臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程

- -臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第一節(jié) 臨床血液學(xué)檢驗(yàn)血常規(guī)檢查【標(biāo) 本】抗凝靜脈血（有些儀器也可用末梢血?！痉?法】血液細(xì)胞自動(dòng)分析儀測(cè)定法?！驹?劑】血液細(xì)胞自動(dòng)分析儀配套試劑?！静?作】詳見(jiàn)自己實(shí)驗(yàn)室血液細(xì)胞自動(dòng)分析儀使用手冊(cè)?！靖?注】1.血常細(xì)胞計(jì)、詳見(jiàn)有關(guān)資料。2.半自動(dòng)及全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀從設(shè)計(jì)上均要求用抗凝靜脈- - -血。其優(yōu)點(diǎn)為：（1）靜脈血能正確地反映病人實(shí)際情況，重復(fù)性好；（2）利于延長(zhǎng)儀器的使用壽命；（3）解決了采血盤(pán)的交叉感染問(wèn)題等。3.血細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)用EDTAK：為抗凝劑EDTA·K·2HO1.5～2 2 22.2mg可抗凝1l血。4.貯血容器應(yīng)選用有蓋塑料管。抗凝血采集后在室溫中貯存應(yīng)不超過(guò)6h；如需制作血涂片應(yīng)在h完成。5.測(cè)定前必須將EDTA·K抗凝血充分混勻。26.血細(xì)胞分析儀測(cè)定最適溫度為18～22℃，低于15℃或高于30℃，均可使體積發(fā)生改變，影響各參結(jié)果。7.血細(xì)胞分析儀用于白細(xì)胞分類(lèi)只能當(dāng)作一種過(guò)篩手段，當(dāng)白細(xì)細(xì)≥8.0%；紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板的任何一個(gè)直方圖出形等情況須用顯鏡及分類(lèi)。嗜酸性粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)【標(biāo) 本】末梢血或抗凝靜脈血?！痉?法】直接計(jì)數(shù)法?！驹?劑】- - -.n；2.乙醇-伊紅稀釋液；3.伊紅-丙酮稀釋液?！静?作】1．小試管中加稀釋液0.38ml。2血20ul。3置3in低高數(shù)10個(gè)大方格嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)?？倲?shù)×0×06=嗜酸性粒細(xì)胞/L?！靖?注】1.血液稀釋后應(yīng)于h計(jì)數(shù)完畢。2.充池前要充分混勻，但又不宜用力過(guò)猛。3.住院病人采集標(biāo)本時(shí)間力求統(tǒng)一，以免受日間生理變化的影響。紅細(xì)胞沉降率測(cè)定【標(biāo) 本】抗凝靜脈血?！痉?法】氏法。【試 劑】109mmol/L枸櫞酸鈉溶液。【操 作】1.3mm×100mm試管1支，在2ml容量處刻上記號(hào)抗凝劑- - -0.4ml。2.靜脈采血后，取下針頭，加血至刻度，旋轉(zhuǎn)混合。3.用血沉管（300mm×2.5mm）吸取上述混勻血液至"0"刻度處，拭去管外附著，將管垂直立在血沉架上。4.記時(shí)，室溫中靜置1h，觀察血漿高度，細(xì)胞下毫米數(shù)報(bào)告之。【附 注】1.紅細(xì)胞在單位時(shí)間下沉的速度與血漿蛋白的量與質(zhì)，血漿中脂類(lèi)的量和質(zhì)紅細(xì)胞的大小與量是否成串錢(qián)相聚以及血沉管的徑、清潔度、放是否垂直，室溫因素都有關(guān)系。2.標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)空腹。3.血液和抗凝劑的比例要準(zhǔn)確。4.血沉管徑要標(biāo)準(zhǔn)2.5mm，放置要垂直。5.做血沉的標(biāo)本要在采集后h測(cè)定，并分混勻。6.室溫過(guò)低、過(guò)高和貧血時(shí)，對(duì)結(jié)果有影響。為此，血沉應(yīng)盡量放在18～25℃室溫下測(cè)定。室溫過(guò)高時(shí)血沉加快，可以按溫度系數(shù)校正。室溫過(guò)低時(shí)血沉減慢正。網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)【標(biāo) 本】末梢血或抗凝靜脈血?！痉?法】百分計(jì)數(shù)法。- - -【試 劑】10g/L煌焦油藍(lán)生理鹽水溶液或1g/L煌焦油藍(lán)ACD液。【操 作】1.于小試管中滴加1滴煌焦油藍(lán)生理鹽水溶液或煌焦油藍(lán)ACD溶液。2.加入末梢血或靜脈血2滴于上述試管中，混勻。3.靜置1520min后，取用1滴制成薄片。4.油鏡下檢查1000對(duì)。【附 注】1.活體染色時(shí)間不能過(guò)短，室溫低時(shí)，放37℃溫箱。2.網(wǎng)織紅細(xì)胞也可用ilr窺盤(pán)計(jì)數(shù)法熒光染色或流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)。嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)【標(biāo) 本】末梢血?！痉?法】百分計(jì)數(shù)法。【試 劑】1.甲醇；2.堿性亞甲基藍(lán)染液（保存2～3周?！静?作】- - -1.按常法制成薄血片，自然干燥后，用甲醇固定3min。2.用堿性亞甲基藍(lán)染液染色1～2min，水洗待干。3.用油鏡計(jì)數(shù)1000率?！靖?注】1.用堿性亞甲基藍(lán)染液染色后，紅細(xì)胞呈淺藍(lán)綠色，嗜堿性點(diǎn)彩呈深藍(lán)色。2.也可用瑞氏染色，嗜堿性點(diǎn)彩呈藍(lán)黑色。3.由于點(diǎn)彩紅細(xì)胞分布不勻，必要時(shí)擴(kuò)大計(jì)數(shù)紅細(xì)胞數(shù)。 體液及排泄物檢查尿液檢驗(yàn)?zāi)虺Ｒ?guī)檢查【標(biāo) 本】新鮮尿液?！痉?法】化學(xué)試帶法?！驹?劑】各型號(hào)尿液化學(xué)分析儀配套試帶?！静?作】- - -詳見(jiàn)自己實(shí)驗(yàn)室的尿液化學(xué)分析儀使用手冊(cè)?！靖?注】1.尿常規(guī)檢查使用尿液化學(xué)分析儀，目前能進(jìn)行8～10項(xiàng)檢測(cè)（PH蛋白葡萄酮體尿膽紅素尿膽素原亞硝酸鹽、比重、白細(xì)胞。這些項(xiàng)目亦有相應(yīng)的手見(jiàn)有關(guān)資料。2.必須了解所用試帶各膜塊注意事項(xiàng)、藥物干擾。3.要注意尿液化學(xué)分析儀測(cè)定結(jié)果與手工法的差異，必要時(shí)用手工法復(fù)查。4.尿液化學(xué)分析儀檢測(cè)僅是一個(gè)過(guò)篩手段，當(dāng)?shù)鞍?、隱血、白細(xì)胞等出現(xiàn)果（如尿蛋白“＋”或以上，應(yīng)進(jìn)行鏡檢。5.尿液顏色、透明度等一般性狀異常時(shí)也應(yīng)報(bào)告。本－周氏（Bence-Jones）蛋白定性檢查【標(biāo) 本】新鮮尿液?！痉?法】熱沉淀反應(yīng)法。【試 劑】1.00g/L磺基水酸溶液；2.2mol/L醋酸鹽緩沖液pH4.9±0.1?！静?作】1.先將尿液用磺基水酸法作蛋白定性檢查，如呈陰性反應(yīng)，則- - -可認(rèn)為標(biāo)本中本－周氏陰性。