2024-2025學(xué)年高中生物課后分層檢測(cè)案12血紅蛋白的提取和分離含解析新人教版選修1

PAGE8-課后分層檢測(cè)案12血紅蛋白的提取和分別[基礎(chǔ)鞏固練]1．利用凝膠色譜法先洗脫出來(lái)的蛋白質(zhì)是()A．相對(duì)分子質(zhì)量大的B．溶解度高的C．相對(duì)分子質(zhì)量小的D．所帶電荷多的2．凝膠色譜法是分別蛋白質(zhì)分子的一種常用方法，但并非全部的蛋白質(zhì)都可以用此方法進(jìn)行分別，能分別的蛋白質(zhì)分子之間必需()A．具有相同的相對(duì)分子質(zhì)量B．相對(duì)分子質(zhì)量不同，但都是相對(duì)分子質(zhì)量較大的分子C．相對(duì)分子質(zhì)量不同，但都是相對(duì)分子質(zhì)量較小的分子D．具有不同的相對(duì)分子質(zhì)量3．凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)時(shí)，凝膠的種類較多，但其作用的共同點(diǎn)是()A．變更蛋白質(zhì)分子通過(guò)凝膠時(shí)的路徑B．吸附一部分蛋白質(zhì)，從而影響蛋白質(zhì)分子的移動(dòng)速度C．將酶或細(xì)胞固定在凝膠中D．與蛋白質(zhì)分子進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，從而影響其移動(dòng)速度4．分別血紅蛋白溶液時(shí)，離心所采納的方法是()A．低速長(zhǎng)時(shí)間離心B．低速短時(shí)間離心C．高速長(zhǎng)時(shí)間離心D．高速短時(shí)間離心5．將處理裂開后的紅細(xì)胞混合液以2000r/min的速度離心10min后，離心管中的溶液分為四層，從上到下的依次依次是()A．血紅蛋白、甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、紅細(xì)胞裂開物沉淀層B．甲苯層、紅細(xì)胞裂開物沉淀層、血紅蛋白、脂質(zhì)物質(zhì)層C．脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、紅細(xì)胞裂開物沉淀層D．甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、紅細(xì)胞裂開物沉淀層6．運(yùn)用凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)試驗(yàn)中，相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的行進(jìn)過(guò)程可表示為下圖中的()7．在血紅蛋白的整個(gè)提取過(guò)程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是()①防止血紅蛋白被氧氣氧化②血紅蛋白是一種堿性物質(zhì)，須要酸中和③防止色譜柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡，影響洗脫效果④讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi)，維持其結(jié)構(gòu)和功能A．①②B．②③C．②④D．③④8．下列關(guān)于蛋白質(zhì)提取和分別試驗(yàn)中樣品處理步驟的描述，正確的是()A．紅細(xì)胞的洗滌：加入蒸餾水，緩慢攪拌，低速短時(shí)間離心B．血紅蛋白的釋放：加入生理鹽水和甲苯，置于磁力攪拌器上充分?jǐn)嚢鐲．分別血紅蛋白：將攪拌好的混合液離心，過(guò)濾后，用分液漏斗分別D．透析：將血紅蛋白溶液裝入透析袋，然后置于pH為4.0的磷酸緩沖液中透析12h9．紅細(xì)胞含有大量的血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊或其他哺乳動(dòng)物的血液來(lái)提取和分別血紅蛋白，請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：(1)試驗(yàn)前取簇新的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來(lái)，經(jīng)處理并離心，收集血紅蛋白溶液。①加入檸檬酸鈉的目的是________________。②以上所述的過(guò)程為樣品處理，它包括____________、____________、分別血紅蛋白溶液。(2)收集的血紅蛋白溶液可以在透析袋中透析，這就是樣品的粗分別。①透析的目的是________。②透析過(guò)程中須要用到________緩沖液。(3)通過(guò)凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最終經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。①凝膠色譜法是依據(jù)________分別蛋白質(zhì)的方法。②加入SDS可以使蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠電泳中的遷移率完全取決于________。[實(shí)力提升練]10．