UV-2600型紫外分光光度計(jì)操作指導(dǎo)書(shū)

1、UV-2600型紫外分光光度計(jì)操作指導(dǎo)書(shū)1概況1.1儀器概況：UV-2600型紫外分光光度計(jì)是由日本島津（Shimadzu）生產(chǎn)制造，與功能強(qiáng)大的操作軟件UVProbe結(jié)合，操作簡(jiǎn)單方便，且符合SH/T0181方法的測(cè)量精度要求。1.2主要技術(shù)參數(shù)波長(zhǎng)范圍185nm900nm（使用積分球附件ISR- 2600Plus時(shí)220nm1400nm）分辨率0.1nm波長(zhǎng)準(zhǔn)確性±0.3nm譜帶范圍0.1、0.2、0.5、1、2、5nm測(cè)光方式雙光束方式雜散光0.005%以下檢測(cè)器光電倍增管R-928測(cè)光范圍-55Abs比色池1cm光源50W鹵素?zé)?、氘燈單色器切尼?特納單色器主電壓AC100V

2、240V主頻率50/60Hz1.3使用條件操作溫度：1535操作濕度：30%805%2儀器結(jié)構(gòu)儀器由UV-2600型紫外分光光度計(jì)和計(jì)算機(jī)組成。3操作步驟 3.1 開(kāi)機(jī)在使用前先確認(rèn)儀器和計(jì)算機(jī)的工作電源，檢查儀器樣品室應(yīng)無(wú)遮擋光路的物品。確認(rèn)后先開(kāi)啟計(jì)算機(jī)，然后開(kāi)啟儀器電源。待分光光度計(jì)外側(cè)的指示燈顯示綠色時(shí)，啟動(dòng)電腦桌面上的UVPROBE程序。首先從下拉式菜單的儀器項(xiàng)上追加需要的儀器，操作完畢如下圖所示，然后點(diǎn)擊上圖的連接鍵，這樣儀器與計(jì)算機(jī)連接（當(dāng)然，中間的通訊電纜的連接、通訊口的指定等都是必須的，此處不再贅述）并開(kāi)始下示的初始化面。初始化大約需要5分鐘左右，進(jìn)行一系列的檢查和初置，如一

3、切順利通過(guò)就可以開(kāi)始測(cè)定。3.2 測(cè)定首先選擇測(cè)定的方式，在主菜單上能發(fā)現(xiàn)右圖所示的各鍵，自左至右分別為：報(bào)告生成器：用于制作各種格式的報(bào)告。動(dòng)力學(xué)測(cè)定方式：一般測(cè)定吸收值隨時(shí)間的變化，通常用于酶反應(yīng)隨時(shí)間的變化。光度測(cè)定（定量）方式：可進(jìn)行多波長(zhǎng)、單波長(zhǎng)、峰高或峰面積定量。校準(zhǔn)曲線可使用多點(diǎn)、單點(diǎn)、K因子等方法。由于具有自定義方程的功能，DNA/蛋白質(zhì)測(cè)定等以前需要特殊選購(gòu)的軟件才能進(jìn)行的工作，使用UVPROBE可自編程序進(jìn)行測(cè)定。光譜測(cè)定方式：可進(jìn)行紫外可見(jiàn)區(qū)的光譜測(cè)定。3.3光譜測(cè)定方式3.3.1參數(shù)的設(shè)定點(diǎn)擊菜單欄上的鍵，即可出現(xiàn)如下圖所示的選擇測(cè)定條件的畫(huà)面：在此對(duì)話(huà)框中可選擇波長(zhǎng)測(cè)

4、定的范圍、掃描的速度、采樣間隔等條件。點(diǎn)擊圖中試樣準(zhǔn)備標(biāo)簽，可輸入重量、體積、稀釋因子、光程長(zhǎng)等信息。點(diǎn)擊圖中儀器參數(shù)標(biāo)簽，可選擇測(cè)定種類(lèi)（吸收值、透射率、能量、反射率）以及通帶（狹逢）等條件。數(shù)據(jù)處理面板方法面板圖象面板點(diǎn)擊主菜單上的鍵，可分別開(kāi)關(guān)圖象面板（圖中的左鍵）、數(shù)據(jù)處理面板（中）以及方法面板（右鍵）。 3.3.2 光譜測(cè)定首先點(diǎn)擊上圖的進(jìn)行基線校正，然后點(diǎn)擊波長(zhǎng)設(shè)置到500nm，再點(diǎn)擊自動(dòng)調(diào)零。為何要如此做？原因非常簡(jiǎn)單，由于一般的分光光度計(jì)的能量在500nm左右最強(qiáng)，在此自動(dòng)調(diào)零可得到最正確的基線。通常上述操作在開(kāi)機(jī)后進(jìn)行一次就足夠了。此后，設(shè)置樣品點(diǎn)擊鍵即可開(kāi)始測(cè)定。3.4 光