2.取透明尿液4ml于試管中再加入醋酸鹽緩沖液ml混勻后，放置56℃水浴中15水沸3濁減弱或沉淀減少，均提示本-周氏蛋白陽(yáng)性。若煮沸后，渾濁增加或沉淀增多表明此尿液中還有其它此時(shí)應(yīng)將試管從沸水中取出立即過(guò)濾濾液開(kāi)始透明溫度下降后渾濁煮沸時(shí)又透明，提示-周氏蛋白為陽(yáng)性?！靖?注】1.過(guò)多的本-周氏蛋白在90℃以上不易完全溶解故需與對(duì)照管比較，也可將尿液稀釋后再測(cè)。2.煮沸過(guò)濾除去尿中白、球蛋白時(shí)，動(dòng)作要迅速，并需保持高溫，否則本-周氏蛋白也會(huì)濾去。尿乳糜定性檢查【標(biāo) 本】新鮮尿液?！驹?劑】1.乙醚（AR；2.丹Ⅲ醋酸乙醇染色液或猩紅染色液。【操 作】1.取尿5～10ml，加乙醚23ml合振搖后，使脂肪溶于乙醚。靜分鐘后，2000r/min心n。2.吸取乙醚與尿液的界面層涂片，加丹Ⅲ醋酸乙醇染色液或猩- - -液1。3.鏡檢觀察是否有紅色脂肪小滴?！靖?注】1.尿液中加少量飽和氫氧化鈉，再加乙醚，有助于澄清。2.將分離的乙醚層隔水蒸干，若留有油狀沉淀，也可加丹Ⅲ，鏡檢證實(shí)有無(wú)脂肪小滴。尿膽色素原定性試驗(yàn)【標(biāo) 本】新鮮尿液。【試 劑】1.對(duì)二甲氨基苯甲醛試劑；2.飽和醋酸鈉溶液；3.氯仿；4.正丁醇。【操 作】1.在試管中加入尿標(biāo)本l及對(duì)二甲氨基苯甲醛試劑2ml混合。2.立即加飽和醋酸鈉溶液4ml混仿3ml搖混合后，上層水溶液呈紅色者為陽(yáng)性反應(yīng)。3.陽(yáng)性結(jié)果應(yīng)用下法證實(shí)：如尿膽原含量多，用一次氯仿不能完全抽提尿膽原應(yīng)多次用氯提直至氯仿層呈淡粉紅色或無(wú)色醇- - -4ml，如液仍呈紅色實(shí)尿中膽色為陽(yáng)性。【附 注】1.醋酸鈉溶液必須為飽和液。2.當(dāng)尿膽色素原濃度太高時(shí)，應(yīng)將尿標(biāo)本稀釋25100。3.尿液必須新鮮，不能久置。尿苯丙酮酸定性試驗(yàn)【標(biāo) 本】新鮮尿液。【方 法】三氯化鐵法?！驹?劑】1.100g/L三氯化鐵液；2.磷酸鹽沉淀劑?！静?作】1.尿液4l加磷酸鹽沉淀劑1ml，混勻，靜置3min，如出現(xiàn)沉淀，可用濾紙過(guò)濾或離心除去。2.濾液中加入濃鹽酸23和100g/L三氯化溶液23滴，每加1滴立即觀察顏色變化。以尿液顯藍(lán)綠色并持續(xù)2~4min為陽(yáng)性。【附 注】1.尿中若含酚類(lèi)藥物（如水酸制劑）及氯丙嗪，也可與氯化鐵結(jié)合顯色，試驗(yàn)用此類(lèi)藥物。膽可造成假陽(yáng)性。- - -2.小兒出生后6周不易查出。故于出生6周后檢查為。3.大多數(shù)苯丙酮尿癥患者的尿液可出現(xiàn)陽(yáng)性。但約1/41/2病例可能會(huì)漏檢4.亦可采用，4-二硝基苯肼法。尿沉渣檢查【標(biāo) 本】新鮮尿液（最好采集清晨中。【方 法】顯微鏡檢查法。【操 作】1.液l1500r/min離心5min。2.下0.2ml形成分充分混勻。3.取尿沉渣0.02ml，滴在載玻片上，用18mm×18mm的蓋玻片覆蓋。4.用10×10其中有形。用00鏡頭觀察鑒定細(xì)胞成分及計(jì)算數(shù)察0個(gè)視野所見(jiàn)鏡察20個(gè)視野，算出一個(gè)視平均值，記錄結(jié)果。尿鹽類(lèi)數(shù)量以每一高倍視野＋2＋3、4?！靖?注】- - -1.清晨（一般情況應(yīng)采集中段尿在1h檢。2.見(jiàn)到各種上皮細(xì)胞也應(yīng)報(bào)告，報(bào)告方式參照白細(xì)胞。3.亦可采用染色尿沉渣鏡檢。尿沉渣定量檢查【標(biāo) 本】新鮮晨尿?！痉?法】一小時(shí)尿沉渣計(jì)數(shù)法?！静?作】1.集3h尿液于干燥容器送檢（標(biāo)本留取時(shí)間5:308:30。2.準(zhǔn)確測(cè)量3h液10ml心1500r/min心n液9ml下1ml充分混勻。吸取混勻尿液1滴，注于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板。細(xì)胞共數(shù)0大數(shù)0胞/h胞/h型/h?！靖?注】1.尿液應(yīng)新鮮，PH應(yīng)在6以下。2.尿液比重最好在.26以上。3.如尿液中含多量磷酸鹽時(shí)，應(yīng)加少量稀醋酸液（切勿加多，使其溶解；含酸鹽時(shí)，應(yīng)加溫使其溶解。4.亦可采用尿沉渣定量分析板或尿沉渣自動(dòng)分析儀進(jìn)行尿沉渣- - -定量檢查，詳見(jiàn)有關(guān)資料。絨毛膜促性腺激素檢測(cè)【標(biāo) 本】新鮮尿液?！痉?法】金標(biāo)抗體檢測(cè)法?！静?作】見(jiàn)試劑盒說(shuō)明書(shū)。【附 注】若質(zhì)控點(diǎn)和測(cè)定點(diǎn)均不呈現(xiàn)紅色，表示劑失效。糞便檢驗(yàn)糞便的顯微鏡檢查【標(biāo) 本】新鮮糞便。【方 法】直接涂片鏡檢法?！静?作】1.潔凈玻片上加等滲鹽水12或覆以蓋片。涂片的能透過(guò)印刷物字跡為準(zhǔn)）檢查。- - -2.在涂片中如發(fā)現(xiàn)疑似包囊，則在該涂片上滴加1滴碘液，在高倍鏡下仔細(xì)鑒別，如仍不能決取全量糞便濃縮法檢查。隱血試驗(yàn)【標(biāo) 本】新鮮糞便。【方 法】免疫學(xué)檢測(cè)法?！静?作】取一片潔凈干燥的載玻片，滴加23滴蒸，取糞便少，反應(yīng)端浸濕在5min觀察結(jié)果應(yīng)線及質(zhì)控線均呈藍(lán)色帶為?！靖?注】1.若兩條線均不顯色，說(shuō)明試紙條失效。2.本法由于間斷性出血或出血在糞便中分布不均等因素，可造成假陰性結(jié)果。3.本法由于藥物等原因，對(duì)正常人檢查有時(shí)會(huì)得到陽(yáng)性結(jié)果。4.亦可采用化學(xué)試帶法、鄰甲聯(lián)苯胺法、愈創(chuàng)木酯法等。收集標(biāo)本前3本法不受動(dòng)物血紅蛋白的干擾，試驗(yàn)前不須禁食肉類(lèi)。糞膽素檢查- - -【標(biāo) 本】。【方 法】氯化高汞煮沸法。【試 劑】飽和氯化高汞溶液?！静?作】1.于小試管置糞便一小塊，加飽和氯化高汞溶液數(shù)毫升。2.將糞塊調(diào)勻，加熱煮沸mn，立即觀顏色反?！靖?注】1.結(jié)果不易判定時(shí)，應(yīng)注意糞便顏色，必要時(shí)以鹽水代替試劑做空白對(duì)照。2.當(dāng)糞便顆粒經(jīng)煮沸后如有紅色又有綠色出現(xiàn)，說(shuō)明標(biāo)本既含糞膽素又含膽紅素，常見(jiàn)于腸等。腦脊液檢驗(yàn)氏（Pandy）球蛋白定性試驗(yàn)【標(biāo) 本】新鮮腦脊液?！驹?劑】5%苯酚溶液（棕色瓶保存?！静?作】取試劑2～3ml管腦液12以- - -黑色背景，觀察結(jié)果，報(bào)告陰性或及陽(yáng)性的程度。細(xì)胞計(jì)數(shù)【標(biāo) 本】新鮮腦脊液?！驹?劑】1.細(xì)胞計(jì)數(shù)板；2.紅細(xì)胞稀釋液；3.冰乙酸；4.1%冰乙酸?！静?作】1.細(xì)胞總數(shù)：（1數(shù)0個(gè)大方格紅、白細(xì)為每ul的細(xì)胞數(shù)較多，可計(jì)數(shù)一大格的細(xì)胞數(shù)×10。（2）渾濁或帶血腦脊液：用血紅蛋白吸管吸取混勻的腦脊液20ul液0.38ml用數(shù)4以0即為每ul腦脊液的細(xì)胞總數(shù)。2．