山東省臨沂市河?xùn)|區(qū)2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期期中考試生物試題【含答案解析】

2022級(jí)普通高中學(xué)科素養(yǎng)水平監(jiān)測(cè)試卷生物2024.4注意事項(xiàng)：1．答題前，考生先將自己的姓名、考生號(hào)、座號(hào)填寫在相應(yīng)位置。2．選擇題答案必須使用2B鉛筆正確填涂，非選擇題答案必須使用0.5毫米的黑色簽字筆書寫，繪圖時(shí)，可用2B鉛筆作答，字體工整，筆跡清楚。3．請(qǐng)按照題號(hào)在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效，在草稿紙、試卷上答題無效。一、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一個(gè)選項(xiàng)是最符合題目要求的。1.下列有關(guān)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述，正確的是（）A.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的操作過程是在嚴(yán)格無菌的條件下進(jìn)行的B.果醋發(fā)酵液中，液面處的醋酸菌密度低于瓶底處的密度C.利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)后密封發(fā)酵D.用帶蓋瓶子制作葡萄酒時(shí)，擰松瓶蓋的間隔時(shí)間不一定相同【答案】D【解析】【分析】1、在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖，再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵。2、醋酸菌好氧型細(xì)菌，當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長(zhǎng)的最佳溫度是在30℃～35℃。3、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸癁槿樗??！驹斀狻緼、現(xiàn)代發(fā)酵技術(shù)的操作過程是在嚴(yán)格無菌的條件下進(jìn)行的，傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的操作過程并不是在嚴(yán)格無菌的條件下進(jìn)行的，A錯(cuò)誤；B、醋酸菌是好氧菌，果醋發(fā)酵液中，液面處的醋酸桿菌密度高于瓶底處的密度，B錯(cuò)誤；C、乳酸菌是厭氧菌，利用乳酸菌制作酸奶過程中，不需要通氣，而需要一直密封，C錯(cuò)誤；D、用帶蓋瓶子制作葡萄酒時(shí)，二氧化碳產(chǎn)生速度先快后慢，擰松瓶蓋的間隔時(shí)間可以先短后長(zhǎng)，D正確。故選D。2.硝化細(xì)菌是化能自養(yǎng)菌，通過的氧化過程獲取菌體生長(zhǎng)繁殖所需的能量，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中具有重要作用。如表是分離硝化細(xì)菌的培養(yǎng)基配方，下列說法錯(cuò)誤的是（）成分含量成分含量（NH4）2SO40.5gNaH2PO40.25FeSO40.03gNa2CO31gMgSO40.03g瓊脂5%K2HPO40.75蒸餾水定容至1000mLA.（NH4）2SO4可作為硝化細(xì)菌的氮源和能源B.培養(yǎng)基中的Na2CO3是硝化細(xì)菌的主要碳源C.K2HPO4和NaH2PO4能維持培養(yǎng)基的pHD.硝化細(xì)菌能清除水體中的銨態(tài)氮及亞硝態(tài)氮【答案】B【解析】【分析】

雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無機(jī)鹽。另外還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無氧的條件?！驹斀狻緼、據(jù)題分析，硝化細(xì)菌通過NH4+→NO2-→NO3-的氧化過程獲取能量，故通過分析培養(yǎng)基成分可知（NH4）2SO4可作為硝化細(xì)菌的氮源和能源，A正確；B、硝化細(xì)菌為自養(yǎng)型生物，能利用二氧化碳合成糖類，故硝化細(xì)菌的主要碳源是二氧化碳，B錯(cuò)誤；C、分析培養(yǎng)基成分，其中K2HPO4和NaH2PO4屬于無機(jī)鹽，可維持培養(yǎng)基的pH，C正確；D、據(jù)題，硝化細(xì)菌能將NH4+氧化成NO2-，進(jìn)而將NO2-氧化成NO3-，故可用硝化細(xì)菌清除水體中的銨態(tài)氮及亞硝態(tài)氮，D正確。故選B。3.把一種缺乏組氨酸合成能力的缺陷型細(xì)菌接種在不含組氨酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，在培養(yǎng)基表面得到了少量的菌落。下列相關(guān)敘述正確的是A.實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基B.化學(xué)誘變劑處理缺陷型細(xì)菌可變?yōu)橐吧虲.用劃線法接種可以根據(jù)菌落數(shù)計(jì)算活菌數(shù)量D.少量缺陷型細(xì)菌通過基因重組具備了合成組氨酸的能力【答案】B【解析】【分析】在微生物培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基、實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)用具都要進(jìn)行滅菌處理。常用稀釋涂布法計(jì)算活菌的數(shù)目，常用平板分離法分離細(xì)菌和定量測(cè)定。基因突變的原因有很多，如物理因素、化學(xué)因素和生物因素。本題考查了測(cè)定微生物的數(shù)量、微生物的分離和培養(yǎng)相關(guān)內(nèi)容。意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。【詳解】A、由于要觀察菌落，所以實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；B、題干所述現(xiàn)象說明化學(xué)誘變劑處理缺陷型細(xì)菌可以變?yōu)橐吧停珺正確；C、用稀釋涂布平板法接種可以根據(jù)菌落數(shù)計(jì)算活菌數(shù)量，C錯(cuò)誤；D、少量缺陷型細(xì)菌通過基因突變具備了合成組氨酸的能力，D錯(cuò)誤。故選B?！军c(diǎn)睛】本題考查了測(cè)定微生物的數(shù)量、微生物的分離和培養(yǎng)相關(guān)內(nèi)容。意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。4.香蕉、馬鈴薯等通常用無性繁殖的方式進(jìn)行繁殖，它們感染的病毒很容易傳給后代。病毒在作物體內(nèi)逐年積累，就會(huì)導(dǎo)致作物產(chǎn)量降低，品質(zhì)變差。生產(chǎn)中培育香蕉脫毒苗常用的方法是（）A.人工誘導(dǎo)基因突變B.