實驗診斷學臨床5

免疫學檢查由于具有特異性和敏感性，在實驗診斷中應用越來越廣泛。目前一頁\總數(shù)九十九頁\編于十點

immuneresponse抗原B淋巴細胞吞噬細胞T淋巴細胞致敏T淋巴細胞cytokine

漿細胞antibodyT記憶細胞B記憶細胞NKcomplement其它目前二頁\總數(shù)九十九頁\編于十點常用免疫檢測免疫檢測體液免疫細胞免疫腫瘤標志物自身自身免疫感染免疫檢查移植免疫目前三頁\總數(shù)九十九頁\編于十點常用免疫檢測方法常用免疫學檢測方法發(fā)光物標記免疫分析酶標記、核素標記免疫分析快速金標記技術(shù)流式細胞免疫技術(shù)免疫印跡免疫比濁免疫沉淀目前四頁\總數(shù)九十九頁\編于十點做免疫學檢查思考點方法特異性時效性免疫抑制劑等藥物影響檢測物質(zhì)性質(zhì)正常值依據(jù)不同檢測系統(tǒng)思考點方法靈敏性(參考值不一致性）目前五頁\總數(shù)九十九頁\編于十點第一節(jié)：體液免疫檢查體液免疫檢查主要包含：免疫球蛋白(immunoglobulin)補體(complement)目前六頁\總數(shù)九十九頁\編于十點一、免疫球蛋白測定免疫球蛋白是一組具有抗體活性的球蛋白，由漿細胞合成分泌。免疫球蛋白基本結(jié)構(gòu)根據(jù)重鏈抗原性可分為5類（α、γ、μ、δ、ε），每個Ig只能和一種輕鏈結(jié)合（κ或λ）。目前七頁\總數(shù)九十九頁\編于十點IgGIgAIgMIgE特性主要特性生理變化IgG約占總Ig75%，能通過胎盤（新生兒獲得免疫抗體），次級免疫應答。孕期22-28周含量與母體基本相同，出生3-4月最低，16歲前達成人水平。IgA分為血清和分泌型，血清型占總Ig10-15%，SIgA存在于分泌液中與局部抗感染相關。新生兒含量很低，16歲前達成人水平。IgM初級免疫應答，可以五聚體形式存在，占總Ig5-10%，具很強凝集抗原作用。20周起合成，新生兒為成人10%，8-10歲達成人水平。IgE血清中含量最低Ig，占總Ig0.002%，介導Ⅰ型過敏反應。新生兒含量極低，12歲前達成人水平。目前八頁\總數(shù)九十九頁\編于十點免疫球蛋白合成、分泌及主要功能合成分泌主要功能IgG脾和淋巴結(jié)中漿細胞抗細菌、抗病毒、抗毒素，可通過胎盤、可被動免疫、預防接種產(chǎn)生主要抗體。IgA腸系淋巴組織中漿細胞抗細菌、抗病毒、抗毒素，尤其分泌型在消化道、呼吸道等管腔抗感染。IgM脾和淋巴結(jié)中漿細胞感染后最早出現(xiàn)，殺菌、溶菌、溶血、凝集作用明顯。IgE粘膜固有層中漿細胞分泌參與I型變態(tài)反應目前九頁\總數(shù)九十九頁\編于十點IgGIgAIgMIgE病理變化增高降低IgG慢性感染、慢性肝炎、肝硬化、淋巴瘤、和某些自身免疫性疾?。ㄈ鏢LE)，免疫增殖疾病（如MM）。先天免疫缺陷，獲得性免疫缺陷（如腎病綜合征，營養(yǎng)不良），使用免疫抑制劑，重鏈和輕鏈病等。IgA慢性感染、慢性肝炎、肝硬化、淋巴瘤、和某些自身免疫性疾?。ㄈ鏢LE)，免疫增殖疾?。ㄈ鏜M），腎病。IgA降低見于呼吸道反復感染者，先天免疫缺陷，獲得性免疫缺陷（如腎病綜合征，營養(yǎng)不良），重鏈和輕鏈病等。IgM同IgG外，宮內(nèi)感染可急劇增高?；就琁gGIgE同IgG外過敏性疾病可明顯增，寄生蟲感染，間質(zhì)性肺炎等，特異性IgE增高與過敏原相關。基本同IgG目前十頁\總數(shù)九十九頁\編于十點慢性肝炎導致Ig增高機理隨著肝炎病情的加重和時間延長，受損的肝細胞作為自身抗原刺激淋巴系統(tǒng)，分泌大量抗體，使IgG、IgM及IgA同時增高，以IgG增高為主。肝硬化時肝細胞發(fā)生片狀壞死，造成枯否氏細胞(Kupffercell)功能失調(diào)，不能有效地發(fā)揮吞噬濾過作用，失去對抗原的處理能力，使門靜脈血中的抗原不能被清除，抗體形成增多。肝臟免疫系統(tǒng)功能嚴重失調(diào)，從而導致B淋巴細胞失控。目前十一頁\總數(shù)九十九頁\編于十點二、M蛋白檢測M蛋白（monoclonalimmunoglobulins）：由一種單克隆B淋巴細胞異常增殖所產(chǎn)生，具有相同結(jié)構(gòu)和電泳遷移率的免疫球蛋白分子或其分子片段（如輕鏈），一般不具抗體活性。簡述免疫球蛋白合成正常情況合成一條重鏈需要18分鐘，合成一條輕鏈只需10分鐘，組成一條完整的Ig就會有一條多輕鏈過剩，過剩的輕鏈分泌到細胞外，10%腎小管內(nèi)分解代謝，80%重吸收，10%排出體外（<20ug/ml)。正常合成Ig，一個Ig分子只能和一種輕鏈結(jié)合，Ig輕鏈κ/λ之比為2：1。目前十二頁\總數(shù)九十九頁\編于十點M蛋白檢測臨床意義陽性主要見于