5、度測(cè)定方式3.4.1 參數(shù)的設(shè)定點(diǎn)擊菜單欄中的鍵，出現(xiàn)下圖：測(cè)定的方式選擇測(cè)定波長(zhǎng)的列名選擇和登錄波長(zhǎng)登錄后的波長(zhǎng)顯示區(qū)此處顯示的波長(zhǎng)類(lèi)型是“點(diǎn)”表示測(cè)定高度，如果選擇的是范圍，則需輸入起始和結(jié)束波長(zhǎng)，并可選擇最大、最小、峰、谷或面積等作為定量的依據(jù)。無(wú)論如何選擇，波長(zhǎng)都是必須的，并要加入以后才有效。在某單欄上有右列各鍵，點(diǎn)擊以后分別出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)表（最左）、樣品表（左2）、工作曲線圖（右2）和樣品圖（最右）。工作曲線標(biāo)準(zhǔn)表樣品圖樣品表3.4.2 定量測(cè)定首先如前所述，選擇了點(diǎn)及波長(zhǎng)，然后在方法中選擇校準(zhǔn)，在此決定用工作曲線法定量，并選擇多點(diǎn)、單點(diǎn)或K因子法等。進(jìn)行定量測(cè)定也需要基線校正和自動(dòng)調(diào)零，

6、方法如前面所述。此后，樣品室內(nèi)逐個(gè)放入標(biāo)準(zhǔn)，點(diǎn)擊上圖下方的讀數(shù)鍵即可。注意，無(wú)論是測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)或未知樣品，必須輸入名稱(chēng)才有效。標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定完畢，工作曲線自動(dòng)顯示。接下去就可測(cè)定未知樣品的濃度了。有時(shí)不測(cè)定濃度，只測(cè)定某些波長(zhǎng)的讀數(shù)，則在校準(zhǔn)方法中選擇“原始數(shù)據(jù)”，在登錄時(shí)選擇若干需要的波長(zhǎng)，即可測(cè)定各波長(zhǎng)的讀數(shù)。使用SH/T0181方法標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行光譜測(cè)定時(shí)，點(diǎn)擊設(shè)置波長(zhǎng)到287.5nm，再放入兩只均裝有光譜純異辛烷的比色皿，點(diǎn)擊自動(dòng)調(diào)零，最后，將外面一只比色皿中裝入需要測(cè)定的樣品，點(diǎn)擊鍵讀數(shù)，即可測(cè)得在該波長(zhǎng)處的樣品的吸光度值。在工作曲線圖象上點(diǎn)擊鼠標(biāo)右鍵，選擇屬性，可從該圖象上得到許多有用的信息，見(jiàn)下

7、圖：只需在這些顯示的項(xiàng)目中做標(biāo)記，相應(yīng)的信息即出現(xiàn)在工作曲線圖象的左下方。見(jiàn)下圖的劃圈部分：所謂K因子法實(shí)際上可稱(chēng)為已知工作曲線法（而且不局限于直線），即工作曲線回歸方程的系數(shù)和次數(shù)已知，故而只要輸入這些系數(shù)以及工作曲線的次數(shù)。這一方法對(duì)工作曲線較為穩(wěn)定的日常分析非常有效。設(shè)置方法見(jiàn)下圖：3.5 動(dòng)力學(xué)分析在菜單欄中點(diǎn)擊方法鍵，得到如下圖象：此處的計(jì)時(shí)方式選擇的是“自動(dòng)”，時(shí)間總量中需手動(dòng)設(shè)置測(cè)定的時(shí)間。由于是自動(dòng)計(jì)時(shí)方式，所以采樣步長(zhǎng)（圖中為時(shí)間周期）和讀數(shù)次數(shù)將根據(jù)時(shí)間總量自動(dòng)設(shè)置。此外可設(shè)置波長(zhǎng)以及活度計(jì)算的開(kāi)始和結(jié)束時(shí)間。設(shè)置大短的活度范圍會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤信息。相反，如果計(jì)時(shí)方式選擇的是手動(dòng)

