腫瘤免疫治療新方法

PAGEPAGE10自體細(xì)胞免疫療法CIK（cytokine-inducedkiller種細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞）是將人外周血單個核細(xì)胞在體外用多種細(xì)胞因子（如抗CD3IL-2IFN-γ等）共同培養(yǎng)一段時間后獲得CD3+和CD56+兩種膜蛋NKTTNKMHCCIK細(xì)胞中的效應(yīng)細(xì)胞CD3+和CD56+細(xì)胞在正常人外周血中極其罕見，僅1%—5%。[1]CIK特點CIKCD3+CD56+細(xì)胞在正常人外周血中極28～301000CD3+CD56CD3+CD56-TCD3-CD56+NKCD3+CD56-的TCD4-CD8-TT（CD4-CD8CD4-CD8-、CD4+CD8+）均可通過體外多因子培養(yǎng)而獲得CD56分子的表達(dá)，CD4+CD8CD4-CD8CD3+CD56+細(xì)胞絕大多數(shù)來源于外周血中CD4-CD8+TCD4-CD8-T1TCD56CD3CIKCD3+CD56+CIKCD8+和CD8-,的兩群細(xì)胞其CIKCD3CD56CD8殺傷原理CIK細(xì)胞能夠通過三種途徑殺滅腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞：①CIKCIK可以通過不同的機制識別腫瘤細(xì)胞，釋放顆粒酶/穿孔素等毒性顆粒，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞裂解。②CIKCIKIFN-γ、TNF-α、IL-2③CIKCIK型跨膜糖蛋白型跨膜糖蛋白）結(jié)合，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。CIK細(xì)胞發(fā)揮作用的三種途徑殺瘤特點LAKLAKTIL等TLAK及在收集過程中可能導(dǎo)致的功能改變而限制了其臨床應(yīng)用價值。增殖速度快CIKIFN-γ、IL-1αCD3、McAbIL-2LAK22100CD3+CD56+100028～30LAK殺瘤活性高CIK細(xì)胞是以CD3+CD56+T細(xì)胞為主的異質(zhì)細(xì)胞群，大量體內(nèi)外實驗證實CIK以NKLAKIL-2Lu在體外等數(shù)量的CIKLAKCIKCD3+CD56+效應(yīng)細(xì)胞增長CIK（TLU）LAK73LAKCIK細(xì)胞的瘤細(xì)胞抑制Log指數(shù)為2.5～3.5LAK細(xì)胞的瘤細(xì)2Log。體內(nèi)實驗發(fā)現(xiàn)，對于在嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠身上構(gòu)建的人類B細(xì)胞淋巴瘤SU-DHL4CIK細(xì)胞在LAK殺瘤譜廣CIKCD3+CD56+TMHC（包NKK562NKHelaHL60TOCRF-CEMOCI-LY8、LAM53，人結(jié)HT-29均表現(xiàn)出強大的殺傷活性。對多重耐藥腫瘤細(xì)胞同樣敏感WolfK562/DOXCCRF-CEM-VBLCIK細(xì)胞對化療藥物敏感的親本細(xì)胞和不敏感的轉(zhuǎn)化細(xì)胞均具有強大的殺傷活性，兩者比較無差別。CsA、FK506MehtaCsAFK506CD3CIKCIKCIK對正常骨髓造血前體細(xì)胞毒性很小SeheffoldCFU-GMCIKCIKK5623GM-CFU1HolyeCIKCIKIFN-γ有關(guān)。Fas-FasL已證明過繼免疫治療失敗的一個重要原因是過繼效應(yīng)細(xì)胞被（FasVernerisCIKcFLIP、Bcl-2、Bcl-X1、DAD1survivinCIKFasLCIK細(xì)胞培養(yǎng)上清中可以檢測到具生物學(xué)活性的水溶性FasLCIK細(xì)胞可以對抗體內(nèi)FasL效應(yīng)細(xì)胞活性下降甚至消失。影響殺傷活性的因素外源性細(xì)胞因子的補充CIKIL-2、IL-7、IL-12IL-2IL-7IL-12IL-2IL-7CIKIL-2、IL-7、IL-12CIKIL-2IL-7CIKCD28IL-7IL-12CIKICAM-1則會提高CD56IL-2IL-7可明顯增加IL-2、IL-7IL-12IL-12抗CD3McAbCIKLefterovCD3McAbCIKFcR（如CD36CD32）CD3McAbFcR多種細(xì)胞因子基因的轉(zhuǎn)染CIKCIKCIKIL-7：FitkeIL-7CIKIL-7，最多者1100pg/106cell/24hIL-7CIKCIKTNF-αCIKIL-7CIKICAM-1CIKCIKCIKIL-2Lu等發(fā)現(xiàn)CIK細(xì)胞培養(yǎng)過程中CD56分子的表達(dá)是IL-2CIKCIKIL-2ZollIL-2CIKSchmidt-WolfIL-2CIKIL-2（330-1800pg/106836pg/106cell/24h）CIKCIK細(xì)胞在增殖率和細(xì)胞殺傷活性上均高于未轉(zhuǎn)染細(xì)胞。制備流程CIK細(xì)胞制備流程37℃，5%的二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育2h，使用高速離心機分離，收集懸浮細(xì)胞，在體外（模擬人體內(nèi)環(huán)境），CD3IFN-R，IL-22-37、11、13、15CIKCD3+和CD561000發(fā)展歷程1985IL-2LAKCD3INF-r、IL-1CD3\CD8\CD56LAK1991SchmidtWolfCIK胞。國內(nèi)臨床應(yīng)用情況和相關(guān)政策法規(guī)1996CIK的相關(guān)臨床應(yīng)用與研究。根據(jù)國際國內(nèi)細(xì)胞治療臨床應(yīng)用的進(jìn)展?fàn)顩r，200951疫細(xì)胞治療技術(shù)”列為三類