運(yùn)用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量時(shí)，可選用一組已知相對(duì)分子質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白同時(shí)進(jìn)行電泳，依據(jù)已知相對(duì)分子質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白的電泳區(qū)帶位置，用電泳遷移率和相對(duì)分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以測(cè)出未知蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量。下列說(shuō)法不正確的是()A．SDS能與蛋白質(zhì)形成復(fù)合物而掩蓋不同蛋白質(zhì)間的電荷差別，使電泳遷移率取決于分子的大小B．與已知相對(duì)分子質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白的電泳帶相比，只能也許估計(jì)出待測(cè)蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量C．SDS在引發(fā)劑和催化劑的作用下參加構(gòu)成聚丙烯酰胺凝膠D．假如只是分別混合物而不需測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量時(shí)，就無(wú)需加入SDS，此時(shí)蛋白質(zhì)的電泳遷移率取決于所帶電荷和分子的大小11．已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種物質(zhì)，其分子大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量狀況如圖所示。下列敘述正確的是()A．將樣品裝入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋內(nèi)，則分子甲也保留在袋內(nèi)B．若五種物質(zhì)為蛋白質(zhì)，則用凝膠色譜柱分別時(shí)，甲的移動(dòng)速度最快C．將樣品以2000r/min的速度離心10min，若分子戊存在于沉淀中，則分子丙也存在于沉淀中D．若五種物質(zhì)為蛋白質(zhì)，用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳分別樣品中的蛋白質(zhì)分子，則分子甲和分子戊形成的電泳帶相距最近12．下圖是用除去DNA的濾液進(jìn)行血紅蛋白的提取和分別試驗(yàn)的裝置，下列有關(guān)敘述不正確的是()A．首先用圖甲裝置對(duì)濾液進(jìn)行處理，其目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)B．圖乙裝置的試管中收集到的液體中最先出現(xiàn)的是相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)C．用圖乙裝置分別血紅蛋白時(shí)，待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí)，用試管收集流出液，每管收集5mL，連續(xù)收集D．圖丙裝置中電泳法分別提純血紅蛋白的原理是血紅蛋白帶有肯定量的電荷，在電場(chǎng)的作用下向一極移動(dòng)13．以下關(guān)于血紅蛋白提取和分別的過(guò)程及原理敘述正確的是()A．紅細(xì)胞洗滌過(guò)程中要加入5倍體積的蒸餾水，重復(fù)洗滌3次B．將血紅蛋白溶液放在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液中透析12小時(shí)C．凝膠裝填在色譜柱內(nèi)要?jiǎng)蚍Q，不能有氣泡存在D．蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較大的移動(dòng)速度慢14．下圖為凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)的示意圖和SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳示意圖。據(jù)圖分析不正確的是()A．在裝填圖甲中凝膠色譜柱時(shí)一旦發(fā)覺柱內(nèi)有氣泡存在，就須要重裝B．圖甲中大分子蛋白質(zhì)因阻力大而移動(dòng)得慢，所以最終從層析柱中流出來(lái)C．圖乙中凝膠中加入的SDS可以使蛋白質(zhì)遷移速率完全取決于分子大小D．已知凝膠中的SDS帶負(fù)電，則應(yīng)在電泳槽的①處接電源負(fù)極，②處接電源正極15．隨著人類基因組安排的進(jìn)展和多種生物基因組測(cè)序工作的完成，人類跨入了后基因組和蛋白質(zhì)組時(shí)代。對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行探討時(shí)，首先要獲得純度較高的蛋白質(zhì)。圖1是某生物愛好小組在“蛋白質(zhì)的提取和分別”試驗(yàn)中，打算從豬的血液中初步提取血紅蛋白，設(shè)計(jì)的“血紅蛋白提取、分別流程圖”：圖1請(qǐng)回答(1)～(4)有關(guān)問(wèn)題：(1)樣品處理中紅細(xì)胞的洗滌要用________反復(fù)沖洗、離心。向紅細(xì)胞懸液中加入肯定量的低濃度pH＝7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢?，可以裂開紅細(xì)胞，裂開細(xì)胞的原理是________________________________。(2)血紅蛋白粗分別階段，透析的目的是________，若要盡快達(dá)到志向的透析效果，可以________________(寫出一種方法)。