選擇優(yōu)良品種進(jìn)行雜交C.進(jìn)行遠(yuǎn)緣植物體細(xì)胞雜交D.取尖端分生組織進(jìn)行組織培養(yǎng)【答案】D【解析】【分析】植物組織培養(yǎng)：1、過程：離體的植物組織，器官或細(xì)胞（外植體）經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，最后發(fā)育成植株（新植體）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要。2、原理：植物細(xì)胞的全能性。3、應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（快速繁殖優(yōu)良品種、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種和突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斀狻恐参锏母?、莖尖、芽尖部位幾乎不含病毒，因此采取根尖、莖尖、芽尖進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，可以獲得脫毒植株。綜上所述，ABC錯(cuò)誤，D正確。故選D。5.植物體細(xì)胞通常被誘導(dǎo)為愈傷組織后才能表現(xiàn)全能性。研究發(fā)現(xiàn)，愈傷組織的中層細(xì)胞是根或芽再生的源頭干細(xì)胞，其在不同條件下，通過基因的特異性表達(dá)調(diào)控生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素的作用，表現(xiàn)出不同的效應(yīng)（見如表）。已知生長(zhǎng)素的生理作用大于細(xì)胞分裂素時(shí)有利于根的再生；反之，有利于芽的再生。下列推論不合理的是（）條件基因表達(dá)產(chǎn)物和相互作用效應(yīng)①WOX5維持未分化狀態(tài)②WOX5+PLT誘導(dǎo)出根③WOX5+ARR2，抑制ARR5誘導(dǎo)出芽A.WOX5失活后，中層細(xì)胞會(huì)喪失干細(xì)胞特性B.WOX5+PLT可能有利于愈傷組織中生長(zhǎng)素的積累C.ARR5促進(jìn)細(xì)胞分裂素積累或提高細(xì)胞對(duì)細(xì)胞分裂素的敏感性D.體細(xì)胞中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的作用可能相互抑制【答案】C【解析】【分析】植物細(xì)胞一般具有全能性。在一定的激素和營(yíng)養(yǎng)等條件的誘導(dǎo)下，已經(jīng)分化的細(xì)胞可以經(jīng)過脫分化，即失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能，轉(zhuǎn)變成未分化的細(xì)胞，進(jìn)而形成不定形的薄壁組織團(tuán)塊，這稱為愈傷組織。愈傷組織能重新分化成芽、根等器官，該過程稱為再分化。植物激素中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素。生長(zhǎng)素的用量比細(xì)胞分裂素用量，比值高時(shí)，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時(shí)，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值適中時(shí)，促進(jìn)愈傷組織的形成。【詳解】A、根據(jù)表格信息可知，WOX5能維持未分化狀態(tài)，使植物細(xì)胞保持分裂能力強(qiáng)、較大的全能性，若WOX5失活后，中層細(xì)胞會(huì)喪失干細(xì)胞分裂能力強(qiáng)、分化程度低的特性，A正確；B、由題干信息“生長(zhǎng)素的生理作用大于細(xì)胞分裂素時(shí)有利于根的再生”，再結(jié)合表格信息，WOX5+PLT可能誘導(dǎo)出根，可推測(cè)WOX5+PLT可能有利于愈傷組織中生長(zhǎng)素的積累，B正確；C、由題意可知，生長(zhǎng)素的生理作用小于細(xì)胞分裂素時(shí)有利于芽的再生，而抑制ARR5能誘導(dǎo)出芽，可知ARR5被抑制時(shí)細(xì)胞分裂素較多，故可推測(cè)ARR5抑制細(xì)胞分裂素積累或降低細(xì)胞對(duì)細(xì)胞分裂素的敏感性，C錯(cuò)誤；D、由題干信息可知，出芽或出根都是生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素含量不均衡時(shí)才會(huì)發(fā)生，故可推測(cè)體細(xì)胞中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的作用可能相互抑制，D正確。故選C。6.在獲得番茄—馬鈴薯雜種植株的過程中，為方便雜種細(xì)胞的篩選和鑒定，科學(xué)家們利用紅色熒光蛋白和綠色熒光蛋白分別標(biāo)記了番茄和馬鈴薯的原生質(zhì)體上的蛋白質(zhì)，其培育過程如圖所示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.①過程中應(yīng)在等滲環(huán)境中進(jìn)行，可使用蝸牛消化道提取液來降解兩種植物的細(xì)胞壁B.在挑選融合后的原生質(zhì)體時(shí)，在熒光顯微鏡下能觀察到細(xì)胞表面具有兩種熒光顏色的才是雜種細(xì)胞C.過程③和④采用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其原理是植物細(xì)胞的全能性D.若圖中雜種細(xì)胞為四倍體，則用該植物體的花粉離體培養(yǎng)后獲得的植株為二倍體【答案】D【解析】【分析】據(jù)圖分析，①是去除細(xì)胞壁形成原生質(zhì)體的過程，②是原生質(zhì)體形成雜種植株的過程，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，③是脫分化過程，④是再分化過程?！驹斀狻緼、①過程為避免植物原生質(zhì)體的破裂，應(yīng)在等滲環(huán)境中進(jìn)行。蝸牛以植物為食，其消化道中的酶能水解植物的細(xì)胞壁，A正確；B、因?yàn)閮煞N植物細(xì)胞表面被不同熒光蛋白所標(biāo)記，所以在挑選雜種細(xì)胞時(shí)應(yīng)找細(xì)胞表面有兩種熒光蛋白標(biāo)記的細(xì)胞，B正確；C、過程③和④采用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，從雜種細(xì)胞到發(fā)育為完整植物個(gè)體的過程，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，C正確；D、利用植物體的花粉離體培養(yǎng)后獲得的植株，無論含有幾個(gè)染色體組，都為單倍體，D錯(cuò)誤。故選D。7.抗PD-L1單克隆抗體能與骨髓瘤細(xì)胞膜表面的PD-L1特異性結(jié)合，因而具有治療某些癌癥的作用。下圖是制備抗PD-L1單克隆抗體的示意圖，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.