白細(xì)胞數(shù)：（1酸12壁沾有冰乙酸后傾然后滴加混勻的腦脊液3～4滴，數(shù)分鐘后，- - -混勻充入計(jì)數(shù)池，按細(xì)胞總數(shù)紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)。（2將混勻的腦脊液用1%冰乙酸溶液稀釋后按細(xì)胞總數(shù)操作中的細(xì)胞計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)，結(jié)果×稀釋倍數(shù)。3．細(xì)胞分類(lèi)：（1）直接分類(lèi)法：白細(xì)胞計(jì)數(shù)后，將低倍鏡換成高倍鏡，直接在高倍鏡下根據(jù)細(xì)胞核的形態(tài)單個(gè)核細(xì)（包括巴及數(shù)100白于100個(gè)，應(yīng)接寫(xiě)出單多核細(xì)具體數(shù)字。（2）染色分類(lèi)法：如直接分類(lèi)不易區(qū)分細(xì)胞時(shí)，可將腦脊液離物2清1室或37℃溫箱待干，進(jìn)行瑞氏染色后用油鏡分類(lèi)。如見(jiàn)有不能分類(lèi)的細(xì)胞，應(yīng)另行描述報(bào)告?！靖?注】1.腦脊液常規(guī)包括一般性狀檢查、氏（Pandy）球蛋白定驗(yàn)及細(xì)胞計(jì)數(shù)。2.計(jì)數(shù)應(yīng)及時(shí)進(jìn)行。3.細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)注意新型隱球菌與白細(xì)胞的區(qū)別。4.計(jì)數(shù)池用后，應(yīng)用75%毒60min。漿膜腔積液檢查漿膜粘蛋白定性試驗(yàn)（Rivalta反應(yīng)）【標(biāo) 本】新鮮漿膜腔積液。- - -【試 劑】?！静?作】取00ml水100ml酸0.1m（～5分背觀察白色霧狀沉淀的發(fā)生及其下降速度等報(bào)告陰性或陽(yáng)性及陽(yáng)性的程度。細(xì)胞學(xué)檢查【標(biāo) 本】新鮮漿膜腔積液?！静?作】1.細(xì)胞總數(shù)及有核細(xì)胞計(jì)數(shù)方法基本與腦脊液同，漏出液中有核細(xì)胞數(shù)量常在100×106/L以下；滲中有核細(xì)胞數(shù)量，常在500×106/L以上。2.細(xì)胞分類(lèi)：穿刺液應(yīng)在抽出后立即離心，用沉淀物涂片后以瑞氏染色法進(jìn)行分類(lèi)必要時(shí)制備稍厚涂片在干燥前醚乙醇等量混合液中固定30min，用木-伊紅（HE）或巴氏法染色查找癌細(xì)胞。精液檢查精子活動(dòng)率- - -【標(biāo) 本】?！静?作】取新鮮標(biāo)本混勻后在溫?zé)岵Ｆ嫌酶弑剁R觀察100個(gè)精子計(jì)數(shù)活動(dòng)精子與不活動(dòng)精子的比精子活動(dòng)的百分率?！靖?注】如室溫低于10℃時(shí)應(yīng)將標(biāo)本先放入37℃溫育5～10min后鏡檢。精子活力【標(biāo) 本】新鮮精液?！静?作】取上述新鮮濕片標(biāo)本，觀察精子的活動(dòng)力，以0級(jí)至Ⅳ級(jí)報(bào)告。精子計(jì)數(shù)【標(biāo) 本】新鮮精液?！驹?劑】精子稀釋液?！静?作】1.于小試管加精子稀釋液0.38ml，吸液化精液20ul，加入稀釋液搖勻。2.置12min沉- - -后，以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行。3.如精子數(shù)少，數(shù)2乘0萬(wàn)即為每毫升精數(shù)，再換算成×109/L報(bào)告。4.如精子數(shù)多，可計(jì)數(shù)5個(gè)中方格精子數(shù)，加6個(gè)零為每ml精液精子數(shù)再換算成×109/L報(bào)告。【附 注】1.收集精液前應(yīng)避免性生活3~7天，精液宜用清潔干燥之小瓶冬季應(yīng)注意保溫。2.出異應(yīng)復(fù)查23次方能得出比較的結(jié)果。3.如低倍鏡、高倍鏡檢查均無(wú)精子，應(yīng)將精液離心沉淀后再涂片檢查，如兩次均無(wú)精子，報(bào)子。精子形態(tài)觀察【標(biāo) 本】新鮮精液?！驹?劑】革蘭或瑞氏染液?！静?作】革蘭或瑞氏染色后用油觀察，報(bào)告異常精子的百分比。- - -前列腺液檢查【標(biāo) 本】新鮮前列腺（臨床醫(yī)師作前列腺按摩術(shù)后采集標(biāo)本于清潔玻片上，立即送檢?！静?作】1.肉眼觀記錄液體顏色是否混有血液粘稠（有無(wú)膿塊。2.濕片鏡檢：高倍鏡下觀察白細(xì)胞、紅細(xì)胞、卵磷脂小體，其次為上皮細(xì)胞、淀粉樣體等，必蘭染色查細(xì)菌。陰道分泌物檢查【標(biāo) 本】陰道分泌物?！静?作】1.清潔度：取陰道分泌物，用生理鹽水涂片，高倍鏡檢查，根據(jù)所含白細(xì)膿細(xì)胞上皮細(xì)桿菌菌的多少分成Ⅰ～Ⅳ度。2.滴蟲(chóng)檢查：在濕片鏡下如見(jiàn)梨形，比白細(xì)胞大2倍，頂端有鞭毛4根，在2542℃溫度下可活動(dòng)蟲(chóng)（在寒冷天氣，標(biāo)要采取保溫措施，報(bào)告之。3.霉菌檢查：在濕片高倍鏡下如見(jiàn)卵圓形霉菌孢子，報(bào)告之。痰液檢查顯微鏡檢查- - -【標(biāo) 本】。【操 作】取1接檢注意有無(wú)紅細(xì)胞白細(xì)胞上皮細(xì)胞枯什曼螺旋體、夏科-雷登結(jié)晶膽結(jié)磺線菌寄生蟲(chóng)可見(jiàn)蛔蟲(chóng)卵、肺吸蟲(chóng)卵、痢疾阿米巴、真菌孢子、心力衰竭細(xì)胞、載碳細(xì)胞細(xì)胞等。嗜酸性粒細(xì)胞檢查【標(biāo) 本】痰液?！驹?劑】瑞氏或伊紅-美藍(lán)染色液?！静?作】取痰液做直接涂片，干燥后用瑞氏或伊紅-美藍(lán)染色液染色，油鏡下計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞，報(bào)告嗜酸性粒細(xì)胞百。- - - 血栓與止血的檢驗(yàn)血管壁與皮細(xì)胞檢驗(yàn)出血時(shí)間（BT）出血時(shí)間檢測(cè)是指皮膚受特定條件的外傷后出血自止所需的時(shí)間此過(guò)程反映皮膚毛細(xì)血管與血小板相互作包括血小板粘附，血小板活放以及血小板聚集等反應(yīng)。1.出血時(shí)間“測(cè)定器法”自肘前窩凹下二橫指處，經(jīng)常規(guī)消毒濾紙吸干流出的血至出血自然停止，按停秒表，記錄出血。2.Duke法，自耳垂或指尖取血。【方法與操作】見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版）【注意事項(xiàng)】測(cè)定器法：1.采取部位應(yīng)保暖，血液應(yīng)自動(dòng)流出。2.由于刺入皮膚的刀片長(zhǎng)度和深度均固定，故“測(cè)定器法”的結(jié)果較為準(zhǔn)確。3.濾紙吸干流出血液時(shí)，應(yīng)避免與傷口接觸。4.試驗(yàn)前1周不能服用抗血小板藥物，如阿司以免影響結(jié)果。- - -血小板數(shù)量和功能檢驗(yàn)血小板計(jì)數(shù)和平均血小板體積測(cè)定血小板計(jì)數(shù)：目視計(jì)數(shù)法。【標(biāo) 本 】末梢血或抗凝靜脈血?！痉椒ㄅc操作】見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版?！驹?劑】1.草酸銨法稀釋液。2.許汝和稀釋液?！靖?注】1.血小板稀釋液要清潔。防微粒和細(xì)菌污染。試管和吸管也應(yīng)清潔、干凈。2.