酵母菌霉菌常用培養(yǎng)基的配方_第1頁
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文檔簡介

1、酵母菌、霉菌常用培養(yǎng)基的配制一、目的要求 了解合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基的配制原理。 學(xué)習(xí)和掌握麥芽汁培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基和察氏 培養(yǎng)基的配制方法。二、基本原理 麥芽汁培養(yǎng)基和馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基被廣泛用于培養(yǎng)酵母菌和霉菌。 馬鈴薯葡 萄糖培養(yǎng)基有時也可用于培養(yǎng)放線菌。 豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基也是培養(yǎng)酵母菌及霉菌 的一種優(yōu)良培養(yǎng)基。察氏培養(yǎng)基主要用于培養(yǎng)霉菌觀察形態(tài)用。麥芽汁培養(yǎng)基為天 然培養(yǎng)基,馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基和豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基二者均為半合成培養(yǎng)基,而 察氏培養(yǎng)基則為合成培養(yǎng)基。培養(yǎng)基配方中出現(xiàn)的自然 pH 系指培養(yǎng)基不經(jīng)酸、堿 調(diào)節(jié)而自然呈現(xiàn)的 pH。三、

2、實驗材料(一)藥品葡萄搪、蔗糖、 NaN03、 K2HP04、KC、l MgSO47H2O,F(xiàn)eS04、瓊脂。(二)儀器 天平、高壓蒸汽滅菌鍋。(三)玻璃器皿 移液管、試管、錐形瓶、燒杯、量筒、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等。(四)其他物品藥匙、pH 試紙、稱量紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報 紙、新鮮麥芽汁、黃豆芽、馬鈴薯等。四、實驗內(nèi)容(一)麥芽汁培養(yǎng)基的配制1培養(yǎng)基成分新鮮麥芽汁一般為 10-15 波林。2配制方法(1) 用水將大麥或小麥洗凈, 用水浸泡 6-12h,置于 15陰涼處發(fā)芽, 上蓋紗布, 每日早、中、晚淋水一次,待麥芽伸長至麥粒的兩倍時,讓其停止發(fā)芽,曬干或烘 干,

3、研磨成麥芽粉,貯存?zhèn)溆谩?2) 取一份麥芽粉加四份水,在 65水浴鍋中保溫 3-4h,使其自行糖化,直至 糖化完全 (檢查方法是取的糖化液,加 2 滴碘液,如無藍(lán)色出現(xiàn),即表示糖化完全 )(3) 糖化液用 4-6 層紗布過濾,濾液如仍混濁, 可用雞蛋清澄清 (用一個雞蛋清, 加水 20 m1,調(diào)勻至生泡沫,倒入糖化液中,攪拌煮沸,再過濾 )。(4) 用波美比重計檢測糖化液中糖濃度,將濾液用水稀釋到10-15 波林,調(diào) pH至 6 4。如當(dāng)?shù)赜衅【茝S,可用未經(jīng)發(fā)酵,未加酒花的新鮮麥芽汁,加水稀釋到 10-15 波林后使用。(5) 如配固體麥芽汁培養(yǎng)基時,加入 2瓊脂,加熱融化,補(bǔ)充失水。(6)

4、分裝、加塞、包扎。(7) 高壓蒸汽滅菌 100 Pa 滅菌 20 min。(二) 馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的配制 1、培養(yǎng)基成分馬鈴薯20g葡萄糖2 g瓊脂-2g水100ml自然 pH2配制方法(1) 配制 20馬鈴薯浸汁 取去皮馬鈴薯 200g,切成小塊, 加水 1000m1。80 浸泡 lh,用紗布過濾,然后補(bǔ)足失水至所需體積。 100 Pa滅菌 20 min。即成 20馬 鈴薯浸汁,貯存?zhèn)溆谩?2) 配制時,按每 100 m1馬鈴薯浸汁加入 2g 葡萄糖,加熱煮沸后加入 2g 瓊脂, 繼續(xù)加熱融化并補(bǔ)足失水。(3) 分裝、加塞、包扎。(4) 高壓蒸汽滅菌 100 Pa 滅菌 20 min。(三

5、) 豆芽汁葡萄糟培養(yǎng)基的配制1培養(yǎng)基成分黃豆芽10g葡萄糖5g瓊脂-2g水100ml自然 pH2配制方法(1) 稱新鮮黃豆芽 10g,置于燒杯中,再加入 100 m1水,小火煮沸 30 min,用 紗布過濾,補(bǔ)足失水,即制成 10豆芽汁。(2) 配制時,按每 100 m1 10豆芽汁加入 5g 葡萄糖,煮沸后加入 2 g瓊脂,繼 續(xù)加熱融化,補(bǔ)足失水。(3) 分裝、加塞、包扎。(4) 高壓蒸汽滅菌 100 Pa 滅菌 20 min。(四) 察氏(czapck)培養(yǎng)基的配制1培養(yǎng)基成分蔗糖 3g0.3gNaN03K2HP040.1gKCl0.05gMgSO47H2O0.05 gFeS040.001 g瓊脂-2g蒸餾水100ml自然 pH2配制方法(1)稱量及溶化 量取所需水量約 23 左右加入到燒杯中,分別稱取蔗糖、 NaNO3 、K2HP04 、KC、l MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每 100 ml 培養(yǎng)基加入 1ml 的 FeS04 溶液。( 2)定容 候藥品全部溶解后,將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。(

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