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1、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮的關(guān)系【實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康摹?.1.觀察坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位的基本波形觀察坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位的基本波形 ( ( 雙相或單相波雙相或單相波 ) )2.2.測(cè)定坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位的傳導(dǎo)速度測(cè)定坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位的傳導(dǎo)速度3.3.測(cè)定動(dòng)作電位的絕對(duì)不應(yīng)期測(cè)定動(dòng)作電位的絕對(duì)不應(yīng)期4.4.觀察坐骨神經(jīng)干腓腸肌標(biāo)本的電活動(dòng)與肌肉觀察坐骨神經(jīng)干腓腸肌標(biāo)本的電活動(dòng)與肌肉 收縮之間的關(guān)系收縮之間的關(guān)系 1. 1. 細(xì)胞的生物電可表現(xiàn)為細(xì)胞的生物電可表現(xiàn)為:靜息電位、動(dòng)作電位靜息電位、動(dòng)作電位 2. 2. 靜息電位靜息電位:安靜時(shí)存在于細(xì)胞膜內(nèi)外兩側(cè)的電位差安靜時(shí)存在于細(xì)胞膜內(nèi)外兩側(cè)的電位差 3
2、. 3. 動(dòng)作電位動(dòng)作電位:細(xì)胞受刺激時(shí),在靜息電位基礎(chǔ)上發(fā)生的細(xì)胞受刺激時(shí),在靜息電位基礎(chǔ)上發(fā)生的一次迅速、可逆的擴(kuò)步性電位變化一次迅速、可逆的擴(kuò)步性電位變化【實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理】 4. 4. 動(dòng)作電位的特點(diǎn):動(dòng)作電位的特點(diǎn): “全或無(wú)全或無(wú)”現(xiàn)象現(xiàn)象5. 5. 神經(jīng)纖維神經(jīng)纖維興奮后,興奮性的周期性變化:興奮后,興奮性的周期性變化: 絕對(duì)不應(yīng)期絕對(duì)不應(yīng)期:興奮性為零:興奮性為零 相對(duì)不應(yīng)期相對(duì)不應(yīng)期:興奮性正常:興奮性正常 超常期超常期:興奮性正常:興奮性正常 低常期低常期:興奮性正常:興奮性正常 【實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理】電刺激電刺激坐骨神經(jīng)坐骨神經(jīng)【實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理】產(chǎn)生興奮(產(chǎn)生興奮(動(dòng)作電
3、位動(dòng)作電位),興奮沿神經(jīng)傳導(dǎo),興奮沿神經(jīng)傳導(dǎo)神經(jīng)肌接頭興奮傳遞神經(jīng)肌接頭興奮傳遞接頭后膜產(chǎn)生接頭后膜產(chǎn)生終板電位終板電位,總和成,總和成動(dòng)作電位動(dòng)作電位肌肉興奮,產(chǎn)生肌肉興奮,產(chǎn)生收縮收縮蟾蜍蟾蜍【實(shí)驗(yàn)對(duì)象實(shí)驗(yàn)對(duì)象】 【實(shí)驗(yàn)器材和藥品實(shí)驗(yàn)器材和藥品】 BL-420E BL-420E 生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)兩棲類(lèi)手術(shù)器械兩棲類(lèi)手術(shù)器械神經(jīng)屏蔽盒神經(jīng)屏蔽盒張力換能器張力換能器記錄電極輸入線及刺激電極輸出線記錄電極輸入線及刺激電極輸出線任氏液任氏液, , 棉球棉球20%20%高滲甘油、高滲甘油、1%1%普魯卡因普魯卡因【實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)方法】 一、坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位觀察一、坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位觀
4、察分離的坐骨神經(jīng)干應(yīng)分離的坐骨神經(jīng)干應(yīng)盡可能長(zhǎng),剪去分支盡可能長(zhǎng),剪去分支, ,徹底去除表面的結(jié)締徹底去除表面的結(jié)締組織膜,避免傷及神組織膜,避免傷及神經(jīng)干,任氏液浸泡經(jīng)干,任氏液浸泡5 51010分鐘。分鐘。視頻視頻3-1 3-1 坐骨神經(jīng)干標(biāo)本制備坐骨神經(jīng)干標(biāo)本制備 注意注意: : 1. 1. 用棉球蘸任氏液擦拭電極。用棉球蘸任氏液擦拭電極。 2. 2. 神經(jīng)平搭在電極上神經(jīng)平搭在電極上, ,要有方向性要有方向性刺激刺激刺激刺激+ +刺激刺激- -C C1 1C C3 3C C2 2C C4 4 距離距離圖圖3-1 儀器連接示意圖儀器連接示意圖二、連接實(shí)驗(yàn)裝置二、連接實(shí)驗(yàn)裝置(見(jiàn)圖(見(jiàn)圖3
