管灸治療面神經(jīng)炎的機(jī)制研究實(shí)用課件_第1頁(yè)
管灸治療面神經(jīng)炎的機(jī)制研究實(shí)用課件_第2頁(yè)
管灸治療面神經(jīng)炎的機(jī)制研究實(shí)用課件_第3頁(yè)
管灸治療面神經(jīng)炎的機(jī)制研究實(shí)用課件_第4頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

怎樣進(jìn)行機(jī)制研究?管灸作為灸法治療的一種,主要用于治療面神經(jīng)炎、神經(jīng)性耳聾等疾病。采用人類疾病動(dòng)物模型進(jìn)行治療機(jī)制研究是目前國(guó)內(nèi)外最常用的方法。因此我們通過(guò)建立家兔面神經(jīng)損傷模型,采用管灸和電針進(jìn)行治療,對(duì)其機(jī)理進(jìn)行研究,同時(shí)和電針進(jìn)行對(duì)比。怎樣進(jìn)行機(jī)制研究?管灸作為灸法治療的1所運(yùn)用的技術(shù)病理形態(tài)學(xué)技術(shù)1形態(tài)計(jì)量學(xué)

2原位雜交3RT-PCR4病理學(xué)技術(shù)分子生物學(xué)技術(shù)所運(yùn)用的技術(shù)病理形態(tài)學(xué)技術(shù)1形態(tài)計(jì)量學(xué)2原位雜交3RT-P2檢測(cè)內(nèi)容神經(jīng)組織病理形態(tài)測(cè)量髓鞘厚度、神經(jīng)束神經(jīng)纖維總數(shù)、神經(jīng)纖維直徑、軸突面積和神經(jīng)束面積,頰肌組織。神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)水平面神經(jīng)核、面神經(jīng)、表情肌中神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3(NT-3)表達(dá)水平。檢測(cè)內(nèi)容神經(jīng)組織病理形態(tài)測(cè)量髓鞘厚度、神經(jīng)束神經(jīng)纖維總數(shù)、3擬解決的問(wèn)題對(duì)損傷面神經(jīng)是否具有促進(jìn)修復(fù)作用?修復(fù)的機(jī)制是什么?對(duì)臨床運(yùn)用管灸有什么指導(dǎo)作用?123擬解決的問(wèn)題對(duì)損傷面神經(jīng)是否具有促進(jìn)修復(fù)作用?修復(fù)的機(jī)制是什4操作流程分組模型制作治療檢測(cè)操作流程分組模型制作治療檢測(cè)5動(dòng)物分組分組模型組制作面神經(jīng)損傷模型,但不做任何治療電針組制作面神經(jīng)損傷模型,給予電針治療假手術(shù)組僅手術(shù)暴露面神經(jīng),但不損傷面神經(jīng)管灸組制作面神經(jīng)損傷模型,給予管灸治療動(dòng)物分組分組模型組電針組假手術(shù)組管灸組6模型制作方法

家兔麻醉后取耳屏前至下頜角下緣“S”形切口,鈍性分離暴露面神經(jīng)頰支,用同一特定鉗于瞳孔下正對(duì)神經(jīng)干處一扣壓榨30秒鐘、松開(kāi)30秒鐘、再壓榨30秒鐘后(SunderlandIII度損傷的力度),用縫線標(biāo)記損傷段,縫合皮下及皮膚層。假手術(shù)組動(dòng)物暴露雙側(cè)面神經(jīng)頰支,鈍性分離面神經(jīng)后,不予壓榨即縫合皮下及皮膚層。術(shù)后常規(guī)抗感染治療5天后開(kāi)始治療,每天1次,6天為一療程,療程間隔1天。 ⑴假手術(shù)組:常規(guī)飼養(yǎng),僅做術(shù)后常規(guī)抗感染治療。 ⑵模型組:常規(guī)飼養(yǎng),僅做術(shù)后常規(guī)抗感染治療。 ⑶電針組:常規(guī)飼養(yǎng),治療時(shí)用兔臺(tái)固定,選用雙側(cè)翳風(fēng),直刺1.0cm;頰車,直刺0.5cm;下關(guān),直刺0.5cm;合谷,約當(dāng)?shù)?掌骨中點(diǎn)橈側(cè),直刺1.0cm。其中翳風(fēng)與頰車采用強(qiáng)度為20~100Hz(波型間動(dòng)頻為30次/min);電壓2~4V,強(qiáng)度由小逐漸增大,電針時(shí)間30min;治療時(shí)間每次30分鐘。 ⑷管灸組:照常飼養(yǎng),治療時(shí)用兔箱固定,取2g艾絨置入特制的管灸器中,點(diǎn)燃后將軟管插入家兔雙側(cè)外耳道約2cm,施以熏灸,每次約30分鐘。

模型制作方法7管灸組70.組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第三療程管灸作為灸法治療的一種,主要用于治療面神經(jīng)炎、神經(jīng)性耳聾等疾病。模型組72.病理觀察及分析表明,管灸治療對(duì)損傷面神經(jīng)的修復(fù)再生具有促進(jìn)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)切取一側(cè)面神經(jīng)核、標(biāo)記段的面神及頰肌組織凍于液氮中保存以備RT-PCR檢測(cè),切取動(dòng)物另一側(cè)面神經(jīng)核、部分標(biāo)記段面神經(jīng)及頰肌組織,經(jīng)4%多聚甲醛/0.組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第四療程管灸組77.假手術(shù)組70.以上結(jié)論提示,管灸治療對(duì)損傷面神經(jīng)纖維的修復(fù)再生具有促進(jìn)作用,能增加面神經(jīng)核、面神經(jīng)、表情肌中NGF與NT-3mRNA的表達(dá),即在中樞、外周及效應(yīng)器等不同層面均能提高NGF與NT-3mRNA的表達(dá),這可能是其在治療面神經(jīng)炎過(guò)程中促進(jìn)面神經(jīng)再生,恢復(fù)神經(jīng)機(jī)能的分子作用機(jī)制之一,從神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的角度部分闡明了臨床上管灸治療面神經(jīng)損傷的機(jī)理。893.0320.與電針組比較★p<0.組別髓鞘厚度(μm)軸突面積(μm2)注:與模型組比較,▲:p<0.054▲▲0.模型組73.管灸組70.管灸組70.