在分離B淋巴細(xì)胞前，需要對(duì)小鼠注射PD-L1進(jìn)行免疫處理B.多孔玻璃板中的細(xì)胞為B淋巴細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞C.圖中細(xì)胞集落a～d既能大量增殖，又能產(chǎn)生抗體D.圖中細(xì)胞集落a可用于擴(kuò)大化培養(yǎng)生產(chǎn)抗PD-L1單克隆抗體【答案】B【解析】【分析】動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)過程：用特定的抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫，并從該小鼠的皮中得到產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞；用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在該培養(yǎng)基上未融合的基本細(xì)胞和融合的具有同融合的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)；對(duì)上述經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)克隆化培養(yǎng)加抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選即可獲得足夠數(shù)量的內(nèi)分泌所需抗體的細(xì)胞；將抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞，在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增治，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取大量的單抗?！驹斀狻緼、在分離B淋巴細(xì)胞前，需要對(duì)小鼠注射PD-L1進(jìn)行免疫處理，獲得產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞，A正確。B、多孔玻璃板中的細(xì)胞有未融合的B淋巴細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞、同種細(xì)胞融合的細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞，B錯(cuò)誤。C、圖中細(xì)胞a~d表示雜交瘤細(xì)胞，既能大量繁殖，又能產(chǎn)生抗體，C正確。D、圖中細(xì)胞聚落a能產(chǎn)生抗PD-L1的抗體，可擴(kuò)大化培養(yǎng)生產(chǎn)抗PD-L1的單克隆抗體，D正確。故選B。8.如圖為體細(xì)胞克隆猴“中中”和“華華”的培育流程，為建立人類疾病的動(dòng)物模型、研究疾病機(jī)理帶來光明前景。下列敘述正確的是（）A.過程①將成纖維細(xì)胞注射到去核的卵母細(xì)胞中，體現(xiàn)細(xì)胞膜的選擇透過性B.過程②在培養(yǎng)基中加入的動(dòng)物血清含有激發(fā)成纖維細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)C.過程③進(jìn)行同步發(fā)情處理，可降低代孕母猴對(duì)“中中”“華華”的免疫排斥反應(yīng)D.與模型小鼠相比，模型猴更適合于研究人類疾病的發(fā)病機(jī)理、研發(fā)診治藥物【答案】D【解析】【分析】分析圖：圖示過程為體細(xì)胞克隆過程，①對(duì)處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞去核，②取體細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞核移植；融合后的細(xì)胞激活后培養(yǎng)到早期胚胎，再進(jìn)行③胚胎移植，最終得到克隆猴。【詳解】A、過程①將成纖維細(xì)胞注射到去核的卵母細(xì)胞中，未體現(xiàn)細(xì)胞膜的選擇透過性，A錯(cuò)誤；B、在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需在培養(yǎng)基中加入一定量的動(dòng)物血清的作用是模擬內(nèi)環(huán)境和補(bǔ)充未知的缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，激發(fā)成纖維細(xì)胞核的全能性的是卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的物質(zhì)，B錯(cuò)誤；C、過程③進(jìn)行同步發(fā)情處理，是為了為胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境，C錯(cuò)誤；D、猴子與人類的親緣關(guān)系比小鼠近，與模型小鼠相比，模型猴更適合于研究人類疾病的發(fā)病機(jī)理、研發(fā)診治藥物，D正確。故選D。【點(diǎn)睛】9.為獲取玉米編碼蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的基因，提取玉米細(xì)胞RNA，獲得cDNA后導(dǎo)入基因工程酵母菌細(xì)胞（產(chǎn)生的蔗糖酶不能分泌到胞外），利用選擇培養(yǎng)基篩選到含有目的基因的酵母菌。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.應(yīng)選取含有蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的組織提取RNAB.RNA通過逆轉(zhuǎn)錄形成cDNAC.選擇培養(yǎng)基應(yīng)以蔗糖為唯一碳源D.基因工程酵母菌無水解蔗糖的能力【答案】D【解析】【分析】獲取目的基因可通過逆轉(zhuǎn)錄的方法，通過該方法需要先獲得目的基因的RNA，由于基因選擇性表達(dá)，需要到特定的細(xì)胞中提取所需RNA?！驹斀狻緼、基因的表達(dá)具有選擇性，提取玉米編碼蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的基因的RNA，應(yīng)在含有蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的組織提取，A正確；B、RNA在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，通過逆轉(zhuǎn)錄過程形成cDNA，B正確；C、獲取的目的基因是編碼蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的基因，為研究目的基因是否表達(dá)后起作用，選擇培養(yǎng)基應(yīng)以蔗糖為唯一碳源，C正確；D、基因工程酵母菌產(chǎn)生的蔗糖酶不能分泌到胞外，因而具有水解蔗糖的能力，D錯(cuò)誤。故選D。10.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）能實(shí)現(xiàn)對(duì)相應(yīng)核苷酸序列的大量復(fù)制，相關(guān)敘述正確的是（）A.