(3)血紅蛋白的純化是通過(guò)________法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去。(4)電泳利用了待分別樣品中各種分子的________________等的差異，而產(chǎn)生不同遷移速度，實(shí)現(xiàn)各種分子的分別。(5)一同學(xué)通過(guò)血紅蛋白醋酸纖維薄膜電泳，視察到正常人和鐮刀型細(xì)胞貧血癥患者的血紅蛋白電泳結(jié)果如圖2所示。由圖可知攜帶者有________種血紅蛋白，從分子遺傳學(xué)的角度作出的說(shuō)明是________________。[素養(yǎng)養(yǎng)成練]16．下面是某探討小組開展的“豬血漿某白蛋白的提取及分子量測(cè)定”的探討，請(qǐng)完成下列有關(guān)問(wèn)題。材料儀器：簇新豬血、低速冷凍離心機(jī)、透析袋、電泳儀等。化學(xué)試劑：pH為7.4的緩沖液、檸檬酸鈉、奈氏試劑(與NHeq\o\al(＋,4)反應(yīng)出現(xiàn)黃色或紅棕色沉淀)、飽和度為55%的(NH4)2SO4溶液、生理鹽水等。試驗(yàn)步驟：(1)樣品獲得：向簇新豬血中加入________以防止血液凝固，靜置一段時(shí)間后取上層血漿。(2)鹽析法粗提蛋白質(zhì)：①向血漿中加入肯定體積的飽和度為55%的(NH4)2SO4溶液，充分混合后靜置、離心，取沉淀物，向沉淀物中加入適量生理鹽水使之溶解；②重復(fù)步驟①2～3次，最終用生理鹽水將沉淀溶解即得到粗提品，鹽析粗提“血漿某白蛋白”的主要原理是________________________________________________________________________________________________________________________________________________，重復(fù)步驟①的主要目的是________________________________________________________________________。(3)透析除鹽：將粗提品裝入透析袋，以pH為7.4的緩沖液作透析液，每隔4h更換一次透析液，每次更換前利用奈氏試劑檢測(cè)透析液中NHeq\o\al(＋,4)的量。利用緩沖液作透析液的緣由是________________________________________________________________________。檢測(cè)中，若視察到透析液____________________時(shí)，即可終止透析。(4)凝膠色譜法分別：透析后的樣品經(jīng)凝膠柱洗脫，獲得純凈血漿某白蛋白樣品。(5)分子量測(cè)定：化學(xué)物質(zhì)SDS能使蛋白質(zhì)變性并解聚成單條肽鏈。在聚丙烯酰胺凝膠電泳中加入肯定量的SDS，使電泳遷移率完全取決于肽鏈的分子大小。下圖為本試驗(yàn)中用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血漿某白蛋白的結(jié)果。依據(jù)電泳結(jié)果，某同學(xué)得到“提取的血漿某白蛋白有兩條肽鏈”的結(jié)論，這種說(shuō)法牢靠嗎？理由是：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。課后分層檢測(cè)案12血紅蛋白的提取和分別1．解析：相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)能進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道，路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度較慢；相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道，路程較短，移動(dòng)速度較快，首先洗脫出來(lái)。答案：A2．解析：多種在凝膠分別范圍之外的分子，在不變更凝膠種類的狀況下是很難分別的。對(duì)于相對(duì)分子質(zhì)量不同，但同屬于凝膠分別范圍內(nèi)的各種分子，在凝膠珠中的分布狀況是不同的，相對(duì)分子質(zhì)量較大的只能進(jìn)入孔徑較大的那一部分凝膠。答案：C3．解析：凝膠的種類較多，但每種凝膠內(nèi)部都有通道。相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部，通過(guò)的路程較長(zhǎng)，洗脫時(shí)從凝膠柱中出來(lái)得較晚，相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子則可以較早地洗脫出來(lái)，從而達(dá)到分別蛋白質(zhì)的目的。答案：A4．解析：高速或長(zhǎng)時(shí)間離心，會(huì)導(dǎo)致白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞一同沉淀，得不到純凈的紅細(xì)胞，而影響后面血紅蛋白的提取純度。答案：B5．解析：混合液經(jīng)離心后按密度大小排列，在離心管中從上到下的依次依次是：第1層為無(wú)色透亮的甲苯層，第2層白色薄層固體是脂溶性物質(zhì)沉淀層，第3層紅色透亮液體是血紅蛋白水溶液，第4層暗紅色沉淀物主要是紅細(xì)胞裂開物沉淀。答案：D6．