各組分別于第一、二、四療程后隨機(jī)選擇7只動(dòng)物處死,按相應(yīng)的要求取材進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)切取一側(cè)面神經(jīng)核、標(biāo)記段的面神及頰肌組織凍于液氮中保存以備RT-PCR檢測(cè),切取動(dòng)物另一側(cè)面神經(jīng)核、部分標(biāo)記段面神經(jīng)及頰肌組織,經(jīng)4%多聚甲醛/0.1molPBS(Ph7.0~7.6),含有1/1000DEPC中固定4hr,全自動(dòng)組織脫水機(jī)處理,石蠟組織包埋機(jī)包埋,石蠟組織切片機(jī)連續(xù)作4μm厚切片。將切片裱貼于原位雜交專用玻片上。 其余面神經(jīng)分別固定于4%甲醛-鈣液及10%甲醛中。損傷近、遠(yuǎn)點(diǎn)作橫斷石蠟包埋,損傷處作縱斷石蠟包埋,分別作HE染色、水溶性猩紅-亮綠雙重染色。觀察神經(jīng)纖維結(jié)締組織、雪旺細(xì)胞、髓鞘、軸突的病理改變。采用Image-ProPlus5.0圖像分析系統(tǒng)測(cè)量髓鞘厚度、神經(jīng)束神經(jīng)纖維總數(shù)、神經(jīng)纖維直徑、軸突面積和神經(jīng)束面積。頰肌組織亦作HE染色,光鏡觀察肌肉組織病理改變情況。管灸組70.8模型制作流程壓榨面神經(jīng)分離面神經(jīng)標(biāo)記損傷部位模型制作流程面神經(jīng)鉗子絲線模型制作流程壓榨面神經(jīng)分離面神經(jīng)標(biāo)記損傷部位模型制作流程面神9病理檢測(cè)方法病理切片HE染色猩紅-亮綠染色神經(jīng)纖維數(shù)、纖維直徑髓鞘厚度、軸突面積神經(jīng)束面積病理檢測(cè)方法病理切片HE染色猩紅-亮綠染色神經(jīng)纖維數(shù)、纖維10髓鞘厚度、軸突面積比較組別髓鞘厚度(μm)

軸突面積(μm2)

第一療程第二療程第四療程

第一療程第二療程第四療程假手術(shù)組1.52±0.53▲▲1.54±0.62▲▲1.58±0.58▲▲8.25±1.51▲▲8.97±1.42▲▲8.35±1.46模型組0.72±0.150.76±0.240.86±0.165.35±0.925.86±1.027.52±1.38管灸組0.82±0.181.22±0.31▲1.38±0.32▲6.17±1.027.84±1.33▲13.93±2.21▲▲電針組0.79±0.221.18±0.26▲1.29±0.27▲5.93±0.987.36±1.24▲12.69±1.83▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01病理檢測(cè)結(jié)果髓鞘厚度、軸突面積比較組別髓鞘厚度(μm)11神經(jīng)束面積比較組別第一療程第二療程第四療程

假手術(shù)組43572±1439▲▲42965±1241▲▲43198±1395

模型組29856±115336858±132445372±1691管灸組32084±1584▲40889±1729▲▲59496±3574▲▲

電針組30928±136539662±1903▲▲53751±3318▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01病理檢測(cè)結(jié)果神經(jīng)束面積比較組別第一療程12神經(jīng)纖維數(shù)、纖維直徑比較

組別神經(jīng)纖維數(shù)(條)纖維直徑(μm)

第一療程第二療程第四療程

第一療程第二療程第四療程

假手術(shù)組

3856±524▲▲3725±4733819±5693.52±0.57▲▲3.29±0.85▲▲3.67±0.71▲模型組2931±4893326±5914032±6532.16±0.332.52±0.453.01±0.46管灸組3418±5674251±614▲5129±706▲▲2.65±0.402.98±0.37▲3.95±0.62▲電針組3328±4934185±587▲4856±634▲2.53±0.282.87±0.34▲3.86±0.56▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01病理檢測(cè)結(jié)果神經(jīng)纖維數(shù)、纖維直徑比較

組別神經(jīng)纖維數(shù)(條)13結(jié)論

病理觀察和分析表明,管灸和電針對(duì)損傷神經(jīng)的修復(fù)再生具有促進(jìn)作用,管灸療效和電針相當(dāng)。結(jié)論 14表情肌面神經(jīng)核、面神經(jīng)NGFNT-3多點(diǎn)標(biāo)記DIG(地高辛)探針原位雜交——過(guò)氧化物酶顯色法RT-PCR方法(逆轉(zhuǎn)錄PCR法)NGFNT-3檢測(cè)表情肌面神經(jīng)核、面神經(jīng)NGF多點(diǎn)標(biāo)記DIG(地高辛)探針原位15NGF原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)核中NGFmRNA積分光密度的影響組別動(dòng)物數(shù)積分光密度(×106)1療程2療程4療程假手術(shù)組79.49±2.5110.00±3.14

10.86±2.92模型組711.85±2.2914.19±3.6315.61±3.12管灸組718.36±3.14▲▲35.25±5.95▲▲★★36.72±5.09▲▲★電針組717.18±4.21▲▲26.27±6.70▲▲28.19±7.01▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NGF原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)核中NG16管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中NGFmRNA積分光密度的影響組別動(dòng)物數(shù)積分光密度(×106)1療程2療程4療程假手術(shù)組72.15±0.332.06±0.41

