細(xì)胞遺傳學(xué)分析

1、白血病的染色體異常和基因重排,一、白血病染色體的基本特性,（一）獲得性 （二）克隆性 （三）原發(fā)性和繼發(fā)性 （四）平衡性和不平衡性,（一）獲得性,證據(jù)：同卵雙生 子女正常 畸變細(xì)胞局限于白細(xì)胞 白血病為后天獲得，非先天遺傳性疾病,（二）克隆性,克隆性是指來自同一個惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞的一群白細(xì)胞具有相同的染色體異常 ISCN（1995）規(guī)定： 至少2個細(xì)胞有相同的染色體增加或結(jié)構(gòu)重排，至少3個細(xì)胞有相同的染色體丟失 方可確認(rèn)存在一個克隆,（三）原發(fā)性和繼發(fā)性,原發(fā)性：疾病早期 白血病發(fā)病有關(guān) 白血病細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)改變相關(guān) 核型單一出現(xiàn) 繼發(fā)性：克隆演化所致 發(fā)病無關(guān) 預(yù)后差,（四）平衡性和不平衡性,平

2、衡性： 相互易位或結(jié)構(gòu)重排（ DNA含量不變） 使原不在一起的兩基因并置在一起(2種情況) 1 、原癌基因與DNA激活序列相鄰 （ALL 、染色體易位） 2 、編碼轉(zhuǎn)錄因子、受體酪氨酸激酶或核孔蛋白的基因和正常時(shí)無關(guān)的基因融合 （AML染色體易位） 不平衡：癌基因劑量的增加或抑癌基因的丟失,二、慢性粒細(xì)胞白血?。–ML）,1、Ph 染色體 1960年Nowell和Hungerford在美國費(fèi)城首先發(fā)現(xiàn) 9和22號染色體的相互易位t(9；22) (q34；q11),加圖1（示ph）115,大約92的Ph（）CML患者有典型的t(9；22) (q34；q11)易位 其余患者則涉及3條或更多染色體其

3、中必定包括9和22號染色體在內(nèi)的復(fù)雜易位,加圖2（示ph）120,產(chǎn)生BCR/ABL融合基因 9q34的ABL原癌基因易位到22q11上和BCR基因部分融合產(chǎn)生BCR/ABL融合基因 BCR/ABL融合蛋白具激酶活性,2、CML慢性期的染色體改變 Ph見于95%的CML患者（ Ph（+）CML ） Ph（+）CML患者中70%有46，t（9；22）的假二倍體； 30%還可有-Y、+8、+Ph 3、AP/BP-CML 的染色體改變 20%保持46，t（9；22）核型 80%有核型演變（出現(xiàn)額外染色體達(dá)47-50） 4、 Ph（-）CML 5%,三、慢性淋巴細(xì)胞白血?。–LL）,CLL染色體研究進(jìn)

4、展緩慢（由于95的CLL為B細(xì)胞性，T細(xì)胞性僅占5% ） 1979年后采用了B細(xì)胞激活劑（EBV、LPS、PWM）才有了進(jìn)展 CLL患者核型演變很少見，一旦發(fā)生則往往預(yù)后不良,圖127,四、急性髓性白血?。ˋML）,兩類：一類是和FAB亞型相關(guān)的特異性染色體重排，約占60；另一類是和FAB亞型無關(guān)的異常，大多為數(shù)目異常； 和FAB亞型相關(guān)的特異性染色體重排 t(8；21)(q22；q22) AMLM2 t(15；17)(q22；q12 or 21) AMLM3 inv(16)(p13q22) AMLM4 t/del(11)(q23) AMLM5 其他少見的染色體重排 和FAB亞型不相關(guān)的異常

5、原有異常CR后一般不再檢出，復(fù)發(fā)時(shí)又可重現(xiàn),t(8；21)(q22；q22)見于15%-20%的AML 和AMLM2有特別聯(lián)系（92%為AMLM2 、7%為AMLM7、另為92%為AMLM1 ） 75%的有額外染色體異常（其中性染色體丟失最多73%） 21q22的AML1基因易位到8q22上和位于該處的ETO基因融合形成AML1- ETO融合基因,1、 t(8；21)(q22；q22) ( AMLM2),圖133,t(15；17)(q22；q12 or 21) t(8；21)只見于AML-M3 約85%AMLM3可檢出t(15；17)（具高特異性遺傳標(biāo)志） 17q上的維甲酸受體a基因易位到15

6、q的PML基因上融合形成PML- RAR a融合基因 全反式維甲酸治療有效、反之無效,2、t(15；17)(q22；q12 or 21) AMLM3,144,inv(16)(p13q22)見于25%AML-M4 形成CBFB- MYH11融合基因 構(gòu)成M4EO亞型 M4EO亞型放化療效果好，CR近100%，MS達(dá)5年,3、inv(16)(p13q22) AMLM4,圖57,153,五、急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）,大約60-85的ALL患者可檢出克隆性染色體畸變 其中66為特異性染色體重排,六、骨髓異常增生綜合癥（MDS）,1 、 異常檢出率：30-50%，以缺失（整個或部分缺失）多見，獲得（

7、額外未知起源的物質(zhì)）其次，易位少見 2 、 缺失：del（5q）最常見，del（20q），del（11q），del（7q）其次，del（13q）少見,七、白血病染色體畸變的臨床和生物學(xué)意義,1、克隆性染色體異常的檢出有助于白血病的診斷和鑒別診斷 克隆性染色體異常的發(fā)現(xiàn)是診斷MDS或白血病的主要依據(jù)，據(jù)此可與其他非惡性血液病進(jìn)行鑒別,2、特異性染色體重排的發(fā)現(xiàn)不但有助于AML和ALL的鑒別，而且有助于進(jìn)一步識別它們中的各自亞型,MICM(morphologic，immunologic，cytogenetic and molecular biologic)將特異性染色體重排和細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征、免疫學(xué)表型和分子生物學(xué)特性等一起列為白血病診斷分型的重要指標(biāo),3、染色體畸變可作為監(jiān)測急性白血病（AL）緩解、復(fù)發(fā)和CML急變的重要指標(biāo),額外異常染色體一般比臨床或血液學(xué)急變征象早2-4個月,4、性染色體體標(biāo)記可用來驗(yàn)證異基因骨髓移植是否成功或確定白血病的來源,5、染色體是獨(dú)立的預(yù)后指標(biāo)并有助于治療方案的選擇,核型 AML ALL 低危 t(8;21)t(15;17)in(16) 50的超二倍體、t(12;21) 中危 異常、del(9q)del(7q) 6q- 、t(10;14)、t(11;14) 高危 -5、-7、del(5