旋光度的測(cè)定

醫(yī)用化學(xué)旋光度的測(cè)定能力目標(biāo)知識(shí)目標(biāo)素質(zhì)目標(biāo)掌握旋光儀的使用方法熟悉比旋光度的計(jì)算方法。了解旋光儀的構(gòu)造。2一、實(shí)驗(yàn)原理物質(zhì)可按是否具有光學(xué)活性分為兩大類，一類具有使偏振光的振動(dòng)平面旋轉(zhuǎn)的性質(zhì)，如乳酸、葡萄糖等，稱為旋光性物質(zhì)或光學(xué)活性物質(zhì)；另一類對(duì)偏振光不產(chǎn)生影響，沒(méi)有旋光性。旋光度是指光學(xué)活性物質(zhì)使偏振光的振動(dòng)平面旋轉(zhuǎn)地角度。物質(zhì)的旋光度與溶液的濃度、溶劑、溫度、旋光測(cè)定管長(zhǎng)度和所用光源的波長(zhǎng)等都有關(guān)系，所以常用比旋光度[α]tλ來(lái)表示各物質(zhì)的旋光性。4物質(zhì)能使偏振光的振動(dòng)平面發(fā)生旋轉(zhuǎn)的性質(zhì)稱為旋光性,該物質(zhì)被稱為旋光性物質(zhì)。旋光性能使偏振光振動(dòng)平面沿順時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)的物質(zhì)稱為右旋體，用“d”或“+”表示；能使偏振光振動(dòng)平面沿逆時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)的物質(zhì)稱為左旋體，用“l(fā)”或“—”表示。5旋光度α旋光度α可用旋光儀進(jìn)行測(cè)定[α]λt=αC×l比旋光度測(cè)定溫度光源波長(zhǎng)旋光度濃度（g/ml）測(cè)定管長(zhǎng)度（dm）在一定條件下，比旋光度是旋光性物質(zhì)的一個(gè)重要物理常數(shù)，通過(guò)對(duì)旋光度的測(cè)定可以確定光學(xué)活性物質(zhì)的含量和純度。二、實(shí)驗(yàn)儀器和試劑儀器：目測(cè)旋光儀、分析天平、100ml燒杯、100℃溫度計(jì)、100ml容量瓶試劑：葡萄糖晶體、葡萄糖溶液三、實(shí)驗(yàn)步驟

1．旋光儀零點(diǎn)的校正。在測(cè)定樣品前，必須先校正旋光儀的零點(diǎn)。將旋光儀的旋光管清洗干凈，裝上蒸餾水，使液面凸出管口，將玻璃蓋沿管口邊緣輕輕平推蓋好，不能帶入氣泡，管內(nèi)不能有空隙，否則將影響測(cè)定結(jié)果。然后擰上螺絲帽蓋，使之不漏水，但不要擰得過(guò)緊。將旋光管外壁擦干，放入旋光儀內(nèi)，罩上蓋子，開(kāi)啟鈉光燈約5分鐘，待發(fā)光正常后，將標(biāo)尺盤(pán)調(diào)到零點(diǎn)左右，旋動(dòng)旋鈕，使視場(chǎng)內(nèi)I和II部分的明暗一致（實(shí)驗(yàn)圖16-4）。記錄讀數(shù)。重復(fù)操作至少5次，取平均值。若零點(diǎn)相差太大時(shí)，應(yīng)對(duì)儀器進(jìn)行重新校正。2．測(cè)定已知準(zhǔn)確濃度的葡萄糖溶液的旋光度。用分析天平準(zhǔn)確稱量10.000g(±0.003g)葡萄糖晶體于小燒杯中，加入適量蒸餾水，攪拌使之溶解，定量轉(zhuǎn)移到100ml容量瓶中，稀釋至標(biāo)線，搖勻備用。用上述溶液少量潤(rùn)洗旋光管2次，以避免葡萄糖溶液被蒸餾水稀釋而改變濃度。然后將溶液裝入旋光管中，每隔2分鐘測(cè)定1次旋光度，觀察葡萄糖溶液的變旋現(xiàn)象，讀取其穩(wěn)定的讀數(shù)。重復(fù)操作5次取5次穩(wěn)定讀數(shù)的平均值，此時(shí)所得的讀數(shù)與零點(diǎn)之間的差值即為葡萄糖的旋光度。記錄旋光度的長(zhǎng)度和溶液的溫度，根據(jù)公式計(jì)算葡萄糖的比旋光度。

明暗界限清晰明暗一致

旋光儀目鏡視場(chǎng)圖3.測(cè)定未知濃度的葡萄糖溶液的旋光度。將旋光管用蒸餾水洗凈后，再用少量待測(cè)溶液潤(rùn)洗2次，按上述方法測(cè)定該溶液的旋光度。將所測(cè)旋光度的讀數(shù)和上述實(shí)驗(yàn)（步驟2）所計(jì)算出的比旋光度代人公式，即可確定該溶液的濃度。四、注意事項(xiàng)及說(shuō)明

1.在測(cè)定樣品前，必須先校正旋光儀的零點(diǎn)。

2.旋光管裝液時(shí)：使液面凸出管口，將玻璃蓋沿管口邊緣輕輕平推蓋好，不能帶入氣泡，管內(nèi)不能有空隙