解析：相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)留在顆粒外面，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)進(jìn)入顆粒內(nèi)部；相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)因路徑短先被洗脫出來(lái)，相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)因路徑長(zhǎng)而后被洗脫出來(lái)，相對(duì)分子最小的最終被洗脫出來(lái)。答案：B7．解析：在血紅蛋白的整個(gè)提取過(guò)程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是防止色譜柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡，影響洗脫效果，同時(shí)也是為了讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi)，維持其結(jié)構(gòu)和功能。答案：D8．解析：紅細(xì)胞洗滌步驟中應(yīng)加入生理鹽水而不是蒸餾水；血紅蛋白釋放過(guò)程中加入蒸餾水和甲苯；透析時(shí)緩沖液pH應(yīng)為7.0，而不是4.0。答案：C9．解析：(1)檸檬酸鈉是一種抗凝血?jiǎng)?，加入檸檬酸鈉可以防止血液凝固；樣品處理包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分別血紅蛋白溶液。(2)透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而將大分子保留在袋內(nèi)，透析可以去除樣品中分子量較小的雜質(zhì)。(3)凝膠色譜法是依據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分別蛋白質(zhì)的方法。答案：(1)①防止血液凝固②紅細(xì)胞的洗滌血紅蛋白的釋放(2)①去除分子量較小的雜質(zhì)②磷酸(3)①相對(duì)分子質(zhì)量的大小②分子的大小10．解析：聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺和交聯(lián)劑N，N′—亞甲基雙丙烯酰胺在引發(fā)劑和催化劑的作用下聚合交聯(lián)成的具有三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠。答案：C11．解析：透析的原理是相對(duì)分子質(zhì)量小的物質(zhì)能透過(guò)半透膜，相對(duì)分子質(zhì)量大的物質(zhì)不能透過(guò)，乙保留在袋內(nèi)，甲則不肯定保留在袋內(nèi)；凝膠色譜柱分別時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量小的物質(zhì)路程長(zhǎng)、移動(dòng)慢；離心時(shí)相對(duì)分子質(zhì)量大的物質(zhì)先沉淀，戊沉淀，則乙、丁、丙均已沉淀；用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳分別蛋白質(zhì)時(shí)，電泳遷移率主要取決于分子大小。答案：C12．解析：圖乙裝置表示通過(guò)凝膠色譜法分別蛋白質(zhì)的過(guò)程，蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量較大時(shí)，被排阻在凝膠顆粒的外面，在顆粒之間快速通過(guò)，最先出現(xiàn)在收集液中。答案：B13．解析：低滲溶液中細(xì)胞會(huì)吸水漲破，所以紅細(xì)胞的洗滌過(guò)程應(yīng)當(dāng)用生理鹽水洗滌，不能用蒸餾水洗滌，A錯(cuò)誤；將血紅蛋白溶液通過(guò)透析進(jìn)行粗分別時(shí)應(yīng)當(dāng)選用磷酸緩沖液，B錯(cuò)誤；裝填色譜柱時(shí)，凝膠填在色譜柱內(nèi)要?jiǎng)蚍Q，不能有氣泡存在，因?yàn)闅馀輹?huì)影響蛋白質(zhì)洗脫的次序，C正確；蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較大的移動(dòng)速度快，D錯(cuò)誤。答案：C14．解析：在裝填凝膠色譜柱時(shí)，凝膠裝填在色譜柱內(nèi)要?jiǎng)蚍Q，不能有氣泡存在，因?yàn)闅馀輹?huì)影響蛋白質(zhì)洗脫的次序，A正確；圖甲中大分子蛋白質(zhì)不簡(jiǎn)單進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動(dòng)速度快，所以最先從層析柱中流出來(lái)，B錯(cuò)誤；圖乙中凝膠中加入的SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過(guò)蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，故可以使蛋白質(zhì)遷移速率完全取決于分子大小，C正確；凝膠中的SDS帶負(fù)電，所以電泳槽的①處接電源負(fù)極，②處接電源正極，D正確。答案：B15．解析：(1)樣品處理中紅細(xì)胞的洗滌要用生理鹽水反復(fù)沖洗、離心。向紅細(xì)胞懸液中加入肯定量的低濃度pH＝7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢?，可以裂開紅細(xì)胞，裂開細(xì)胞的原理是滲透原理(當(dāng)外界溶液濃度低于動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)液濃度時(shí)，細(xì)胞吸水漲破)。(2)血紅蛋白粗分別階段，透析的目的是除去小分子雜質(zhì)。(3)電泳利用了待分別樣品中