8、的話(huà)，則可輸入時(shí)間周期和讀取次數(shù)，而時(shí)間總量（測(cè)定時(shí)間）會(huì)根據(jù)輸入的時(shí)間周期和讀取次數(shù)自動(dòng)計(jì)算得到。活度范圍用于酶反應(yīng)隨時(shí)間的變化，如果單純進(jìn)行時(shí)間掃描的話(huà)，則可不考慮活度范圍。測(cè)定的波長(zhǎng)欄內(nèi)可選擇單波長(zhǎng)或雙波長(zhǎng)（波長(zhǎng)l-波長(zhǎng)2或波長(zhǎng)l/波長(zhǎng)2）兩種方法。選擇后輸入相應(yīng)的波長(zhǎng)。主菜單中有如右各鍵，自主到右分別是時(shí)間掃描圖象、數(shù)據(jù)處理面板、測(cè)定參數(shù)面板和酶活度圖象。點(diǎn)擊各鍵屏幕出現(xiàn)相應(yīng)的板塊。下圖中表示已經(jīng)測(cè)定得到數(shù)據(jù)的顯示情況。4 定期維護(hù)檢查表檢查維護(hù)項(xiàng)目每天1年2年3年檢查樣品室檢查外觀確認(rèn)光源點(diǎn)燈時(shí)間更換W1（鹵素）燈更換D2（氘）燈性能確認(rèn)5 常見(jiàn)故障及排除5.1 初始化室的異常狀況（

9、以下編號(hào)見(jiàn)前文初始化窗口中內(nèi)容）編號(hào)檢查位置處理措施 關(guān)閉（OFF）本產(chǎn)品的電源開(kāi)關(guān)后再次打開(kāi)（ON），進(jìn)新儀器初始化。、樣品室池架上是否有遮擋光線的物品？暫時(shí)關(guān)閉（OFF）本產(chǎn)品的電源開(kāi)關(guān)。取出遮擋光線的物品后再次打開(kāi)（ON）電源。觀察光源室，W1是否漏光？如果沒(méi)有漏光將W1熄滅。暫時(shí)關(guān)閉（OFF）本產(chǎn)品的電源開(kāi)關(guān)后再次打開(kāi)（ON）。如果光源不亮，請(qǐng)更換W1燈。光源的使用時(shí)間是否超過(guò)使用壽命？在UVProbe軟件中單擊“儀器”菜單的“配置”，顯示“配置”窗口后單擊“點(diǎn)燈時(shí)間”選項(xiàng)卡。如果各光源燈的點(diǎn)燈時(shí)間超過(guò)“燈壽命”，請(qǐng)更換光源。、樣品室池架上是否有遮擋光線的物品？暫時(shí)關(guān)閉（OFF）本產(chǎn)品

10、電源開(kāi)關(guān)。取出遮擋光線的物品后再次打開(kāi)（ON）電源，對(duì)儀器進(jìn)行初始化。樣品室蓋是否敞開(kāi)？暫時(shí)關(guān)閉（OFF）本產(chǎn)品電源開(kāi)關(guān)。關(guān)閉樣品室蓋后再次打開(kāi)（ON）電源開(kāi)關(guān)，對(duì)儀器進(jìn)行初始化。光源的使用時(shí)間是否超過(guò)使用壽命？在UVProbe軟件中單擊“儀器”菜單的“配置”，顯示“配置”窗口后單擊“點(diǎn)燈時(shí)間”選項(xiàng)卡。如果各光源燈的點(diǎn)燈時(shí)間超過(guò)“燈壽命”，請(qǐng)更換光源。5.2 故障癥狀與處理方法故障（癥狀）主要原因處理方法打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)后不通電。AC電源線插頭是否插好？正確連接AC電源線插頭。AC電源線是否被壓，或電源線彎曲？如果AC電源線損壞，更換相同型號(hào)的電源線。供電電源是否符合儀器的電源規(guī)格？使用與儀器的電