2.24±0.38模型組72.07±0.582.51±0.442.76±0.12管灸組72.53±0.283.97±0.86▲▲★4.27±0.63▲▲電針組72.82±0.62▲3.23±0.41▲3.61±0.92▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NGF原位雜交檢測(cè)結(jié)果NGF原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中NGFmRNA積分光密度的17管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔表情肌中NGFmRNA積分光密度的影響組別動(dòng)物數(shù)積分光密度(×106)1療程2療程4療程假手術(shù)組72.72±0.24▲▲2.81±0.80▲2.68±0.43▲▲模型組73.65±0.684.07±0.954.85±0.76管灸組74.86±0.51▲▲★7.62±0.12▲▲★★8.01±0.59▲▲★電針組73.95±0.275.81±0.14▲▲6.16±0.35▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NGF原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔表情肌中NGFmRNA積分光密度的影18NGFRT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)核中NGFmRNA的影響組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第四療程假手術(shù)組70.347±0.0290.325±0.028▲0.339±0.037▲▲模型組70.369±0.0310.403±0.0770.473±0.066管灸組70.465±0.044▲▲0.635±0.071▲▲★0.658±0.057▲▲電針組70.453±0.037▲▲0.524±0.063▲▲0.646±0.059▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NGFRT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)19管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中NGFmRNA的影響組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第四療程假手術(shù)組70.220±0.0240.269±0.0290.254±0.031▲▲模型組70.241±0.0270.301±0.0260.321±0.027管灸組70.403±0.041▲▲0.594±0.053▲▲0.612±0.058▲▲★電針組70.416±0.054▲▲0.572±0.061▲▲0.589±0.042▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NGFRT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中NGFmRNA的影響20管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔表情肌中NGFmRNA的影響組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第三療程假手術(shù)組70.252±0.0310.245±0.029▲▲0.250±0.032▲▲模型組70.290±0.0380.351±0.0320.354±0.039管灸組70.338±0.0470.502±0.054▲▲0.527±0.050▲▲電針組70.330±0.0520.490±0.058▲▲0.514±0.049▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NGFRT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔表情肌中NGFmRNA的影響組21第一療程第二療程第四療程第一療程第二療程第四療程假手術(shù)組72.54▲3.電針組70.⑵模型組:常規(guī)飼養(yǎng),僅做術(shù)后常規(guī)抗感染治療。注:與模型組比較,▲:p<0.NT-3RT-PCR檢測(cè)結(jié)果假手術(shù)組70.0380.模型組73.管灸治療增強(qiáng)面神經(jīng)核、面神經(jīng)、面部表情肌NGFmRNA、NT-3mRNA的表達(dá)以治療兩療程時(shí)達(dá)高峰,繼續(xù)治療雖有增高,但增高幅度不大。管灸和電針對(duì)NGF表達(dá)的影響與電針組比較★p<0.組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第四療程082▲▲0.管灸組70.54▲3.044▲▲0.模型組29856±115336858±132445372±1691以上結(jié)論提示,管灸治療對(duì)損傷面神經(jīng)纖維的修復(fù)再生具有促進(jìn)作用,能增加面神經(jīng)核、面神經(jīng)、表情肌中NGF與NT-3mRNA的表達(dá),即在中樞、外周及效應(yīng)器等不同層面均能提高NGF與NT-3mRNA的表達(dá),這可能是其在治療面神經(jīng)炎過(guò)程中促進(jìn)面神經(jīng)再生,恢復(fù)神經(jīng)機(jī)能的分子作用機(jī)制之一,從神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的角度部分闡明了臨床上管灸治療面神經(jīng)損傷的機(jī)理。管灸組32084±1584▲40889±1729▲▲59496±3574▲▲管灸和電針對(duì)NGF表達(dá)的影響結(jié)論:1.管灸和電針均可以提高面神經(jīng)核、面神經(jīng)及表情肌中NGF表達(dá)。2.部分指標(biāo)顯示管灸較電針為優(yōu)。第一療程第二療程第四療程第一療程第二療22NT-3原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)核中NT-3mRNA積分光密度的影響組別動(dòng)物數(shù)積分光密度(×106)1療程2療程4療程假手術(shù)組73.98±0.763.80±0.89

3.73±0.68▲模型組74.99±1.235.49±1.766.29±1.86管灸組77.03±2.02▲10.98±1.95▲▲★★

10.83±2.24▲▲

電針組76.65±1.58▲8.09±1.69▲▲8.24±1.81▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NT-3原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)核中23NT-3原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中NT-3mRNA積分光密度的影響組別動(dòng)物數(shù)積分光密度(×106)1療程2療程4療程假手術(shù)組73.28±0.733.34±0.50