針刺應(yīng)稍深，使血流通暢。拭去第一滴血后，首先采血作血小板檢測(cè)防止血小板聚集和破壞采取標(biāo)本后盡快計(jì)數(shù)。3.血液稀釋液充分混勻后，滴入計(jì)數(shù)池后，要靜置10~15min。室溫高時(shí)注意保池周?chē)臐穸?，以免水分蒸發(fā)。4.計(jì)數(shù)時(shí)光線要適中，注意有折光性的血小板與雜質(zhì)灰塵相區(qū)別，附在血細(xì)胞旁邊的血小板也要注意，不要漏掉。血小板計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)- - -【標(biāo) 本】?！痉椒ㄅc操作】使用血小板計(jì)數(shù)儀及與其相匹配的稀釋液操作詳見(jiàn)儀器說(shuō)明書(shū)。平均血小板體積（MPV）測(cè)定【標(biāo) 本】根據(jù)儀器的要求用末稍血或靜脈取血注入抗凝（EDTA.Na或肝2素）【方法與操作】自動(dòng)化血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀均可檢測(cè)血小板功能檢驗(yàn)血小板粘附試驗(yàn)【標(biāo) 本】自靜脈取血.0~15ml。【方 法】1.玻珠柱法：（1）操作：見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程。（2）注意事項(xiàng)：1）取血過(guò)程必須順利，掌握血液通過(guò)玻珠柱的速度，流速太快，粘附率流速太慢會(huì)使粘附率增高。- - -2）玻珠柱為一次性用具，用后即棄去。3）待用玻珠柱應(yīng)置于干燥器中貯存，受潮后粘附率下降。2.玻璃濾器法：【標(biāo) 本】自靜脈取血1.5ml?！痉椒ㄅc操作】見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版。血小板聚集試驗(yàn)（PAgT）【標(biāo) 本】自肘靜脈取血4.5ml注入于含0.5ml19mmoL枸椽酸鈉的硅化離心管分混勻。【試 劑】1.富含血小板血漿PR）及貧含血小板血漿（PPP。2.血小板聚集誘導(dǎo)劑AD、腎上腺素、膠原、瑞斯托霉素（Ristocetin）等?！痉椒ㄅc操作】PAgT比濁法《全床檢驗(yàn)操作規(guī)程步驟操作?！咀⒁忭?xiàng)】1.血標(biāo)本中pH6.~85之間時(shí)，可測(cè)得最佳結(jié)果p＜6.4或＞10.0時(shí)，可使聚集或消失。2.阿司匹林、生丁、肝素、雙香豆素等可抑制聚集，尤其阿司匹林抑制聚集作用時(shí)間可持續(xù)1。3.采血后標(biāo)本應(yīng)放在15~25℃下，切忌冰箱保存，并在3h完- - -。凝血因子檢驗(yàn)全血凝固時(shí)間檢驗(yàn)（CT）【標(biāo) 本】靜脈取血3ml?！痉椒ㄅc操作】試管法、硅管法操作參見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版。【附 注】1.靜脈取血要一針見(jiàn)血，盡量減少組織液和空氣混入。2.水浴箱溫度要恒定，過(guò)高或過(guò)低，可影響結(jié)果。活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定（APTT）【標(biāo) 本】自靜脈取血，用109mmol/L枸椽酸鈉作9抗凝?！驹?劑】市售成套試劑?！痉椒ㄅc操作】按試劑及有關(guān)儀器說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行。【附 注】1.標(biāo)本應(yīng)及時(shí)檢測(cè)，最遲不超過(guò)2h。2.分離血漿應(yīng)在3000r/min，離心10min。3.本試驗(yàn)較C5％- - -輕型血友病。血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定（PT，一期法）【標(biāo) 本】靜脈血1.8ml用109mmol/L鈉0.2ml抗凝?！驹?劑】1.組織凝血活酶浸出液；2..025mol/LCaCl液；2【方法與操作】見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版?！靖?注】1.采血后宜在1h完成，置冰箱4℃保存,不應(yīng)超過(guò)4h，-2℃下可放置2周-70℃可放置6個(gè)月。2.水溫箱控制在37℃1℃，過(guò)高過(guò)低均影響結(jié)果。簡(jiǎn)易凝血活酶生成試驗(yàn)（STGT）【標(biāo) 本】取全血0.04ml加5ml蒸餾水，混勻，即成溶血液，備用。【方法與操作】見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版）循環(huán)抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)?zāi)笗r(shí)間測(cè)定（TT）- - -【標(biāo) 本】血1~1.5ml，注入枸櫞酸鈉抗凝管，混勻?！痉椒ㄅc操作】見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第二版）【試 劑】1.0mmolL枸櫞酸鈉液2.凝血酶溶液【附 注】1.采血后宜在1h完成，置冰箱保存不應(yīng)超過(guò)h。2.肝素或EDTA.Na抗凝血漿不宜作本試驗(yàn)。2 溶血性貧血的檢驗(yàn)紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)【標(biāo) 本】1.簡(jiǎn)易法，靜脈血為宜。2.比色法，用肝素抗凝管，抽取靜脈血1.0~1ml，混勻?！痉椒安僮髋c試劑】1.簡(jiǎn)易法：用配有6號(hào)針頭的干燥無(wú)菌注射器取靜脈血1.0~1.5ml立即滴入試管含有量的NaCL及蒸餾水的各管，每管１滴，貧血患者可加2滴，搖勻，靜置，室溫2h，觀察結(jié)果。詳見(jiàn)《臨床實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)上冊(cè)。2.比色法：見(jiàn)《臨床實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)上冊(cè)。- - -【附 注】1.簡(jiǎn)易法：（11~2個(gè)月需更換1次試劑。（2如取耳垂血要使血液流出暢通如靜脈血要求注射器干燥。（3）如用抗凝血，以去纖維蛋白或肝素抗凝血為合適。（4）如開(kāi)始及完全溶血的結(jié)果不易判斷時(shí)，可離心后觀察。（5）地中海貧血的滲透脆性降低，需作低濃度NaCL液檢測(cè)。2.比色法：（1）如在室溫下實(shí)驗(yàn)，需在2比色結(jié)束。（2血與NaCL緩沖液的PH值及查結(jié)果均有一定影響。紅細(xì)胞自體溶血試驗(yàn)本試驗(yàn)是測(cè)定患者的紅細(xì)胞在自體血清中經(jīng)孵育后自發(fā)發(fā)生的溶血程度?！驹?劑】1.0g/L葡萄糖（無(wú)菌；2.等滲鹽水（無(wú)菌；3.Hi稀釋液；4.0.4mol/LATP生理鹽水無(wú)菌液?！痉椒ㄅc操作】見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第二版?！靖?注】- - -應(yīng)嚴(yán)守?zé)o菌操作規(guī)程。臨床微生物及寄生蟲(chóng)檢驗(yàn)細(xì)菌涂片檢查涂片不染色顯微鏡檢查1.標(biāo)本要求：各種標(biāo)本或細(xì)菌培養(yǎng)物。2.試驗(yàn)方法：直接涂片法、壓滴法或懸滴法。