為激活相應(yīng)酶，PCR反應(yīng)緩沖液中需加入Mg2+B.復(fù)性是為了使解旋后的兩條鏈恢復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu)C.PCR的產(chǎn)物通常用抗原—抗體雜交技術(shù)進(jìn)行鑒定D.該技術(shù)需要用到引物、脫氧核苷酸、解旋酶等【答案】A【解析】【分析】PCR原理：在高溫作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。【詳解】A、Mg2+可激活熱穩(wěn)定DNA聚合酶，故PCR反應(yīng)緩沖液中需加入Mg2+，A正確；B、復(fù)性的目的是使引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上，B錯(cuò)誤；C、瓊脂糖凝膠電泳通常用來鑒定PCR產(chǎn)物，分子量較小DNA分子比分子量較大的DNA分子遷移要快些，從而對(duì)不同大小的DNA片段進(jìn)行分離，C錯(cuò)誤；D、該技術(shù)需要用到引物、脫氧核苷酸等，但不需要解旋酶，DNA分子在高溫條件下解旋，D錯(cuò)誤。故選A。11.以下為形成cDNA過程和PCR擴(kuò)增過程示意圖。據(jù)圖分析，下列說法正確的是（）A.催化①過程的酶是RNA聚合酶B.催化②⑤過程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高溫C.③過程不需要解旋酶的作用D.通過cDNA過程和PCR過程獲得的同一目的基因的結(jié)構(gòu)完全相同【答案】C【解析】【分析】由圖可知，其中①是以RNA為模板形成單鏈DNA的逆轉(zhuǎn)錄過程；②是以單鏈DNA為模板合成雙鏈DNA的DNA分子復(fù)制過程；③④⑤依次是PCR反應(yīng)過程中的變性、復(fù)性、延伸階段?！驹斀狻緼、①過程為逆轉(zhuǎn)錄，催化①過程的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶，A錯(cuò)誤；B、催化②⑤過程的酶都是DNA聚合酶，②過程由DNA單鏈合成雙鏈的過程不需要耐高溫，B錯(cuò)誤；C、③過程不需要解旋酶的作用，是通過加熱解旋的，C正確；D、對(duì)同一目的基因而言，通過cDNA過程獲得和PCR過程獲得的目的基因結(jié)構(gòu)不完全相同，D錯(cuò)誤。故選C。12.基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，以便于重組和篩選。已知限制酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓CATCC—；限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。據(jù)圖判斷，下列操作正確的是（）A.質(zhì)粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割B.質(zhì)粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶I切割C.目的基因和質(zhì)粒均用限制酶I切割D.目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅱ切割【答案】A【解析】【分析】分析題圖：限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-，因此限制酶Ⅱ也能作用于限制酶Ⅰ的識(shí)別序列?！驹斀狻肯拗泼窱的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-，可知限制酶Ⅱ能夠識(shí)別和切割限制酶Ⅰ的識(shí)別序列，目的基因的右端限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-，目的基因左端是限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-，只有用限制酶Ⅱ才能同時(shí)將目的基因切割下來；質(zhì)粒有GeneI和GeneⅡ表示兩種標(biāo)記基因，分別有限制酶I的識(shí)別序列和限制酶Ⅱ的識(shí)別序列，如果用限制酶Ⅱ切割，則GeneI和GeneⅡ都被破壞，造成重組質(zhì)粒無標(biāo)記基因，用限制酶Ⅰ切割，則破壞GeneⅡ，保留GeneI，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以連接形成重組DNA，A正確，BCD錯(cuò)誤。故選A。13.研究發(fā)現(xiàn)，人溶菌酶（hLZ）是天然抗生素替代品?？茖W(xué)家將該蛋白基因?qū)肷窖蝮w內(nèi)使其能夠在山羊乳腺細(xì)胞中表達(dá)，從而從山羊乳汁中提取人溶菌酶。圖1表示被限制酶切割后的該蛋白基因，圖2表示培育流程。下列敘述正確的是（）A.切割該蛋白基因的限制酶有2種，識(shí)別的序列可分別為GATCCAT和AGCTTCCB.①過程是基因工程的核心步驟，需要的工具酶有限制酶、DNA連接酶和質(zhì)粒C.②過程常采用顯微注射的方法，受體細(xì)胞應(yīng)選擇受精卵而一般不選擇體細(xì)胞D.③過程應(yīng)將山羊受精卵培育到原腸胚進(jìn)行移植，移植后需進(jìn)行是否妊娠的檢測(cè)【答案】C【解析】【分析】圖2中①為構(gòu)建基因表達(dá)載體或重組質(zhì)粒，②為將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞，③為胚胎移植。【詳解】A、根據(jù)目的基因切割后產(chǎn)生的黏性末端不同，可確定切割該基因的限制酶有2種，一種酶識(shí)別的序列可為GGATCC，在G和G之間進(jìn)行切割，另一種酶識(shí)別的序列可為AAGCTT，在A和A之間切割，A錯(cuò)誤；B、①過程是基因工程的核心步驟，需要的工具酶有限制酶、DNA連接酶，質(zhì)粒不屬于工具酶，B錯(cuò)誤；C、②過程為將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞，常采用顯微注射的方法，受體細(xì)胞可以選擇受精卵（全能性高），一般不選擇體細(xì)胞，C正確；D、③過程應(yīng)將山羊受精卵培育到桑椹胚或囊胚再進(jìn)行移植，且移植后還需對(duì)受體是否發(fā)生妊娠反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)，D錯(cuò)誤。故選C。14.一種雙鏈DNA分子被三種不同的限制酶切割，切割產(chǎn)物通過電泳分離，用大小已知的DNA片段的電泳結(jié)果作為分子量標(biāo)記（右圖左邊一列）。關(guān)于該雙鏈DNA,下列說法錯(cuò)誤的是（）A.呈環(huán)狀結(jié)構(gòu)B.分子質(zhì)量大小為10kbC.有一個(gè)NotI和兩個(gè)EcoRI切點(diǎn)D.