3.43±0.49模型組73.46±0.673.72±0.453.91±0.76管灸組73.94±0.624.54±0.81▲4.99±1.02▲電針組73.88±0.514.88±0.63▲▲5.15±0.83▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NT-3原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中N24NT-3原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔表情肌中NT-3mRNA積分光密度的影響組別動(dòng)物數(shù)積分光密度(×106)1療程2療程4療程假手術(shù)組73.13±0.493.07±0.54▲3.23±0.64▲模型組73.38±0.514.00±0.454.25±0.66管灸組74.25±0.76▲5.44±0.97▲▲5.65±1.13▲電針組74.05±0.824.87±0.88▲5.04±1.08注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NT-3原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔表情肌中NT25NT-3RT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)核中NT-3mRNA的影響組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第三療程假手術(shù)組70.426±0.0380.438±0.043▲0.441±0.049▲模型組70.462±0.0310.526±0.0540.532±0.054管灸組70.524±0.049▲0.727±0.077▲▲0.732±0.068▲▲電針組70.506±0.0460.710±0.082▲▲0.709±0.072▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NT-3RT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面26NT-3RT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中NT-3mRNA的影響組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第四療程假手術(shù)組70.406±0.0470.415±0.044▲0.403±0.046▲▲模型組70.445±0.0520.483±0.0610.494±0.053管灸組70.521±0.069▲0.694±0.057▲▲0.713±0.059▲▲電針組70.517±0.065▲0.702±0.065▲▲0.710±0.068▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NT-3RT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面27管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔表情肌中NT-3mRNA的影響組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第四療程假手術(shù)組70.359±0.0470.376±0.046▲▲0.373±0.035▲▲模型組70.410±0.0420.504±0.0570.542±0.067管灸組70.422±0.0540.638±0.068▲▲0.683±0.071▲▲電針組70.436±0.0590.612±0.077▲0.631±0.068▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NT-3RT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔表情肌中NT-3mRNA的影響28管灸組70.模型組70.管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)核中NT-3mRNA積分光密度的影響第一療程第二療程第四療程第一療程第二療程第四療程組別神經(jīng)纖維數(shù)(條)纖維直徑(μm)以上結(jié)論提示,管灸治療對(duì)損傷面神經(jīng)纖維的修復(fù)再生具有促進(jìn)作用,能增加面神經(jīng)核、面神經(jīng)、表情肌中NGF與NT-3mRNA的表達(dá),即在中樞、外周及效應(yīng)器等不同層面均能提高NGF與NT-3mRNA的表達(dá),這可能是其在治療面神經(jīng)炎過(guò)程中促進(jìn)面神經(jīng)再生,恢復(fù)神經(jīng)機(jī)能的分子作用機(jī)制之一,從神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的角度部分闡明了臨床上管灸治療面神經(jīng)損傷的機(jī)理。組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第三療程與電針組比較★p<0.電針組717.第一療程第二療程第四療程第一療程第二療程第四療程注:與模型組比較,▲:p<0.假手術(shù)組73.電針組70.注:與模型組比較,▲:p<0.041▲▲0.管灸組32084±1584▲40889±1729▲▲59496±3574▲▲054▲▲0.注:與模型組比較,▲:p<0.注:與模型組比較,▲:p<0.假手術(shù)組70.結(jié)論:1.管灸和電針均可以提高面神經(jīng)核、面神經(jīng)及表情肌中NT-3表達(dá)。2.部分指標(biāo)顯示管灸較電針為優(yōu)。管灸和電針對(duì)NT-3表達(dá)的影響管灸組70.結(jié)29結(jié)論1.病理觀察及分析表明,管灸治療對(duì)損傷面神經(jīng)的修復(fù)再生具有促進(jìn)作用。2.原位雜交及RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果均表明管灸治療可以增強(qiáng)面神經(jīng)核、面神經(jīng)、面部表情肌NGFmRNA、NT-3mRNA的表達(dá)。3.管灸治療增強(qiáng)面神經(jīng)核、面神經(jīng)、面部表情肌NGFmRNA、NT-3mRNA的表達(dá)以治療兩療程時(shí)達(dá)高峰,繼續(xù)治療雖有增高,但增高幅度不大。4.管灸治療增強(qiáng)面神經(jīng)核、面神經(jīng)、面部表情肌NGFmRNA、NT-3mRNA的表達(dá)與電針總體療效相當(dāng),部分指標(biāo)優(yōu)于電針。

結(jié)論30結(jié)果

以上結(jié)論提示,管灸治療對(duì)損傷面神經(jīng)纖維的修復(fù)再生具有促進(jìn)作用,能增加面神經(jīng)核、面神經(jīng)、表情肌中NGF與NT-3mRNA的表達(dá),即在中樞、外周及效應(yīng)器等不同層面均能提高NGF與NT-3mRNA的表達(dá),這可能是其在治療面神經(jīng)炎過(guò)程中促進(jìn)面神經(jīng)再生,恢復(fù)神經(jīng)機(jī)能的分子作用機(jī)制之一,從神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的角度部分闡明了臨床上管灸治療面神經(jīng)損傷的機(jī)理。結(jié)果以上結(jié)論提示,管灸治療對(duì)損傷面神經(jīng)纖維的修31管灸的作用機(jī)制之一管灸NGFNT-3中樞面神經(jīng)核效應(yīng)器表情肌外周面神經(jīng)管灸的作用機(jī)制之一管灸NGF中樞面神經(jīng)核效應(yīng)器表情肌外周面神32問(wèn)題與展望

神經(jīng)修復(fù)機(jī)制非常復(fù)雜,管灸是通過(guò)何種途徑影響這些神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)的?管灸影響神經(jīng)修復(fù)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程和特點(diǎn)是什么?等等這些問(wèn)題仍有待進(jìn)一步的研究,從而更深層次的揭示管灸作用機(jī)理,利于管灸療法的臨床推廣和臨床療效的提高。問(wèn)題與展望 神經(jīng)修復(fù)機(jī)制非常復(fù)雜,管灸是通過(guò)何33本次課程結(jié)束,謝謝欣賞本次課程結(jié)束,謝謝欣賞34注:與模型組比較,▲:p<0.86▲▲★4.組別髓鞘厚度(μm)軸突面積(μm2)1療程2療程4療程管灸組32084±1584▲40889±1729▲▲59496±3574▲▲082▲▲0.假手術(shù)組動(dòng)物暴露雙側(cè)面神經(jīng)頰支,鈍性分離面神經(jīng)后,不予壓榨即縫合皮下及皮膚層。觀察神經(jīng)纖維結(jié)締組織、雪旺細(xì)胞、髓鞘、軸突的病理改變。原位雜交及RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果均表明管灸治療可以增強(qiáng)面神經(jīng)核、面神經(jīng)、面部表情肌NGFmRNA、NT-3mRNA的表達(dá)。管灸組70.1療程2療程4療程假手術(shù)組73.電針組76.假手術(shù)組72.電針組70.制作面神經(jīng)損傷模型,但不做任何治療管灸組70.管灸組70.管灸和電針均可以提高面神經(jīng)核、面神經(jīng)及表合谷,約當(dāng)?shù)?掌骨中點(diǎn)橈側(cè),直刺1.所運(yùn)用的技術(shù)病理形態(tài)學(xué)技術(shù)1形態(tài)計(jì)量學(xué)

