)構(gòu)：…CXXXC……C……C……..Fractalkine/neurotactin:分形素/神經(jīng)趨化素，唯一一個(gè)CX3C成員，為膜結(jié)合型

CK。趨化譜：膜型:Mo,T;重組的趨化因子功能區(qū):Neu。定位：16q13，與CCL17,22緊密連鎖。10文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁!2、根據(jù)來源和功能分類：

（1）組成性/淋巴組織/自穩(wěn)性趨化因子：定義：胸腺、淋巴結(jié)、脾臟中組成性高表達(dá)的CK。

靶細(xì)胞：初始T細(xì)胞、胸腺細(xì)胞、記憶細(xì)胞。功能：在淋巴細(xì)胞的發(fā)育、成熟、歸巢和再循環(huán)過程中發(fā)揮重要作用。皮膚、小腸、粘膜組織中也表達(dá)此類CKs，與組織特異性淋巴細(xì)胞歸巢有關(guān)。11文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁!

（2）誘導(dǎo)性表達(dá)趨化因子/炎性趨化因子：

定義：在LPS、IL-1、TNF-等刺激下產(chǎn)生的CK。

靶細(xì)胞：效應(yīng)細(xì)胞。

功能：防御功能；反應(yīng)過度時(shí)，有破壞作用。

12文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁!炎性趨化因子和自穩(wěn)性趨化因子成員、受體及靶細(xì)胞13文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁!1、CKs分子量小，在8-12KD之間；2、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)上具有同源性，CXC與CC成員之間：20%-30%；（四）趨化因子的共同結(jié)構(gòu)特點(diǎn)14文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁!4、CKs有2個(gè)螺旋，3個(gè)折疊；15文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁!5、不同CKs具有相似的空間結(jié)構(gòu)。16文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁!二、趨化因子受體17文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁!1、7次跨膜，C端位于胞內(nèi)，有Ser/Thr位點(diǎn)，參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)；(一)趨化因子受體的特點(diǎn)18文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁!3、胞內(nèi)區(qū)與G蛋白偶聯(lián)，G蛋白由組成；4、亞單位具有GTP結(jié)合位點(diǎn)和GTP酶活性；5、CKR未與CK結(jié)合時(shí)，呈聚合狀態(tài)，與GDP結(jié)合；與CK結(jié)合后，與GTP結(jié)合，游離，活化下游效應(yīng)物.19文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁!（二）、趨化因子受體的分類1、根據(jù)結(jié)合配體的不同，分為CXCR，CCR，XCR,CX3CR。

2、根據(jù)特異性不同，分為特異性受體、共享性受體、雜合性受體（DARC，Duffy血型抗原，紅細(xì)胞趨化因子受體）、孤兒受體、病毒受體等。20文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁!（三）、趨化因子受體的表達(dá)1、CKR有其相對(duì)特異的表達(dá)譜：CXCR4：Neu、Mo;CCR3:Eos、Bas；DARC：RBC21文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁!2、CKR的表達(dá)具有時(shí)、空特異性：（1）在Th細(xì)胞的不同階段，表達(dá)不同的CKR：

Na?veTh:CCR7,CXCR4;Th0:CCR7,CCR5,CXCR3Th1:CCR5,CXCR3;Th2:CCR3,4,8,CXCR422文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁!TLR調(diào)控DC細(xì)胞CKR的表達(dá)23文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第23頁!CKR的信號(hào)傳導(dǎo)途徑24文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第24頁!（一）趨化作用；（二）上調(diào)整合素的表達(dá),活化白細(xì)胞；（三）促進(jìn)細(xì)胞脫顆粒和生物活性物質(zhì)釋放:

CCL2/MCP-1：Bas釋放組織胺；CXCL8/IL-8：Neu產(chǎn)生活性物質(zhì)，呼吸爆發(fā)；（四）調(diào)節(jié)血管生成：ELRCXC、CCL2促進(jìn)血管生成；CXCL10、CCL21/SLC抑制血管生成。25文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第25頁!趨化因子在白細(xì)胞遷移中的作用26文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第26頁!（五）生長(zhǎng)因子活性，促進(jìn)細(xì)胞增殖27文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第27頁!（一）CKs促進(jìn)免疫細(xì)胞發(fā)育、成熟：1、CXCL12/SDF-1和CXCR4促進(jìn)B細(xì)胞分化發(fā)育成熟；2、CCL25/TECK和CCR9、CXCL12/SDF-1和CXCR4、CCL22/MDC和CCR4等促進(jìn)T細(xì)胞發(fā)育成熟；3、CCL3，4/MIP-1、和CCR1，CCR2，CCR5等促進(jìn)非成熟DC向炎癥部位聚集，攝取抗原，發(fā)生功能成熟。28文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第28頁!CCL25/TECK和CCR9、CXCL12/SDF-1和CXCR4、CCL22/MDC和CCR4等促進(jìn)T細(xì)胞發(fā)育成熟29文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第29頁!胸腺中表達(dá)的CK和CKR30文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第30頁!(二）CCL21/SLC，CCL19/ELC和CCR7、CXCL13/BCA-1/BLC和CXCR5協(xié)助T、B、DC細(xì)胞在周圍免疫器官中正確定位并相互作用T：CCR7;DC：CCR7;B：CCR7、CXCR5;TFH：CXCR5T區(qū)HEV：SLC、ELC;B濾泡區(qū)HEV：BCA;T與DC在T區(qū)作用，分化效應(yīng)細(xì)胞;TFH與B在B區(qū)作用，協(xié)助Ab產(chǎn)生和類別轉(zhuǎn)換31文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第31頁!病原體決定免疫應(yīng)答32文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第32頁!趨化因子與過敏反應(yīng)中嗜酸細(xì)胞聚集Th2細(xì)胞分泌的IL-4、IL-13與IL-1、TNF協(xié)同作用，促進(jìn)Eotaxins-1,2,3、MCP-4產(chǎn)生，趨化Eos、Bas。33文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第33頁!（五）CKs協(xié)助記憶、效應(yīng)T、B細(xì)胞向特定組織歸巢CLA+T向皮膚歸巢：CCL27

/

CTACK、

CCR10，CCL17/TARC、CCR447hiT向小腸歸巢：CCL25

/

TECK、CCR9IgAASC向小腸粘膜歸巢：CCL25

/

TECK、CCR9IgGASC位于慢性炎癥部位：CXCL9/Mig、

CXCR3，CXCL12/SDF-1、CXCR4T向粘膜歸巢：CCL28

/

MEC。34文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第34頁!五、趨化因子調(diào)節(jié)造血（一）趨化造血前體細(xì)胞，調(diào)節(jié)骨髓造血功能：

MIP-1/CCL3、MCP-4/CCL13、TECK/CCL25等25種CKs抑制髓系造血；人MIP-1/CCL3與GM-CSF和M-CSF協(xié)同刺激骨髓造血；（二）促進(jìn)B前體細(xì)胞的發(fā)育：SDF-1/CXCL12；（三）促進(jìn)Eos前體細(xì)胞發(fā)育成熟：Eotaxin/CCL11。

35文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第35頁!

（一）趨化實(shí)驗(yàn)：1、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：皮下、腹腔、靜脈注射，觀察細(xì)胞浸潤(rùn)情況；繁瑣。2、體外實(shí)驗(yàn)：最常用的方法是Boyden小室法，也稱微孔濾膜法。48孔趨化小室，上層放靶細(xì)胞，下層放待檢測(cè)因子，兩層之間有聚炭膜隔開；簡(jiǎn)單易行。

細(xì)胞類型膜孔徑趨化時(shí)間Neu:3um30min；Lymphocytes:5um120min；Mo:8um90min

36文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第36頁!Boyden小室示意圖37文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第37頁!（二）鈣流實(shí)驗(yàn)

多數(shù)CK與受體結(jié)合后,胞內(nèi)Ca2+；Indo-1AM或Fura-2AM等是Ca2+螯合劑EGTA的衍生物，可特異高親和Ca2+；將靶細(xì)胞與熒光探針孵育；檢測(cè)熒光強(qiáng)度變化，反映CK活性。

38文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第38頁!七、新趨化因子cDNA的克隆技術(shù)(一)早期CKs：蛋白質(zhì)到核酸；費(fèi)時(shí)耗力,CXCL8/IL-8。

(二)新發(fā)現(xiàn)CKs：核酸到蛋白質(zhì)；快速。39文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第39頁!2、染色體中免疫分子聚集區(qū)的大規(guī)模測(cè)序

17號(hào)染色體存在CCCluster，對(duì)YAC克隆測(cè)序、分析，克隆了CCL18/MIP-4,與MIP-1α有49.5％的同源性，趨化T細(xì)胞。

40文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第40頁!4、Blast檢索及EST分析和拼接

例1：從公共的EST數(shù)據(jù)庫發(fā)現(xiàn)CCL26/MIP-4,與MIP-1β有44％的同源性，趨化T、Mo。例2：本室大鼠CKLF1，2、小鼠CKLF2，4及人CKLF-RP1-8(CKLF-RelatedProtein1)的克隆化。41文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第41頁!（一）CKs概念、命名、分類、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：

