血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)培訓(xùn)課件

血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)血型概述

血型是人類血液以血型抗原為表現(xiàn)型的遺傳性狀，ABO血型系統(tǒng)和Rh血型系統(tǒng)是紅細(xì)胞的兩大血型抗原抗體系統(tǒng)，在臨床輸血和血液遺傳學(xué)研究上有重要意義。

血型鑒定(bloodtyping)是臨床輸血的首要問題，正確的血型鑒定是保證輸血安全的前提條件。2血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)主要內(nèi)容ABO血型系統(tǒng)ABO血型系統(tǒng)抗原ABO血型系統(tǒng)抗體ABO血型系統(tǒng)亞型ABO血型鑒定檢測原理鑒定方法方法學(xué)評(píng)價(jià)質(zhì)量控制RH血型系統(tǒng)RH血型系統(tǒng)抗原RH血型系統(tǒng)抗體RH血型鑒定檢測原理鑒定方法方法學(xué)評(píng)價(jià)質(zhì)量控制3血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)ABO血型系統(tǒng)抗體分為天然抗體和免疫性抗體天然抗體主要為IgM型免疫球蛋白免疫性抗體則來自母嬰血型不合的妊娠或血型不合的輸血，通常是來自母體的IgG型免疫球蛋白。4血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)ABO血型系統(tǒng)抗體兩種抗體的比較特性IgM型IgG型分子量（kD）1000160耐熱性（70℃）破壞穩(wěn)定與紅細(xì)胞結(jié)合最適溫度（℃）4-2537與紅細(xì)胞反應(yīng)介質(zhì)生理鹽水酶處理或清蛋白溶液被血型物質(zhì)中和能不能通過胎盤不能能5血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)ABO血型系統(tǒng)亞型A抗原的主要亞型有A1和A2，均能與抗A血清發(fā)生直接凝集反應(yīng)。AB血型中也存在相應(yīng)的A1B和A2B亞型。B亞型較少見，且抗原性弱，故臨床意義不大。6血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)ABO血型檢測原理血型抗原與相應(yīng)抗體在反應(yīng)介質(zhì)中形成紅細(xì)胞和相應(yīng)血型抗體結(jié)合的免疫復(fù)合物，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。正向定型（directtyping）反向定型（indirecttyping）7血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)鑒定方法血凝試驗(yàn)玻片法試管法全自動(dòng)微板法流式細(xì)胞技術(shù)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)微柱凝膠試驗(yàn)8血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)鑒定方法鹽水凝集法（saltmediumtest）9血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)鑒定方法正定型，玻片法10血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)鑒定方法玻片法評(píng)價(jià)它是目前臨床常用的血型鑒定的初篩試驗(yàn)方法。具有操作簡便，節(jié)省材料的優(yōu)點(diǎn)。但弱凝集反應(yīng)需要借助顯微鏡觀察確定。11血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)鑒定方法反定型，試管法12血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)鑒定方法試管法評(píng)價(jià)——優(yōu)點(diǎn)試管法是交叉配血試驗(yàn)中最基礎(chǔ)的試驗(yàn)方法之一。與玻片法原理相同，但是借助試管更大的反應(yīng)空間，并對(duì)待測紅細(xì)胞予以一定的濃度的稀釋或者加入更多的待測紅細(xì)胞，通過低速離心后可根據(jù)有無肉眼可見凝集反應(yīng)來判斷結(jié)果。由于待測紅細(xì)胞經(jīng)過稀釋，在一定程度上減少了血液中非特異性抗體的濃度，從而提高了試驗(yàn)的敏感性。比玻片法更具有準(zhǔn)確可靠的優(yōu)點(diǎn)。13血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)鑒定方法試管法評(píng)價(jià)——缺點(diǎn)只能檢測出完全抗體（抗A、抗B）引起的血型不合，對(duì)免疫性抗體引起的血型不合不能檢出，有輸血史或不明輸血史及妊娠史不能用該法。本實(shí)驗(yàn)中的生理鹽水對(duì)血清（漿）中的抗體有稀釋作用，易導(dǎo)致配血結(jié)果假陰性。易受冷凝集素的干擾。14血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)方法學(xué)評(píng)價(jià)鹽水凝集法操作簡便，無需特殊儀器。玻片法：無需離心，適用于血型普查。但反應(yīng)時(shí)間長，靈敏度差，凝集較弱時(shí)易導(dǎo)致定型錯(cuò)誤。不適于反向定型。試管法：用離心法加速反應(yīng)，所需時(shí)間短，適于急診定型。因離心增強(qiáng)紅細(xì)胞凝集，可發(fā)現(xiàn)較弱的凝集現(xiàn)象，有助于檢出亞型，故為常用血型鑒定方法。