3.操作步驟：見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)規(guī)程。4.結(jié)果觀察：觀察標(biāo)本中有無(wú)細(xì)菌或真菌，如有再觀察細(xì)菌的形態(tài)及運(yùn)動(dòng)情況，報(bào)告所見(jiàn)。5.注意事項(xiàng)：注意微生物操作安全；標(biāo)本量不宜太多，以免影響觀察；涂片制作后立即觀察，涂片干涸后應(yīng)。涂片革蘭染色顯微鏡檢查1.標(biāo)本要求：各種標(biāo)本或細(xì)菌培養(yǎng)物。2.試驗(yàn)方法：常規(guī)法、快速法。3.操作步驟：見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)規(guī)程。4.結(jié)果觀察：觀察染色涂片有無(wú)細(xì)菌或真菌，如有則進(jìn)一步觀察觀察細(xì)菌菌體在細(xì)胞或細(xì)胞外。報(bào)。- - -5.注意事項(xiàng)：涂片厚薄適宜均勻；固定及染色不能超時(shí)，否則染色變性；只能報(bào)細(xì)菌的染色性、形態(tài)、特殊結(jié)構(gòu)及排列，不能直接報(bào)菌種如報(bào)告涂片見(jiàn)淋病奈瑟白喉棒狀桿菌。涂片抗酸染色顯微鏡檢查1.標(biāo)本要求：各種標(biāo)本或細(xì)菌培養(yǎng)物。2.試驗(yàn)方法：萋尼染色法、快速染色法或熒光（金胺－羅丹）染色法。3.操作方法：見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)規(guī)程。4.結(jié)果觀察：抗酸菌在萋尼染色法中呈紅色，在金胺－羅丹染色法中呈金黃色。5.觀察染色涂片有無(wú)抗酸桿菌，如有則進(jìn)一步觀察細(xì)菌數(shù)量大致情況。涂片細(xì)胞，則觀察菌體在細(xì)胞或外。報(bào)告所見(jiàn)。6.注意事項(xiàng)：涂片厚薄適宜均勻；固定及染色不能超時(shí)，否則染是否在細(xì)胞，不能直接報(bào)告見(jiàn)分枝桿菌或結(jié)核分枝桿菌，因奴卡菌屬、放線菌屬細(xì)菌也可為抗酸陽(yáng)性菌。涂片墨汁染色顯微鏡檢查1.標(biāo)本要求：各種標(biāo)本或細(xì)菌培養(yǎng)物。2.試驗(yàn)方法：直接染色法。3.操作步驟：見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)規(guī)程。4.結(jié)果觀察：涂片背景為黑色，新型隱球菌或細(xì)菌莢膜在染色中- - -呈折光環(huán)形菌體結(jié)構(gòu)。5.觀察染色涂片有新型隱球菌或細(xì)菌莢膜時(shí)為檢查陽(yáng)性。報(bào)告所見(jiàn)。6.注意事項(xiàng)染液與標(biāo)本液的比例為1:1比例不當(dāng)影響觀察效果；只能報(bào)告所見(jiàn)折光性環(huán)狀樣菌體不能直接報(bào)告見(jiàn)新球菌等。寄生蟲(chóng)檢驗(yàn)操作瘧原蟲(chóng)檢查1.標(biāo)本要求間日瘧及三日瘧患者應(yīng)在發(fā)作后數(shù)小時(shí)至10小時(shí)采血，惡性瘧患者在發(fā)作后0小時(shí)左右采血。2.試驗(yàn)方法：薄血厚血片染色鏡檢。3.試驗(yàn)材料：瑞氏－姬姆薩染色液、顯微鏡等。4.操作步驟：見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)規(guī)程。5.結(jié)果判斷薄片須找100或100以上個(gè)厚片須找0個(gè)視野或以上才能報(bào)告“未找到瘧。6.注意事項(xiàng)：見(jiàn)瘧時(shí)必須進(jìn)行分類(lèi)。微絲蚴檢查1.標(biāo)本要求：采血時(shí)間以晚上912前后為宜。2.試驗(yàn)方法：鮮血片法、厚血片試管濃集法。3.試驗(yàn)材料：枸櫞酸鈉等。4.操作步驟：見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)規(guī)程。- - -蟲(chóng)卵及包囊濃縮檢查1.標(biāo)本要求：新鮮糞便取蠶豆大小，放于大小與大號(hào)青霉素相似的瓶。2.試驗(yàn)方法：漂浮法、清水沉淀法。3.試驗(yàn)材料：一般檢驗(yàn)常規(guī)材料。4.操作步驟：見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)規(guī)程。肛門(mén)擦拭子蟲(chóng)卵檢查1.標(biāo)本要求：隨機(jī)取樣送檢。2.試驗(yàn)方法：軟透明紙肛門(mén)拭子檢查拭子肛門(mén)擦拭法等。3.試驗(yàn)材料：一般常規(guī)實(shí)驗(yàn)用品。4.操作步驟：見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)規(guī)程。臨床免疫學(xué)檢查傳染病免疫學(xué)檢查乙型肝炎血清標(biāo)志物（HBV一M）檢測(cè)【方 法】ELISA法?！驹?劑】國(guó)有商品化試劑盒供應(yīng)但必須按規(guī)用經(jīng)中國(guó)藥品生物制品檢定所檢定并貼“中國(guó)藥品生物制品檢定所檢定合格字樣的防偽- - -標(biāo)簽的試劑?！静?作】按試劑盒說(shuō)明書(shū)書(shū)進(jìn)行。【附 注】1．試劑盒應(yīng)置冰箱中保存，取出后平衡至室溫方可使用，未用完的微孔條須密封保存；2．每次應(yīng)設(shè)空白1孔（不加及標(biāo)酶試劑余各步相同，陰性對(duì)照3孔，陽(yáng)照2孔；3．洗滌液須用蒸鎦水或去離子水配制，洗滌時(shí)各孔均應(yīng)加滿(mǎn)洗液，以防孔口邊緣有游離酶殘凈；4．用洗板機(jī)洗板，每次洗板反復(fù)5遍，最后一次要求微孔不殘留洗滌液，如達(dá)不到要求，需；5．洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)設(shè)定30~60浸泡時(shí)間；6．滴加試劑前應(yīng)將滴瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次，使液體均勻并棄去一滴。滴加時(shí)瓶身應(yīng)保持垂直，以使滴量準(zhǔn)確，注意勿將試劑滴在孔壁上；737溫育須采用水浴箱，不可使用37孔必觸37℃水浴水面，不可懸空；8．不同批號(hào)試劑不可混合使用?！窘Y(jié)果判斷】酶標(biāo)儀雙波長(zhǎng)450/630nm比色測(cè)定；1．HBAg、抗—HB、HBeAg；S S臨界值（C.O）=陰性對(duì)照孔A值的均值N×2.1（陰性對(duì)照A值＜0.05時(shí)按0.05；- - -本A值S/C.O≥1為HBsAg抗—HBsg陽(yáng)（S/N≥2.1；標(biāo)本A值S/C.O＜1為HBsAg抗—HBsg陰（S/N＜2.1。2．抗—HBe、抗一HB；C臨界值（C.O）=陰性對(duì)照孔A值的均值N×0.5；標(biāo)本A值S/C.O≤1者為抗—HBe、抗一HB陽(yáng)性（S/N≤0.5；C標(biāo)本A值S/C.O＞1者為抗—HBe、抗一HB陰性（S/N＞0.5。C抗甲型肝炎病毒免疫球蛋白M（Anti-HAV-IgM）測(cè)定【方 法】ELISA法?！驹?劑】市售合格試劑、要求同HBV兩對(duì)半；【操 作】按試劑說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行，要求可參考HBV兩對(duì)半；【結(jié)果判斷】要求同HBV兩對(duì)半中HBsAg?？