泉州醫(yī)高專免疫學(xué)檢驗習題集酶免疫技術(shù)

1、第9章酶免疫技術(shù)一、選擇題【A1型題】1. HRP的酶活性基團是A.糖蛋白B.亞鐵血紅素C.白蛋白D.球蛋白E.色氨酸2. 關(guān)于酶免疫技術(shù)的特點，正確的是A.酶標記物催化抗原反應(yīng)，使其結(jié)果放大，提高了檢測的靈敏度B.酶活性易受理化因素的影響，酶標記物穩(wěn)定性差C.選擇高質(zhì)量的標記用酶是建立酶免疫技術(shù)最重要的前提D.底物以酶催化后的成色，使酶標記免疫反應(yīng)結(jié)果得以放大E.酶免疫技術(shù)檢測方法較為繁瑣3. HRP的RZ值表示的是A.HRP在403nm與275nm的OD值之比B.HRP在420nm與275nm的OD值之比C.HRP在403nm與300nm的OD值之比D.HRP在275nm與403nm的OD

2、值之比E.HRP在290nm與275nm的OD值之比4. 目前ELISA中應(yīng)用最廣泛的底物是A.OPDB.ABTSC.TMBD.5-ASAE.p-NPP5. EMIT主要用于何種物質(zhì)的測定A.大分子抗原B.小分子抗原或半抗原C.多克隆抗體D.單克隆抗體E.補體6. ELISA雙抗體夾心法是A.酶標記特異性抗體用于抗原的檢測B.屬于競爭結(jié)合測定C.先將待測抗原包被于固相載體上D.標記一種抗體可檢測多種抗原E.能用于半抗原物質(zhì)的測定7 捕獲法主要用于何種物質(zhì)的測定A.IgGB.IgAC.IgMD.IgDE.IgE8. 下例何種方法用一種標記物可檢測多種被測物A.ELISA雙抗體夾心法B.ELISA

3、競爭法C.放免疫法D.ELISA捕獲法E.ELISA間接法9. 用于標記的HRP，下面哪一項描述是正確的A.HRP是由具有酶活性的糖白主酶和無酶活性的亞鐵血紅素輔基構(gòu)成B.根據(jù)HRP的RZ值可判斷酶活性的高低C.HRP對酶催化反應(yīng)中的受氫體專一性要求不高D.酶變性后，其RZ值不變E.HRP的底物為對-硝基苯磷酸酯 10. ELISA中的雙位點一步法試驗時，造成抗原測定值低于實際含量或假陰性的常見原因是A.固相抗過多B.待測物過濃C.標記抗體過多D.反應(yīng)時間不夠E.洗滌不徹底11. 酶免疫技術(shù)是根據(jù)何種特性分為均相和異相兩類技術(shù)的A.抗原特性B.抗體特性C.抗原抗體反應(yīng)后是否需要分離結(jié)合和游離酶

4、標記物D.酶的穩(wěn)定性E.載體特性12. 關(guān)于均相酶免疫測定，以下哪一項是正確的A.多用于大分子物質(zhì)的測定B.酶標抗原和抗體在固相載體表面形成復(fù)合物，作用于底物顯色C.需要分離結(jié)合和游離酶標記物D.常利用酶標記抗原與抗體結(jié)合后的空間位阻降低酶活性E.酶標抗原與待測抗原競爭結(jié)合抗體，故最終酶活力的大小與標本中抗原量呈負相關(guān)13. 關(guān)于ELISA競爭法，下列敘述正確的是A.用于檢測抗原B.被測物與酶標記物的免疫活性各不相同C.被測物多則標記物被結(jié)合的機會少D.待測管的顏色比對照管的淺則表示被測物量少E.結(jié)合于固相的酶標記抗原量與被測抗原量成正比14. 堿性磷酸酶AP常用的底物A.OPDB.TMBC.