1.多發(fā)性骨髓瘤

2.巨球蛋白血癥

3.重鏈病

4.半分子病

5.惡性淋巴瘤

6.良性M蛋白血癥

目前十三頁\總數(shù)九十九頁\編于十點過敏原檢測吸入性和食入性多項特異性IgE抗體檢測（I型過敏反應）特異性IgE指能與過敏原特異性結(jié)合的IgE。特異性IgE是尋找Ⅰ型過敏反應變應原、并進行治療較好方法。原理將各種過敏原（如花粉、牛奶）與患者血清反應，血清中存在特異性IgE則呈陽性反應。

多項食物特異性IgG抗體檢測（食入性）（III型過敏反應）目前十四頁\總數(shù)九十九頁\編于十點其它臨床常用檢測項目介紹血液、尿液免疫球蛋白總輕鏈檢測血液、尿液免疫球蛋白游離輕鏈檢測血液免疫球蛋白IgG4檢測目前十五頁\總數(shù)九十九頁\編于十點二、血清補體檢測（complement）

補體是主要由巨噬細胞分泌存在于新鮮血液中具有酶樣活性的球蛋白，補體不耐熱易降解，故補體檢測須用新鮮血清。補體有C1-C9(經(jīng)典途徑）及BF、DF、PF、HF、IF（旁路途徑）和補體調(diào)節(jié)因子組成。臨床常作總補體活性（CH50）和單一因子C3、C4、BF及C1q檢測。目前十六頁\總數(shù)九十九頁\編于十點補體兩條激活途徑區(qū)別

經(jīng)典途徑：抗原抗體復合物激活C1和C4、2，形成C3轉(zhuǎn)化酶，然后是C5、6、7、8、9的激活，最后導致靶細胞溶解。

傍路途徑：是細菌的內(nèi)毒素和其它有關因子，直接激活C3，再是C5、6、7、8、9的激活，最后導致靶細胞溶解。

不同點是路徑不一樣，傍路途徑可最快地發(fā)揮效應，達到溶靶細胞作用。

其次是激活物質(zhì)不一樣，經(jīng)典路徑激活物質(zhì)是抗原抗體復合物，產(chǎn)生后才能激活C1，所以需要時間長。傍路途經(jīng)激活物質(zhì)是內(nèi)毒素，細菌感染后一經(jīng)釋放內(nèi)毒素就能激活C3，所以有最快的反應。

目前十七頁\總數(shù)九十九頁\編于十點目前十八頁\總數(shù)九十九頁\編于十點總補體溶血活性（CH50)檢測

增高急性感染、急性組織損傷、惡性腫瘤和風濕病早期，補體增高常與其它血漿蛋白改變相伴隨。降低自身免疫性疾病SLE的活動期急性腎小球腎炎冷球蛋白血癥等嚴重肝病變先天性缺乏SRBCAbcSRBCAb目前十九頁\總數(shù)九十九頁\編于十點C3、C4、C1q、B因子檢測參與途徑降低增高C3經(jīng)典、旁路1）合成障礙2）消耗過多3）先天缺乏1）急性炎癥2）急性組織損傷3）排異反應C4經(jīng)典C1q經(jīng)典B因子旁路目前二十頁\總數(shù)九十九頁\編于十點第二節(jié)細胞免疫檢查

淋巴細胞占外周血白細胞總數(shù)的20%～40%，是機體免疫系統(tǒng)主要細胞，主要有TLC、BLC、NK、KC，淋巴細胞進一步可分為很多亞型。目前二十一頁\總數(shù)九十九頁\編于十點淋巴細胞表面標志檢測簇分化抗原CD（Clusterofdifferentiation）:細胞在發(fā)育分化過程中，細胞表面抗原物質(zhì)發(fā)生變化，CD抗原即指細胞變化過程中不同時期產(chǎn)生的抗原。目前臨床CD4（TH）與CD8（TS）檢測應用廣泛。簇分化抗原檢測方法目前較多采用流式細胞儀技術(shù)進行分析，流式細胞免疫分析技術(shù)為特異抗體加標記技術(shù)加單細胞檢測。特點：特異性、靈敏性高、檢測精密度均較以前手工操作高很多。目前二十二頁\總數(shù)九十九頁\編于十點流式細胞儀檢測簡介

目前二十三頁\總數(shù)九十九頁\編于十點一、T細胞表面標志檢測CD3（總成熟T細胞）、E玫瑰花試驗檢測臨床意義

增高：甲亢、淋巴細胞性甲狀腺炎、重癥肌無力、器

官移植后排異反應

減低：AIDS、胸腺發(fā)育不良、聯(lián)合免疫缺陷、也可見

于放療和化療及免疫抑制類藥物治療

CD4、CD8檢測臨床意義

CD4+增高：類風濕關節(jié)炎活動期，自身免疫疾病

CD4+減低：AIDS等病毒感染、免疫抑制劑治療、嚴重

創(chuàng)傷、大手術(shù)等

CD8+增高：傳染性單核細胞增多癥和巨細胞病毒感染

急性期、慢性乙型肝炎等

CD8+降低：部分自身免疫性疾病、Ⅰ型糖尿病等目前二十四頁\總數(shù)九十九頁\編于十點T淋巴細胞表面標志檢測E玫瑰花形成實驗（細胞表面受體概念）TCSRBCSRBCSRBCSRBCSRBCSRBCSERSERSERSERSERSER目前二十五頁\總數(shù)九十九頁\編于十點二、B細胞表面標志檢測B細胞表面抗原和表面受體檢測臨床意義