贡透窝撞《久庖咔虻鞍譍（Anti-HCV-IgG）測(cè)定【方 法】ELISA法?！驹?劑】市售合格試劑、要求同HBV兩對(duì)半?！静?作】- - -按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行、要求可參考HBV兩對(duì)半。【結(jié)果判斷】1．陰性對(duì)照：正常情況下，A≤0.08；2．陽(yáng)性對(duì)照：正常情況下，A≥0.50；3．臨界值（C.O）=陰性對(duì)照均值×2.8。陰性對(duì)照孔A值>0.08應(yīng)舍棄、如所有陰性對(duì)照孔A值均>0.08，試驗(yàn)應(yīng)重做。陰性對(duì)照孔A<0.05以0.05計(jì)算。標(biāo)本A值S/C.O≥1者為陽(yáng)性。標(biāo)本A值S/C.O<1為陰性?？笻IV（1+2）測(cè)定在選用測(cè)定方法時(shí)需根據(jù)自身?xiàng)l件和需要加以綜合考慮管所述方法靈敏度都很高、但在實(shí)際工作中，假陽(yáng)性仍然，為達(dá)到最佳的的，一般需采用下列程序。ELISA、金標(biāo)等過(guò)篩試驗(yàn)陰性排除后；陽(yáng)性者應(yīng)以同類(lèi)另一方法免重發(fā)出陽(yáng)果報(bào)告?！痉?法】1ELA膠凝集試驗(yàn)等。試劑必須使用經(jīng)中國(guó)藥品生物制品檢定所檢定“中國(guó)藥品生物制品檢定合格”防偽標(biāo)簽的商品試劑盒。2．確認(rèn)：免疫印跡法和放射免疫沉淀試驗(yàn)。- - -使用經(jīng)國(guó)家衛(wèi)生部正式批準(zhǔn)的快速免疫轉(zhuǎn)印相應(yīng)的放射免疫沉淀試劑盒?！静?作】按試劑說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行?！窘Y(jié)果判斷】按試劑說(shuō)明書(shū)要求判定?！靖?注】1．判斷是否感染HIV應(yīng)十分慎重，對(duì)可能是陽(yáng)性的樣品還應(yīng)結(jié)合其它測(cè)定項(xiàng)目的結(jié)果和臨床情況作出判斷。2．金標(biāo)法必須使用當(dāng)天新鮮血清才能保證最佳結(jié)果，否則易產(chǎn)生非特異性顯色反應(yīng)血漿必須去掉纖維蛋白否則易造成膜過(guò)濾阻塞。肥達(dá)氏反應(yīng)【方 法】大孔反應(yīng)凝集試驗(yàn)?！驹?劑】試劑市售?！静?作】按試劑盒使用說(shuō)明書(shū)執(zhí)行在大孔反應(yīng)板進(jìn)行較傳統(tǒng)的肥達(dá)氏反應(yīng)結(jié)果更每次試驗(yàn)均須做陰、陽(yáng)性對(duì)照管（孔?！窘Y(jié)果判斷 】為便于觀察，每10ml稀釋菌液中（70億菌，入20.0g/L- - -液5u1(微升，結(jié)果更清晰。凝集價(jià)O＞180、H＞1160才有診斷價(jià)值。近斯接傷寒，付菌苗者其凝集價(jià)升高?！癘抗體屬I(mǎi)gM出現(xiàn)早維間數(shù)日抗H體屬I(mǎi)gG，出現(xiàn)較晚、但維持時(shí)間可達(dá)數(shù)年?？规溓蚓苎豋（ASO）檢查【方 法】膠乳凝集法。【試 劑 】市售成套商品試劑。【操 作】按試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。1．A、S、O膠乳加入后輕搖動(dòng)到指定間應(yīng)立刻紀(jì)錄結(jié)清不性低10，在膠乳試劑加入后應(yīng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間2min，室溫升高10℃應(yīng)縮短反應(yīng)時(shí)間2min。陽(yáng)性質(zhì)控血清應(yīng)在本說(shuō)明書(shū)指定的時(shí)間出現(xiàn)清晰凝集，但不能將陽(yáng)血清出現(xiàn)凝集的時(shí)間視為判果的時(shí)間界限。2．溶血、脂血、高膽紅素血癥、高膽固醇血癥、類(lèi)風(fēng)濕因子陽(yáng)性以及標(biāo)本被細(xì)菌污染都不會(huì)驗(yàn)。3放在4效達(dá)1，但用前必須搖勻。4．本試驗(yàn)用的滴管口徑以及裝膠乳試劑的塑料瓶的口徑應(yīng)同樣- - -大小，保證液滴大小一致。梅毒血清學(xué)檢查快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片法（RPR）【試 劑】本試驗(yàn)有商品試劑盒RPR抗原液勻灰黑色無(wú)雜質(zhì)6～10℃暗處可保存1年?！静?作】按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行?！窘Y(jié)果判斷】陰性標(biāo)本不凝集陽(yáng)性標(biāo)本反應(yīng)液中可見(jiàn)明顯黑色凝集顆粒根據(jù)顆粒大小報(bào)+~++++。如有需要，陽(yáng)性標(biāo)本也可在RPR卡片上將血清用生理鹽水作1:2~1:32稀釋后，按定性試驗(yàn)方法做半定量試驗(yàn)?！靖?注】1．此試驗(yàn)的最佳溫度為23~29高。溫度過(guò)低，靈敏度可能下降；2．觀察結(jié)果要及時(shí)；3前半定驗(yàn)有助于澄清題因此呈粗糙非反應(yīng)結(jié)果的血清宜再做半定量試驗(yàn)。甲苯胺紅不加熱血清法（TRUST）【試 劑】本試驗(yàn)有商品試劑盒。- - -【操 作】按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。【結(jié)果判斷】+~++++。【附 注】1待測(cè)血清及TRUST抗原于測(cè)定前放室溫平（23～ 29℃；2．陽(yáng)性反應(yīng)需做半定量試驗(yàn)，操作方法同RPR半定試驗(yàn)。螺旋體血球凝集法（TPHA）【試 劑】市售成套試劑?！静?作】按試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行?！窘Y(jié)果判斷】定性試驗(yàn)：將標(biāo)本最終稀釋成1:40與未致敏的紅細(xì)胞反應(yīng)，作為陰性；同樣將該標(biāo)本稀釋成1:80與致敏的紅細(xì)胞反應(yīng)，如出現(xiàn)明顯之凝集現(xiàn)象為陽(yáng)性對(duì)出現(xiàn)陽(yáng)性的標(biāo)本可進(jìn)一步作1:5、1:10…的最高稀釋倍數(shù)作為該血清樣本的凝。【附 注】1以致病的梅毒螺旋體致敏明膠粒子代替細(xì)胞的TPPA試驗(yàn)與TPHA試驗(yàn)一樣，在試原理，操作及的判斷方面基致。TPPA商品化試劑盒供應(yīng)；2．梅毒血清學(xué)檢查，傳統(tǒng)的康一華氏反應(yīng)已被汰，目前常用的- - -方法除上述不加熱血清反應(yīng)素試（USRRPRTRUSTTPHATPPA外性病研試驗(yàn)VDRL及熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)FTA-ABS等；其中的FTA-ABS、TPHA、TPPA，屬特異性的密螺旋體抗原試驗(yàn)，而VDRLUSRPTRUST則用時(shí)常以其一篩選檢查，而用FTA-ABS或TPHA或TPPA作證實(shí)試驗(yàn)。腫瘤免疫學(xué)檢查甲胎蛋白（AFP）測(cè)定【方 法】ELISA法。【試 劑】本試驗(yàn)有商品試劑盒。