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文檔簡介
實驗2分離以尿素為氮源的一.實驗原理
尿素NH3
中性堿性
酚紅顏色:
(酸性)黃色
紅色(變色范圍
pH6.4-8.2)二.實驗目的使用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基分離細菌(有脲酶)通過指示劑(酚紅)顏色的變化檢知培養(yǎng)基pH的變化(脲酶催化的化學反應)配制培養(yǎng)基尿素培養(yǎng)基葡萄糖0.025gNaCl0.12gK2HPO40.12g
瓊脂糖0.5g
酚紅0.25g
尿素
10mlLB培養(yǎng)基蛋白胨:0.25g酵母提取液:0.12gNaCl:0.25g
瓊脂糖:0.5g
對照組選擇培養(yǎng)基實驗組為什么用瓊脂糖代替瓊脂?怎么獲得無菌的尿素溶液?接種取0.1ml菌懸液涂布分離37℃倒置培養(yǎng)按濃度捆成一摞恒溫37℃培養(yǎng)1、為什么要用瓊脂糖代替瓊脂配置固體培養(yǎng)基因為瓊脂是未被純化的混合物,內(nèi)含一定量的含氮化合物。如果用瓊脂固化培養(yǎng)基,會為細菌提供一定量的非尿素類氮源,這樣會在尿素固體培養(yǎng)上產(chǎn)生大量以非尿素為氮源的細菌,不利于以尿素為氮源的細菌的篩選,故用純化的瓊脂糖而不用瓊脂做固化劑思考題:2、有脲酶的細菌在生態(tài)穩(wěn)態(tài)上起什么作用土壤中的尿素在較高溫度下會被水解成氨,氨使土壤堿化,氨還與SO42-等離子形成化合物,使土壤板結(jié)。而脲酶的細菌不僅使動植物尸體降解,而且利用了所形成的氨,有利于自然界中氮的循環(huán)。4、與全營養(yǎng)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)比較,為什么尿素培養(yǎng)基上只有少數(shù)菌落
表明能利用尿素的細菌在土壤菌落中只占有極少數(shù)。5.本實驗分離
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