表面抗原CD19、CD20、CD21、CD22

CD19增高：B細胞系統(tǒng)惡性腫瘤

CD19降低：體液免疫缺陷疾病

D20在B細胞激活后逐步降低

CD21為EB病毒和CD3受體

CD22在B細胞激活時逐步增高

SmIgB細胞表面特異性標志

SmIg增高：B細胞惡性增殖相關疾病，如慢淋、毛細胞白血病、巨球蛋白血癥。

SmIg降低：體液免疫缺陷相關疾病目前二十六頁\總數(shù)九十九頁\編于十點CD4/CD8測定臨床意義CD4/CD8測定臨床意義

增高：多見于自身免疫性疾病，如類風關活動期、多發(fā)性硬化癥、SLE、器官移植后排異反應、膜性腎小球腎炎等

降低：AIDS、瘤型麻風病、惡性腫瘤發(fā)作期、傳染性單核細胞增多癥、巨細胞病毒感染急性期、血吸蟲病等。目前二十七頁\總數(shù)九十九頁\編于十點三、淋巴細胞功能檢測NK細胞活性測定意義目前一般用流式細胞技術(shù)

NK細胞無需抗原刺激可直接殺傷靶細胞，可釋放r干擾素（IFN-r）、β腫瘤壞死因子（TNF-β）和集落刺激因子（GM-CSF）,在機體抗腫瘤和抗感染免疫中發(fā)揮重要作用

增高：感染早期，器官移植干擾素等免疫增強劑治療。

降低：惡性腫瘤，免疫缺陷疾病，使用免疫抑制劑。抗體依賴性細胞介導的細胞毒測定（antibodydependentcellmediatedcytotoxicity，ADCC）增高：自身免疫性疾病，移植免疫等降低：惡性腫瘤、免疫缺陷、慢性肝炎、腎功能衰竭等目前二十八頁\總數(shù)九十九頁\編于十點三、細胞因子檢查細胞因子是由免疫細胞及相關細胞產(chǎn)生，特點高活性、多功能，一般為低分子蛋白。細胞因子種類繁多，功能復雜，多種因子可具有相同功能，各種細胞因子間可互相作用，細胞因子功能同時受到細胞因子受體功能影響，因此在選擇檢測項目和結(jié)果分析時要綜合考慮。目前二十九頁\總數(shù)九十九頁\編于十點四、細胞因子檢查細胞因子種類繁多，功能復雜，多種因子可具有相同功能，各種細胞因子間可互相作用，細胞因子功能同時受到細胞因子受體功能影響，因此在選擇檢測項目和結(jié)果分析時要綜合考慮。目前三十頁\總數(shù)九十九頁\編于十點細胞因子產(chǎn)生細胞靶細胞對靶細胞主要作用IL-2TLTLNKBL促進生長和細胞因子產(chǎn)生促進生長和活化生長及抗體合成IL-6MC、TL、內(nèi)皮細胞TL&BL成熟BL肝臟輔助刺激濟生長急性期反應物TNF腫瘤壞死因子MC、TLPMN內(nèi)皮細胞丘腦下部肝臟肌肉脂肪TL&BL活化（炎癥）活化（炎癥、凝集）發(fā)熱急性期反應物（血清淀粉樣A蛋白）分解蛋白（惡病質(zhì)）輔助刺激劑IFN干擾素纖維母細胞、MC所有NK抗病毒，抑制細胞增殖，加強MHC1類表達和活化目前三十一頁\總數(shù)九十九頁\編于十點目前診治常用檢查提問希望目前常用檢查首選甲肝早期？HAV-IgGHAV-IgMHAV-IgAHAV-IgE感染過甲肝？HAV-IgGHAV-IgMHAV-IgAHAV-IgE哮喘花粉引起？特異性IgG特異性IgM特異性IgA特異性IgE多發(fā)性骨髓瘤？補體CD4+免疫球蛋白細胞因子自身免疫病緩解？補體CD4+免疫球蛋白細胞因子艾滋病期判斷？補體CD4+/CD8+免疫球蛋白HIV-Ab乙肝疫苗接種情況HBV-IgGHBV-IgMHBV-IgAHBV-IgE懷疑鼻咽癌？EBV-IgGEBV-IgMEBV-IgAEBV-IgE目前三十二頁\總數(shù)九十九頁\編于十點診斷試驗評價的幾個常用指標敏感度（Sensitivity）特異度（specificity）受試者工作特征曲線（accuracyoperatingcharacteristic）目前三十三頁\總數(shù)九十九頁\編于十點敏感度ClinicalSensitivity指由標準診斷法（金標準）確診的病例組中經(jīng)所選實驗查出陽性例數(shù)，余下既為假陰性。臨床敏感度實驗真陽性數(shù)實驗（真陽性+假陰性）（金標準陽性數(shù)）100%目前三十四頁\總數(shù)九十九頁\編于十點特異度ClinicalSpecificity指標準診斷方法確診無病的對照組中經(jīng)所選實驗方法查出陰性例數(shù)，余下為假陽性。臨床特異度實驗真陰性數(shù)實驗（真陰性+假陽性）（金標準陰性數(shù)）100%目前三十五頁\總數(shù)九十九頁\編于十點試驗敏感度和特異度選擇一個理想實驗方法，最佳臨界值，從理論上講特異度和敏感度最好都為100%，而實際上是不太可能的。敏感度和特異度一般呈反比關系，通常采用統(tǒng)計學理論結(jié)合具體疾病選擇最合適特異度和敏感度。高敏感度實驗適用于：初篩、初步診斷或排除診斷為目的。高特異度試驗適用于：確診為目的時一般選擇高特異度。凡假陽性結(jié)果會導致病人精神和肉體上嚴重危害，例如腫瘤、HIV攜帶者要選擇高特異度。目前三十六頁\總數(shù)九十九頁\編于十點理想狀態(tài)試驗敏感度和特異度真陽性例數(shù)真陰性假陰性假陽性定量試驗結(jié)果值金標準+金標準-臨界值特異度100%敏感度100%（理想）臨界值目前三十七頁\總數(shù)九十九頁\編于十點假設：某項目檢測臨界值為15ng/ml真陽性例數(shù)真陰性假陰性假陽性試驗結(jié)果值金標準+金標準-臨界值15ng/ml臨界值目前三十八頁\總數(shù)九十九頁\編于十點假設：高敏感度情況（臨界值降低為5ng/ml）真陽性例數(shù)真陰性假陰性假陽性試驗結(jié)果值金標準+金標準-臨界值5ng/ml臨界值目前三十九頁\總數(shù)九十九頁\編于十點用ROC曲線選擇臨界值和試驗方法ROC曲線在評價臨床檢驗指標時，可表示該指標敏感度與特異度之間關系。根據(jù)曲線不僅可得到?jīng)Q定區(qū)分正常與異常臨界點的重要信息，還可用于針對同一疾病不同診斷試驗間比較。目前四十頁\總數(shù)九十九頁\編于十點同一腫瘤二種腫瘤標志物選擇1000255075100敏感度%假陽性率（1-特異度）%腫瘤標志物1腫瘤標志物20255075ROC曲線目前四十一頁\總數(shù)九十九頁\編于十點目前四十二頁\總數(shù)九十九頁\編于十點第三節(jié)腫瘤標志物檢測腫瘤標志物概念：一般而言，TM是指存在于腫瘤細胞內(nèi)或腫瘤細胞表達及脫落的物質(zhì)，或是宿主對腫瘤反應而產(chǎn)生的物質(zhì)。由于腫瘤發(fā)生、發(fā)展原因至今尚未完全解決，提示腫瘤的標志也并未完全明確，所以腫瘤標志物概念還有待補充和修正。目前四十三頁\總數(shù)九十九頁\編于十點廣義上腫瘤標志物是指與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、消亡相關的各種物質(zhì)。腫瘤細胞本身產(chǎn)生的腫瘤標志物常分為兩類：