2原位雜交3RT-PCR4病理學(xué)技術(shù)分子生物學(xué)技術(shù)注:與模型組比較,▲:p<0.所運(yùn)用的技術(shù)病理形態(tài)學(xué)技術(shù)35操作流程分組模型制作治療檢測(cè)操作流程分組模型制作治療檢測(cè)36管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中NGFmRNA的影響組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第四療程假手術(shù)組70.220±0.0240.269±0.0290.254±0.031▲▲模型組70.241±0.0270.301±0.0260.321±0.027管灸組70.403±0.041▲▲0.594±0.053▲▲0.612±0.058▲▲★電針組70.416±0.054▲▲0.572±0.061▲▲0.589±0.042▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NGFRT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中NGFmRNA的影響37管灸和電針對(duì)NGF表達(dá)的影響結(jié)論:1.管灸和電針均可以提高面神經(jīng)核、面神經(jīng)及表情肌中NGF表達(dá)。2.部分指標(biāo)顯示管灸較電針為優(yōu)。管灸和電針對(duì)NGF表達(dá)的影響結(jié)論:38NT-3RT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)核中NT-3mRNA的影響組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第三療程假手術(shù)組70.426±0.0380.438±0.043▲0.441±0.049▲模型組70.462±0.0310.526±0.0540.532±0.054管灸組70.524±0.049▲0.727±0.077▲▲0.732±0.068▲▲電針組70.506±0.0460.710±0.082▲▲0.709±0.072▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NT-3RT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面3997▲▲5.模型組29856±115336858±132445372±1691情肌中NGF表達(dá)。情肌中NGF表達(dá)。電針組70.模型組70.假手術(shù)組70.與電針組比較★p<0.采用Image-ProPlus5.0320.0320.NGF原位雜交檢測(cè)結(jié)果與電針組比較★p<0.模型組70.假手術(shù)組70.假手術(shù)組動(dòng)物暴露雙側(cè)面神經(jīng)頰支,鈍性分離面神經(jīng)后,不予壓榨即縫合皮下及皮膚層。假手術(shù)組72.病理觀察和分析表明,管灸和電針對(duì)損傷神經(jīng)的修復(fù)再生具有促進(jìn)作用,管灸療效和電針相當(dāng)。NGFRT-PCR檢測(cè)結(jié)果假手術(shù)組70.6),含有1/1000DEPC中固定4hr,全自動(dòng)組織脫水機(jī)處理,石蠟組織包埋機(jī)包埋,石蠟組織切片機(jī)連續(xù)作4μm厚切片。假手術(shù)組70.假手術(shù)組70.管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中NT-3mRNA積分光密度的影響其余面神經(jīng)分別固定于4%甲醛-鈣液及10%甲醛中。電針組72.電針組72.082▲▲0.管灸組32084±1584▲40889±1729▲▲59496±3574▲▲082▲▲0.0380.治療時(shí)間每次30分鐘。管灸組70.88▲5.頰肌組織亦作HE染色,光鏡觀察肌肉組織病理改變情況。假手術(shù)組73.管灸組70.模型組74.與電針組比較★p<0.其中翳風(fēng)與頰車采用強(qiáng)度為20~100Hz(波型間動(dòng)頻為30次/min);神經(jīng)纖維數(shù)、纖維直徑比較結(jié)論:1.管灸和電針均可以提高面神經(jīng)核、面神經(jīng)及表情肌中NT-3表達(dá)。2.部分指標(biāo)顯示管灸較電針為優(yōu)。管灸和電針對(duì)NT-3表達(dá)的影響97▲▲5.假手術(shù)組740怎樣進(jìn)行機(jī)制研究?管灸作為灸法治療的一種,主要用于治療面神經(jīng)炎、神經(jīng)性耳聾等疾病。采用人類疾病動(dòng)物模型進(jìn)行治療機(jī)制研究是目前國(guó)內(nèi)外最常用的方法。因此我們通過(guò)建立家兔面神經(jīng)損傷模型,采用管灸和電針進(jìn)行治療,對(duì)其機(jī)理進(jìn)行研究,同時(shí)和電針進(jìn)行對(duì)比。怎樣進(jìn)行機(jī)制研究?管灸作為灸法治療的41所運(yùn)用的技術(shù)病理形態(tài)學(xué)技術(shù)1形態(tài)計(jì)量學(xué)