其NotI切點(diǎn)與EcoRI切點(diǎn)的最短距離為2kb【答案】D【解析】【分析】通過與分子量標(biāo)記比較可知單用EcoRI處理后產(chǎn)生了4kb和6kb兩條帶；而利用EcoRI和NotI雙酶切時(shí)產(chǎn)生了6kb、3kb、1kb三條帶，即4kb的片段進(jìn)一步被NotI酶切為3kb和1kb的片段，因此DNA含有一個(gè)NotI酶切位點(diǎn)，因?yàn)橛肗otI處理只產(chǎn)生了一個(gè)10kb的條帶，所以該分子必須是環(huán)狀的，長(zhǎng)度一定是10kb。據(jù)此答題?！驹斀狻緼B、單用EcoRI處理和利用EcoRI和NotI雙酶切時(shí)產(chǎn)生的結(jié)果不同，說明DNA含有NotI酶切位點(diǎn)，因?yàn)橛肗otI處理只產(chǎn)生了一個(gè)10kb的條帶，所以該分子必須是環(huán)狀的，且長(zhǎng)度一定是10kb，A正確；B正確；C、因?yàn)橛肗otI處理只產(chǎn)生了一個(gè)10kb的條帶，說明該環(huán)狀DNA上含有一個(gè)NotI切割位點(diǎn)，單用EcoRI處理后產(chǎn)生了4kb和6kb兩條帶，說明該環(huán)狀DNA上含有2個(gè)EcoRI切割位點(diǎn)，C正確：D、用EcoRI處理后產(chǎn)生的4kb的片段，進(jìn)一步被NotI酶切為3kb和1kb的片段，可以得知NotI切點(diǎn)與EcoRI切點(diǎn)的最短距離為1kb，最大距離為3kb，D錯(cuò)誤。故選D?！军c(diǎn)睛】15.下列關(guān)于胚胎工程的敘述，正確的是（）A.胚胎工程技術(shù)包括體外受精、胚胎移植和胚胎分割等B.胚胎移植時(shí)選用的胚胎都是由受精卵發(fā)育而來C.受精卵需發(fā)育到原腸胚階段才能進(jìn)行胚胎移植D.胚胎移植前需對(duì)供體和受體進(jìn)行配型以免發(fā)生免疫排斥【答案】A【解析】【分析】胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)?！驹斀狻緼、胚胎工程技術(shù)包括有體外受精、胚胎移植和胚胎分割等技術(shù)，A正確；B、用于移植的早期胚胎不一定是由受精卵發(fā)育而來，也可以是細(xì)胞核移植后得到的，B錯(cuò)誤；C、一般受精卵發(fā)育到桑葚胚或囊胚階段進(jìn)行胚胎移植，C錯(cuò)誤；D、受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。因此，在進(jìn)行胚胎移植時(shí)沒有必要對(duì)供體和受體進(jìn)行配型，D錯(cuò)誤。故選A。二、選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，有的只有一個(gè)選項(xiàng)正確，有的有多個(gè)選項(xiàng)正確，全部選對(duì)的得3分，選對(duì)但不全的得1分，有選錯(cuò)的得0分。16.下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化酵母菌過程中的部分操作步驟，下列說法正確的是（）A.①步驟使用的培養(yǎng)基是未滅菌的培養(yǎng)基B.①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行C.③到④的過程中，接種環(huán)共灼燒了5次D.④步驟操作時(shí)，不能將第1區(qū)和第5區(qū)的劃線相連【答案】BD【解析】【分析】由圖可知，①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進(jìn)行平板劃線，④是培養(yǎng)。制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的基本過程為：計(jì)算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板?！驹斀狻緼、①步驟表示倒平板，在倒平板之前，培養(yǎng)基已經(jīng)調(diào)節(jié)過pH并滅過菌，A錯(cuò)誤；B、①②③步驟操作時(shí)需要酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止雜菌污染，B正確；C、接種環(huán)在每次劃線前和接種結(jié)束后都要通過灼燒來滅菌，所以③到④的過程中5次劃線操作前都要灼燒滅菌，接種結(jié)束后還需灼燒滅菌1次，防止造成污染，由此可見，③到④的過程中共需灼燒接種環(huán)6次，C錯(cuò)誤；D、④步驟操作時(shí)，不能將第1區(qū)和第5區(qū)的劃線相連，否則就達(dá)不到稀釋的目的，不能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落，D正確。故選BD。17.試管苗、試管嬰兒和克隆羊都是現(xiàn)代生物科技的杰出成果。下列對(duì)它們所利用的生物學(xué)原理及技術(shù)的敘述，正確的是（）A.都屬于無性生殖B.都應(yīng)用了細(xì)胞工程相關(guān)技術(shù)C.都發(fā)生基因重組D.都體現(xiàn)了細(xì)胞全能性【答案】B【解析】【分析】1、試管嬰兒是采用體外受精、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)形成的，屬于有性生殖，該過程沒有發(fā)生基因重組，但可能發(fā)生變異，也不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性。2、試管苗是采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成，屬于無性生殖，能保持母本性狀，充分體現(xiàn)了體細(xì)胞的全能性，該過程沒有發(fā)生基因重組，但可能發(fā)生變異。【詳解】A、試管嬰兒是體外受精和胚胎移植后形成的，屬于有性生殖，A錯(cuò)誤；B、試管嬰兒和克隆羊都利用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，試管苗采用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，因此三者都應(yīng)用到了細(xì)胞工程技術(shù)，B正確；C、自然狀態(tài)下，基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過程中，試管苗和克隆羊?qū)儆跓o性生殖，不能發(fā)生基因重組，C錯(cuò)誤；D、克隆羊是體細(xì)胞核移植后形成的，體現(xiàn)了動(dòng)物體細(xì)胞細(xì)胞核的全能性，不能體現(xiàn)細(xì)胞全能性，D錯(cuò)誤。故選B。18.“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的相關(guān)敘述中，錯(cuò)誤的是（）A.實(shí)驗(yàn)材料可以使用豬肝B.研磨后的研磨液經(jīng)過離心后，去除上清液，保留沉淀物備用C.可利用預(yù)冷的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精初步分離DNA與蛋白質(zhì)D.