1）當理化、病毒、遺傳等因素引起正常細胞內(nèi)基因突變而發(fā)生癌變時，癌變細胞內(nèi)及表達在其表面的蛋白質(zhì)等成份發(fā)生某種變化，形成腫瘤抗原，這種抗原可以表達在正常細胞，而腫瘤細胞表達高。也可因腫瘤導致組織結(jié)構(gòu)變化，腫瘤抗原進入血液，如PSA；或僅在胚胎組織中表達，正常成人細胞中不表達，在發(fā)生腫瘤時又重新表達，如AFP、CEA。目前四十四頁\總數(shù)九十九頁\編于十點2）由腫瘤細胞產(chǎn)生的特殊抗原，這種抗原在性質(zhì)上與正常細胞所表達的抗原不同。癌基因的發(fā)現(xiàn)證明正常細胞有癌基因存在，只是處于不表達狀態(tài)，其一旦被激活，就失去正常調(diào)控，使細胞發(fā)生癌變。而由于癌基因表達產(chǎn)物與腫瘤抗原的關系至今未完全清楚，所以目前未發(fā)現(xiàn)很特異的腫瘤抗原。目前四十五頁\總數(shù)九十九頁\編于十點一般鑒定各種TM的方法為利用所制備的特異Ab從體液或細胞組織中檢測各種腫瘤相關抗原。目前也有利用T細胞受體（TcellreceptorTCR）識別腫瘤抗原方法。目前四十六頁\總數(shù)九十九頁\編于十點腫瘤標志物的分類

瘤標志物目前有100多種。尚未有統(tǒng)一全面的分類標準。常分為血清/血漿腫瘤標志物和組織腫瘤標志物。組織分化標志轉(zhuǎn)移潛在性標志癌基因及抑癌基因增殖標志目前四十七頁\總數(shù)九十九頁\編于十點血清腫瘤標志物血清TM胚胎性抗原激素類酶類標志物糖類抗原AFPCEATPASCCCA125、CA15-3CA19-9、CA50CA72-4、CA242SCCTPSA、FPASα-AFU、r-GTNSE、AKPCTHCGGH基因類腫瘤標志物其它癌基因和抑癌基因β2-MGSFTG目前四十八頁\總數(shù)九十九頁\編于十點人體器官與腫瘤標志物目前四十九頁\總數(shù)九十九頁\編于十點理想腫瘤標志物的要求理想TM靈敏含量與腫瘤病情相符部位特異腫瘤特異早發(fā)現(xiàn)早診斷判斷復發(fā)區(qū)分良性與惡性鑒定腫瘤類型器官部位特異病程和治療觀察目前五十頁\總數(shù)九十九頁\編于十點TM檢測臨床意義輔助臨床早發(fā)現(xiàn)、早診斷幫助區(qū)分區(qū)分良性與惡性腫瘤協(xié)助臨床腫瘤類型鑒定及腫瘤部位鑒別幫助臨床對腫瘤病程判斷治療效果觀察，提前判斷復發(fā)目前五十一頁\總數(shù)九十九頁\編于十點甲胎蛋白

AFP由胚胎卵黃囊、胚胎肝細胞及其他內(nèi)胚層分化的胃腸組織合成。發(fā)生在妊娠12周，出生后降低。當肝細胞或生殖腺胚胎組織發(fā)生惡性病變時，相關基因重新被激活，細胞重新合成AFP，血液中含量增加。臨床應用：

AFP增高為原發(fā)性肝癌重要指標之一。特異性強、敏感度高相對較高。AFP常用于原發(fā)性肝癌臨床檢查及普查。大部分患者呈持續(xù)性高水平升高，部分患者呈低水平增高。目前五十二頁\總數(shù)九十九頁\編于十點