只能檢測完全抗體易受冷凝集素干擾15血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)鑒定方法凝膠微柱法16血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)鑒定方法凝膠微柱法的結(jié)果17血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)方法學(xué)評(píng)價(jià)凝膠微柱法重復(fù)性好，特異性和靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確。試劑成本較高，需用離心設(shè)備。根據(jù)不同需要可選用中性凝膠、特異凝膠或抗球蛋白凝膠作為反應(yīng)介質(zhì)。結(jié)果既可肉眼觀察，也可用血型分析儀分析。18血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)鑒定方法全自動(dòng)微板法標(biāo)準(zhǔn)化加樣、孵育、離心、懸浮、靜止反應(yīng)前后吸光度值增加數(shù)值的計(jì)算對(duì)血型進(jìn)行正定型與反定型19血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)方法學(xué)評(píng)價(jià)全自動(dòng)微板法此法正反定型試驗(yàn)，準(zhǔn)確率高，且能提高檢測靈敏度，使弱凝集樣本更加易顯現(xiàn)。快速、準(zhǔn)確、自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)，適合批量操作。血型微量化檢測具有節(jié)約大量昂貴抗血清、縮短檢測時(shí)間、操作程序簡單等優(yōu)點(diǎn)，目前在各大采供血機(jī)構(gòu)已得到廣泛應(yīng)用。20血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)鑒定方法流式細(xì)胞技術(shù)稀釋：將待測血樣的紅細(xì)胞用生理鹽水稀釋成百分之五的紅細(xì)胞懸液。標(biāo)記：分裝各管分別等比加入熒光素標(biāo)記抗體，避光放置15min待受檢紅細(xì)胞上的血型抗原與相應(yīng)熒光標(biāo)記抗體結(jié)合后，用生理鹽水洗滌離心除去未結(jié)合抗體。檢測：重懸后立即用流式細(xì)胞儀檢測與熒光標(biāo)記抗體結(jié)合的紅細(xì)胞，通過軟件分析，從而得到待測樣本的紅細(xì)胞血型。21血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)方法學(xué)評(píng)價(jià)流式細(xì)胞術(shù)在細(xì)胞分型方面具有速度快、靈敏度高、特異性好，檢測結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好。特別適合應(yīng)用于ABO血型亞型的快速鑒定。目前有研究指出流式細(xì)胞技術(shù)亦可通過分離孕婦血液中的胎兒紅細(xì)胞用于產(chǎn)前非侵入性胎兒血型檢測。22血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)質(zhì)量控制2.被檢紅細(xì)胞標(biāo)本新鮮，嚴(yán)防污染。某些疾病出現(xiàn)假凝集，可加做自身血清和紅細(xì)胞，自身紅細(xì)胞和生理鹽水對(duì)照試驗(yàn)及結(jié)合反定型結(jié)果進(jìn)行鑒定。當(dāng)疑有血漿成分干擾血型鑒定時(shí)可用生理鹽水反復(fù)洗滌紅細(xì)胞以除干擾。24血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)質(zhì)量控制3.試驗(yàn)器材器材清潔、干燥、標(biāo)記清楚。用試管法定型時(shí)，應(yīng)同時(shí)進(jìn)行正向和反向定型。須設(shè)置對(duì)照。紅細(xì)胞濃度按要求配置，紅細(xì)胞與相應(yīng)抗體的比例適當(dāng)。反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間、離心時(shí)間。弱A亞型和弱B亞型，肉眼判斷必同時(shí)須用顯微鏡復(fù)查。25血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)Rh血型系統(tǒng)抗原及抗體Rh血型系統(tǒng)抗原目前已發(fā)現(xiàn)的Rh抗原有45種，其中與人類關(guān)系最為密切的是D、E、C、c、e五種。D抗原的抗原性最強(qiáng)。Rh血型系統(tǒng)抗體絕大多數(shù)Rh抗體由輸血或妊娠刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的IgG型免疫性抗體。主要Rh血型系統(tǒng)抗體有抗D、抗E、抗C、抗c、抗e五種，其中抗D最為常見。26血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)Rh血型檢測方法酶介質(zhì)法聚凝胺試驗(yàn)（polybrenetest）27血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)Rh血型檢測方法抗球蛋白試驗(yàn)（antiglobulintest）28血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)Rh血型檢測方法人源鹽水介質(zhì)抗D試驗(yàn)低離子強(qiáng)度溶液試驗(yàn)29血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)CompanyLogo方法學(xué)評(píng)價(jià)

