初始污染菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

初始污染菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程初始污染菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程初始污染菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程資料僅供參考文件編號(hào)：2022年4月初始污染菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程版本號(hào)：A修改號(hào)：1頁(yè)次：1.0審核：批準(zhǔn):發(fā)布日期：1目的：建立產(chǎn)品初始污染菌數(shù)檢驗(yàn)及分析標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。

2責(zé)任：質(zhì)量檢驗(yàn)人員負(fù)責(zé)執(zhí)行此規(guī)程。3范圍：適用于未滅菌產(chǎn)品初始污染菌數(shù)驗(yàn)證試驗(yàn)的檢測(cè)分析。

4內(nèi)容：初始污染菌檢測(cè)器材與試劑

器材

（1）生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱

（2）立式滅菌柜

（3）超凈工作臺(tái)

（4）無(wú)菌過(guò)濾裝置

（5）無(wú)菌鑷子、無(wú)菌剪子

（6）電子天平

（7）移液器

（8）接種環(huán)

稀釋液、沖洗液無(wú)菌氯化鈉蛋白胨緩沖液培養(yǎng)基

營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：按說(shuō)明書(shū)方法保存配制。

檢驗(yàn)方法：平皿法供試液的制備供試品是紗布可用無(wú)菌手續(xù)稱(chēng)取10g,放入無(wú)菌氯化鈉蛋白胨緩沖液中充分振蕩后取樣。作為1：10的供試液。供試液10倍遞減稀釋。供試品是液體取樣10ml加至無(wú)菌氯化鈉蛋白胨緩沖液中充分振蕩后取樣。作為1：10的供試液。供試液10倍遞減稀釋。

供試液操作方法每個(gè)稀釋級(jí)各吸取1ml至直徑90mm的無(wú)菌平皿中，注入15～20ml溫度不超過(guò)45℃的溶化的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，倒置培養(yǎng)。每個(gè)稀釋級(jí)注2個(gè)平皿。陰性對(duì)照取無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液1ml，置無(wú)菌平皿中，注入培養(yǎng)基，凝固，倒置培養(yǎng)。每種計(jì)數(shù)用的培養(yǎng)基各制備2個(gè)平板，均不得有菌生長(zhǎng)。培養(yǎng)條件將已經(jīng)凝固的平板倒置于37℃培養(yǎng)箱中，一般培養(yǎng)48±2h。計(jì)數(shù).1菌落計(jì)數(shù)基本規(guī)則①選取平均菌落數(shù)在30～300之間的稀釋級(jí)作為報(bào)告菌落數(shù)測(cè)定范圍。如只有1個(gè)稀釋級(jí)平均菌落數(shù)在30～300之間，則將稀釋級(jí)的菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。②如有兩個(gè)相鄰稀釋級(jí)的平均菌落數(shù)在30～300之間，則先計(jì)算兩稀釋級(jí)菌落數(shù)的比值。高稀釋級(jí)的平均平板菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)比值=————————————————————低稀釋級(jí)的平均平板菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)當(dāng)比值≤2時(shí)，則以2個(gè)稀釋級(jí)的平均菌落數(shù)均值報(bào)告。當(dāng)比值>2時(shí)，則以低稀釋級(jí)的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。③如各稀釋級(jí)平均菌落數(shù)均在300以上，則按最高平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告；如各稀釋級(jí)平均菌落數(shù)均在30以下，則按最低平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。④如各稀釋級(jí)平均菌落數(shù)均不在30～300之間，則以最接近30或300的稀釋級(jí)平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。⑤如各稀釋級(jí)平均菌落數(shù)均無(wú)菌落生長(zhǎng)或最低稀釋級(jí)平均菌落數(shù)小于1時(shí)，應(yīng)報(bào)告菌數(shù)為<10個(gè)/g或ml。⑥如有3個(gè)稀釋級(jí)平均菌落數(shù)均在30～300之間，則以后2級(jí)計(jì)算級(jí)間比值報(bào)告。⑦菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告，菌落數(shù)在10以?xún)?nèi)時(shí)，按實(shí)有數(shù)值報(bào)告。大于100時(shí)，采用二位有效數(shù)字，在兩位有效數(shù)值后面，應(yīng)以四舍五入法計(jì)算。在報(bào)告菌落數(shù)為“不可計(jì)”時(shí)，應(yīng)表明樣品的稀釋度。清場(chǎng)

檢驗(yàn)完畢，將使用的試劑歸位，清理臺(tái)面，并將用過(guò)的工具進(jìn)行清洗。檢測(cè)人員應(yīng)及時(shí)填寫(xiě)《初始污染菌數(shù)檢測(cè)記錄》，并對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行判定。注意事項(xiàng)

產(chǎn)品取樣應(yīng)在完成整個(gè)灌裝或包裝過(guò)程以后，而又在滅菌前取樣；本操作應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級(jí)下的局部潔凈度100級(jí)的無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。操作過(guò)程應(yīng)盡量避免任何可能使結(jié)果發(fā)生偏差的污染。

無(wú)菌操作臺(tái)必需定期進(jìn)行潔凈度檢測(cè)，試驗(yàn)前提前開(kāi)紫外燈15min后方可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。

過(guò)濾器、濾膜、鑷子以及無(wú)菌設(shè)備使用前應(yīng)進(jìn)行滅菌，使用時(shí)應(yīng)保證濾膜在過(guò)濾前后的完整性。5依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)文件

2010版《中華人民共和國(guó)藥典（