AFP陰性并不排除原發(fā)性肝癌，據(jù)統(tǒng)計18%-20%的原發(fā)性肝癌患者血清AFP正常。此時需結(jié)合臨床及其他檢測指標來降低假陰性。年齡因素：AFP對原發(fā)性肝癌的診斷率隨患者年齡的增加而逐漸下降。對老年人AFP正常或輕微升高不能排除肝癌的可能性。預后：原發(fā)性肝癌血清AFP水平與預后有關。肝癌切除后AFP能否正?；蛏仙桥袛囝A后的關鍵因素。目前五十三頁\總數(shù)九十九頁\編于十點其他腫瘤部分卵黃囊腫患者血清AFP上升，胃癌、結(jié)腸癌等內(nèi)胚層衍生的組織發(fā)生的癌，即使未發(fā)生肝轉(zhuǎn)移也合成AFP。而非內(nèi)胚層衍生組織的癌，即使轉(zhuǎn)移到肝臟也不合成AFP，血清AFP是否上升與癌的原發(fā)部位有關。與絨毛膜促性腺激素聯(lián)合檢測有助于生殖細胞腫瘤的分類與分期。目前五十四頁\總數(shù)九十九頁\編于十點肝臟良性病變肝臟良性病變時，AFP也可增高。病毒性肝炎患者AFP輕度增高，慢性肝炎患者約有20%AFP增高。暴發(fā)性肝炎患者AFP明顯增高。病理檢查時可發(fā)現(xiàn)AFP升高與肝細胞再生，同時肝臟受損有關系。目前五十五頁\總數(shù)九十九頁\編于十點CEA檢測

癌胚抗原(carcinoembryonicantigen,CEA)是一種MW為150K～300KD的糖蛋白，1965年Gold和Freedman首先自人結(jié)腸癌組織發(fā)現(xiàn)，是胚胎性癌抗原。主要存在于胎兒消化道上皮組織、胰臟和肝臟。正常成人血清中CEA含量極低，惡性腫瘤的癌細胞分泌CEA進入血液和淋巴，導致血中CEA水平增高。

臨床應用：結(jié)腸癌患者70%～90%顯示CEA高濃度陽性，對于CEA升高的結(jié)腸癌患者，血清CEA水平與癌腫大小、有無轉(zhuǎn)移存在一定關系，當發(fā)生肝轉(zhuǎn)移時，CEA升高更為明顯。目前五十六頁\總數(shù)九十九頁\編于十點

血清CEA水平變化與結(jié)腸癌分期密切相關。明顯升高時主要見于中晚期腫瘤，進展期結(jié)腸癌（Duke分期C、D期）時陽性率可達70%以上，而DukeA、B期時敏感性只有30%左右其他腫瘤其他消化道腫瘤也可檢測到CEA陽性，如：大腸癌患者可達65%-75%的陽性。CEA與大腸癌的Duke分期有明確關系，可用于治療效果的監(jiān)測；內(nèi)胚層衍生的癌，如胰腺癌、肺癌以及胃癌可導致CEA水平增高。非內(nèi)胚層衍生的癌，如乳腺癌和子宮癌也能使CEA水平增高。目前五十七頁\總數(shù)九十九頁\編于十點良性腫瘤10%-20%，以及某些內(nèi)胚層發(fā)生的重癥可以導致CEA增高。CEA檢測對腫瘤術(shù)后復發(fā)敏感性很高，可達80%以上。往往早于臨床、病理檢查、X光檢查等。非腫瘤疾病腸道炎癥、腎功不全、結(jié)腸息肉、肝硬化、慢性肝炎、閉鎖性黃疸等也可導致CEA水平增高

CEA并非一種癌的特異性抗原，而是癌的一種相關抗原。缺少特異性，作為篩選指標時應注意。常用于腫瘤患者的監(jiān)測，療效的判斷。目前五十八頁\總數(shù)九十九頁\編于十點前列腺特異抗原（PSA）PSA為一種絲氨酸蛋白水解酶，存在于前列腺腺泡和導管上皮細胞胞漿中。在血液中以3種不同分子形式存在，即游離PSA；與a1-抗糜蛋白酶（ACT）結(jié)合形成PSA-ACT；與a2-巨球蛋白結(jié)合形成PSA-a2M。血液中主要為PSA-ACT。正常情況下前列腺腺泡內(nèi)容物（富含PSA）與淋巴系統(tǒng)間存在由內(nèi)皮層、基底細胞層和基底膜構(gòu)成的屏障相隔。當腫瘤或其他病變破壞了這道屏障時，腺管內(nèi)容物即可漏入淋巴系統(tǒng)并隨之進入血液，導致血中PSA水平增高。目前五十九頁\總數(shù)九十九頁\編于十點臨床意義前列腺癌60-90%血清t-PSA增高術(shù)后t-PSA無明顯降低或再次增高，提示預后較差或腫瘤轉(zhuǎn)移和復發(fā)。前列腺增生、前列腺炎等良性疾病也會有輕度增高。肛門指檢、前列腺按摩、前列腺手術(shù)等也會引起增高，注意鑒別，必要時數(shù)周后進行PSA再次檢測。f-PSA/t-PSA檢測比值下降時對前列腺癌診斷意義較大。目前六十頁\總數(shù)九十九頁\編于十點CA19-9

CA19-9(carbohydrateantigen19-9)是一種粘蛋白型的糖類蛋白腫瘤標志物，為細胞膜上的糖脂質(zhì)，因由鼠單克隆抗體116NS19-9識別而命名。是迄今報道的對胰腺癌敏感性最高的標志物。在血清中它以唾液粘蛋白形式存在，分布于正常胎兒胰腺、膽囊、肝、腸和正常成年人胰腺、膽管上皮等處。目前六十一頁\總數(shù)九十九頁\編于十點臨床應用：消化道惡性腫瘤胰腺癌、肝膽系癌、胃癌、結(jié)直腸癌的CA19-9水平分別是正常均值的幾百倍。而陽性率以胰腺癌為最高，故CA19-9是胰腺癌較好的標志。胰腺癌診斷中的應用：大部分胰腺癌患者血清CA19-9水平明顯增高。如果以正常參考范圍上限（37U/mL）為診斷標準，敏感性和特異性均可達90%以上。CA19-9水平與腫瘤的階段有關，血清中含量的高低提示手術(shù)的難易程度，術(shù)前CA19-9水平對預后有一定提示作用，低者預后較好，術(shù)后CA19-9水平降至正常者生存期長于未下降者。目前六十二頁\總數(shù)九十九頁\編于十點

