紙色譜法實驗報告總結

紙色譜法實驗報告總結色譜分離法色譜分離法又稱色層分離法或色譜法，是一種物理化學分離法。它是利用混合物中各組分在兩相(固定相和流動相)中分布程度的差異而達到分離目的的分離方法。色譜方法的種類很多，其中氣相色譜法和液相色譜法需要專門的儀器，屬于儀器分析的范疇，本文不予討論。這里主要討論以分離為目的的4種固定相和流動相柱色譜分離法薄層色譜分離法紙色譜分離法1固定相和流動相萃取色譜是將溶劑萃取與色譜分離技術相結合的液相分配色譜，一般在柱上進行，稱柱色譜。固定相：以涂漬或吸留于多孔、疏水的惰性載體的有機萃取劑流動相：以含有合適的無機化合物的水溶液為流動相。由于它與正相分配色譜相反，故又稱為反相分配色譜。把含有待分離組分的試液置于色譜柱上層，加入流動相，被分離組分從柱頂隨流動相逐漸向下移動的同時，它們不斷地在兩相間進行萃取和反萃取多次分配，最終根據(jù)各分離組分的洗脫曲線判定分離優(yōu)劣。2柱色譜分離法柱色譜是把吸附劑(固定相)，如Al2O3、硅膠等，裝入柱內(nèi)，然后在柱的頂部注入待分離的樣品溶液。如果樣品內(nèi)含有A、B兩種組分，則兩者均被吸附在柱的上端，形成一個環(huán)帶。當樣品全部加完后，可選擇適當?shù)南疵搫?流動相)進行洗脫，A、B兩組分隨洗脫劑向下流動而移動。吸附劑對不同物質(zhì)具有不同的吸附能力，當用洗脫劑洗脫時，柱內(nèi)連續(xù)不斷地發(fā)生溶解、吸附、再溶解，再吸附的現(xiàn)象。又由于洗脫劑與吸附劑兩者對A、B兩組分的溶解能力與吸附能力不相同，因此A、B兩組分移動的距離也不同。吸附弱的和溶解度大的組分(如A)容易洗脫下來，移動的速率也大些。經(jīng)過定時間后，A、B兩組分完全分開，形成兩個環(huán)帶，每個環(huán)帶內(nèi)是種純凈的物質(zhì)。

如果A、B兩組分有顏色，則能清楚地看到也環(huán)；若繼續(xù)沖洗，則A組分先從柱內(nèi)流出，用適當容器接收，再進行分析測定。3薄層色譜分離法薄層色譜又稱為薄層析。它是一種將柱色譜與紙色譜相結合發(fā)展起來的色譜方法。薄層色譜法是把固定相吸附劑(如硅膠、中性氧化鋁、聚酰胺等)在玻璃板上鋪成均勻的薄層(此處玻璃板又稱為薄層板)，將試樣點在薄層板的一端距邊緣一定距離處，

把薄層板放入色譜缸中，使點有試樣的一端浸入流動相(展開劑)中，由于薄層的毛細作用，展開劑沿著吸附劑薄層上升，遇到樣品時，試樣就溶解在展開劑中并隨著展開劑上升。在此過程中，試樣中的各組分在固定相和流動相之間不斷地發(fā)生溶解、吸附、再溶解、再吸附的分配過程。易被吸附的物質(zhì)移動得慢一些，

較難吸附的物質(zhì)移動得快一些，

經(jīng)過一段時間后

，不同物質(zhì)上升的距離不一樣而形成相互分開的斑點從而得到分離。薄層色譜法的固定相吸附劑顆粒粒徑要比柱色譜法小得多，一般為10~40um。由于被分離的對象及所用展開劑的極性不同，應選用活性不同的吸附劑作固定相，吸附劑的活性可分為I~V級，I級的活性最強，V級的活性最弱。吸附劑和展開劑選擇的一般原則是:

非極性組分的分離，選用活性強的吸附劑，用非極性展開劑;極性組分的分離，選用活性弱的吸附劑，用極性展開劑。實際工作中要經(jīng)過多次實驗確定。4紙色譜分離法紙色譜又稱為紙層析，它是以濾紙作為載體進行色譜分離的。按其作用機理，紙色譜屬于分配色譜。濾紙上吸附的水作為固定相，一般濾紙上的纖維能吸附22%左右的水分，其中約6%的水借氫鍵與纖維素的羥基結合在一起，在一般條件下難以脫去，因此紙色譜不僅可用不溶于水的有機溶劑作流動相，而且可以用與水相溶的有機溶劑，如丙醇、乙醇、丙酮等作流動相。在濾紙條的下端點上待分離的試樣，然后掛在加蓋的玻璃缸(色譜筒)內(nèi)，將紙條下端浸入流動相中，不要讓試樣點接觸液面。流動相由于濾紙的毛細管作用，沿濾紙向上展開，因此流動相又稱為展開劑。當流動相接觸到點在濾紙上的試樣點(原點)時，試樣中的各組分就不斷地在固定相和展開劑之間進行分配，從而使試樣中分配系數(shù)不同的各種