5、p-NPPD.ABTSE.5-ASA15. 下述哪一種ELISA最常用于抗原的測定A.雙抗體夾心法ELISAB.間接法ELISA C.競爭法ELISAD.捕獲法ELISA E.補體結(jié)合法16. ELISA間接法是用于A.酶標記抗原用于檢測抗體B.酶標記抗抗體用于檢測抗體C.酶標記抗抗體用于檢測抗原D.酶標記抗體用于檢測抗原E.酶標記抗原用于檢測抗原17. HRP催化的反應(yīng)式為DH2+H2O2D+2H2O，何者習慣上被稱為底物A.DH2B.H2O2C.DD.H2OE.酸性磷酸酶18. TMB經(jīng)HRP作用后，加入硫酸終止反應(yīng)后變?yōu)锳.綠色B.紅色C.橙黃色D.黃色E.藍色19. 酶免疫分析技術(shù)中常

6、用于標記的酶有 EA.辣根過氧化物酶和過氧化氫酶B.堿性磷酸酶和辣根過氧化物酶C.半乳糖苷酶D.過氧化氫酶E. B和C20. 以下哪些方法屬于均相酶免疫技術(shù)A.捕獲夾心法B.酶放大免疫測定技術(shù)C.ELISA夾心法D.斑點-ELISAE.ELISA競爭法【A2型題】21. 下列哪項不符合ELISA中固相載體的要求A.結(jié)合抗體或抗原的容量大B.抗原或抗體與其結(jié)合后，應(yīng)保持免疫活性C.固相方法簡便易行，快速經(jīng)濟 D.對蛋白吸附能力E.抗原或抗體與其結(jié)合后失去免疫活性22. 下列關(guān)于雙抗體夾心法原理，不正確的是A.使用分別針對抗原不同決定簇的兩種單克隆抗體作為酶標記物B.一種單克隆抗體作為固相抗體，另

7、一種作為酶標抗體C.可使標本和酶標抗體同時加入成為一步法D.用于檢測二價或二價以的抗原E.采用高親合力的單克隆抗體可提高檢測的靈敏度和特異性23. 下面哪項不屬于HRP的底物A.OPDB.TMBC.4MUGD.ABTSE.5-ASA24. 不屬于ELISA試劑要求的是A.選擇酶制劑時，酶的RZ值比酶活力指標更重要B.選擇抗體要求具有高的比活性C.底物應(yīng)顏色變化明顯，反應(yīng)終止后顏色穩(wěn)定D.載體要示吸附性好，空白值低、透明度發(fā)E.抗原要求純度高，抗原性完整25. 下面哪項不屬于ELISA標記酶必須具備的特異性A.有可與抗原、抗體結(jié)合的基團B.標記抗原后，酶活性保持穩(wěn)定C.當酶標記原與抗體結(jié)合后，酶

8、活性可出現(xiàn)激活或抑制D.酶催化底物反應(yīng)一生成的信號易于測定、重復(fù)性好E.標記抗原后，不影響抗原的免疫活性【B1型題】（26-27題共用備選答案）A.HRPB.APC.半乳糖苷酶D.過氧化氫酶E.酸性磷酸酶26. 從植物辣中提取的是27. 大腸肝菌或小牛腸粘膜提取的是（28-30題共用備選答案）A.間接法B.雙抗體夾心法測抗原C.競爭法測抗體D.捕獲法E.競爭法測抗原28. 以下示意圖是哪一種ELISA檢測模式29. 以下示意圖是哪一種ELISA檢測模式30. 以下示意圖是哪一種ELISA檢測模式二、 名詞解釋 1.ELISA2.封閉（blocking）3.異相酶免疫測定（heterogenou

9、s enzyme immunosassay,異相EIA）4.包被（coating）5.均相酶免疫測定（homogenous enzyme immunosassay）三、 簡答題1.試以ELISA為例，簡述建立酶免疫實驗方法的主要研究內(nèi)容。2.簡述酶免疫技術(shù)的分類。3.簡述雙抗體夾心法的原理。4.簡述ELISA的基本原理、方法類型及應(yīng)用。5.簡述均相酶免疫測定的原理。參考答案一、選擇題1.B 2.D 3.A 4.C 5.B 6.A 7.C 8.E 9.D 10.B11.C 12.D 13C 14.C 15.A 16.B 17.B 18.D 19.E 20.B 21.E 22.A 23.C 24.