2原位雜交3RT-PCR4病理學(xué)技術(shù)分子生物學(xué)技術(shù)所運(yùn)用的技術(shù)病理形態(tài)學(xué)技術(shù)1形態(tài)計(jì)量學(xué)2原位雜交3RT-P42檢測(cè)內(nèi)容神經(jīng)組織病理形態(tài)測(cè)量髓鞘厚度、神經(jīng)束神經(jīng)纖維總數(shù)、神經(jīng)纖維直徑、軸突面積和神經(jīng)束面積,頰肌組織。神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)水平面神經(jīng)核、面神經(jīng)、表情肌中神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3(NT-3)表達(dá)水平。檢測(cè)內(nèi)容神經(jīng)組織病理形態(tài)測(cè)量髓鞘厚度、神經(jīng)束神經(jīng)纖維總數(shù)、43擬解決的問(wèn)題對(duì)損傷面神經(jīng)是否具有促進(jìn)修復(fù)作用?修復(fù)的機(jī)制是什么?對(duì)臨床運(yùn)用管灸有什么指導(dǎo)作用?123擬解決的問(wèn)題對(duì)損傷面神經(jīng)是否具有促進(jìn)修復(fù)作用?修復(fù)的機(jī)制是什44操作流程分組模型制作治療檢測(cè)操作流程分組模型制作治療檢測(cè)45動(dòng)物分組分組模型組制作面神經(jīng)損傷模型,但不做任何治療電針組制作面神經(jīng)損傷模型,給予電針治療假手術(shù)組僅手術(shù)暴露面神經(jīng),但不損傷面神經(jīng)管灸組制作面神經(jīng)損傷模型,給予管灸治療動(dòng)物分組分組模型組電針組假手術(shù)組管灸組46模型制作方法

家兔麻醉后取耳屏前至下頜角下緣“S”形切口,鈍性分離暴露面神經(jīng)頰支,用同一特定鉗于瞳孔下正對(duì)神經(jīng)干處一扣壓榨30秒鐘、松開(kāi)30秒鐘、再壓榨30秒鐘后(SunderlandIII度損傷的力度),用縫線標(biāo)記損傷段,縫合皮下及皮膚層。假手術(shù)組動(dòng)物暴露雙側(cè)面神經(jīng)頰支,鈍性分離面神經(jīng)后,不予壓榨即縫合皮下及皮膚層。術(shù)后常規(guī)抗感染治療5天后開(kāi)始治療,每天1次,6天為一療程,療程間隔1天。 ⑴假手術(shù)組:常規(guī)飼養(yǎng),僅做術(shù)后常規(guī)抗感染治療。 ⑵模型組:常規(guī)飼養(yǎng),僅做術(shù)后常規(guī)抗感染治療。 ⑶電針組:常規(guī)飼養(yǎng),治療時(shí)用兔臺(tái)固定,選用雙側(cè)翳風(fēng),直刺1.0cm;頰車,直刺0.5cm;下關(guān),直刺0.5cm;合谷,約當(dāng)?shù)?掌骨中點(diǎn)橈側(cè),直刺1.0cm。其中翳風(fēng)與頰車采用強(qiáng)度為20~100Hz(波型間動(dòng)頻為30次/min);電壓2~4V,強(qiáng)度由小逐漸增大,電針時(shí)間30min;治療時(shí)間每次30分鐘。 ⑷管灸組:照常飼養(yǎng),治療時(shí)用兔箱固定,取2g艾絨置入特制的管灸器中,點(diǎn)燃后將軟管插入家兔雙側(cè)外耳道約2cm,施以熏灸,每次約30分鐘。

模型制作方法47管灸組70.組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第三療程管灸作為灸法治療的一種,主要用于治療面神經(jīng)炎、神經(jīng)性耳聾等疾病。模型組72.病理觀察及分析表明,管灸治療對(duì)損傷面神經(jīng)的修復(fù)再生具有促進(jìn)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)切取一側(cè)面神經(jīng)核、標(biāo)記段的面神及頰肌組織凍于液氮中保存以備RT-PCR檢測(cè),切取動(dòng)物另一側(cè)面神經(jīng)核、部分標(biāo)記段面神經(jīng)及頰肌組織,經(jīng)4%多聚甲醛/0.組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第四療程管灸組77.假手術(shù)組70.以上結(jié)論提示,管灸治療對(duì)損傷面神經(jīng)纖維的修復(fù)再生具有促進(jìn)作用,能增加面神經(jīng)核、面神經(jīng)、表情肌中NGF與NT-3mRNA的表達(dá),即在中樞、外周及效應(yīng)器等不同層面均能提高NGF與NT-3mRNA的表達(dá),這可能是其在治療面神經(jīng)炎過(guò)程中促進(jìn)面神經(jīng)再生,恢復(fù)神經(jīng)機(jī)能的分子作用機(jī)制之一,從神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的角度部分闡明了臨床上管灸治療面神經(jīng)損傷的機(jī)理。893.0320.與電針組比較★p<0.組別髓鞘厚度(μm)軸突面積(μm2)注:與模型組比較,▲:p<0.054▲▲0.模型組73.管灸組70.管灸組70.

各組分別于第一、二、四療程后隨機(jī)選擇7只動(dòng)物處死,按相應(yīng)的要求取材進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)切取一側(cè)面神經(jīng)核、標(biāo)記段的面神及頰肌組織凍于液氮中保存以備RT-PCR檢測(cè),切取動(dòng)物另一側(cè)面神經(jīng)核、部分標(biāo)記段面神經(jīng)及頰肌組織,經(jīng)4%多聚甲醛/0.1molPBS(Ph7.0~7.6),含有1/1000DEPC中固定4hr,全自動(dòng)組織脫水機(jī)處理,石蠟組織包埋機(jī)包埋,石蠟組織切片機(jī)連續(xù)作4μm厚切片。將切片裱貼于原位雜交專用玻片上。 其余面神經(jīng)分別固定于4%甲醛-鈣液及10%甲醛中。損傷近、遠(yuǎn)點(diǎn)作橫斷石蠟包埋,損傷處作縱斷石蠟包埋,分別作HE染色、水溶性猩紅-亮綠雙重染色。觀察神經(jīng)纖維結(jié)締組織、雪旺細(xì)胞、髓鞘、軸突的病理改變。采用Image-ProPlus5.0圖像分析系統(tǒng)測(cè)量髓鞘厚度、神經(jīng)束神經(jīng)纖維總數(shù)、神經(jīng)纖維直徑、軸突面積和神經(jīng)束面積。頰肌組織亦作HE染色,光鏡觀察肌肉組織病理改變情況。管灸組70.48模型制作流程壓榨面神經(jīng)分離面神經(jīng)標(biāo)記損傷部位模型制作流程面神經(jīng)鉗子絲線模型制作流程壓榨面神經(jīng)分離面神經(jīng)標(biāo)記損傷部位模型制作流程面神49病理檢測(cè)方法病理切片HE染色猩紅-亮綠染色神經(jīng)纖維數(shù)、纖維直徑髓鞘厚度、軸突面積神經(jīng)束面積病理檢測(cè)方法病理切片HE染色猩紅-亮綠染色神經(jīng)纖維數(shù)、纖維50髓鞘厚度、軸突面積比較組別髓鞘厚度(μm)