腫瘤復發(fā)時，CA19-9可再度升高，并且發(fā)生于影像學診斷之前。因此可用作監(jiān)測腫瘤的復發(fā)。其他惡性腫瘤卵巢癌、淋巴瘤、胃癌、肝癌、食管癌、乳腺癌的陽性率較低。胃癌的陽性率約為25%-60%，且與腫瘤分期有關。對于胃癌患者，同時檢測CEA可提高陽性率。直腸、結(jié)腸癌患者，陽性率為18%-58%，與腫瘤分期有關。目前六十三頁\總數(shù)九十九頁\編于十點

同時測定CEA可提高敏感度，如果治療有效，CA19-9下降速度較CEA快。膽囊癌、膽管癌、膽道癌的CA19-9陽性率較高，使用原則：CA19-9與AFP、CEA聯(lián)合檢查，有助于提高胃腸道腫瘤的診斷效率非腫瘤性疾病低濃度增高、一過性增高可見于慢性胰腺炎、膽石癥、肝硬化、腎功能不全等。目前六十四頁\總數(shù)九十九頁\編于十點CA15-3

屬于糖蛋白類抗原，主要用于乳腺癌的監(jiān)測和篩選，以及用于評價患者預后情況的指標。

臨床應用：

乳腺癌：乳腺癌患者30-50%增高，有轉(zhuǎn)移灶者增高可達80%，發(fā)現(xiàn)癌轉(zhuǎn)移的敏感性比癌胚抗原和組織多肽抗原高，且早于臨床發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移。CA15-3是監(jiān)測病人術(shù)后復發(fā)情況，特別是癌癥轉(zhuǎn)移患者的術(shù)后監(jiān)測的重要指標，血清CA15-3水平增高，提示乳腺癌的局部或全身復發(fā)，且增高早于核素檢查和臨床檢查。

目前六十五頁\總數(shù)九十九頁\編于十點

可與CA125聯(lián)合檢查，用于卵巢癌復發(fā)的早期診斷，與CEA聯(lián)合檢測時，可提高乳腺癌早期診斷的敏感性和特異性。其他惡性腫瘤肺癌、卵巢癌、結(jié)腸癌、肝癌等，也可出現(xiàn)血清CA15-3增高。非惡性腫瘤疾病良性乳腺疾病、卵巢疾病等可引起CA15-3的水平增高。目前六十六頁\總數(shù)九十九頁\編于十點2.結(jié)直腸癌結(jié)直腸癌在歐美國家發(fā)病率較高。在我國隨著人民生活水平提高，結(jié)直腸癌發(fā)病率也呈增高趨勢。主要腫瘤標志物有：（1）CEA：局限性或早期可手術(shù)根治的結(jié)直腸癌CEA升高低于<10%，而在遠處轉(zhuǎn)移的患者中CEA增高者可達90%。（2）CA19-9（3）CA72-4（4）CA242（5）組織多肽抗原（TPS）目前六十七頁\總數(shù)九十九頁\編于十點腫瘤標志物的選擇建議TM肝癌①AFP②CEA

③CA19-9④AFU⑤SF胰腺癌①CA19-9②CA242③CA50④CA125

⑤CEA胃癌①CEA②CA19-9③CA72-4④PG⑤CA242⑥結(jié)直腸癌①CEA②CA19-9③CA72-4④CA242⑤TPS肺癌①NSE②SCC③CEA④CYFRA21-1⑤TPS乳腺癌①CEA②CA15-3③Her-2/neu④TPS女性生殖系統(tǒng)腫瘤①宮頸癌HPV②卵巢癌HE4/CA125③生殖細胞癌HCG前列腺癌①PSA②PSM③PACP惡性淋巴瘤①LDH②β2-MG

③CA125④TNFα腦膠質(zhì)瘤①NSE②BEHAB③GFAP④VEGF鼻咽癌①VCA-IgA②EA-IgA③SCC④TPS骨轉(zhuǎn)移腫瘤①骨吸收指標②骨形成指標目前六十八頁\總數(shù)九十九頁\編于十點幾種腫瘤標志物檢測意義標志物性質(zhì)相對特異腫瘤其它腫瘤其它疾病AFP甲胎蛋白胚胎類糖蛋白原發(fā)性肝細胞癌睪丸癌、畸胎瘤肝炎、肝硬化等CEA癌胚抗原胚胎類糖蛋白直腸癌、結(jié)腸癌、胃癌、胰腺癌乳腺癌、肺癌等腸道息肉、炎癥，肝、肺等炎癥PSA前列腺額特異抗原具有酶樣活性蛋白前列腺癌腎癌、膀胱癌前列腺肥大和炎癥、泌尿生殖系統(tǒng)疾病CA15-3糖蛋白乳腺癌肺癌、腎癌等肝、腸等非腫瘤疾病CA125糖蛋白卵巢癌乳腺癌、胰腺癌等卵巢囊腫、肝炎等CA199糖蛋白胰腺癌胃癌、結(jié)腸癌等急性胰腺炎、肝硬化等目前六十九頁\總數(shù)九十九頁\編于十點幾種腫瘤標志物檢測意義標志物性質(zhì)相對特異腫瘤其它腫瘤其它疾病CA72-4糖蛋白胃癌結(jié)腸癌、卵巢癌SCC糖蛋白鱗狀上皮細胞癌抗原胚胎類糖蛋白子宮頸癌肺癌、鼻咽癌肝炎、結(jié)核TPA組織多肽抗原胚胎類糖蛋白支氣管癌膀胱癌肝炎PAP前列腺酸性磷酸酶酶前列腺癌前列腺肥大或炎癥NSE神經(jīng)元特異性烯醇化酶酶小細胞肺癌其他非小細胞肺癌、神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤等血小板和紅細胞中存在目前七十頁\總數(shù)九十九頁\編于十點腫瘤標志物作為體檢項目問題惡性腫瘤呈上升趨勢的今天，迫切需要簡便、廉價、適用于腫瘤初篩及大規(guī)模人群普查的腫瘤指標。遺憾的是目前實驗室開展的腫瘤標志物檢測項目，普遍不適合于腫瘤普查。所以要避免盲目、隨意、無根據(jù)的挑選腫瘤標志物進行篩查。針對特定區(qū)域某種腫瘤高危人群的檢查，也要選擇特異度及敏感度相對較好腫瘤標志物。也可在體檢其它檢查可疑的基礎上，再以腫瘤標志物檢測。