1、概念：是能使細(xì)胞發(fā)生趨化運(yùn)動(dòng)的小分子細(xì)胞因子。

趨化運(yùn)動(dòng)是指細(xì)胞向高濃度刺激物方向的定向運(yùn)動(dòng)。2、命名：CKs：

CXCLn、CCLn、XCLn、CX3CLnCK基因：SCYAn:CC;SCYBn:CXC;SCYCn:C;SCYDn:CX3C。CK受體：CXCR1-6，

CCR1-11，XCR1和CX3CR1。3、分類：（1）

CXC（）：ELR和非ELR；CC（）：4C和6C；C（）；CX3C（）。（2）組成性/淋巴組織/自穩(wěn)性趨化因子；誘導(dǎo)性表達(dá)/炎性趨化因子。42文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第42頁!（二）CKR結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、

分類、表達(dá)及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)1、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：

（1）7次跨膜，C端位于胞內(nèi)，有Ser/Thr位點(diǎn)，參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)；（2）不同CKR之間具有同源性；（3）胞內(nèi)區(qū)與G蛋白偶聯(lián)，G蛋白由組成；（4）亞單位具有GTP結(jié)合位點(diǎn)和GTP酶活性；（5）CKR未與配體結(jié)合時(shí)，呈聚合狀態(tài)，與GDP結(jié)合；與CK結(jié)合后，與GTP結(jié)合，游離，活化下游效應(yīng)物.（6）與CKR偶聯(lián)的G蛋白有多種，與趨化運(yùn)動(dòng)有關(guān)的G蛋白亞單位多為PTX敏感的GI。43文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第43頁!（三）CKs的生物學(xué)活性1、趨化作用；2、上調(diào)整合素的表達(dá)、活化白細(xì)胞；3、促進(jìn)細(xì)胞脫顆粒和生物活性物質(zhì)釋放；4、調(diào)節(jié)血管生成；5、生長(zhǎng)因子活性，促進(jìn)細(xì)胞增殖。44文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第44頁!

（五）CKs與造血

1、趨化造血前體細(xì)胞，調(diào)節(jié)骨髓造血功能；

MIP-1/CCL3等多數(shù)CKs抑制髓系造血；MIP-1/CCL3與GM-CSF等協(xié)同刺激骨髓造血；2、促進(jìn)B前體細(xì)胞發(fā)育：SDF-1/CXCL12；3、促進(jìn)Eos前體細(xì)胞發(fā)育成熟：Eotaxin/CCL11。

45文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第45頁!（七）新CKs的克隆方法1、傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)到核酸途徑:2、現(xiàn)代的核酸到蛋白質(zhì)途徑：

（1）趨化因子產(chǎn)生細(xì)胞cDNA的大規(guī)模測(cè)序和生物信息學(xué)分析；

（2）染色體中免疫分子聚集區(qū)的大規(guī)模測(cè)序；（3）差異顯示技術(shù)；（4）生物信息學(xué)技術(shù)。46文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第46頁!一、趨化因子47文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第47頁!（二）命名早期：根據(jù)CK來源、靶細(xì)胞、結(jié)構(gòu)特征而命名。TARC：ThymusandActivation–RegulatedChemokine胸腺和活化調(diào)節(jié)的趨化因子STCP-1/MDC:StimulatedTCellChemoattractantProtein-1（活化T細(xì)胞趨化蛋白-1）Macrophage-DerivedChemokine（巨噬細(xì)胞來源的趨化因子）；

48文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第48頁!（三）趨化因子的分類

1、根據(jù)蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行分類：CXC（）趨化因子；CC（）趨化因子；C（）趨化因子；CX3C（）趨化因子。C為半胱氨酸,X為任意氨基酸49文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第49頁!CXC趨化因子的名稱、染色體定位及受體50文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第50頁!CC趨化因子的名稱、染色體定位及受體51文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第51頁!（3）C（）趨化因子結(jié)構(gòu)：……C…………C……(2，4位Cys)

Ltn1，2(lymphotactin，淋巴細(xì)胞趨化素)兩個(gè)成員，

趨化譜：T，BMC定位：1q2352文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第52頁!53文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第53頁!自穩(wěn)性趨化因子的組織表達(dá)54文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第54頁!趨化因子的表達(dá)模式55文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第55頁!（3）其它具有趨化活性的細(xì)胞因子IGF-1,FGF,HGF等細(xì)胞因子具有趨化活性，但它們的主要作用不是趨化作用，不列為CKs。56文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第56頁!3、多數(shù)CKs含有4個(gè)保守的Cys，1，3位Cys、2，4位Cys形成功能必須的兩對(duì)二硫鍵；57文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第57頁!CXCL12/SDF-1的空間構(gòu)型圖（NMR）58文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第58頁!趨化因子的結(jié)構(gòu)、定位及組成59文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第59頁!趨化因子受體屬于7次跨膜的G蛋白偶聯(lián)受體超家族（GPCRs，G-proteincoupledreceptors）60文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第60頁!2、不同CKR之間具有同源性；61文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第61頁!6、與CKR偶聯(lián)的G蛋白有多種，與趨化運(yùn)動(dòng)有關(guān)的G蛋白亞單位多為PTX敏感的GI。62文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第62頁!63文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第63頁!趨化因子受體、配體及靶細(xì)胞64文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第64頁!（2）CKR在DC遷移和功能成熟中具有不同的表達(dá)模式:

