抑菌論文畢業(yè)答辯

香薰中藥消毒劑抑菌活性研究學號：1003511113班級：2023級中鑒3班姓名：江華鳳

指導(dǎo)老師：曾聰彥

1/19目

錄1234研究目與意義試驗材料試驗辦法及成果分析結(jié)論2/19一、研究目及意義

消毒劑廣泛利用于醫(yī)院、學校、公共交通、食品藥品工業(yè)等場所,對預(yù)防疾病傳輸、維護人民公共衛(wèi)生事業(yè)健康發(fā)展起著相稱大作用。本課題研究香薰中藥消毒劑是針對醫(yī)院病房而研發(fā)一種新中藥消毒劑。在醫(yī)院,消毒劑使用需求相對較大并在避免醫(yī)院感染發(fā)揮著至關(guān)主要作用。目前病房消毒常用紫外線和過氧乙酸等化學消毒劑進行消毒，雖都有較好消毒效果，但使用存在不便，消毒時均需要人員離開病房。并且紫外線對人眼角膜、皮膚有損傷，過氧乙酸消毒后有較強刺激味殘留。抱負消毒劑應(yīng)具有殺菌譜廣、殺菌能力強、作用速度快、穩(wěn)定性好、無毒、無殘留、無腐蝕、無刺激，易溶于水、對人和動物安全、對環(huán)境無污染等特點。

3/19一、研究目及意義1、目前中藥消毒劑復(fù)方組成主要以清熱、除濕、祛風為法則。故以芳香化濕、清熱解毒兩類為主。達到消毒滅菌效果，又有清新空氣之效。2、為理解決在有人環(huán)境進行空氣消毒問題，本課題采取氣味芳香類和清熱解毒類中藥搭配組方，制成噴霧消毒劑。3、通過K-B紙片擴散法和平板涂布稀釋法對醫(yī)院病房常見細菌抑菌性能進行初步研究，以及對病房噴霧消毒，觀測對醫(yī)院病房消毒效果。4、為香薰中藥消毒劑在醫(yī)院等公共場所應(yīng)用和推廣提供了一定理論依據(jù)。4/19二、研究內(nèi)容1、摸索香薰中藥消毒劑制備辦法，確保使用過程達成安全、高效程度。2、抑菌部分（金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、糞腸球菌、綠膿假單胞菌、肺炎球菌、肺炎克雷伯菌）

通過K-B紙片擴散法初步研究抑菌作用，

平板涂布稀釋法定量研究最低抑菌濃度（MIC）。3、參照衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》，采取自然沉降法觀測香薰中藥消毒液對病房消毒效果5/191、香薰中藥消毒劑制備組方：蒼術(shù)、艾葉、桂枝、薰衣草制備辦法：組方百分比1：1：1：1，各藥味均打成細粉，混勻后加入圓底燒瓶，按固液比1:6蒸餾水，冷水浸泡2h，裝入揮發(fā)油提取裝置，提取揮發(fā)油，提取至沒有揮發(fā)油滴出，約6h。揮發(fā)油用EP管搜集，密封保存，搜集揮發(fā)油。取適量吐溫-80，逐漸加入揮發(fā)油，邊加入邊朝一種方向攪勻乳化，直至所有加完揮發(fā)油。攪均之后逐漸加入適量蒸餾水，邊加邊攪勻，呈均勻乳化液，未見表面有油層。制成中藥香薰消毒液，屬水包油型乳化劑（O/W）。6/191、香薰中藥消毒劑制備1.組方（蒼術(shù)、艾葉、桂枝、薰衣草、板藍根、牛蒡子）

原設(shè)計方案雙提法所得為部分揮發(fā)油及藥品混合物，噴霧過程中，①大顆粒粒子殘余難以揮出，液滴形式噴出，效果更為抱負②藥液顏色較深也許對病房存在污染，黑色藥滴易沉積沾在病床上，難清洗。③板藍根、牛蒡子含揮發(fā)油很少，其抗病毒、抑菌作用多為內(nèi)服，而本試驗為香熏因此精簡處方，保存另四味含揮發(fā)油較多藥品，并以混合提取揮發(fā)油形式7/191、香薰中藥消毒劑制備2.霧化辦法：（電熱香薰燈和超聲噴霧儀）電熱香薰燈加熱較慢，最后有部分油斑殘余。