鑒定時(shí)向試管中加入二苯胺試劑后靜置5min，呈現(xiàn)藍(lán)色【答案】BD【解析】【分析】DNA、RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面存在差異，可以利用這些差異，選用適當(dāng)?shù)奈锢砘蚧瘜W(xué)方法對(duì)它們進(jìn)行提取。DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈藍(lán)色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑?！驹斀狻緼、肝細(xì)胞含有細(xì)胞核和眾多的細(xì)胞器，可以使用豬肝作為實(shí)驗(yàn)材料，A正確；B、研磨后研磨液經(jīng)過離心后，可以使用紗布對(duì)研磨液進(jìn)行過濾，并獲取上清液，上清液中含有DNA，B錯(cuò)誤；C、DNA不溶于酒精，尤其是體積分?jǐn)?shù)為95%的冷凍酒精，而細(xì)胞中的蛋白質(zhì)等其他物質(zhì)可以溶解于酒精，本實(shí)驗(yàn)使用了預(yù)冷的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精，目的是析出提取含雜質(zhì)較少的DNA，C正確；D、DNA鑒定時(shí)向試管中加入二苯胺試劑后，應(yīng)將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后可觀察到藍(lán)色，D錯(cuò)誤。故選BD。19.下圖為利用PCR技術(shù)擴(kuò)增特定DNA片段的部分示意圖，圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。下列有關(guān)描述錯(cuò)誤的是（）A.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)不需要解旋酶而需要耐高溫的DNA聚合酶B.引物是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)，子鏈沿著模板鏈的5'→3'方向延伸C.從理論上推測(cè)，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中只含有引物A的DNA片段所占的比例為15/16D.在第三輪循環(huán)產(chǎn)物中才開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段且占1/2【答案】BCD【解析】【分析】聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段的原理：在解旋酶作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4中游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。.PCR反應(yīng)過程是：變性→復(fù)性→延伸。【詳解】A、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)不需要解旋酶，該過程中氫鍵的斷裂是通過高溫完成的，而子鏈延伸過程需要耐高溫的DNA聚合酶，A正確；B、引物是子鏈合成延伸基礎(chǔ)，即DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，也可以說子鏈沿著模板鏈的3’→5’方向延伸，B錯(cuò)誤；C、從理論上推測(cè)，第四輪循環(huán)產(chǎn)物共有24=16個(gè)DNA分子，其中有2個(gè)DNA含有模板鏈，只含有引物A的DNA片段即為與其中的一個(gè)模板鏈形成的DNA分子，因此，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中只含有引物A的DNA片段所占的比例為1/16，C錯(cuò)誤；D、DNA復(fù)制為半保留復(fù)制，DNA復(fù)制n次，共形成2n個(gè)DNA，其中兩個(gè)DNA含有母鏈和子鏈（引物A或引物B），（2n-2）個(gè)DNA都含有子鏈（含有引物A和引物B）。第三輪循環(huán)即DNA復(fù)制3次，共形成8個(gè)DNA，其中2個(gè)DNA含有引物A或引物B，6個(gè)DNA含有引物A和引物B，其中只有2個(gè)兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段，含量為1/4，D錯(cuò)誤。故選BCD。20.OsCLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四個(gè)基因分別編碼四種不同的酶，研究人員將這些基因分別與葉綠體轉(zhuǎn)運(yùn)肽（引導(dǎo)合成的蛋白質(zhì)進(jìn)入葉綠體）基因連接，構(gòu)建多基因表達(dá)載體（載體中部分序列如圖所示），利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化水稻，在水稻葉綠體內(nèi)構(gòu)建了一條新代謝途徑，提高了水稻的產(chǎn)量。下列敘述正確的是（）A.可用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)四種酶在轉(zhuǎn)基因水稻中的表達(dá)量B.四個(gè)基因轉(zhuǎn)錄時(shí)都以DNA的同一條單鏈為模板C.應(yīng)選用含潮霉素的培養(yǎng)基篩選被農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的水稻細(xì)胞D.四個(gè)基因都在水稻葉綠體內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄翻譯【答案】AC【解析】【分析】1、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。2、目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)?！驹斀狻緼、可用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測(cè)四種酶在轉(zhuǎn)基因水稻中的表達(dá)量，雜交帶相對(duì)量越多，表明目的基因翻譯成的蛋白質(zhì)含量越高，A正確；B、由題圖可知，在同一個(gè)T-DNA中OsGLO1啟動(dòng)子啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的方向與其他三個(gè)基因的不同，故四個(gè)基因轉(zhuǎn)錄時(shí)不都以DNA的同一條單鏈為模板，B錯(cuò)誤；C、據(jù)圖可知，卡那霉素抗性基因不在T-DNA中，而潮霉素抗性基因在T-DNA中，應(yīng)選用含潮霉素的培養(yǎng)基篩選被農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的水稻細(xì)胞，C正確；D、由題意知，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化水稻，可使目的基因插入到水稻細(xì)胞中染色體的DNA上，所以與葉綠體轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因連接的四個(gè)基因，在水稻細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，在核糖體中進(jìn)行翻譯，D錯(cuò)誤。