方法

評(píng)價(jià)酶介質(zhì)法（直接法）

簡單、快速、經(jīng)濟(jì)，但靈敏度低。酶介質(zhì)法（間接法）

簡單、經(jīng)濟(jì)、靈敏?？设b定抗原和檢測抗體。

但較費(fèi)時(shí)，準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性較差低離子強(qiáng)度溶液試驗(yàn)反應(yīng)時(shí)間短，靈敏度高聚凝胺試驗(yàn)快速、靈敏、準(zhǔn)確性高，應(yīng)用較多抗球蛋白試驗(yàn)

檢查不完全抗體最可靠方法，但操作復(fù)雜，

費(fèi)時(shí)，試劑較貴。多用于新生兒溶血病的診

斷及因血型不合輸血產(chǎn)生的血型抗體的檢測人源鹽水介質(zhì)抗D試驗(yàn)

操作簡單，特異性和靈敏度均高，應(yīng)用廣泛，

但試劑昂貴30血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)質(zhì)量保證檢測前標(biāo)本處理：標(biāo)本新鮮，嚴(yán)防污染。為避免假陰性，被檢紅細(xì)胞要用生理鹽水充分洗滌。試劑和器材：使用有效期內(nèi)的合格試劑?？寡逡咨票４妫乐挝廴?。使用的儀器、器材清潔干燥。31血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)質(zhì)量保證檢測中抗原抗體比例、介質(zhì)濃度反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)溫度、離心條件陰性對(duì)照、陽性對(duì)照及試劑對(duì)照紅細(xì)胞上的Rh抗原與相應(yīng)抗體反應(yīng)形成的凝集較弱，觀察結(jié)果不可用力振搖當(dāng)結(jié)果可疑時(shí)，須用顯微鏡觀察確認(rèn)32血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)質(zhì)量保證檢測后復(fù)查實(shí)驗(yàn)全過程，填寫試驗(yàn)報(bào)告，查對(duì)無誤后方可發(fā)出報(bào)告。標(biāo)本置4℃保存1周以上，以備復(fù)查。33血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)臨床上血型檢查的質(zhì)量控制1、醫(yī)務(wù)人員的問題臨床醫(yī)生臨床護(hù)士抽取血標(biāo)本時(shí)，未校對(duì)患者的姓名、床號(hào)檢驗(yàn)科人員沒有對(duì)報(bào)告核對(duì)正確，造成血型鑒定錯(cuò)誤34血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)臨床上血型檢查的質(zhì)量控制2、被檢紅細(xì)胞血型測定的錯(cuò)誤血型：檢測時(shí)只用肉眼觀察結(jié)果，微弱、細(xì)小的凝集未看到冷凝集素：在支原體肺炎、肝硬化等疾病患者血清中，冷凝集素很高，嚴(yán)重干擾血型鑒定。ABO亞型：抗原結(jié)構(gòu)和位點(diǎn)數(shù)改變導(dǎo)致的弱表現(xiàn)。ABO血型抗體減弱：當(dāng)獻(xiàn)血者血清中抗A和抗B效價(jià)減弱，其反定型格局總表現(xiàn)為AB型。35血型檢查方法學(xué)評(píng)價(jià)及其質(zhì)量控制培訓(xùn)臨床上血型檢查的質(zhì)量控制3、其它因素輸血或妊娠：產(chǎn)生不規(guī)則抗體類B抗原：某些受腸道革蘭氏陰性桿菌感染的病人，紅細(xì)胞獲得了類B抗原，A型病人可誤定為AB型，O型誤定為B型磺胺類藥物：注射青霉素后，有些人的血清中含有青霉素抗體，而青霉素已吸附在紅細(xì)胞表面，當(dāng)此紅細(xì)胞與血清相遇時(shí)便發(fā)生凝集。