對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座

第八章對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥品分析

對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第1頁(yè)序言局麻藥品化學(xué)結(jié)構(gòu)親脂性芳環(huán)中間連接功效基團(tuán)親水性胺基局麻藥是一類(lèi)能在局部可逆性地阻斷感覺(jué)神經(jīng)沖動(dòng)發(fā)生與傳導(dǎo)藥品對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第2頁(yè)序言親脂性芳環(huán)中間連接功效基團(tuán)親水性胺基對(duì)氨基苯甲酸酯對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第3頁(yè)序言親脂性芳環(huán)中間連接功效基團(tuán)親水性胺基酰苯胺對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第4頁(yè)一、對(duì)氨基苯甲酸酯類(lèi)藥品基本結(jié)構(gòu)與經(jīng)典藥品含有對(duì)氨基苯甲酸酯母體第一節(jié)

結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)中芳伯氨基未被取代，而在芳環(huán)對(duì)位有取代對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第5頁(yè)對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第6頁(yè)對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第7頁(yè)對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第8頁(yè)芳伯氨基酯鍵,易水解脂烴胺Cl－反應(yīng)

鹽酸普魯卡因?qū)Π被郊姿狨ズ王１桨奉?lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第9頁(yè)二、酰苯胺類(lèi)藥品基本結(jié)構(gòu)與經(jīng)典藥品☆

芳伯氨基被?；?/p>

☆

共性為含有芳酰氨基對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第10頁(yè)鹽酸利多卡因?qū)Π被郊姿狨ズ王１桨奉?lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第11頁(yè)鹽酸布比卡因?qū)Π被郊姿狨ズ王１桨奉?lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第12頁(yè)鹽酸羅哌卡因?qū)Π被郊姿狨ズ王１桨奉?lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第13頁(yè)三、主要化學(xué)性質(zhì)1、芳伯氨基特征

對(duì)氨基苯甲酸酯類(lèi)：含有芳伯氨基（鹽酸丁卡因除外）可顯重氮化-偶合反應(yīng)與芳醛縮合易氧化變色亞硝酸鈉滴定法對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第14頁(yè)酰苯胺類(lèi)：具芳酰氨基，酸性條件下水解產(chǎn)物具芳伯氨基鹽酸利多卡因鹽酸布比卡因鹽酸羅哌卡因鹽水溶液較穩(wěn)定原因：酰胺基鄰位存在兩個(gè)甲基，受空間位阻影響，較難水解對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第15頁(yè)2、水解特征：

水解速度受光、熱或堿性條件影響3、弱堿性：

脂烴胺側(cè)鏈為叔胺氮原子（苯佐卡因除外），含有弱堿性

要采取非水溶液滴定法與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第16頁(yè)4、溶解性：

具芳伯氨基，或同時(shí)具脂烴胺側(cè)鏈，游離堿多為堿性油狀物或低熔點(diǎn)固體，難溶于水，可溶于有機(jī)溶劑

鹽酸鹽均為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，含有一定熔點(diǎn)。在水和乙醇中易溶，難溶于乙醚、氯仿等有機(jī)溶劑

普魯卡因鹽酸鹽水溶液加氫氧化鈉或碳酸鈉溶液，有油狀普魯卡因析出對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第17頁(yè)5、與重金屬離子反應(yīng)特征酰苯胺類(lèi)酰胺氮可與銅離子或鈷離子絡(luò)合，生成有色配位化合物?？扇苡诼确碌扔袡C(jī)溶劑。6、UV,IR對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第18頁(yè)第二節(jié)判別試驗(yàn)一、重氮化-偶合反應(yīng)注意：在判別時(shí)，首先要使溶液成酸性，然后才能滴加亞硝酸鈉試液及堿性β一萘酚試劑。對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第19頁(yè)直接：鹽酸普魯卡因、苯佐卡因、鹽酸氯普魯卡因、鹽酸普魯卡因胺對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第20頁(yè)鹽酸普魯卡因判別（直接）對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第21頁(yè)特例：鹽酸丁卡因COOCH2CH2N(CH3)2CH3(CH2)3NHHCl分子結(jié)構(gòu)中不具芳伯氨基芳香仲胺芳香仲胺酸性亞硝酸鈉試液乳白色N-亞硝基化合物沉淀與含有芳伯氨基同類(lèi)藥品區(qū)分對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第22頁(yè)二、與重金屬離子反應(yīng)

