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文檔簡介
現(xiàn)代生物科技專題——細胞工程江蘇省揚州中學現(xiàn)代生物科技專題2——細胞工程一、明確細胞工程六大技術及其原理(一)植物組織培養(yǎng):細胞的全能性(二)植物體細胞雜交:細胞的全能性、膜的流動性(三)動物細胞培養(yǎng):細胞增殖(四)動物體細胞核移植:動物細胞核的全能性(五)動物細胞融合:膜的流動性(六)單克隆抗體的制備:膜的流動性、細胞增殖和細胞代謝二、通過比較掌握流程圖(一)植物組織培養(yǎng):細胞的全能性二、通過比較掌握流程圖(二)植物體細胞雜交:細胞的全能性、膜的流動性二、通過比較掌握流程圖(三)動物細胞培養(yǎng):細胞增殖利用植物細胞培養(yǎng)技術大量生產某些細胞產物,如蛋白質、脂肪、糖類、藥物、香料、生物堿等。3、通過體細胞核移植培育產生的新個體繁殖方式屬于無性生殖①固體培養(yǎng)基組成:無機營養(yǎng)、有機營養(yǎng)、激素、瓊脂。(2)骨髓瘤細胞:能大量增殖4、避免雜菌污染的措施:培養(yǎng)液及培養(yǎng)用具滅菌處理,加入一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液。③植物組織培養(yǎng)中添加蔗糖的目的是提供營養(yǎng)和調節(jié)滲透壓。②流程:花藥(花粉)單倍體幼苗純合子。(3)外界環(huán)境可能引起不可遺傳的變異。(四)動物體細胞核移植二、通過比較掌握流程圖(四)動物體細胞核移植:動物細胞核的全能性二、通過比較掌握流程圖(五)動物細胞融合:膜的流動性二、通過比較掌握流程圖(六)單克隆抗體的制備:膜的流動性、細胞增殖三、關注過程中特有的操作步驟或條件(一)植物組織培養(yǎng)細胞分裂素固體注意:①固體培養(yǎng)基組成:無機營養(yǎng)、有機營養(yǎng)、激素、瓊脂。②整個培養(yǎng)過程需根據培養(yǎng)目標更換不同培養(yǎng)基③植物組織培養(yǎng)中添加蔗糖的目的是提供營養(yǎng)和調節(jié)滲透壓。④培養(yǎng)階段不同光照條件不同三、關注過程中特有的操作步驟或條件(二)植物體細胞雜交1、細胞壁酶解方法:用__________________處理。2、促融方法:①物理法:離心、振動、電激等;
②化學法:聚乙二醇(PEG)。3、培養(yǎng)目標及意義:雜種植株,克服遠緣雜交不親和的障礙纖維素酶和果膠酶三、關注過程中特有的操作步驟或條件(三)動物細胞培養(yǎng)1、動物細胞培養(yǎng)中兩次使用胰蛋白酶的作用不同:第一次:處理剪碎的組織,使其分散成單個細胞。第二次:使貼壁生長的細胞從瓶壁上脫落下來。2、區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的關鍵是是否分瓶培養(yǎng)3、傳代細胞的特點傳代培養(yǎng)到10代以內的細胞核型穩(wěn)定,10~50代時部分細胞核型可能發(fā)生變化,50代以后繼續(xù)增殖的為發(fā)生癌變細胞,形成細胞系。4、避免雜菌污染的措施:培養(yǎng)液及培養(yǎng)用具滅菌處理,加入一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液。5、特定培養(yǎng)條件:液體培養(yǎng)基,需加入動物血清或血漿,有氧環(huán)境培養(yǎng)以保證細胞呼吸,CO2培養(yǎng)箱的作用主要是提供適宜的pH培養(yǎng)環(huán)境三、關注過程中特有的操作步驟或條件(四)動物體細胞核移植1、選擇去核卵母細胞作為受體細胞的原因(1)營養(yǎng)豐富,體積大,易操作;(2)更重要原因:含有激發(fā)細胞核全能性表達的物質。2、核移植獲得的克隆動物與提供細胞核的親本性狀可能不同的三個原因:(1)克隆動物遺傳物質來自兩個親本。