公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座

動物細胞工程公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第1頁動物細胞工程慣用技術伎倆：動物細胞培養(yǎng)、動物細胞核移植、動物細胞融合、單克隆抗體思索：植物細胞工程慣用技術伎倆有哪些？植物組織培養(yǎng)、

植物體細胞雜交強調：動物細胞培養(yǎng)技術是其它動物細胞工程技術基礎。公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第2頁燒傷病人治療通常是取燒傷病人健康皮膚進行自體移植，但對于大面積燒傷病人來講，健康皮膚很有限，請同學們想一想怎樣來治療該病人？

取該患者皮膚進行細胞培養(yǎng),取得足量細胞后再移植公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第3頁學習目標：【知識能力】1、動物細胞培養(yǎng)過程、條件及應用

2、應用細胞基礎知識，分析細胞工程理論基礎【情感態(tài)度與價值觀】

1、討論細胞工程技術社會意義

2、認同細胞學基礎理論研究與技術開發(fā)之間關系一、動物細胞培養(yǎng)公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第4頁

概念：從動物機體中取出相關組織，將它分散成單個細胞，然后在適宜培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和繁殖。

一、動物細胞培養(yǎng)原理：是細胞增殖（有絲分裂）公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第5頁一、動物細胞培養(yǎng)閱讀P53-55“哺乳動物細胞培養(yǎng)技術”并思索：

1、動物細胞生長特點是什么？2、為何選取動物胚胎或幼齡個體器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料？

3、為何要對取出動物組織進行處理，使細胞分散？4、用胰蛋白酶對動物組織進行處理是因為細胞間物質主要是什么？胰蛋白酶真不會把細胞消化掉嗎？為何？

5、動物細胞培養(yǎng)條件有哪些？6、簡述動物細胞培養(yǎng)操作過程公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第6頁1、動物細胞生長特點：細胞貼壁：

懸液中分散細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。要求：培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內表面光滑、無毒、易于貼附。

公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第7頁接觸抑制：細胞在貼壁生長過程中，伴隨細胞分裂，數量不停增加，最終形成一個單層，此時細胞間相互接觸，細胞分裂和生長停頓，數量不再增加。50代以后失去接觸抑制接觸抑制動物細胞生長特點部分細胞突變，取得不死性，向癌細胞方向發(fā)展，糖蛋白降低，失去接觸抑制（如腫瘤細胞）。接觸抑制公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第8頁動物組織塊細胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)胰蛋白酶處理分散成單個細胞幼齡動物器官組織；動物胚胎加入培養(yǎng)液用胰蛋白酶等處理貼壁細胞適宜條件公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第9頁2、為何選取動物胚胎或幼齡個體器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料？動物胚胎或幼齡動物組織、器官，它們細胞分化程度低，增殖能力強，分裂旺盛，輕易培養(yǎng)。一、動物細胞培養(yǎng)公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第10頁動物組織塊細胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)胰蛋白酶處理分散成單個細胞幼齡動物器官組織；動物胚胎加入培養(yǎng)液用胰蛋白酶等處理貼壁細胞適宜條件公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第11頁3、為何要對取出動物組織進行處理，使細胞分散？

分散單個細胞輕易攝取所需營養(yǎng)，排出代謝廢物。一、動物細胞培養(yǎng)公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第12頁4、用胰蛋白酶對動物組織進行處理是因為細胞間物質主要是什么？胰蛋白酶真不會把細胞消化掉嗎？為何？

細胞間物質主要是蛋白質（膠原纖維）。一、動物細胞培養(yǎng)胰蛋白酶除了能夠消化細胞間蛋白外，長時間作用也會消化細胞膜蛋白，對細胞有損傷作用，所以必須控制好胰蛋白酶消化時間。

公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第13頁動物組織塊細胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)胰蛋白酶處理分散成單個細胞幼齡動物器官組織；動物胚胎加入培養(yǎng)液用胰蛋白酶等處理貼壁細胞適宜條件公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第14頁5、動物細胞培養(yǎng)條件1、無菌、無毒環(huán)境（添加一定量抗生素，定時更換培養(yǎng)液）2、營養(yǎng)（葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等。）3、溫度和PH36.5+（-）0.5度,7.2-7.44、氣體環(huán)境：

O2和CO2（95%空氣和5%CO2

）確保細胞順利生長增殖一、動物細胞培養(yǎng)公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第15頁一、動物細胞培養(yǎng)6、過程：動物胚胎或幼齡動物組織、器官細胞懸浮液胰蛋白酶10代細胞原代培養(yǎng)50代細胞傳代培養(yǎng)細胞株無限傳代細胞系單個細胞加培養(yǎng)液遺傳物質未改變遺傳物質已改變（分解彈性纖維）從機體取出后馬上培養(yǎng)細胞為原代細胞。普通培養(yǎng)第1代細胞與傳10代以內細胞稱為原代細胞培養(yǎng)。將原代細胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細胞懸浮液，分裝到兩個或兩個以上培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，普通培養(yǎng)第11代細胞與傳40代或50代稱為傳代培養(yǎng)。用胰蛋白酶等處理貼壁細胞公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第16頁植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理細胞全能性細胞增殖培養(yǎng)基狀態(tài)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成份蔗糖植物激素葡萄糖動物血清培養(yǎng)結果植物體細胞株、細胞系培養(yǎng)目標快速繁殖、培育無病毒植株取得細胞或細胞分泌蛋白細胞全能性細胞增殖固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基蔗糖植物激素葡萄糖動物血清植物體細胞株、細胞系快速繁殖、培育無病毒植株取得細胞或細胞分泌蛋白公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第17頁動物細胞培養(yǎng)應用：①.大規(guī)模生產生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等；②.檢測有毒物質，判斷某種物質毒性；③.培養(yǎng)基因工程中受體細胞公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第18頁1.用動、植物成體體細胞進行離體培養(yǎng)，以下敘述正確是

A．都需用培養(yǎng)箱

B．都須用液體培養(yǎng)基

C．都要在無菌條件下進行

D．都可表達細胞全能性C鞏固練習：公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第19頁2、以下屬于動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)主要區(qū)分是

A.培養(yǎng)基成份不一樣

B.動物細胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進行

C.動物細胞能夠傳代培養(yǎng)，而植物細胞不能

D.動物細胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細胞只能培養(yǎng)成植株A3、動物細胞工程技術基礎是

A.動物細胞融合B.單克隆抗體

C.胚胎移植D.動物細胞培養(yǎng)D公開課動物細胞培養(yǎng)專家講座第20頁4、細胞株特點是

A．遺傳物質沒有改變，能夠無限傳代

B．遺傳物質發(fā)生改變，不可無限傳代

C．遺傳物質沒有改變，不可無限傳代

D．遺傳物質發(fā)生改變，且有癌變特點，能夠無限傳代

5、在動物細胞培養(yǎng)中有部分細胞可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去，這種傳代細胞稱之為:A．原代培養(yǎng)B．傳代培養(yǎng)

C．細胞株D．