【操 作】按試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行?！窘Y(jié)果判斷】1．定性：顯色為陽(yáng)性，無(wú)色為陰性；2測(cè)492nm線（吸光度為縱坐標(biāo)AFP含量為橫坐標(biāo)，得出標(biāo)本中AFP含量，乘以稀釋倍數(shù)后發(fā)出定量報(bào)告?！靖?注】操作中有關(guān)要求可參考乙肝兩對(duì)半試驗(yàn)定量的試劑目前以進(jìn)口的ELISA法AFP測(cè)定試劑盒為佳。此外，也可用放疫（雙抗體）- - -對(duì)AFP行定量測(cè)定，操售放免試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。自身抗體──類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）測(cè)定類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和紅斑狼瘡患者的血清中常存在高滴度的F，國(guó)普通使用膠乳驗(yàn)進(jìn)行測(cè)定。此可用雙抗原夾心ELISA法測(cè)定，其測(cè)作程序按市售試劑盒進(jìn)行?！痉?法】膠乳凝集試驗(yàn)?！驹?劑】市售試劑盒?！静?作】按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行?！窘Y(jié)果判斷】按說(shuō)明書(shū)要求?！靖?注】1．每次試驗(yàn)必須設(shè)陰、陽(yáng)對(duì)照；2RF膠乳試劑應(yīng)于4~10℃保存但不應(yīng)冰凍貯藏使用前要搖勻，并使試劑溫度與室溫平衡；3本試驗(yàn)的RF主要是IM型RF關(guān)于測(cè)定F的G和A型的臨床意義目前尚無(wú)明確定論。- - - 臨床化學(xué)檢驗(yàn)蛋白質(zhì)測(cè)定血清總蛋白（TP）測(cè)定雙縮脲法（常規(guī)測(cè)定，標(biāo)化測(cè)定）【試 劑】選用市售優(yōu)質(zhì)試劑蛋白標(biāo)準(zhǔn)液使用市售定值參考血（非定值質(zhì)控血清）【操 作】按試劑盒儀器專(zhuān)用說(shuō)明書(shū)設(shè)置程序輸入?yún)?shù)用自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀自動(dòng)測(cè)定或手工操色測(cè)定，波長(zhǎng)540nm。【標(biāo) 本】血清（血漿）一般空腹為宜，忌溶血。尿液：收集24小時(shí)的尿液，防腐，并記。血清白蛋白（ALB）測(cè)定溴甲酚綠法【試 劑】市售優(yōu)質(zhì)試劑?！静?作】按試劑盒及儀器使用說(shuō)明書(shū)設(shè)置程序輸入?yún)?shù)動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀自動(dòng)測(cè)定，或手色測(cè)定，波長(zhǎng)630nm?！緲?biāo) 本】- - -血清（漿）空腹為宜，忌溶血，室溫可保存8小時(shí),2~8℃可保存48小時(shí)。糖類(lèi)測(cè)定體液葡萄糖測(cè)定1．葡萄糖氧化酶（GOD）法，波長(zhǎng)505nm。2．已糖激酶（HK）法，波長(zhǎng)340m。3．鄰甲苯胺（O—TB）法，波長(zhǎng)630nm。4．葡萄糖脫氫酶（GDH）法，波長(zhǎng)340nm?！驹?劑】市售優(yōu)質(zhì)試劑?！静?作】1如DO~TB法；2．按試劑及儀器的使用說(shuō)明書(shū)設(shè)置程序，輸入?yún)?shù)，用自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀測(cè)定；3．手工測(cè)定推薦GOD，HK法宜用自動(dòng)生化分測(cè)定，該法為公認(rèn)的參考方法?！緲?biāo) 本】1．血清（一般空腹血為宜）或草酸鉀—氟化鈉抗凝血漿，若暫不能測(cè)定，應(yīng)即時(shí)分離出血清密封4~8℃保存；2用GODHKO~TB應(yīng)4~8℃保存；3集24h以O(shè)TB及GOD氧- - -電極法測(cè)定為宜。葡萄糖耐量試驗(yàn)（OGTT）【方 法】1．空腹抽血、留尿，送檢空腹血糖及尿糖；2稱(chēng)取葡萄糖75克溶於20~300ml開(kāi)水中令受試者一次服下，記下開(kāi)始服糖的時(shí)間；3．服糖后每隔0.5h、1hh3h，各抽血留尿一次，送檢血、尿糖；4．將各次所測(cè)血糖和尿糖定性結(jié)果以數(shù)字或曲線報(bào)告。受試者受試前三天可正常進(jìn)食應(yīng)停用胰島素或其它降糖藥；服糖后每血應(yīng)準(zhǔn)時(shí)，時(shí)間誤差制在±3分鐘以。無(wú)機(jī)離子測(cè)定鉀鈉測(cè)定火焰光度法（參考方法）【試 劑】鉀、鈉標(biāo)準(zhǔn)，市售，或自配。【操 作】嚴(yán)格按各廠家出售的火焰光度計(jì)的說(shuō)明書(shū)操作用直接法或標(biāo)法測(cè)定法每次測(cè)鈉前測(cè)定幾個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液發(fā)光強(qiáng)度繪制準(zhǔn)用12010160mmo/L三個(gè)鈉標(biāo)準(zhǔn)液作比較法測(cè)定計(jì)算，鉀可用單一標(biāo)準(zhǔn)液來(lái)計(jì)算測(cè)定。- - -離子選擇電極（ISE）法【試 劑】由生產(chǎn)該儀器的廠家提供不同廠家其配方不盡相同不可相互代用?！静?作】按各廠家出產(chǎn)的電解質(zhì)分析儀用說(shuō)明書(shū)操作，經(jīng)定標(biāo)通過(guò)，穩(wěn)定后用直接電位法或間接電位法測(cè)定。【標(biāo) 本】當(dāng)倍數(shù)稀釋?zhuān)鼓蜮洕舛仍?0mmo1/L以，尿鈉測(cè)定讀數(shù)應(yīng)在高、中、低，三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液中的兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)讀。氯化物測(cè)定電極法【試 劑】定標(biāo)液由生產(chǎn)該類(lèi)分析儀的廠家提供各廠家的配盡相同不可相互替代使用?！静?作】各廠家生產(chǎn)的電解質(zhì)分析儀一次進(jìn)樣可時(shí)測(cè)定KNa+CL—，操作程序與鉀、鈉電極法測(cè)定同。硝酸汞滴定法【試 劑】- - -市售試劑或參照有關(guān)書(shū)刊文獻(xiàn)自配，滴定指示劑宜選二苯卡巴腙，該應(yīng)貯於棕色瓶中保存?！静?作】按試劑說(shuō)明書(shū)或相應(yīng)文獻(xiàn)規(guī)定的程序操作對(duì)溶血黃疸及混濁的血清，可用其無(wú)蛋白滴定。硫氰酸汞比色法【試 劑】市售現(xiàn)成試劑。【操 作】按試劑說(shuō)明書(shū)的程序操作比色測(cè)定或試劑及儀器使用說(shuō)明書(shū)要求設(shè)置程序輸入?yún)?shù)用自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀自動(dòng)測(cè)定波長(zhǎng)460m。【標(biāo) 本】離子轉(zhuǎn)移作用使測(cè)得結(jié)果偏高。血鈣測(cè)定1．EDTA絡(luò)合滴定法；2．鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法。波長(zhǎng)：575n；3．甲基麝香草酚蘭比色法。波長(zhǎng)：610n；4．離子選擇電極（ISE）法。- - -【試 劑】市售現(xiàn)成試劑。ISE法需用儀器生產(chǎn)廠家提供的定標(biāo)（同鉀鈉氯IE測(cè)定法?！静?作】按ISE法鉀鈉氯鈣電解質(zhì)分析儀說(shuō)明書(shū)操作；滴定法與比色法測(cè)得的是總鈣，ISE法測(cè)得的為離子鈣，離子鈣的含量與樣品的pH關(guān),故所用的儀器應(yīng)帶有pH測(cè)定校正程序，以計(jì)算出在生理pH7.4）下的鈣離子濃度?！緲?biāo) 本】血清或肝素抗凝之血漿，不可螯合劑或草酸鹽抗凝的血漿。血?dú)夥治鲇醚獨(dú)馀c酸堿分析儀進(jìn)分析，同時(shí)測(cè)定PCOPO、與pH三2 2項(xiàng)基本指標(biāo)由此演算出氣體酸堿斷的其它各項(xiàng)指標(biāo)血?dú)夥治鰧傥Ｖ兀瑩尵炔∪说谋O(jiān)測(cè)項(xiàng)目。【試 劑】嚴(yán)格使用各儀器生產(chǎn)廠提供的與其儀器配套專(zhuān)用試劑廠家的試劑不可任，定標(biāo)液清洗液室溫存放即可?！緲?biāo) 本】肝素抗凝動(dòng)脈血或動(dòng)脈化的毛細(xì)血管血采血針管不得留有氣泡血采出后立即用小塞或塑料塞密封采血管隔絕血液與外界空氣的接觸并立送檢如暫不能送檢應(yīng)即時(shí)置4~8℃冰箱中保存，時(shí)間以不超過(guò)2小時(shí)為宜?！静?作】- - -血?dú)馀c酸堿分析儀基本上分為帶有電解質(zhì)測(cè)定和不帶有電解質(zhì)測(cè)定二大的除帶有電外尚帶有葡萄糖Uea及乳酸的測(cè)定，在氣體定標(biāo)上，一類(lèi)為直接標(biāo)準(zhǔn)氣定標(biāo)，另一類(lèi)為儀器配氣定標(biāo)，嚴(yán)格按儀器明書(shū)規(guī)定操作、保養(yǎng)，測(cè)樣前進(jìn)行儀器，并輸入病人抽血樣時(shí)的體溫，Hb含量等參數(shù)，定標(biāo)通過(guò)，穩(wěn)定后方可進(jìn)行血樣測(cè)定。酶類(lèi)測(cè)定血清丙氨酸氨基移換酶（ALT）測(cè)定血清門(mén)冬氨酸氨基移換酶（AST）測(cè)定這兩個(gè)酶的測(cè)定在方法上操作程序及試劑等的要求上本一致。賴(lài)氏（Reitman）法（比色法）【試 劑】0.015A此圍則應(yīng)試劑及儀器等方問(wèn)題?！静?作】按試劑盒的說(shuō)明書(shū)手工操作比色測(cè)定波長(zhǎng)505nm先繪制好準(zhǔn)曲線中查得該活性。酶偶聯(lián)速率法（連續(xù)監(jiān)測(cè)法）【試 劑】盒均可使用，目前推薦雙試劑法，它是ALT、AST測(cè)定的首選法，市售- - -的ALTAST底物溶液其起始吸光度必須大於1.2A空須於5u/L，否則提示此試劑已不合格，不能使?！静?作】按試劑及儀器使用說(shuō)明書(shū)設(shè)定程序輸入?yún)?shù)化分析儀測(cè)定，波長(zhǎng)340nm。【標(biāo) 本】血清，忌溶血，血清應(yīng)即時(shí)分離，室溫可保存二天，4℃可保存一周，-25℃可保存一月，但不推薦冰凍保存，更不宜反復(fù)凍溶，遇有嚴(yán)重脂血或黃疸的血清樣品，測(cè)定時(shí)應(yīng)作血清標(biāo)本對(duì)照管（賴(lài)氏法。血清堿性磷酸酶（ALP）測(cè)定連續(xù)監(jiān)測(cè)法【試 劑】市售現(xiàn)成試劑，其中的磷酸對(duì)硝基苯酚底物液要求：1．酶水解轉(zhuǎn)換率（4-NPP→4N）必須大於98%。24-NPP長(zhǎng)311nm介質(zhì)10mmo1/LNaOH溫度25℃=986776L.mol–1·m–1。3．游離4-NP＜0.3mmo1/mo14-NPP；4．無(wú)機(jī)磷酸＜10mmo1/mo14-NPP。試劑應(yīng)貯于棕色瓶中4~8℃保存?！静?作】按試劑盒及儀器說(shuō)明書(shū)要求設(shè)定程序輸入?yún)?shù)用自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，波長(zhǎng)450nm。- - -比色法【試 劑】市售或按正式出版的書(shū)刊文獻(xiàn)自配?！静?作】按試劑盒或相應(yīng)文獻(xiàn)規(guī)程比色測(cè)定波長(zhǎng)510n標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制，樣品測(cè)定，查標(biāo)準(zhǔn)曲線求得ALP活力單位?！緲?biāo) 本】血清或肝素抗凝血漿。忌用草酸鹽、檸檬酸鹽，EDTA－Na抗凝2血。血清（尿液）淀粉酶測(cè)定碘一淀粉比色法【試 劑】底物緩沖淀粉液配好后其PH應(yīng)在7.0±0.1圍，貯冰箱保存。【操 作】長(zhǎng)600nm。肝功能試驗(yàn)血清總膽紅素（TBIL）和結(jié)合膽紅素（DBIL）測(cè)定改良J~G法【試 劑】配- - -制標(biāo)準(zhǔn)液的膽紅素應(yīng)符合如下標(biāo)準(zhǔn)，純膽紅素的氯仿溶液在25℃當(dāng)光徑1.00±0.001m,波長(zhǎng)453nm條件下其摩爾系數(shù)應(yīng)在60700±1600圍，偶氮膽紅素的摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在74380±866圍，配制標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋劑須含白蛋白可用牛血清白蛋白或人血清代替人血清白蛋白標(biāo)應(yīng)貯於棕色瓶中避光保存在市售試劑中以含堿性酒石酸的靈敏異性高?！静?作】按試劑盒說(shuō)明書(shū)或相應(yīng)書(shū)刊文獻(xiàn)規(guī)程手工操作比色測(cè)定長(zhǎng).求IL及BIL的含量以mo1L報(bào)告。也可按廠家提供的試劑及儀器使用的說(shuō)明書(shū)的要求將相應(yīng)的程序及參數(shù)設(shè)入，用自動(dòng)生化分析?！緲?biāo) 本】血清，空腹血為宜，脂血、脂色素及嚴(yán)重溶血干擾此測(cè)定，暫不能測(cè)定的標(biāo)本應(yīng)避光保存穩(wěn)定8h8℃可保存48h。含疊氮鈉作防腐劑的質(zhì)控血清不宜用此膽紅素。膽紅素氧化酶（BOD）法【試 劑】市售成套試劑。BOD試劑復(fù)溶后2~8℃可保存一周?！静?作】按廠家提供的試劑及儀器說(shuō)明書(shū)要求設(shè)置程序輸入?yún)?shù)用自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。波長(zhǎng)450或460nm。- - -【標(biāo) 本】血清要求與改良J一G法相似。二甲亞楓（DMSO）法【試 劑】市售現(xiàn)成試劑?！静?作】按試劑盒說(shuō)明書(shū)手工操作比色測(cè)定或用自動(dòng)生化儀測(cè)定。波長(zhǎng)560nm?！緲?biāo) 本】血清、輕度脂血，溶血標(biāo)本對(duì)結(jié)果無(wú)明顯影響、重度脂血、溶血標(biāo)本須作標(biāo)本空白進(jìn)行較正。血清肌酐（Cr）測(cè)定堿性苦味酸去蛋白終點(diǎn)法【試 劑】市售試劑?！静?作】按試劑說(shuō)明書(shū)手