1.與銅和鈷離子反應(yīng)

對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第23頁(yè)3．羥肟酸鐵鹽反應(yīng)

2．與汞離子反應(yīng)

對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第24頁(yè)1.鹽酸普魯卡因判別

三、水解產(chǎn)物反應(yīng)鹽酸普魯卡因+NaOH普魯卡因油狀物對(duì)氨基苯甲酸鈉+二乙氨基乙醇（使?jié)駶?rùn)紅色石蕊試紙變藍(lán)色）對(duì)氨基苯甲酸鈉+HCl對(duì)氨基苯甲酸（白色）（白色沉淀）對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第25頁(yè)+△使?jié)駶?rùn)紅色石蕊試紙變藍(lán)HCl對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第26頁(yè)2.苯佐卡因判別

苯佐卡因+NaOH乙醇乙醇+I2+NaOHCHI3（碘仿臭氣，黃色沉淀）對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第27頁(yè)

四、制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)1．三硝基苯酚衍生物

鹽酸利多卡因ChP（）[判別]取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚試液10ml，即生成沉淀；濾過(guò)，沉淀用水洗滌后，干燥，依法測(cè)定（附錄ⅥC），熔點(diǎn)為228～232℃，熔融時(shí)同時(shí)分解。鹽酸布比卡因ChP（）（熔點(diǎn)：194℃

）對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第28頁(yè)2.硫氰酸鹽衍生物

鹽酸丁卡因ChP（）[判別]（1）取本品約0.1g，加5%醋酸鈉溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸銨溶液1ml，即析出白色結(jié)晶；濾過(guò)，結(jié)晶用水洗滌，在80℃干燥，依法測(cè)定（附錄ⅥC），熔點(diǎn)約為131℃。對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第29頁(yè)五、紫外特征吸收光譜法1.在λmax處測(cè)定供試液吸光度。

比如：鹽酸布比卡因在0.01mol/L鹽酸中（0.40mg/ml），于λmax=263nm和λmax=271nm測(cè)定最大吸收，其吸光度分別為0.53～0.58與0.43～0.48

在要求濃度測(cè)定λmax

比如：鹽酸普魯卡因胺片，5μg/ml，在λmax=280nm處有最大吸收。對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第30頁(yè)六、紅外吸收光譜法

鹽酸普魯卡因ChP（）

鹽酸普魯卡因胺[判別]（3）本品紅外光吸收?qǐng)D譜與對(duì)照?qǐng)D譜一致。對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第31頁(yè)3500~3100cm-1N-H2645cm-1N-H+1600cm-11511cm-1C=C1640cm-1C=O1280cm-1對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第32頁(yè)第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢驗(yàn)一、鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸檢驗(yàn)

雜質(zhì)：滅菌溫度、時(shí)間、pH、貯藏時(shí)間、光、金屬離子等影響對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第33頁(yè)

ChP要求：鹽酸普魯卡因及其注射液、注射用鹽酸普魯卡因檢驗(yàn)對(duì)氨基苯甲酸雜質(zhì)

限量：原料、注射用滅菌粉0.5%注射液1.2%

檢驗(yàn)方法版：HPLC法

對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第34頁(yè)二、鹽酸氯普卡因注射液中相關(guān)物質(zhì)和光解產(chǎn)物檢驗(yàn)

