紙色譜法實(shí)驗(yàn)報(bào)告總結(jié)

紙色譜法實(shí)驗(yàn)報(bào)告總結(jié)色譜分離法色譜分離法又稱色層分離法或色譜法，是一種物理化學(xué)分離法。它是利用混合物中各組分在兩相(固定相和流動(dòng)相)中分布程度的差異而達(dá)到分離目的的分離方法。色譜方法的種類很多，其中氣相色譜法和液相色譜法需要專門的儀器，屬于儀器分析的范疇，本文不予討論。這里主要討論以分離為目的的4種固定相和流動(dòng)相柱色譜分離法薄層色譜分離法紙色譜分離法1固定相和流動(dòng)相萃取色譜是將溶劑萃取與色譜分離技術(shù)相結(jié)合的液相分配色譜，一般在柱上進(jìn)行，稱柱色譜。固定相：以涂漬或吸留于多孔、疏水的惰性載體的有機(jī)萃取劑流動(dòng)相：以含有合適的無機(jī)化合物的水溶液為流動(dòng)相。由于它與正相分配色譜相反，故又稱為反相分配色譜。把含有待分離組分的試液置于色譜柱上層，加入流動(dòng)相，被分離組分從柱頂隨流動(dòng)相逐漸向下移動(dòng)的同時(shí)，它們不斷地在兩相間進(jìn)行萃取和反萃取多次分配，最終根據(jù)各分離組分的洗脫曲線判定分離優(yōu)劣。2柱色譜分離法柱色譜是把吸附劑(固定相)，如Al2O3、硅膠等，裝入柱內(nèi)，然后在柱的頂部注入待分離的樣品溶液。如果樣品內(nèi)含有A、B兩種組分，則兩者均被吸附在柱的上端，形成一個(gè)環(huán)帶。當(dāng)樣品全部加完后，可選擇適當(dāng)?shù)南疵搫?流動(dòng)相)進(jìn)行洗脫，A、B兩組分隨洗脫劑向下流動(dòng)而移動(dòng)。吸附劑對不同物質(zhì)具有不同的吸附能力，當(dāng)用洗脫劑洗脫時(shí)，柱內(nèi)連續(xù)不斷地發(fā)生溶解、吸附、再溶解，再吸附的現(xiàn)象。又由于洗脫劑與吸附劑兩者對A、B兩組分的溶解能力與吸附能力不相同，因此A、B兩組分移動(dòng)的距離也不同。吸附弱的和溶解度大的組分(如A)容易洗脫下來，移動(dòng)的速率也大些。經(jīng)過定時(shí)間后，A、B兩組分完全分開，形成兩個(gè)環(huán)帶，每個(gè)環(huán)帶內(nèi)是種純凈的物質(zhì)。

如果A、B兩組分有顏色，則能清楚地看到也環(huán)；若繼續(xù)沖洗，則A組分先從柱內(nèi)流出，用適當(dāng)容器接收，再進(jìn)行分析測定。3薄層色譜分離法薄層色譜又稱為薄層析。它是一種將柱色譜與紙色譜相結(jié)合發(fā)展起來的色譜方法。薄層色譜法是把固定相吸附劑(如硅膠、中性氧化鋁、聚酰胺等)在玻璃板上鋪成均勻的薄層(此處玻璃板又稱為薄層板)，將試樣點(diǎn)在薄層板的一端距邊緣一定距離處，

把薄層板放入色譜缸中，使點(diǎn)有試樣的一端浸入流動(dòng)相(展開劑)中，由于薄層的毛細(xì)作用，展開劑沿著吸附劑薄層上升，遇到樣品時(shí)，試樣就溶解在展開劑中并隨著展開劑上升。在此過程中，試樣中的各組分在固定相和流動(dòng)相之間不斷地發(fā)生溶解、吸附、再溶解、再吸附的分配過程。易被吸附的物質(zhì)移動(dòng)得慢一些，

較難吸附的物質(zhì)移動(dòng)得快一些，

經(jīng)過一段時(shí)間后

，不同物質(zhì)上升的距離不一樣而形成相互分開的斑點(diǎn)從而得到分離。薄層色譜法的固定相吸附劑顆粒粒徑要比柱色譜法小得多，一般為10~40um。由于被分離的對象及所用展開劑的極性不同，應(yīng)選用活性不同的吸附劑作固定相，吸附劑的活性可分為I~V級，I級的活性最強(qiáng)，V級的活性最弱。吸附劑和展開劑選擇的一般原則是:

非極性組分的分離，選用活性強(qiáng)的吸附劑，用非極性展開劑;極性組分的分離，選用活性弱的吸附劑，用極性展開劑。實(shí)際工作中要經(jīng)過多次實(shí)驗(yàn)確定。4紙色譜分離法紙色譜又稱為紙層析，它是以濾紙作為載體進(jìn)行色譜分離的。按其作用機(jī)理，紙色譜屬于分配色譜。濾紙上吸附的水作為固定相，一般濾紙上的纖維能吸附22%左右的水分，其中約6%的水借氫鍵與纖維素的羥基結(jié)合在一起，在一般條件下難以脫去，因此紙色譜不僅可用不溶于水的有機(jī)溶劑作流動(dòng)相，而且可以用與水相溶的有機(jī)溶劑，如丙醇、乙醇、丙酮等作流動(dòng)相。在濾紙條的下端點(diǎn)上待分離的試樣，然后掛在加蓋的玻璃缸(色譜筒)內(nèi)，將紙條下端浸入流動(dòng)相中，不要讓試樣點(diǎn)接觸液面。流動(dòng)相由于濾紙的毛細(xì)管作用，沿濾紙向上展開，因此流動(dòng)相又稱為展開劑。當(dāng)流動(dòng)相接觸到點(diǎn)在濾紙上的試樣點(diǎn)(原點(diǎn))時(shí)，試樣中的各組分就不斷地在固定相和展開劑之間進(jìn)行分配，從而使試樣中分配系數(shù)不同的各種