11、源規(guī)格相符的電源。保險(xiǎn)絲是否燒斷？需要確認(rèn)和更好保險(xiǎn)絲時(shí)請(qǐng)與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。無(wú)法與UVProbe通訊。是否確保正確連接USB纜線？請(qǐng)確切鏈接到PC和儀器上。是否正確設(shè)置PC的COM端口？在PC顯示器右下方確認(rèn)本產(chǎn)品COM端口號(hào)后，電極UVProbe“儀器”菜單的“配置”，設(shè)置連接端口。是否正確安裝USB驅(qū)動(dòng)程序？按照UVProbe軟件的安裝窗口安裝USB驅(qū)動(dòng)程序。測(cè)光值異常。光源是否熄滅？在UVProbe軟件中單擊“儀器”菜單的“配置”，顯示“配置”窗口然后單擊“維護(hù)”選項(xiàng)卡?！肮庠礌顩r”的“W1”、“D2”復(fù)選框未被激活時(shí)，A處理：光源熄燈時(shí)，激活“W1”、“D2”的復(fù)選框。在UV

12、Probe中單擊“斷開(kāi)”，關(guān)閉（OFF）與UVProbe的通訊；關(guān)閉（OFF）儀器電源。稍后再打開(kāi)電源；單擊“連接”，進(jìn)行儀器初始化。如果光源燈未亮，顯示錯(cuò)誤時(shí)，再進(jìn)行“B處理”。光源燈點(diǎn)亮，隨后又熄滅時(shí)進(jìn)行“C處理”。B處理：光源未亮。請(qǐng)更換新燈。C處理：儀器檢出異常時(shí)強(qiáng)行將燈熄滅；檢測(cè)風(fēng)扇是否停止或基板上的溫度感應(yīng)器是否過(guò)熱；關(guān)閉電源開(kāi)關(guān)后與所在區(qū)域內(nèi)的島津分公司聯(lián)系。波長(zhǎng)等測(cè)定參數(shù)設(shè)置是否正確？請(qǐng)重新檢查輸入的參數(shù)。測(cè)光值異常。狹縫寬度是否合適？改變狹縫寬度，重新進(jìn)行測(cè)定。光源的使用時(shí)間收費(fèi)超過(guò)使用壽命？如果光源的使用時(shí)間超過(guò)使用壽命，請(qǐng)更換光源。測(cè)定的樣品是否正確？請(qǐng)檢查所取樣品是否正

13、確。使用的吸收池是否合適？請(qǐng)使用符合測(cè)定目的的吸收池。使用玻璃池時(shí)無(wú)法測(cè)定紫外區(qū)，請(qǐng)使用石英池。儀器附近是否使用手機(jī)？手機(jī)種類(lèi)的信號(hào)強(qiáng)度可能光度值有影響。樣品室安裝的特殊附件和連接器的連接是否正確？請(qǐng)檢查特殊附件是否正確安裝到樣品室，或連接器是否正確連接？在儀器前方是否聽(tīng)到發(fā)動(dòng)機(jī)的異常聲響？扇形發(fā)動(dòng)機(jī)可能運(yùn)行異常。請(qǐng)與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。異常警報(bào)發(fā)出蜂鳴聲，LED顯示紅色。排氣風(fēng)扇的排氣口是否堵塞？關(guān)閉電源開(kāi)關(guān)。檢查排氣風(fēng)扇出口處10cm以?xún)?nèi)是否存在阻礙物，如果有請(qǐng)清除。由于可能出現(xiàn)溫度異常，請(qǐng)稍后再重新打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)。如果仍未解決，請(qǐng)與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。排氣風(fēng)扇是否停止？確認(rèn)空氣從左后方的排氣口排出。如果風(fēng)扇停止運(yùn)行，關(guān)閉電源開(kāi)關(guān)后與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。光源是否熄滅？如果光源的使用時(shí)間超過(guò)使用壽命，請(qǐng)更換光源。兩側(cè)光源都未亮。排氣風(fēng)扇是否停止？確認(rèn)空氣從左后方的排氣口排出。如果風(fēng)扇停止運(yùn)行，關(guān)閉電源開(kāi)關(guān)后與所在區(qū)域的島津分公司聯(lián)系。UVProbe啟動(dòng)慢。儀器記錄文件的容量是否增加？由于加載存儲(chǔ)的儀器記錄需要時(shí)間，軟件的啟動(dòng)可能會(huì)變慢。按照以下順序?qū)x器記錄刪除