故選AC。三、非選擇題：本題包括5小題，共55分。21.控制飲用水的細(xì)菌含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施，回答下列與檢驗(yàn)飲用水中大腸桿菌有關(guān)的問題。（1）檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，有時(shí)需要將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱為__________。下圖所示的四種菌落分布圖中，圖____________不是由該方法得到的，而是利用___________方法得到的。（2）用上述方法檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)是否需要設(shè)置空白對(duì)照?__________（填“需要”或“不需要”）。原因是__________。（3）若分別取0.1mL已稀釋103倍的水樣分別涂布到三個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為55、56、57，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為________個(gè)。（4）統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比接種水樣中活菌的實(shí)際數(shù)目____________（填“高”或“低”），原因是___________?！敬鸢浮浚?）①.活菌計(jì)數(shù)法（“稀釋涂布平板法”）②.D③.平板劃線法（2）①.需要②.檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染（3）5.6×108（4）①.低②.當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落【解析】【分析】對(duì)于微生物的分離常用稀釋涂布平板法和平板劃線法進(jìn)行接種，根據(jù)培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數(shù)目和稀釋倍數(shù)計(jì)算得出細(xì)菌的數(shù)目往往比實(shí)際的數(shù)目低，原因是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落?！拘?詳解】對(duì)于微生物的分離常用稀釋涂布平板法和平板劃線法進(jìn)行接種，但稀釋涂布平板法適用于微生物的計(jì)數(shù)；據(jù)圖分析D是平板劃線法接種，不適用于微生物的計(jì)數(shù)?！拘?詳解】用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)需要設(shè)置對(duì)照組，因?yàn)樾枰袛嗯囵B(yǎng)基是否被雜菌污染（培養(yǎng)基滅菌是否合格）?！拘?詳解】在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，一般選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而遺漏菌落的數(shù)目，而菌落數(shù)目穩(wěn)定后實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)會(huì)更準(zhǔn)確。每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為(55+56+57)÷3×10000×103=5.6×108個(gè)?！拘?詳解】根據(jù)培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數(shù)目和稀釋倍數(shù)計(jì)算得出細(xì)菌的數(shù)目往往比實(shí)際的數(shù)目低，原因是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，故培養(yǎng)基計(jì)算得到的數(shù)值往往比實(shí)際的低。22.如圖所示為發(fā)酵工程生產(chǎn)產(chǎn)品的流程圖：（1）能生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素的工程菌是通過①培養(yǎng)的，①是____________；高產(chǎn)青霉素菌種是通過②培育的，②是____________。（2）整個(gè)過程的中心階段是_____________。在發(fā)酵過程中要嚴(yán)格控制______________、_____________、_____________等發(fā)酵條件。（3）若⑤是微生物飼料，則⑤的本質(zhì)是______________，可采用______________等方法將菌體從培養(yǎng)液中分離出來。（4）發(fā)酵工程的優(yōu)點(diǎn)有______________（答出兩點(diǎn)），因此在食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)和農(nóng)牧業(yè)等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用?！敬鸢浮浚?）①.基因工程育種②.誘變育種（2）①.發(fā)酵過程②.溶氧③.溫度④.pH（通氣量、轉(zhuǎn)速）（3）①.單細(xì)胞蛋白②.過濾、沉淀（4）生產(chǎn)條件溫和、原料來源豐富且價(jià)格低廉、產(chǎn)物專一、廢棄物對(duì)環(huán)境的污染小和容易處理【解析】【分析】發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品有兩類：一類是代謝產(chǎn)物，另一類是菌體本身。產(chǎn)品不同，分離提純的方法一般不同。①如果產(chǎn)品是菌體，可采用過濾，沉淀等方法將菌體從培養(yǎng)液中分離出來；②如果產(chǎn)品是代謝產(chǎn)物，可用萃取、蒸餾、離子交換等方法進(jìn)行提取?！拘?詳解】能生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素的工程菌是通過基因工程，將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)爰?xì)菌體內(nèi)培養(yǎng)的，①是基因工程育種；高產(chǎn)青霉素菌種是通過誘變育種培育的，因此②是誘變育種?！拘?詳解】發(fā)酵工程的中心階段是發(fā)酵過程。