除草劑生物測(cè)定

第三章除草劑生物測(cè)定第一節(jié)除草劑的生物測(cè)定評(píng)估第二節(jié)除草劑的常用生物測(cè)定方法第三節(jié)除草劑的生物測(cè)定技術(shù)應(yīng)用第一節(jié)除草劑生物測(cè)定的評(píng)估一除草劑評(píng)估的復(fù)雜性同一藥劑對(duì)植物器官的非專(zhuān)一性不同藥劑對(duì)植物器官的同一性不同劑量對(duì)植物作用效應(yīng)不一樣第一節(jié)除草劑的生物測(cè)定評(píng)估二除草劑生物測(cè)定的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)1種子萌發(fā)以試驗(yàn)植物的種子是否萌發(fā)作為評(píng)定除草劑活性的指標(biāo)。黃瓜、高梁及燕麥均為種子萌發(fā)試驗(yàn)的常用植物材料。2植株反應(yīng)2.1植株的局部反應(yīng)主要選取反應(yīng)特征比較明顯的植株部位，如根長(zhǎng)、莖長(zhǎng)是否受到了明顯的抑抑制。第一節(jié)除草劑的生物測(cè)定評(píng)估1種子萌發(fā)2植株反應(yīng)

2.1植株的局部反應(yīng)2.2整株植物的反應(yīng)植株是否完全死亡，如未死亡則取植株的地上部或地下部的量取長(zhǎng)度、或稱(chēng)取整株植物的鮮重或干重等。如果條件能作到相對(duì)一致，用鮮重表示較干重表示更能說(shuō)明問(wèn)題。第一節(jié)除草劑的生物測(cè)定評(píng)估二除草劑生物測(cè)定的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)1種子萌發(fā)2植株反應(yīng)

3生理、生化反應(yīng)根據(jù)植物進(jìn)行光合作用時(shí)有CO2吸收和O2釋放，可作為生物測(cè)定時(shí)的評(píng)價(jià)指標(biāo)，尤其是在進(jìn)行作用機(jī)制的研究時(shí)，更為準(zhǔn)確。

如：利用測(cè)氧儀可觀察的莎樸隆和樸草凈對(duì)多變魚(yú)腥藻的影響，通過(guò)觀察每小時(shí)每mg葉綠素放出的毫摩爾氧量來(lái)評(píng)估光合活性的大小（umolO2/mg.h）第一節(jié)除草劑的生物測(cè)定評(píng)估二除草劑生物測(cè)定的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)1種子萌發(fā)2植株反應(yīng)

3生理、生化反應(yīng)4反應(yīng)等級(jí)無(wú)論觀察的是植株什么類(lèi)型的反應(yīng)，都可以用反應(yīng)等級(jí)進(jìn)行評(píng)估。具體的級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)，則要根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康臄M定。

如對(duì)具生長(zhǎng)抑制作用的除草劑實(shí)行反應(yīng)等級(jí)評(píng)價(jià)時(shí)，就可以采用6級(jí)標(biāo)準(zhǔn)制：0級(jí)：同對(duì)照；1級(jí)：抑制生長(zhǎng)25%以下；2級(jí)：抑制生長(zhǎng)50%以下；3級(jí)：抑制生長(zhǎng)75%以下；4級(jí)：抑制生長(zhǎng)75%以上；5級(jí)：全部死亡；第三章除草劑生物測(cè)定第一節(jié)除草劑的生物測(cè)定評(píng)估第二節(jié)除草劑常用生物測(cè)定方法

一實(shí)驗(yàn)室測(cè)定二溫室測(cè)定三田間測(cè)定第二節(jié)除草劑常用生物測(cè)定方法一實(shí)驗(yàn)室測(cè)定1種子萌發(fā)法10稗草胚軸法2小杯法11番茄水培法3高梁法12燕麥法4蘿卜子葉法13浮萍法5黃瓜幼苗法14玉米法6黃瓜子葉園片法15園葉片漂浮法7小球藻法16再生苗測(cè)重法8小麥根長(zhǎng)法17葉鞘滴注法9去胚乳小麥幼苗法一實(shí)驗(yàn)室測(cè)定1種子萌發(fā)法1.1（BTB法）溴麝香草酚藍(lán)法

BTB為一種酸性呈黃色、中性（7.1）呈綠色、堿性呈藍(lán)色的批示劑。種子發(fā)芽時(shí)會(huì)因呼吸作用而使CO2溶于水而生成H2CO3，而H2CO3又會(huì)進(jìn)一步離解成H+

和HCO3-，使種子周?chē)沫h(huán)境pH下降，如果除草劑具有抑制呼吸的作用，那么，通過(guò)對(duì)BTB的顏色變化即可判斷種子是否為活的。1種子萌發(fā)法1.1（BTB法）溴麝香草酚藍(lán)法1.2(TTC法)氯化三苯四氮唑法

TTC能滲透進(jìn)入種胚的活細(xì)胞內(nèi)，并作為受體被脫氫輔酶（NADH2或NADPH2）上的氫還原，本來(lái)無(wú)色的TTC會(huì)變?yōu)榧t色的三苯基甲酯（TTF）。

