NY/T 558-2002牛海綿狀腦病診斷技術(shù)

ICS.11.220B41NY中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T558—2002牛海綿狀腦病診斷技術(shù)Diagnostictechniguesforbovinespongiformencephalopathy2002-08-27發(fā)布2002-12-01實(shí)施中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部發(fā)布

NY/T558-2002牛海綿狀腦病是動(dòng)物傳染性海綿狀腦病的一種，對(duì)動(dòng)物和人有著持久性危害并最終致死，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織WorldOrganizationforAnimalHealth（英）,OfficeIntentionaldesEpizootic(法）,OIE將之列為B類(lèi)動(dòng)物疫病，我國(guó)將其定為一類(lèi)動(dòng)物疫病。本標(biāo)準(zhǔn)是依照OIE的《診斷試驗(yàn)和疫苗標(biāo)準(zhǔn)手冊(cè)》（2000年版》（ManualofstandardsforDiag-nositicTestsandVaccines,2000)第2.3.13章關(guān)于牛海綿狀腦病的診斷技術(shù)規(guī)定制定的。本標(biāo)準(zhǔn)與該文件的差異是：本標(biāo)準(zhǔn)中除癥狀描述(臨床診斷)外，采用該文件規(guī)定的兩項(xiàng)主要技術(shù)即組織病理學(xué)診斷和免疫組織化學(xué)診斷技術(shù)，其他推薦技術(shù)未采用；由于《診斷試驗(yàn)和變苗標(biāo)準(zhǔn)手冊(cè)》對(duì)上述兩項(xiàng)技術(shù)的具體操作程序未作規(guī)定，本標(biāo)準(zhǔn)采用了OIE傳染性海綿狀腦病瑞士參考實(shí)驗(yàn)室（OIETSEReferenceLaboratory,InstituteofAnimalNeurology,UniversityofBern.Switzerland）的操作程序。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B、附錄C為規(guī)范性附錄，本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口，本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：農(nóng)業(yè)部動(dòng)物檢疫所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王志亮、劉雨田、鄒艷麗、王樹(shù)雙，

NY/T558—2002牛海綿狀腦病診斷技術(shù)1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了診斷牛海綿狀腦病(BSE)的技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于生海綿狀腦病的診斷;也可用于其他動(dòng)物的傳染性海綿狀腦?。═SE)的診斷臨床診斷BSE病牛臨床癥狀各種各樣，病程多為數(shù)月至一年，最終死亡。當(dāng)病牛出現(xiàn)以下全部或部分癥狀而又不能確定為其他疾病時(shí)，應(yīng)懷疑BSE的可能。“）行為異常：表現(xiàn)為不安、恐懼、異常震驚或沉郁；不自主運(yùn)動(dòng)，如磨牙、震額;不愿接觸水泥地面或進(jìn)人畜欄等。感覺(jué)或反應(yīng)過(guò)敏：表現(xiàn)為觸、視、聽(tīng)三覺(jué)過(guò)敏。。對(duì)頸部觸摸、光線(xiàn)的明暗變化以及外部聲響過(guò)度敏感，這是BSE病牛重要的臨床表現(xiàn)。C）運(yùn)動(dòng)異常病牛步態(tài)呈“鵝步"狀，共濟(jì)失調(diào)，四肢伸展過(guò)度，有時(shí)倒地，難以站立。d）體重和體況下降。其他動(dòng)物的TSE臨床癥狀不盡相同，但確診須依靠實(shí)驗(yàn)室診斷實(shí)驗(yàn)室診斷發(fā)現(xiàn)可疑病例后，應(yīng)進(jìn)行采樣·送專(zhuān)門(mén)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)3.1采樣將牛頭固定,用電鋸從前額兩牛角根部向枕骨大孔背側(cè)緣方向鋸開(kāi)，使腦部暴露。用剪刀剪開(kāi)腦膜并切斷所有與腦部相連的神經(jīng)和血管，取出整腦。大規(guī)模監(jiān)測(cè)時(shí)，可用專(zhuān)用工具從枕骨大孔處，取出延腦部分即可。3.2固定將完整的腦組織漫人10倍體積的固定液配方見(jiàn)附錄A)中固定。。一周后更換固定液，再維持一周、303組織病理學(xué)診斷3.3.1病料處理3.3.1.1把固定好的腦組織取出,將大腦和小腦去除.橫切腦干選取厚度為3mm～5mm的腦門(mén)部延髓、小腦后腳部延髓和前丘部中腦組織塊。3.3.1.2將選取好的組織塊放人新配的固定液中再固定一周，其間更換固定液三次，并在水平搖床上不斷搖蕩，以提高固定液的滲透力。3.3.1.3將固定好的組織塊放人流水中漂洗24h。3.3.1.4