10、A 25.C 26.A 27.B 28.A 29.B 30.C二、名詞解釋1.ELISA：全稱為酶聯(lián)免疫吸附試驗，它是將抗原或抗體包被在固相載體表面，然后加入待測抗體或抗原和酶標抗原或抗體，反應(yīng)后用洗滌的方法使結(jié)合在固相上的抗原抗體復(fù)合物與未結(jié)合的物質(zhì)分離，最后加入底物，根據(jù)酶對底物催化的顯色反應(yīng)程度而對標本中的抗原或抗體進行定性或定量的分析方法。2.封閉：是指在抗原或抗體包被ELISA板后，用1%5%牛血清蛋白或5%20%小牛血清再包被一次，以消除固相載體表面未吸附的位點，以防止非特異性吸咐。3.異相EIA：是指在酶免疫測定中，抗原抗體反應(yīng)中，需分離游離的和與抗原（或抗體）結(jié)合形成復(fù)合物的酶

11、標記物，然后對經(jīng)酶催的底物顯色程度進行測定，再推算出樣品中待測抗體（或抗體）的含量的方法。又可分為液相和固相酶免疫測定兩種類型4.包被：是指將抗原或抗體結(jié)合在固相載體上的過程。5.均相酶免疫測定：均相法是利用酶標記物與相應(yīng)的抗原或抗體結(jié)合后，標記酶的活性會發(fā)生改變的原理，可以在不將結(jié)合和游離酶標記物分離的情況下，通過測定標記酶的活性的改變，而確定抗原或抗體的含量。主要用于小分子激素和半抗原（如藥物）的測定。三、 簡答題1. 試以ELISA為例，簡述建立酶免疫實驗方法的主要研究內(nèi)容。答：ELISA是固相酶免疫的代表，此實驗涉及以下幾個方面的問題：酶標記物是酶免疫技術(shù)的核心組成部分，因此用于制備酶

12、標記物的抗原要求純度高，抗原性完整；抗體則不僅需要特異性好、效價高、親合力強以及比活性較高，而且還需要能批量生產(chǎn)和易于分離純化。標記的酶要求活性高，穩(wěn)定，標記后不影響抗原抗體的活性，作用專一性強，無害、價廉等優(yōu)點。選用好的交聯(lián)劑和交聯(lián)方法制備出高質(zhì)量的酶標記物。選用合適的酶作用底物。篩選有效的分離結(jié)合與游離酶標記物的方法。優(yōu)化實驗步驟。2. 簡述酶免疫技術(shù)的分類。答：酶免疫技術(shù)按實際用途，分為酶免疫組化和酶免疫測定兩大類。酶免疫測定根據(jù)抗原抗體反應(yīng)后是否需將結(jié)合和游離的酶標記物分離，分為均相酶免疫測定和異相酶免疫測定，異相酶免疫測定又可分為固相酶免疫測定和液相酶免疫測定。3. 簡述雙抗體夾心法

13、的原理。答：其基本工作原理是利用連接于固相載體上的抗體和酶標抗體可分別與待檢標本中被測抗原上兩個不同的抗原決定簇結(jié)合，形成固相抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物。由于反應(yīng)系統(tǒng)中固相抗體和酶標抗體的量相對于待檢抗原是過量的。因此復(fù)合物的形成量與待檢抗原的含量成正比。測定復(fù)合物中酶作用于加入底物后生成的有色物質(zhì)量，即可確定待檢抗原含量。4. 簡述ELISA的基本原理、方法類型及應(yīng)用。答：基本原理是抗原或抗體預(yù)先結(jié)合到某種固相載體表面；測定時，將待測樣品（含待測抗體或抗原）和酶標抗原或抗體按一定程序與結(jié)合在固相載體上的抗原或抗體反應(yīng)形成抗原或抗體復(fù)合物；反應(yīng)終止時，固相載體上酶標抗原或抗體被結(jié)合量（免疫復(fù)合物）與待測標本中待檢抗體或抗原的量成一定比例；經(jīng)洗滌去除反應(yīng)液中其他物質(zhì)，加入底物進行顯色，最后通過定性或定量分析有色產(chǎn)物量即可確定樣品中待測物質(zhì)含量。方法類型及應(yīng)用：雙抗體夾心法：用于檢測抗原，適用于檢測兩個或兩個以