軸突面積(μm2)

第一療程第二療程第四療程

第一療程第二療程第四療程假手術(shù)組1.52±0.53▲▲1.54±0.62▲▲1.58±0.58▲▲8.25±1.51▲▲8.97±1.42▲▲8.35±1.46模型組0.72±0.150.76±0.240.86±0.165.35±0.925.86±1.027.52±1.38管灸組0.82±0.181.22±0.31▲1.38±0.32▲6.17±1.027.84±1.33▲13.93±2.21▲▲電針組0.79±0.221.18±0.26▲1.29±0.27▲5.93±0.987.36±1.24▲12.69±1.83▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01病理檢測(cè)結(jié)果髓鞘厚度、軸突面積比較組別髓鞘厚度(μm)51神經(jīng)束面積比較組別第一療程第二療程第四療程

假手術(shù)組43572±1439▲▲42965±1241▲▲43198±1395

模型組29856±115336858±132445372±1691管灸組32084±1584▲40889±1729▲▲59496±3574▲▲

電針組30928±136539662±1903▲▲53751±3318▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01病理檢測(cè)結(jié)果神經(jīng)束面積比較組別第一療程52神經(jīng)纖維數(shù)、纖維直徑比較

組別神經(jīng)纖維數(shù)(條)纖維直徑(μm)

第一療程第二療程第四療程

第一療程第二療程第四療程

假手術(shù)組

3856±524▲▲3725±4733819±5693.52±0.57▲▲3.29±0.85▲▲3.67±0.71▲模型組2931±4893326±5914032±6532.16±0.332.52±0.453.01±0.46管灸組3418±5674251±614▲5129±706▲▲2.65±0.402.98±0.37▲3.95±0.62▲電針組3328±4934185±587▲4856±634▲2.53±0.282.87±0.34▲3.86±0.56▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01病理檢測(cè)結(jié)果神經(jīng)纖維數(shù)、纖維直徑比較

組別神經(jīng)纖維數(shù)(條)53結(jié)論

病理觀察和分析表明,管灸和電針對(duì)損傷神經(jīng)的修復(fù)再生具有促進(jìn)作用,管灸療效和電針相當(dāng)。結(jié)論 54表情肌面神經(jīng)核、面神經(jīng)NGFNT-3多點(diǎn)標(biāo)記DIG(地高辛)探針原位雜交——過(guò)氧化物酶顯色法RT-PCR方法(逆轉(zhuǎn)錄PCR法)NGFNT-3檢測(cè)表情肌面神經(jīng)核、面神經(jīng)NGF多點(diǎn)標(biāo)記DIG(地高辛)探針原位55NGF原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)核中NGFmRNA積分光密度的影響組別動(dòng)物數(shù)積分光密度(×106)1療程2療程4療程假手術(shù)組79.49±2.5110.00±3.14

10.86±2.92模型組711.85±2.2914.19±3.6315.61±3.12管灸組718.36±3.14▲▲35.25±5.95▲▲★★36.72±5.09▲▲★電針組717.18±4.21▲▲26.27±6.70▲▲28.19±7.01▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NGF原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)核中NG56管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中NGFmRNA積分光密度的影響組別動(dòng)物數(shù)積分光密度(×106)1療程2療程4療程假手術(shù)組72.15±0.332.06±0.41

