2023屆高考生物考前梳理必修1分子與細(xì)胞實(shí)驗(yàn)7.綠葉中色素的提取和分離

7.綠葉中色素的提取和分離綠葉中的色素能夠溶解在有機(jī)溶劑無(wú)水乙醇中，所以，可以用無(wú)水乙醇提取綠葉中的色素。由于色素存在于細(xì)胞內(nèi)，需要先破碎細(xì)胞才能釋放出色素。綠葉中的色素不只有一種，它們都能溶解在層析液中，但不同的色素溶解度不同。溶解度高的隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得快，反之則慢。這樣，綠葉中的色素就會(huì)隨著層析液在濾紙上的擴(kuò)散而分開(kāi)。目的要求1.進(jìn)行綠葉中色素的提取和分離。2.探究綠葉中含有幾種色素。材料用具新鮮的綠葉（如菠菜的綠葉）。干燥的定性濾紙，試管，棉塞，試管架，研缽，玻璃漏斗，尼龍布，毛細(xì)吸管，剪刀，藥匙，量筒（10mL），天平等。無(wú)水乙醇（也可用體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇加人適量無(wú)水碳酸鈉來(lái)代替），層析液（由20份在60~90℃下分餾出來(lái)的石油醚、2份丙酮和1份苯混合而成），二氧化硅和碳酸鈣。方法步驟1.提取綠葉中的色素（1）稱(chēng)取5g綠葉，剪去主葉脈，剪碎，放入研缽中。（2）向研缽中放入少許二氧化硅和碳酸鈣，再加入5~10mL無(wú)水乙醇，迅速、充分地進(jìn)行研磨（二氧化硅有助于研磨得充分，碳酸鈣可防止研磨中色素被破壞）。（3）將研磨液迅速倒入玻璃漏斗（漏斗基部放一塊單層尼龍布）進(jìn)行過(guò)濾。將濾液收集到試管中，及時(shí)用棉塞將試管口塞嚴(yán)。2.制備濾紙條將干燥的定性濾紙剪成寬度略小于試管直徑、長(zhǎng)度略小于試管長(zhǎng)度的濾低條，再將濾紙條一端剪去兩角，并在距這一端底的1cm處用鉛筆畫(huà)一條細(xì)的橫線。3.畫(huà)濾液細(xì)線用毛細(xì)吸管吸取少量濾液，沿鉛筆次均勻地畫(huà)出一條細(xì)線（也可將濾液倒入增養(yǎng)IL，再用蓋玻片蘸取濾液，在橫線處按壓出均勻的細(xì)線）。待濾液干后，再重畫(huà)一到兩次。4.分離綠葉中的色素將適量的層析液倒入試管中，將濾紙條（有濾液細(xì)線的一端朝下）輕輕插入層析液中，隨后用棉塞塞緊試管口。注意：不能讓濾液細(xì)線觸及層析液，否則濾液細(xì)線中的色素會(huì)被層析液溶解，而不能在濾紙上擴(kuò)散。也可用小燒杯代替試管，用培養(yǎng)皿蓋住小燒杯。5.觀察與記錄觀察試管內(nèi)濾紙條上出現(xiàn)了幾條色素帶，以及每條色素帶的顏色和寬窄。將觀察結(jié)果記錄下來(lái)。最寬：葉綠素a；最窄：胡蘿卜素；相鄰色素帶最近：葉綠素a和葉綠素b；相鄰色素帶最遠(yuǎn)：胡蘿卜素和葉黃素。警示：為減少吸入層析液中有毒性的揮發(fā)性物質(zhì)，分離色素這一步應(yīng)在通風(fēng)好的條件下進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)結(jié)束應(yīng)盡快用肥皂將手洗干凈。試劑作用SiO2有助于研磨CaCO3防止研磨過(guò)程中色素被破壞無(wú)水乙醇溶解綠葉中的色素層析液分離綠葉中的色素討論1.濾紙條上有幾條色素帶？它們按照什么次序分布的？提示：濾紙條上有4條不同顏色的色素帶，從上到下依次為：胡蘿卜素（橙黃色）、葉黃素（黃色）、葉綠素a（藍(lán)色色）和葉綠素b（黃綠色）。2.濾紙條上色素帶的分布說(shuō)明了什么？提示：濾紙條上的色素帶說(shuō)明了綠葉中的色素有4種，它們?cè)趯游鲆褐械娜芙舛炔煌?，隨層析液在濾紙上擴(kuò)散的快慢也不同；同時(shí)由于4種色素的顏色不同，也說(shuō)明不同色素吸收了不同波長(zhǎng)的光。3.濾液顏色太淺的原因是什么？提示：葉片顏色太淺、葉片不新鮮、研磨不充分、未加碳酸鈣或加入量太少、加入無(wú)水乙醇量太多、研磨時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，使部分葉綠素被破壞。4.制備的濾紙條，為什么要剪去一端兩角？提示：由于液面的不同位置表面張力不同，紙條接近液面時(shí)，其邊緣表面的張力大，層析液沿濾紙邊緣擴(kuò)張較快，從而導(dǎo)致色素帶分離不整齊。這樣可以使色素在濾紙條上擴(kuò)散均勻，便于觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。5.畫(huà)濾液細(xì)線時(shí)，為什么要重復(fù)畫(huà)，且線要細(xì)、直？提示：重復(fù)劃線是為了增加色素的濃度，使分離出的色素帶清晰分明。畫(huà)線細(xì)、直是為了防止色素帶之間出現(xiàn)重疊。6.層析時(shí)，為什么不能讓濾液細(xì)線觸及層析液？提示：濾紙條上的濾液細(xì)線觸及（或沒(méi)入）層析液，會(huì)使濾液