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第一節(jié)DNA第十一章第一節(jié)DNA第十一章DNA一、DNA 生物生物化二、生物化的起點(diǎn)與方真核線(xiàn)真核線(xiàn) 雙鏈:噬菌體 后三、’→三、’→ 四、四、與生物化有關(guān)的酶和蛋(一)DNA聚合合成方向:53生物化生物生物化1.大腸桿菌DNADNADNApolymeraseI生物化1)DNApol生物化單鏈環(huán)狀DNA生物化單鏈環(huán)狀DNA 3'5' 5′→3′3′→5′5′→3′DNADNADNApolDNApolDNApol分子不同種類(lèi)亞基數(shù)1≥≥每個(gè)細(xì)胞的分子生物學(xué)活15'→3'聚合酶活+++3'→5'外切酶活+++5'→3'外切酶活+——聚合速度(核苷酸/分持續(xù)合成功生物化3)DNApolⅢ—酶為DNApolI的15倍,除聚合酶活性外,還有多亞基酶含十種亞基(αβγθτδδ’χΨε): 生物生物化DNA數(shù)亞基功α2*聚合作εθ22酶(2)35’外切酶的校對(duì)功組建τ2使酶二聚γ2依賴(lài)DNA的ATP酶,形成γ復(fù)合δ1與β亞基結(jié)合,形成γ復(fù)合1合物形成γ1裝配器β形成γ復(fù)合兩個(gè)β亞基形成滑動(dòng),以提高酶14能力強(qiáng)生物化酶DNA聚合酶Ⅲ酶二聚延長(zhǎng)因DNA聚合酶兩亞 生物生物化2.真核生物DNA有DNApolα、β、γ、δ、αβγδε定細(xì)胞細(xì)胞線(xiàn)粒細(xì)胞細(xì)胞分子量36-160-聚合方向+++++外切酶活性––+++抑制劑DideoxyN-功合修線(xiàn)粒DNA合核合修生物化DNA高等生物和噬菌體生生物化5'模板接PPPP PPP3'口5'模板PPPPPPP生物化 連環(huán)數(shù)W比連環(huán)差連環(huán)數(shù)W比連環(huán)差生物生物化 E.coli的DNAgyrase(DNA旋轉(zhuǎn)酶,連續(xù)引入負(fù)超螺真核細(xì)胞的TopⅡα,Top生物生物化生物化酶Single-strandSingle-strandbinding端粒酶(omerase):端粒酶是一種含RNACCC生物生物化5′TTTTGGGGTTTTGGGGTTTTGGGGTTTT3′交5′TTTTGGGGTTTTGGGGnTTTTGGGGTC3′5′移位AAGGGGTTTTGGTTTTG5′TTTTGGGGTTTTGGGGTTTTGGGGT3′AAAACCCCAAAACCCCnAAAACCCCTCC生物生物化引物合成酶體滯后前導(dǎo)生物化化五、化五、大腸桿 起點(diǎn)ori能量在DnaC的幫助下沿5’→3’ 生物生物化大腸桿菌起點(diǎn)與起始有關(guān)的酶與輔助因蛋白功DnaADnaBDna類(lèi)組蛋白幫助DnaB結(jié)合于起DNA結(jié)合蛋白,促進(jìn)起引物合成酶Dna合成RNA單鏈DNA結(jié)合蛋白結(jié)合單鏈RNA聚合促進(jìn)DnaA活DNA旋轉(zhuǎn)酶釋放DNA解鏈過(guò)程產(chǎn)生的張Dam甲基化使起點(diǎn)GATC序列的腺嘌呤甲基生物化化生物生物化生物化叉叉叉叉完終 叉終 叉Ter:終止陷阱,引 終止的特定區(qū)域20bp的序列,終止利用物質(zhì)Tus可識(shí)別并結(jié)Top六、真核細(xì)胞DNA 1 六、真核細(xì)胞DNA 1 , 生物生物化4真核生物的DNA通常與組蛋白構(gòu)成核小體,生物化生物生物化 生物化7.真核生物DNA DNAαpolDNAγDNAδDNAε定細(xì)胞細(xì)胞線(xiàn)粒細(xì)胞細(xì)胞外切酶––3’→5’外3’→5’外5’→3’外+––––中低高高抑制蚜腸霉蚜腸霉蚜腸霉功引物合修核DNA修細(xì)菌和真核生 體的組組細(xì)酶DNA聚合酶細(xì)菌和真核生 體的組組細(xì)酶DNA聚合酶PCNAγRF-DnaDNA聚合酶RNaseH和DNARNaseH1和MF-DNApolⅠ和DNADNApolε和DNADnaB(定位需DnaTRP- 生物生物化PCR(polymerasechainreaction)PCR技術(shù)是 (K.Mullis)在198
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