2.24±0.38模型組72.07±0.582.51±0.442.76±0.12管灸組72.53±0.283.97±0.86▲▲★4.27±0.63▲▲電針組72.82±0.62▲3.23±0.41▲3.61±0.92▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NGF原位雜交檢測(cè)結(jié)果NGF原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中NGFmRNA積分光密度的57管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔表情肌中NGFmRNA積分光密度的影響組別動(dòng)物數(shù)積分光密度(×106)1療程2療程4療程假手術(shù)組72.72±0.24▲▲2.81±0.80▲2.68±0.43▲▲模型組73.65±0.684.07±0.954.85±0.76管灸組74.86±0.51▲▲★7.62±0.12▲▲★★8.01±0.59▲▲★電針組73.95±0.275.81±0.14▲▲6.16±0.35▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NGF原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔表情肌中NGFmRNA積分光密度的影58NGFRT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)核中NGFmRNA的影響組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第四療程假手術(shù)組70.347±0.0290.325±0.028▲0.339±0.037▲▲模型組70.369±0.0310.403±0.0770.473±0.066管灸組70.465±0.044▲▲0.635±0.071▲▲★0.658±0.057▲▲電針組70.453±0.037▲▲0.524±0.063▲▲0.646±0.059▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NGFRT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)59管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中NGFmRNA的影響組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第四療程假手術(shù)組70.220±0.0240.269±0.0290.254±0.031▲▲模型組70.241±0.0270.301±0.0260.321±0.027管灸組70.403±0.041▲▲0.594±0.053▲▲0.612±0.058▲▲★電針組70.416±0.054▲▲0.572±0.061▲▲0.589±0.042▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NGFRT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中NGFmRNA的影響60管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔表情肌中NGFmRNA的影響組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第三療程假手術(shù)組70.252±0.0310.245±0.029▲▲0.250±0.032▲▲模型組70.290±0.0380.351±0.0320.354±0.039管灸組70.338±0.0470.502±0.054▲▲0.527±0.050▲▲電針組70.330±0.0520.490±0.058▲▲0.514±0.049▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NGFRT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔表情肌中NGFmRNA的影響組61第一療程第二療程第四療程第一療程第二療程第四療程假手術(shù)組72.54▲3.電針組70.⑵模型組:常規(guī)飼養(yǎng),僅做術(shù)后常規(guī)抗感染治療。注:與模型組比較,▲:p<0.NT-3RT-PCR檢測(cè)結(jié)果假手術(shù)組70.0380.模型組73.管灸治療增強(qiáng)面神經(jīng)核、面神經(jīng)、面部表情肌NGFmRNA、NT-3mRNA的表達(dá)以治療兩療程時(shí)達(dá)高峰,繼續(xù)治療雖有增高,但增高幅度不大。管灸和電針對(duì)NGF表達(dá)的影響與電針組比較★p<0.組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第四療程082▲▲0.管灸組70.54▲3.044▲▲0.模型組29856±115336858±132445372±1691以上結(jié)論提示,管灸治療對(duì)損傷面神經(jīng)纖維的修復(fù)再生具有促進(jìn)作用,能增加面神經(jīng)核、面神經(jīng)、表情肌中NGF與NT-3mRNA的表達(dá),即在中樞、外周及效應(yīng)器等不同層面均能提高NGF與NT-3mRNA的表達(dá),這可能是其在治療面神經(jīng)炎過(guò)程中促進(jìn)面神經(jīng)再生,恢復(fù)神經(jīng)機(jī)能的分子作用機(jī)制之一,從神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的角度部分闡明了臨床上管灸治療面神經(jīng)損傷的機(jī)理。管灸組32084±1584▲40889±1729▲▲59496±3574▲▲管灸和電針對(duì)NGF表達(dá)的影響結(jié)論:1.管灸和電針均可以提高面神經(jīng)核、面神經(jīng)及表情肌中NGF表達(dá)。2.部分指標(biāo)顯示管灸較電針為優(yōu)。第一療程第二療程第四療程第一療程第二療62NT-3原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)核中NT-3mRNA積分光密度的影響組別動(dòng)物數(shù)積分光密度(×106)1療程2療程4療程假手術(shù)組73.98±0.763.80±0.89

3.73±0.68▲模型組74.99±1.235.49±1.766.29±1.86管灸組77.03±2.02▲10.98±1.95▲▲★★

10.83±2.24▲▲

電針組76.65±1.58▲8.09±1.69▲▲8.24±1.81▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NT-3原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)核中63NT-3原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中NT-3mRNA積分光密度的影響組別動(dòng)物數(shù)積分光密度(×106)1療程2療程4療程假手術(shù)組73.28±0.733.34±0.50

3.43±0.49模型組73.46±0.673.72±0.453.91±0.76管灸組73.94±0.624.54±0.81▲4.99±1.02▲電針組73.88±0.514.88±0.63▲▲5.15±0.83▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NT-3原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中N64NT-3原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔表情肌中NT-3mRNA積分光密度的影響組別動(dòng)物數(shù)積分光密度(×106)1療程2療程4療程假手術(shù)組73.13±0.493.07±0.54▲3.23±0.64▲模型組73.38±0.514.00±0.454.25±0.66管灸組74.25±0.76▲5.44±0.97▲▲5.65±1.13▲電針組74.05±0.824.87±0.88▲5.04±1.08注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NT-3原位雜交檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔表情肌中NT65NT-3RT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)核中NT-3mRNA的影響組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第三療程假手術(shù)組70.426±0.0380.438±0.043▲0.441±0.049▲模型組70.462±0.0310.526±0.0540.532±0.054管灸組70.524±0.049▲0.727±0.077▲▲0.732±0.068▲▲電針組70.506±0.0460.710±0.082▲▲0.709±0.072▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NT-3RT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面66NT-3RT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)中NT-3mRNA的影響組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第四療程假手術(shù)組70.406±0.0470.415±0.044▲0.403±0.046▲▲模型組70.445±0.0520.483±0.0610.494±0.053管灸組70.521±0.069▲0.694±0.057▲▲0.713±0.059▲▲電針組70.517±0.065▲0.702±0.065▲▲0.710±0.068▲▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NT-3RT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面67管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔表情肌中NT-3mRNA的影響組別動(dòng)物數(shù)第一療程第二療程第四療程假手術(shù)組70.359±0.0470.376±0.046▲▲0.373±0.035▲▲模型組70.410±0.0420.504±0.0570.542±0.067管灸組70.422±0.0540.638±0.068▲▲0.683±0.071▲▲電針組70.436±0.0590.612±0.077▲0.631±0.068▲注:與模型組比較,▲:p<0.05;▲▲p<0.01;與電針組比較★p<0.05;★★p<0.01NT-3RT-PCR檢測(cè)結(jié)果管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔表情肌中NT-3mRNA的影響68管灸組70.模型組70.管灸對(duì)面神經(jīng)損傷模型家兔面神經(jīng)核中NT-3mRNA積分光密度的影響第一療程第二療程第四療程第一療程第二療程第四療程組別神經(jīng)纖維數(shù)(條)纖維直徑(μm)以上結(jié)論提示,管灸治療對(duì)損傷面神經(jīng)纖維的修復(fù)再生具有促進(jìn)作用,能增加面神經(jīng)核、面神經(jīng)、表情肌中NGF與NT-3mRNA的表達(dá),即在中樞、外周及效應(yīng)器等不同層面均能提高NGF與NT-3mRNA的表達(dá),這可能是其在治療面神經(jīng)炎過(guò)程中促進(jìn)面神經(jīng)再生,恢復(fù)神經(jīng)機(jī)能的

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