超聲噴霧儀霧化形式較好，香味更濃。3.乳化辦法：由取吐溫-80加熱溶解于蒸餾水中制成0.5%吐溫-80再加入揮發(fā)油攪勻，變化為取吐溫-80逐漸加入揮發(fā)油，邊加入邊朝一種方向攪勻乳化，直至所有加完揮發(fā)油。攪均之后逐漸加入蒸餾水，邊加邊攪勻，呈均勻乳化液，未見表面有油層8/192、抑菌活性試驗(K-B紙片擴散法)香薰消毒液液制備批示菌菌懸液制備藥敏紙片接種與培養(yǎng)成果數(shù)據(jù)與統(tǒng)計水蒸氣蒸餾法搜集揮發(fā)油，1%吐溫-80無菌液稀釋，配成100%、75%、50%、25%濃度香薰消毒液活化后，無菌條件下分別挑取一環(huán)放入裝有沒有菌水離心管中，濁度儀校正濃度至0.5麥氏標準液，1.5×108細菌數(shù)/ml先于平板涂布菌液，不一樣濃度香薰消毒液均勻涂布于無菌空白藥敏紙片，1%吐溫80水溶液濾紙片為空白對照。對應(yīng)位置貼好后，恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)游標卡尺測量抑菌圈直徑(包括貼片)成果取平均值±sd，計算抑菌率（%）9/192、抑菌活性試驗試驗成果如大腸桿菌2.香薰100% 3.香薰75%4.香薰50%5.香薰25%6.空白圖1圖2圖310/192、抑菌活性試驗成果數(shù)據(jù)分析香薰中藥消毒液對金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌、大腸桿菌、肺炎克雷伯菌有較好抑制作用，尤其對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌最為敏感，25%濃度下抑制率仍達100%以上。對糞腸球菌和肺炎鏈球菌沒有抑制作用。11/193、最低抑菌濃度(MIC)測定

（平板涂布稀釋法）1、供試液制備水蒸氣蒸餾法搜集揮發(fā)油，用1%吐溫80水溶液作稀釋劑制成不一樣體積比(150.00、100.00、60.00、40.00、20.00、10.00、5.00、2.50、1.20mL/L)香薰液稀釋液。各濃度配制3.5ml。2、菌懸液配備3、菌懸液接種與培養(yǎng)

菌懸液+各濃度稀釋液混合液，于平板培養(yǎng)基用涂布環(huán)涂布均勻以稀釋劑1%吐溫80水溶液作對照，恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4、

成果判讀與統(tǒng)計

接種點內(nèi)有1個以上菌落或呈菌苔狀為生長；接種點內(nèi)無任何菌落或呈薄霧印跡為無生長。統(tǒng)計（+）表達生長，（-）表達無生長。以不生長菌體揮發(fā)油最低濃度為揮發(fā)油最低抑菌濃度(MIC)。12/193、最低抑菌濃度(MIC)測定

試驗成果如大腸桿菌圖1空白圖2圖3圖4MIC

13/193、最低抑菌濃度(MIC)測定

成果數(shù)據(jù)分析伴隨揮發(fā)油濃度增加，其抑菌活性也逐漸增強。香薰中藥消毒劑對四種供試菌抑制能力最強是金黃色葡萄球菌，抑制能力最弱是綠膿假單胞菌，其總抑菌活性次序：金黃色葡萄球菌>大腸桿菌>肺炎克雷伯菌>綠膿假單胞菌。它們最低抑制濃度金黃色葡萄球菌為2.50ml/L、大腸桿菌5.00ml/L、綠膿假單胞菌為40ml/L、肺炎克雷伯菌為20ml/L。14/19

4、病房消毒試驗①香薰中藥消毒劑制備

水蒸氣蒸餾法EP管搜集揮發(fā)油，取吐溫-80放入研缽中，邊加揮發(fā)油邊勻速研勻乳化，直至所有加完揮發(fā)油。攪均之后逐漸加入蒸餾水，邊加邊攪勻，呈均勻乳化液，制成1g/ml香薰消毒液。②消毒室選擇和分組綜合科病房（Ⅲ類)

1g/ml香薰消毒液組和3%過氧化氫組（對照組），各10間15/194、病房消毒試驗③檢測辦法

采取平板空氣暴露法，消毒前30min及消毒后1h和通風后1h分別取樣,在每間病房以對角線中點和兩端各距內(nèi)墻1ｍ處取一點（共5點），各放置1個滅菌瓊脂培養(yǎng)基平皿,距地面lm高度,開蓋后暴露在空氣中30min,每個時間段各采集到空氣標本5個平皿，搜集于37℃電恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)48ｈ。然后后進行菌落記數(shù)，算出平均菌落數(shù)，并計算出殺菌率。④判斷標準參照衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》（2023），空氣細菌菌落總數(shù)I類區(qū)域≤10cfu/m3；II類區(qū)域≤200cfu/m3；III類區(qū)域≤500cfu/m3。⑤數(shù)據(jù)處理統(tǒng)計學處理采取SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行分析,對消毒前后空氣中細菌總數(shù)差異進行反復(fù)測量方差分析,P<0.05為有統(tǒng)計學意義。16/194、病房消毒試驗試驗成果與分析試驗成果顯示香薰中藥