用蛋白芯片技術(shù)注意特異性較差，需用其它方法復查。目前七十一頁\總數(shù)九十九頁\編于十點目前診治常用檢查提問目前常用檢查首選多選肝癌？NSEAFPPSACa199女性體檢CEACa153PSACa125肺癌？NSESCCCEAAFP癌癥金標準癌基因AFPPSACEA胰腺癌NSEAFPPSACa199腫瘤標志物增高炎癥惡性腫瘤良性腫瘤非特異反應PAS持續(xù)明顯增高前列腺癌術(shù)后不良前列腺炎治療無效術(shù)后復發(fā)PAS逐步降低治療無效術(shù)后有效前列腺炎治療有效術(shù)后復發(fā)目前七十二頁\總數(shù)九十九頁\編于十點人類具有完善的免疫系統(tǒng)，正常情況下，免疫系統(tǒng)具有識別自我與異己的功能，因而能夠防御異物入侵，而對自身組織不產(chǎn)生或產(chǎn)生極微弱的免疫應答反應，稱自身耐受。一旦機體外部或內(nèi)部因素發(fā)生改變，可使免疫耐受受到影響，導致免疫系統(tǒng)對自身組織產(chǎn)生明顯的免疫應答反應。如是低限度和非持久性，一般影響不大，高限度和持久存在則引起自身免疫性疾病。自身免疫性疾病血清學檢測方法很多，特異性較差，動態(tài)檢測可幫助臨床對預后及療效觀察。第四節(jié)：自身抗體檢測目前七十三頁\總數(shù)九十九頁\編于十點熒光免疫技術(shù)目前常用于免疫組化和自身抗體檢測，特點可用于定位。細胞核細胞核熒光標記抗人Ig自身抗體目前七十四頁\總數(shù)九十九頁\編于十點免疫印跡試驗抗核抗體檢測2.可提取核抗原抗體檢測免疫印跡試驗抗核抗體檢測自身抗體酶標記抗人IgEE底物E目前七十五頁\總數(shù)九十九頁\編于十點抗核抗體檢測1.間接免疫熒光抗體法檢測抗核抗體特點：敏感度高、特異性差，常用于篩查自身免疫性疾病原理：以Hep-2和鼠肝作為抗原，固定于載玻片上，與受檢者血清反應，血清中抗體與載玻片上抗原結(jié)合，再加入熒光標記抗人Ig。在熒光顯微鏡下觀察細胞核上熒光模型。熒光模型主要有：（1）核均質(zhì)型：相關抗體為抗ds-DNA，抗組蛋白和核小體抗體（2）核膜型：抗核孔復合物和抗板層素（3）顆粒型：抗U1-PNP、抗Sm、抗SS-A、抗SS-B（4）核點型：P80盤曲蛋白抗體、Sp100抗體、（5）著絲點型：與著絲點抗體相關（6）核仁型：RNP抗體、抗Scl70抗體等相關目前七十六頁\總數(shù)九十九頁\編于十點ENA自身抗體譜免疫印跡檢測常見可提取核抗原抗體雙鏈DNASm核糖體Scl-70Jo-1SS-BSS-ARNP目前七十七頁\總數(shù)九十九頁\編于十點常見自身抗體檢測及臨床意義

名稱 臨床意義類風濕因子（RF）類風濕性關節(jié)炎及其它免疫性疾病抗ds-DNA抗體 SLE的較特異性抗體抗Smith抗體 SLE的較特異性抗體抗組蛋白抗體 藥物性狼瘡及其它免疫性疾病 抗核糖核蛋白抗體混合結(jié)締組織病、SLE等 抗SS-A和SS-B抗體干燥綜合癥、SLE、RA等抗Scl-70抗體 系統(tǒng)性硬化癥等抗線粒體抗體與自身免疫性肝病相關目前七十八頁\總數(shù)九十九頁\編于十點常見自身抗體檢測及臨床意義名稱 臨床意義Jo-1抗體肌炎和間質(zhì)性肺纖維化抗中性粒細胞胞漿抗體血管炎癥、自身免疫性肝病等抗血小板抗體血小板減少癥抗平滑肌抗體自身免疫性肝病抗精子抗體男子不育癥抗心磷脂抗體SLE、RA等疾病HLA-B27強直性脊椎炎等目前七十九頁\總數(shù)九十九頁\編于十點常見自身抗體檢測及臨床意義名稱 臨床意義抗肌動蛋白抗體：自身免疫性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化抗腎小球基底膜抗體：為抗基底膜抗體腎小球腎炎特異抗體抗中性粒細胞胞漿抗體：主要見于血管炎癥壞死相關的系列疾病抗心磷脂抗體檢測：與SLE相關，并與血小板減低和自發(fā)性流產(chǎn)相關抗平滑肌抗體檢測：主要見于自身免疫性肝病抗甲狀腺球蛋白抗體（TgAb）：本氏甲狀腺炎、Graves病等促甲狀腺激素受體抗體（TRAb）：Graves病等甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb）：本氏甲狀腺炎等甲狀腺自身抗體檢測要結(jié)合激素測定和影像學目前八十頁\總數(shù)九十九頁\編于十點第五節(jié)：感染免疫檢查人體感染病原體后經(jīng)過一段時間產(chǎn)生抗體一般可持續(xù)數(shù)月或數(shù)年，因此抗體檢測可判斷現(xiàn)癥感染和既往感染情況。目前八十一頁\總數(shù)九十九頁\編于十點

