旋光度的測定

醫(yī)用化學旋光度的測定能力目標知識目標素質目標掌握旋光儀的使用方法熟悉比旋光度的計算方法。了解旋光儀的構造。2一、實驗原理物質可按是否具有光學活性分為兩大類，一類具有使偏振光的振動平面旋轉的性質，如乳酸、葡萄糖等，稱為旋光性物質或光學活性物質；另一類對偏振光不產生影響，沒有旋光性。旋光度是指光學活性物質使偏振光的振動平面旋轉地角度。物質的旋光度與溶液的濃度、溶劑、溫度、旋光測定管長度和所用光源的波長等都有關系，所以常用比旋光度[α]tλ來表示各物質的旋光性。4物質能使偏振光的振動平面發(fā)生旋轉的性質稱為旋光性,該物質被稱為旋光性物質。旋光性能使偏振光振動平面沿順時針方向旋轉的物質稱為右旋體，用“d”或“+”表示；能使偏振光振動平面沿逆時針方向旋轉的物質稱為左旋體，用“l(fā)”或“—”表示。5旋光度α旋光度α可用旋光儀進行測定[α]λt=αC×l比旋光度測定溫度光源波長旋光度濃度（g/ml）測定管長度（dm）在一定條件下，比旋光度是旋光性物質的一個重要物理常數，通過對旋光度的測定可以確定光學活性物質的含量和純度。二、實驗儀器和試劑儀器：目測旋光儀、分析天平、100ml燒杯、100℃溫度計、100ml容量瓶試劑：葡萄糖晶體、葡萄糖溶液三、實驗步驟

1．旋光儀零點的校正。在測定樣品前，必須先校正旋光儀的零點。將旋光儀的旋光管清洗干凈，裝上蒸餾水，使液面凸出管口，將玻璃蓋沿管口邊緣輕輕平推蓋好，不能帶入氣泡，管內不能有空隙，否則將影響測定結果。然后擰上螺絲帽蓋，使之不漏水，但不要擰得過緊。將旋光管外壁擦干，放入旋光儀內，罩上蓋子，開啟鈉光燈約5分鐘，待發(fā)光正常后，將標尺盤調到零點左右，旋動旋鈕，使視場內I和II部分的明暗一致（實驗圖16-4）。記錄讀數。重復操作至少5次，取平均值。若零點相差太大時，應對儀器進行重新校正。2．測定已知準確濃度的葡萄糖溶液的旋光度。用分析天平準確稱量10.000g(±0.003g)葡萄糖晶體于小燒杯中，加入適量蒸餾水，攪拌使之溶解，定量轉移到100ml容量瓶中，稀釋至標線，搖勻備用。用上述溶液少量潤洗旋光管2次，以避免葡萄糖溶液被蒸餾水稀釋而改變濃度。然后將溶液裝入旋光管中，每隔2分鐘測定1次旋光度，觀察葡萄糖溶液的變旋現(xiàn)象，讀取其穩(wěn)定的讀數。重復操作5次取5次穩(wěn)定讀數的平均值，此時所得的讀數與零點之間的差值即為葡萄糖的旋光度。記錄旋光度的長度和溶液的溫度，根據公式計算葡萄糖的比旋光度。

明暗界限清晰明暗一致

旋光儀目鏡視場圖3.測定未知濃度的葡萄糖溶液的旋光度。將旋光管用蒸餾水洗凈后，再用少量待測溶液潤洗2次，按上述方法測定該溶液的旋光度。將所測旋光度的讀數和上述實驗（步驟2）所計算出的比旋光度代人公式，即可確定該溶液的濃度。四、注意事項及說明

1.在測定樣品前，必須先校正旋光儀的零點。

2.旋光管裝液時：使液面凸出管口，將玻璃蓋沿管口邊緣輕輕平推蓋好，不能帶入氣泡，管內不能有空隙