典型藥物分析實(shí)例 黃體酮及其制劑分析 （藥物分析課件）

黃體酮及其制劑分析黃體酮又叫孕酮激素，黃體激素，是由卵巢分泌的具有生物活性的主要孕激素。黃體酮黃體酮在懷孕期間黃體酮可以給胎兒早期生長發(fā)育提供支持與保障，而且對子宮也有一定的鎮(zhèn)定作用。非孕期可以保護(hù)女性的子宮內(nèi)膜，所以是很重要的女性激素。當(dāng)出現(xiàn)先兆流產(chǎn)的時(shí)候可以口服黃體酮，可以起到補(bǔ)充孕激素，也可以起到穩(wěn)定胎兒、保胎的作用。黃體酮【性狀】【鑒別】【檢查】【含量測定】一、性狀黃體酮本身性狀為白色或類白色結(jié)晶性粉末；無臭。本品在三氯甲烷中極易溶解，在乙醇、乙醚或植物油中溶解，在水中不溶。黃體酮注射液為無色至淡黃色的澄明油狀液體。熔點(diǎn)：本品的熔點(diǎn)（通則0612）為128～131℃。比旋度：取本品，精密稱定，加乙醇溶解并定量稀釋制成每1ml中約含10mg的溶液，在25℃時(shí)，依法測定（通則0621），比旋度為+186°至+198°。二、鑒別與亞硝基鐵氰化鈉的反應(yīng)與異煙肼的反應(yīng)紅外分光光度法高效液相色譜法

OH3COH3CCH3

HHHH二、鑒別1.與亞硝基鐵氰化鈉的反應(yīng)取本品約5mg，加甲醇0.2ml溶解后，加亞硝基鐵氰化鈉的細(xì)粉約3mg、碳酸鈉及醋酸銨各約50mg，搖勻，放置10～30分鐘，應(yīng)顯藍(lán)紫色。黃體酮結(jié)構(gòu)中有甲酮基，可與亞硝基鐵氰化鈉在一定反應(yīng)條件下生成藍(lán)紫色產(chǎn)物，其他常用甾體激素均不顯藍(lán)紫色，或不顯色。二、鑒別2.與異煙肼的反應(yīng)甾體激素的C3酮基及某些其他位置上的酮基都能在酸性條件下與異煙肼、2，4-二硝基苯肼等羰基試劑反應(yīng)，縮合形成黃色的異煙腙而用于鑒別。取本品約0.5mg，加異煙肼約1mg與甲醇1ml溶解后，加稀鹽酸1滴，即顯黃色。二、鑒別3.紅外分光光度法黃體酮結(jié)構(gòu)中含有甲酮基、雙鍵共軛、羰基，它們在紅外光吸收圖譜中均有特征吸收峰，可用于鑒別。本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集434圖）一致。二、鑒別4.高效液相色譜法在含量測定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。

OH3COH3CCH3

HHHH黃體酮除檢查“干燥失重”外，還需檢查“有關(guān)物質(zhì)”。注射液需檢查“有關(guān)物質(zhì)”。三、檢查三、檢查有關(guān)物質(zhì)取本品，加甲醇溶解并稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。三、檢查有關(guān)物質(zhì)精密量取供試品溶液與對照溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的2倍。供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主峰面積的0.5倍（0.5%），各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積（1.0%）。供試品溶液色譜圖中小于對照溶液主峰面積0.05倍的色譜峰忽略不計(jì)。三、檢查有關(guān)物質(zhì)黃體酮及其注射液中的有關(guān)物質(zhì)主要是合成的中間體和副產(chǎn)物等。現(xiàn)行版《中國藥典》采用高效液相色譜法檢查有關(guān)物質(zhì)，色譜條件與含量測定項(xiàng)下的條件相同，檢查方法為不加校正因子的主成分自身對照法?，F(xiàn)行版《中國藥典》采用高效液相色譜法對黃體酮及其注射液進(jìn)行含量測定。四、含量測定四、含量測定填充劑：辛烷基硅烷鍵合硅膠色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)流動相：甲醇-乙腈-水（25∶35∶40）檢測波長：241nm調(diào)節(jié)流速實(shí)驗(yàn)取本品25mg，置25ml量瓶中，加0.1mol/L氫氧化鈉甲醇溶液10ml使溶解，置60℃水浴中保溫4小時(shí)，放冷，用1mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)至中性，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，取10μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)流速使黃體酮峰的保留時(shí)間約為12分鐘，黃體酮峰與相對保留時(shí)間約為1.1的降解產(chǎn)物峰的分離度應(yīng)大于4.0。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)四、含量測定制作供試品溶液供試品溶液：取本品，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.2mg的溶液。對照品溶液：取黃體酮對照品，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.2mg的