風濕熱是一種變態(tài)結(jié)締組織疾病，常見有風濕性心臟病、風濕性關節(jié)炎等。風濕熱常由A組溶血性鏈球菌引起，此菌可產(chǎn)生一種“O”溶血素具有抗原性，ASLO就是檢測機體產(chǎn)生的抗溶血素“O”抗體。鏈球菌感染后抗“O”的產(chǎn)生一般在一周左右，4-6周達高峰?？梢娪陲L濕性心臟病、風濕性關節(jié)炎、急性腎小球腎炎、呼吸道感染等。ASLO動態(tài)檢測對病程及療效觀察意義較大，結(jié)合CRP和ESR檢測臨床意義更大。

抗鏈球菌溶血素“O”檢測（anti-streptolysinOASLO）

目前八十二頁\總數(shù)九十九頁\編于十點

傷寒是由傷寒桿菌引起的急性腸道傳染病。傷寒桿菌有兩種抗原，即菌體抗原“O”抗原和鞭毛抗“H”原。肥達氏反應就是檢測由上述兩種抗原刺激機體產(chǎn)生的抗體。肥達氏反應用于輔助診斷傷寒和副傷寒感染，由于抗體產(chǎn)生需要一定時間，故第一周陽性率10%，第二周達60%-70%，第四周達90%。臨床常以二次標本（早期和中期或恢復期）的凝集效價變化來判斷是否感染。傷寒病人的“O”抗體較“H”出現(xiàn)早，存在時間短，“H”相反。預防接種可引起“H”增高，“O”正常。傷寒和副傷寒沙門氏菌免疫檢測目前八十三頁\總數(shù)九十九頁\編于十點OH可能情況升高正常傷寒發(fā)病早期、或其它沙門氏菌感染交叉反應正常升高預防接種、既往感染升高升高患傷寒可能性較大升高A/B/C升高可能患副傷寒甲、乙、丙肥達氏試驗目前八十四頁\總數(shù)九十九頁\編于十點流行性腦脊髓膜炎免疫學檢測流行性腦脊髓膜炎由腦膜炎奈瑟菌所致。檢測腦脊液、血清、尿液中抗原或抗體可輔助流腦的臨床診斷。如檢測到腦膜炎奈瑟菌抗原可作為流腦確診，抗體在感染一周后出現(xiàn)，二月后逐漸下降。接種疫苗抗體可維持一年以上。目前八十五頁\總數(shù)九十九頁\編于十點

結(jié)核分枝桿菌主要引起細胞免疫，但也可引起體液免疫產(chǎn)生特異性IgG抗體，臨床常用ELISA方法檢測特異性IgG抗體，PCR方法檢測結(jié)核DNA，但兩種方法均存在部分假陽性，樣本找結(jié)核桿菌方法最為經(jīng)典。結(jié)核菌培養(yǎng)時間長，敏感度低，目前T-SPOT試驗認為對診斷結(jié)核敏感度和特異性均較高。結(jié)核抗體和DNA檢測目前八十六頁\總數(shù)九十九頁\編于十點幽門螺桿菌檢測幽門螺桿菌（Hp）感染是人類最常見的慢性感染之一，與胃十二指腸等消化系統(tǒng)疾病密切相關。由于HP感染具較大危害性，故近幾年HP檢測方法被高度重視，也取得飛速發(fā)展。目前診斷幽門螺桿菌感染的方法很多，依據(jù)是否需做內(nèi)窺鏡檢查分為侵入性和非侵入性兩大類。侵入性常做尿素酶試驗。非侵入性試驗除C13或C14

呼氣試驗外，目前血清學HP是診斷現(xiàn)癥感染較好方法，易于兒童HP感染檢測和體檢普查，現(xiàn)癥感染特異性抗體檢測意義較大。目前八十七頁\總數(shù)九十九頁\編于十點布氏桿菌病凝集試驗布氏桿菌感染病。牧區(qū)多見柯薩奇病毒抗體檢測心肌炎、手足口病輪狀病毒抗體檢測嬰幼兒腹瀉嗜異體凝集試驗

EB病毒檢測取代，傳染性單核細胞增多癥漢坦病毒IgM抗體腎綜合癥出血熱目前八十八頁\總數(shù)九十九頁\編于十點TORCH感染免疫學檢測病原類型常規(guī)檢測引起主要疾病弓形蟲toxoplasmagondii寄生蟲IgM抗體人畜共患。胎兒感染，可引起流產(chǎn)、中樞神經(jīng)疾病等風疹病毒RubellavirusRNAIgG/IgM抗體胎兒感染，可引起流產(chǎn)、畸形等巨細胞病毒CytomegalovirusDNAIgG/IgM抗體，核酸成人99%感染過CMV,免疫功能低下者易再感或復燃，CMV可通過胎盤感染胎兒,影響較大單純皰疹病毒HerpssimplexvirusDNAIgG/IgM抗體皰疹性口腔炎、角膜炎、腦膜炎等，孕婦感染可導致流產(chǎn)等目前八十九頁\總數(shù)九十九頁\編于十點梅毒血請學檢測

當機體感染梅毒螺旋體后，會產(chǎn)生二種抗體，一種為抗類脂抗體，另一種為抗螺旋體抗原抗體，后者較前者特異性強。由于目前螺旋體體外培養(yǎng)較難，故血