NNC6H5NNHC6H5C6H5CC6H5CNN+C6H5

NNC6H5

TTC（無(wú)色）TTF(紅色)1種子萌發(fā)法

2小杯法

以小杯作為測(cè)試工具，杯底放一園形濾紙片，加入一定量的除草劑溶液，再將稗草、油菜、水稻、小麥等敏感植物，蓋上蓋在生長(zhǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)4-7d，其間要補(bǔ)足蒸餾水以減少蒸發(fā)。待癥狀明顯時(shí)測(cè)量根長(zhǎng)或鮮重。1種子萌發(fā)法2小杯法3高梁法

以高梁種子為試材，選取規(guī)格一致的磨口培養(yǎng)皿，裝入洗凈的黃沙、刮平使之與皿邊相齊，每皿漫漫加入一定量的除草劑藥液，以全皿黃沙正好浸透為宜，再將剛剛萌發(fā)出現(xiàn)幼根的高梁種子排列于沙表面（胚芽向上，幼根朝下），蓋緊皿蓋并將培養(yǎng)皿斜靠使之與平面成15℃角，以使根沿著皿蓋生長(zhǎng)。培養(yǎng)皿置于暗室（28±2℃）36-42h后取出，測(cè)量高梁幼根的長(zhǎng)度。1種子萌發(fā)法2小杯法3高梁法4蘿卜子葉法本法測(cè)定具觸殺性的除草劑較為合適。取紅蘿卜子種子洗凈播種在墊有兩層濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)，暗室培養(yǎng)24-30h，從幼苗上切下子葉，再放入盛有以0.2M磷酸緩沖液配制的不同濃度除草劑藥液的培養(yǎng)皿內(nèi)，加蓋后置于25±1℃

的恒溫培養(yǎng)室內(nèi)，輔以3000勒克斯的日光燈連續(xù)照光3天，然后按不同處理提取葉綠素A、B，與標(biāo)準(zhǔn)葉綠素A、B相比較求出抑制葉綠素含量50%的除草劑濃度。1種子萌發(fā)法2小杯法3高梁法4蘿卜子葉法5黃瓜幼苗法

精選黃瓜種子，直接放入含有待測(cè)除草劑藥液的培養(yǎng)皿中，以蒸餾水為CK，放入26℃恒溫暗室中培養(yǎng)96h，移出暗室測(cè)黃瓜幼苗的初生根和地上部長(zhǎng)度。（適于丁酰胺類(lèi)、2.4-滴、咪唑啉酮和磺酰脲類(lèi)等除草劑活性）1種子萌發(fā)法2小杯法3高梁法4蘿卜子葉法5黃瓜幼苗法6黃瓜子葉園片法

此法用于測(cè)定光合作用抑制劑的活性較適宜。非光合作用抑制劑不敏感。以10微摩爾的克蕪蹤為對(duì)照，測(cè)定黃瓜子葉園片的電介質(zhì)泄漏量（導(dǎo)電系數(shù)）來(lái)計(jì)算除草劑的活性。1種子萌發(fā)法2小杯法3高梁法4蘿卜子葉法5黃瓜幼苗法6黃瓜子葉園片法7小球藻法此法也是以測(cè)葉綠素含量來(lái)計(jì)算具光合作用和呼吸作用抑制特性的除草劑活性。小球藻易于進(jìn)行室內(nèi)人工培養(yǎng)，操作簡(jiǎn)便，測(cè)定周期短，比較靈敏、精確。1種子萌發(fā)法2小杯法3高梁法4蘿卜子葉法5黃瓜幼苗法6黃瓜子葉園片法7小球藻法8小麥根長(zhǎng)法在培養(yǎng)皿內(nèi)鋪滿一層小玻璃球，移入一定量的除草劑藥液，放入露白的小麥種子，在20-25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5-7d，測(cè)量根長(zhǎng)。1種子萌發(fā)法2小杯法3高梁法4蘿卜子葉法5黃瓜幼苗法6黃瓜子葉園片法7小球藻法工8小麥根長(zhǎng)法9去胚乳小麥幼苗法

將飽滿均勻的小麥種子浸泡2h，鋪在放有濕濾紙的瓷盤(pán)中，于20

℃左右的恒溫箱中催芽，待芽長(zhǎng)2-3cm時(shí)，選高度一致的幼苗，輕輕取出，不要傷根，摘除胚乳，在清水中漂洗后，放入燒杯中，加入待測(cè)除草劑的不同濃度溶液，于21-26℃下培養(yǎng)7d，測(cè)株高、稱(chēng)鮮重。如將去胚乳小麥種在含有系列濃度的除草劑土壤中，可測(cè)定土壤中的除草劑含量、移動(dòng)性及殘效期。1種子萌發(fā)法2小杯法3高梁法4蘿卜子葉法5黃瓜幼苗法6黃瓜子葉園片法7小球藻法工8小麥根長(zhǎng)法9去胚乳小麥幼苗法

10稗草胚軸法此法適于測(cè)定氯乙酰胺類(lèi)除草劑如甲草胺等。在燒杯中加入不同濃度的除草劑溶液，放入發(fā)芽整齊的稗草種子，再在種子同圍撒些石英砂以防幼苗浮起，在28-30℃的恒溫箱中培養(yǎng)，4天后測(cè)稗草胚軸長(zhǎng)度。11番茄水栽法12燕麥法13浮萍法14玉米法15園葉片漂浮法16再生苗測(cè)重法17葉鞘滴注法取代脲類(lèi)如綠麥??；三氮苯類(lèi)如阿特拉津；浮萍法、園葉片漂浮法均是對(duì)光合作用抑制劑的快速測(cè)定方法；玉米法測(cè)定嗪草