發(fā)酵階段需要隨時(shí)取樣、檢測(cè)細(xì)菌數(shù)目和產(chǎn)物濃度等，以了解發(fā)酵進(jìn)程，發(fā)酵過程中培養(yǎng)基不斷消耗，所以還要及時(shí)添加培養(yǎng)基，不同的發(fā)酵條件可能無法得到發(fā)酵產(chǎn)物，所以還要嚴(yán)格控制發(fā)酵條件，如溶氧、溫度、pH、通氣量、轉(zhuǎn)速等。【小問3詳解】單細(xì)胞蛋白是微生物菌體本身，若⑤是微生物飼料，則⑤的本質(zhì)是單細(xì)胞蛋白。從培養(yǎng)液中分離菌體可采用過濾、沉淀的方法。【小問4詳解】發(fā)酵工程以其生產(chǎn)條件溫和、原料來源豐富且價(jià)格低廉、產(chǎn)物專一、廢棄物對(duì)環(huán)境的污染小和容易處理等特點(diǎn)，在食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)和農(nóng)牧業(yè)等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用，形成了規(guī)模龐大的發(fā)酵工業(yè)。23.和牛體型較小，肉質(zhì)鮮嫩，營(yíng)養(yǎng)豐富。我國(guó)科研人員利用胚胎分割移植技術(shù)，按如圖所示流程操作，成功地批量培育了和牛這一優(yōu)良品種。請(qǐng)回答下列問題：（1）用___________激素處理，可使供體母牛超數(shù)排卵，過程①中產(chǎn)生的精子需要進(jìn)行_____________處理后才具有與卵母細(xì)胞受精的能力。在實(shí)際胚胎工程操作中常以_____________作為受精的標(biāo)志。（2）試管牛的培育需要的工程技術(shù)有_____________、______________和胚胎移植等。（3）為培育子代雌性小牛，胚胎移植前須進(jìn)行性別鑒定，宜取_____________細(xì)胞進(jìn)行DNA分析；移植的胚胎處于______________期，移入的甲胚胎能在代孕雌牛子宮中存活的生理基礎(chǔ)是_______________。（4）胚胎移植的實(shí)質(zhì)是___________。（5）為提高胚胎利用效率，盡快獲得數(shù)量較多的子代和牛，圖中甲環(huán)節(jié)是對(duì)牛胚胎所做的處理，使用的技術(shù)稱為______________，最終目的是___________?！敬鸢浮浚?）①.促性腺

②.獲能③.觀察到兩個(gè)極體或雌、雄原核（2）①.體外受精②.早期胚胎培養(yǎng)（3）①.滋養(yǎng)層②.囊胚③.受體雌牛子宮對(duì)外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)（4）早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移（5）①.胚胎分割

②.產(chǎn)生多個(gè)基因型相同的后代【解析】【分析】分析題圖：圖中①表示精子的采集；②表示卵母細(xì)胞的采集；③表示體外受精過程。通過胚胎工程培育試管牛的過程，包括卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等過程?！拘?詳解】用促性腺激素處理雌牛后，可使供體母牛一次性排出多個(gè)卵細(xì)胞，采集的精子往往需要經(jīng)過獲能處理后才具有與卵細(xì)胞受精的能力。在實(shí)際胚胎工程操作中，常以觀察到兩個(gè)極體或雌、雄原核作為受精的標(biāo)志。【小問2詳解】由圖可知，試管牛的培育需要體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。【小問3詳解】胚胎移植前須進(jìn)行性別鑒定，宜取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行DNA分析；移入的胚胎能在受體雌牛子宮中存活，其生理基礎(chǔ)是代孕雌牛子宮對(duì)外來胚胎基本不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；另外，為培育雌性奶牛，胚胎移植前須進(jìn)行性別鑒定，應(yīng)取早期胚胎的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行DNA分析?！拘?詳解】胚胎移植的實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移?！拘?詳解】為提高胚胎利用效率，盡快獲得數(shù)量較多的子代和牛，應(yīng)對(duì)胚胎進(jìn)行胚胎分割處理，此操作的最終目的是獲得多個(gè)基因型相同的后代。24.科學(xué)家為了提高干擾素的抗病毒活性和儲(chǔ)存穩(wěn)定性，采用重疊延伸PCR技術(shù)，將干擾素基因中相應(yīng)位點(diǎn)的C//G堿基對(duì)特定突變?yōu)镚//C堿基對(duì)，從而使干擾素中的第17位氨基酸由半胱氨酸變成絲氨酸。該技術(shù)采用具有互補(bǔ)末端的引物，使PCR產(chǎn)物形成了重疊鏈，從而在隨后的擴(kuò)增反應(yīng)中通過重疊鏈的延伸，將不同來源的擴(kuò)增片段重疊拼接起來，獲得定點(diǎn)突變的干擾素基因，然后導(dǎo)入大腸桿菌生產(chǎn)表達(dá)新的干擾素，原理如下圖?；卮鹣铝袉栴}：（1）利用重疊延伸PCR技術(shù)誘變干擾素基因時(shí)，將預(yù)期的突變堿基設(shè)計(jì)在PCR的引物3和引物4中，制備出“PCR體系1”和“PCR體系2”，分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增。“PCR體系2”中加入的引物是____________。得到圖中由c、d鏈構(gòu)成的完整DNA分子至少需要“PCR體系2”進(jìn)行___________次循環(huán)。（2）將PCR體系1、2的產(chǎn)物（圖中ab和cd）混合后，繼續(xù)進(jìn)行下一次PCR反應(yīng)。在該P(yáng)CR反應(yīng)體系中經(jīng)過高溫變性后，當(dāng)溫度下降到55℃，能夠互補(bǔ)配對(duì)的DNA鏈相互結(jié)合，理論上有__________種結(jié)合的可能，其中能進(jìn)行進(jìn)一步延伸的有___________種。（3）為便于構(gòu)建基因表達(dá)載體，需要將限制酶EcoRI和SalI的識(shí)別序列分別引入誘變干擾素基因的兩端，操作思路是_____________。（4）利用重疊延伸PCR技術(shù)還可以將兩個(gè)不同來源的DNA片段拼接起來。有人想利用該技術(shù)把基因M和N拼接在一起，設(shè)計(jì)基因M的引物M1、M2，基因N的引物N1、N2。在設(shè)計(jì)這4種引物時(shí)，特別要注意的問題是_______________。【答案】（1）①.引物1和引物3②.2（2）①.4##四②.1##一（3）在引物1的5'端引入限制酶EcoRⅠ的酶切序列，在引物2的5'端引入限制酶SalⅠ的酶切序列（4）M1、M2中的一種引物與N1、N2中的一種引物必須具有互補(bǔ)配對(duì)的片段【解析】【分析】PCR原理：在解旋酶作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。PCR反應(yīng)過程是：變性→復(fù)性→延伸?！拘?詳解】分析題