(2)發(fā)育過程中可能發(fā)生基因突變或染色體變異。(3)外界環(huán)境可能引起不可遺傳的變異。3、通過體細胞核移植培育產生的新個體繁殖方式屬于無性生殖三、關注過程中特有的操作步驟或條件(五)動物體細胞融合特有的促融方法方法:滅活的病毒三、關注過程中特有的操作步驟或條件(六)單克隆抗體的制備1、過程中涉及到的三類細胞的特點:(1)免疫后得到的B淋巴細胞:一個細胞可產生一種特定抗體,但不能增殖(2)骨髓瘤細胞:能大量增殖(3)雜交瘤細胞:既能大量增殖,又能產生抗體2、至少兩次篩選:第一次利用特定的選擇培養(yǎng)基篩選雜交瘤細胞;
第二次利用多孔培養(yǎng)板及抗原—抗體反應篩選能產生特異性強、靈敏度高的抗體的雜交瘤細胞3、動物體細胞融合的重要應用四、主要應用(一)植物組織培養(yǎng)四、主要應用(一)植物組織培養(yǎng)2.作物新品種的培育(1)單倍體育種①實質:花藥離體培養(yǎng)過程就是植物組織培養(yǎng)過程。②流程:花藥(花粉)單倍體幼苗
純合子。③優(yōu)點:后代不發(fā)生性狀分離,都是純合子,能夠穩(wěn)定遺傳,明顯縮短了育種年限。(2)突變體的利用:在植物組織培養(yǎng)過程中,由于培養(yǎng)細胞一直處于不斷分生的狀態(tài),因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力(如射線、化學物質等)的影響而發(fā)生突變。從這些產生突變的個體中可以篩選出對人們有用的突變體,進而培育成新品種。離體培養(yǎng)秋水仙素誘導染色體數(shù)目加倍四、主要應用(一)植物組織培養(yǎng)3、細胞產物的工廠化生產利用植物細胞培養(yǎng)技術大量生產某些細胞產物,如蛋白質、脂肪、糖類、藥物、香料、生物堿等。利用植物細胞培養(yǎng)技術大量生產某些細胞產物,如蛋白質、脂肪、糖類、藥物、香料、生物堿等。二、通過比較掌握流程圖②化學法:聚乙二醇(PEG)。三、關注過程中特有的操作步驟或條件(四)動物體細胞核移植:動物細胞核的全能性(六)單克隆抗體的制備三、關注過程中特有的操作步驟或條件第二次利用多孔培養(yǎng)板及抗原—抗體反應篩選能產生特1、選擇去核卵母細胞作為受體細胞的原因二、通過比較掌握流程圖(2)成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。(一)植物組織培養(yǎng):細胞的全能性(3)外界環(huán)境可能引起不可遺傳的變異。1、細胞壁酶解方法:用__________________處理。2、區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的關鍵是是否分瓶培養(yǎng)四、主要應用(二)植物體細胞雜交1、培養(yǎng)雜種植物,克服遠緣雜交不親和的障礙2、雜種植株的染色體數(shù)通常是兩親本細胞染色體數(shù)目之和,大多屬于異源多倍體,變異類型屬于染色體變異。四、主要應用(三)動物細胞培養(yǎng)(1)生產細胞產品:干擾素、疫苗、單克隆抗體等。(2)實驗檢測并判斷某些毒性物質毒性的大小。(3)臨床醫(yī)學研究:利用動物細胞培養(yǎng)技術中的細胞貼壁生長和接觸抑制的特點,可用燒傷病人自己的健康皮膚細胞培養(yǎng)出大量的自身薄層皮膚細胞,以供植皮所需等。四、主要應用(四)動物細胞核移植(1)加速家畜遺傳改良進程、促進優(yōu)良畜群繁育、保護瀕危物種、克隆器官用于移植等。(2)在基因工程育種等過程中應用(3)存在的問題:①成活率低②克隆動物的健康問題③克隆動物食品的安全性問題等。四、主要應用(五)動物細胞融合(1)突破有性雜交方法的局限,使遠緣雜交成為可能。(2)成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。(3
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