非成熟DC：CCR1，CCR2，CCR5，CXCR4，易于向炎癥部位聚集，攝取抗原負(fù)載抗原的成熟DC：CCR4，CCR7，CXCR4，便于向淋巴組織遷移65文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第65頁!(四)CKR的信號(hào)傳導(dǎo)途徑

IL-8+IL-8RGDPGTP.TPKPLCβ2,3PI-3KIP3+DAGCa2+PKCPKBMAPK66文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第66頁!三、趨化因子的基本功能67文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第67頁!趨化因子引起的細(xì)胞形態(tài)改變68文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第68頁!CXCL8/IL-8的作用69文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第69頁!四、趨化因子在免疫細(xì)胞

發(fā)育、定位及免疫應(yīng)答中的作用70文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第70頁!CXCL12/SDF-1和CXCR4促進(jìn)B細(xì)胞分化發(fā)育成熟HPC表達(dá)CXCR4，骨髓基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生CXCL12/SDF-1；CXCL12/SDF-1趨化HPC與基質(zhì)細(xì)胞相互作用，促進(jìn)HPC向B細(xì)胞發(fā)育，表達(dá)sIg；成熟B細(xì)胞對(duì)CXCL12/SDF-1反應(yīng)性，離開骨髓，進(jìn)入血循環(huán)71文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第71頁!CCL22/MDC和CCR4促進(jìn)DP與TEC作用，發(fā)生陰性選擇或成熟為單陽性細(xì)胞進(jìn)入外周72文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第72頁!CCL3，4/MIP-1、和CCR1，CCR2，CCR5等促進(jìn)DC成熟73文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第73頁!（三）促進(jìn)效應(yīng)T細(xì)胞回到炎癥和感染部位1、TFH：CXCR5，進(jìn)入濾泡區(qū)，輔助B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的類別轉(zhuǎn)換；2、Th1:CCR5,CXCR3，進(jìn)入病毒感染等炎癥部位；3、Th2:CCR3,4,8,CXCR4，進(jìn)入過敏反應(yīng)部位。74文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第74頁!（四）CKs促進(jìn)天然免疫細(xì)胞和

活化的適應(yīng)性免疫細(xì)胞相互作用1、CKs使Th2活化與組織Eso聚集相聯(lián)系；2、CTL活化，產(chǎn)生CKs，Mo、NK、Granulocyte聚集，擴(kuò)大殺傷效應(yīng)。75文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第75頁!CTL產(chǎn)生趨化因子白細(xì)胞聚集病毒感染部位，放大免疫反應(yīng)76文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第76頁!趨化因子及其受體在免疫應(yīng)答中的作用77文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第77頁!六、趨化因子的常用研究方法78文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第78頁!反應(yīng)結(jié)束后，洗掉非特異結(jié)合細(xì)胞，固定、染色，記數(shù)。記數(shù)方法：

高倍鏡下每孔隨機(jī)選5個(gè)視野，取平均值。趨化活性表示方法：

通常以趨化指數(shù)（chemotaticindex,CI）表示。CI指實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞數(shù)與對(duì)照組細(xì)胞數(shù)（三個(gè)復(fù)孔的平均值）的比值，CI大于2有意義。79文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第79頁!A、微孔濾膜法示意圖B、內(nèi)皮細(xì)胞趨化結(jié)果80文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第80頁!（三）功能實(shí)驗(yàn)CXC

CKs:彈性蛋白酶、葡萄糖醛酸酶釋放檢測(cè)、呼吸爆發(fā)實(shí)驗(yàn)；MIP-1，β：用骨髓造血干細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)；CCCKs:組織胺釋放。81文檔之家-/趨化因子研究進(jìn)展(格式)共89頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第81頁!1、CKs產(chǎn)生細(xì)胞cDNA的大規(guī)模測(cè)序和生物信息學(xué)分析

CKs產(chǎn)生細(xì)胞cDNA文庫——大規(guī)模隨機(jī)測(cè)序——同源性比較——與已知CKs