因?yàn)辂}酸氯普卡因注射液在生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生4-氨基-2-氯苯甲酸，影響療效和成品顏色，故此需要對(duì)降解產(chǎn)物進(jìn)行檢驗(yàn)1、高效液相色譜法（HPLC）2、高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)使用方法（LC-MS）對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第35頁(yè)LC-MS分析：1、色譜條件ZobaxSB-C18(150mm×4.6mm,i.d.,5μm)Columntemperature:25℃Mobilephase:0.5%HAc-CH3CN(0.5%HAc)=87:13flowrate:1.0ml/minDetectionwavelength:254nm對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第36頁(yè)2、質(zhì)譜條件PositiveScanmode80~600mau噴霧電壓：4000V裂解電壓：70V干燥氣（N2）：9.5L/min干燥氣壓力：40psi干燥氣溫度：350℃對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第37頁(yè)三、鹽酸利多卡因注射液中2,6—二甲基苯胺及其它雜質(zhì)檢驗(yàn)

采取高效液相色譜法限量：2,6—二甲基苯胺0.04%其它單個(gè)雜質(zhì)0.5%其它雜質(zhì)總限量1.0%

對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第38頁(yè)四、鹽酸羅哌卡因?qū)τ丑w純度檢驗(yàn)長(zhǎng)期有效酰胺類(lèi)局麻藥，R-鹽酸羅哌卡因心臟毒性大臨床使用S－鹽酸羅哌卡因檢驗(yàn)方法：毛細(xì)管電泳法對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第39頁(yè)第四節(jié)含量測(cè)定一、亞硝酸鈉滴定法1、原理終點(diǎn)指示：永停法（外指示劑法）對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第40頁(yè)例：中國(guó)藥典收載有☆含有芳伯氨基藥品——鹽酸普魯卡因及其注射劑、苯佐卡因、鹽酸普魯卡因胺及其片劑與注射劑、注射用鹽酸普魯卡因☆含有潛在芳伯氨基藥品醋氨苯砜及其注射液具酰胺,經(jīng)水解對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第41頁(yè)芳香族硝基化合物,經(jīng)還原無(wú)味氯霉素對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第42頁(yè)2、主要測(cè)定條件（1）加入適量KBr加速反應(yīng):KBr為催化劑不一樣酸影響反應(yīng)速度：HBr>HCl>HNO3、H2SO4NaNO2+HCl→HNO2+NaClK1K2K1≈300K2加入KBr，可增大被測(cè)溶液中NO+濃度在鹽酸存在下重氮化反應(yīng)對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第43頁(yè)（2）加過(guò)量鹽酸作用：胺類(lèi)藥品鹽酸鹽比硫酸鹽溶解度大能夠加緊重氮化反應(yīng)速度

增加重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定性

預(yù)防偶氮氨基化合物生成結(jié)論：加速反應(yīng)注意事項(xiàng)：酸度不能過(guò)大

會(huì)妨礙芳伯氨基游離，影響反應(yīng)速度可使亞硝酸分解

芳胺類(lèi)藥品:酸摩爾比=1:2.5～6對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第44頁(yè)（3）控制溫度：在10～30℃條件下滴定溫度每升高lO℃，重氮化反應(yīng)則加緊2.5倍，但重氮鹽分解速度亦對(duì)應(yīng)地加速2倍

若溫度過(guò)低，反應(yīng)又太慢對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第45頁(yè)（4）滴定管尖端插入液面下滴定

滴定速度：先快后慢

滴定時(shí)將滴定管尖端插入液面下約2/3處，一次把大部分亞硝酸鈉滴定液在攪拌下快速加入，使其盡快反應(yīng)

將滴定管尖端提出液面，用少許水淋洗尖端，再緩緩滴定

在近終點(diǎn)時(shí)，剩下芳伯氨基濃度極稀，需在最終一滴加入后，攪拌1～5min，再確定終點(diǎn)是否真正抵達(dá)對(duì)氨基苯甲酸酯和酰苯胺類(lèi)局麻藥物的分析專(zhuān)家講座第46頁(yè)3.指示終點(diǎn)方法

(1)永停滴定法溶液檢流計(jì)終點(diǎn)前：無(wú)過(guò)量無(wú)電流HNO2

終點(diǎn)時(shí)：有過(guò)量有電流（使指針偏離零HNO2永停在某一位置）(2)外指示劑法用KI-淀粉指示劑