5、-13-1)單擊單擊實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 選擇選擇肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn)肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn) 神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo)神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo) 單擊單擊 “ “電刺激電刺激”項(xiàng)目中項(xiàng)目中強(qiáng)度強(qiáng)度1 1改為改為“0.050.05” “ “程控程控”項(xiàng)目中項(xiàng)目中程控刺激程控刺激選擇選擇“程控程控” 單擊單擊 觀察動(dòng)作電位曲線,找出坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的觀察動(dòng)作電位曲線,找出坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的閾刺閾刺激激和和最大刺激值最大刺激值1 1觀察坐骨神經(jīng)干雙相動(dòng)作電位波形觀察坐骨神經(jīng)干雙相動(dòng)作電位波形 三、實(shí)驗(yàn)觀察三、實(shí)驗(yàn)觀察 單擊單擊“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目” 選擇選擇“肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn)肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn)” 神經(jīng)干興奮傳導(dǎo)速度測(cè)定神經(jīng)干興奮傳導(dǎo)速度測(cè)定 對(duì)話
6、框?qū)υ捒?輸入輸入C1C1與與C3C3間的距離間的距離 單擊單擊確定確定 點(diǎn)擊點(diǎn)擊 ( (專(zhuān)用信息顯示區(qū)專(zhuān)用信息顯示區(qū)) ) 自動(dòng)得出傳導(dǎo)速度自動(dòng)得出傳導(dǎo)速度2. 2. 測(cè)定神經(jīng)干興奮的傳導(dǎo)速度測(cè)定神經(jīng)干興奮的傳導(dǎo)速度 單擊單擊實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 選擇選擇肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn)肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn) 神經(jīng)干興奮不應(yīng)期測(cè)定神經(jīng)干興奮不應(yīng)期測(cè)定 對(duì)話框?qū)υ捒?點(diǎn)擊點(diǎn)擊程控程控觀察隨著兩次刺激間隔時(shí)間的逐漸縮短,動(dòng)作電位觀察隨著兩次刺激間隔時(shí)間的逐漸縮短,動(dòng)作電位2 2的幅度變的幅度變化情況,直至消失為止,此時(shí)的刺激間隔化情況,直至消失為止,此時(shí)的刺激間隔( (波形顯示窗口下方波形顯示窗口下方顯示顯示) ),即為絕對(duì)不應(yīng)
7、期的時(shí)程。,即為絕對(duì)不應(yīng)期的時(shí)程。3. 3. 測(cè)定絕對(duì)不應(yīng)期測(cè)定絕對(duì)不應(yīng)期圖圖3-2 3-2 坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位絕對(duì)不應(yīng)期的測(cè)定坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位絕對(duì)不應(yīng)期的測(cè)定 4. 4. 觀察單相動(dòng)作電位觀察單相動(dòng)作電位 用鑷子將二個(gè)記錄電極之間用鑷子將二個(gè)記錄電極之間( (C1C1和和C2C2) )的神經(jīng)的神經(jīng)夾傷,觀察單相動(dòng)作電位。夾傷,觀察單相動(dòng)作電位。 如果兩個(gè)電極之間的神經(jīng)組織有損傷,興奮如果兩個(gè)電極之間的神經(jīng)組織有損傷,興奮波只能通過(guò)第一個(gè)引導(dǎo)電極,不能傳導(dǎo)至第波只能通過(guò)第一個(gè)引導(dǎo)電極,不能傳導(dǎo)至第二個(gè)引導(dǎo)電極,則只能記錄到一個(gè)方向的電二個(gè)引導(dǎo)電極,則只能記錄到一個(gè)方向的電位偏轉(zhuǎn)波,稱(chēng)為單相動(dòng)
8、作電位。位偏轉(zhuǎn)波,稱(chēng)為單相動(dòng)作電位。1 1、神經(jīng)干分離盡可能、神經(jīng)干分離盡可能長(zhǎng)長(zhǎng)一些,分離過(guò)程中勿損傷一些,分離過(guò)程中勿損傷 神經(jīng);神經(jīng);2 2、神經(jīng)干的兩端不要碰在屏蔽盒上,也不要把神、神經(jīng)干的兩端不要碰在屏蔽盒上,也不要把神 經(jīng)兩端折疊在電極上,以免影響動(dòng)作電位的大經(jīng)兩端折疊在電極上,以免影響動(dòng)作電位的大 小和波形;小和波形;3 3、刺激強(qiáng)度在開(kāi)始是不要過(guò)強(qiáng),先由弱強(qiáng)度開(kāi)、刺激強(qiáng)度在開(kāi)始是不要過(guò)強(qiáng),先由弱強(qiáng)度開(kāi) 始,逐漸至適宜強(qiáng)度,以免過(guò)強(qiáng)刺激損傷神經(jīng)始,逐漸至適宜強(qiáng)度,以免過(guò)強(qiáng)刺激損傷神經(jīng) 標(biāo)本。標(biāo)本?!咀⒁馐马?xiàng)注意事項(xiàng)】 【實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果】1. 1. 報(bào)告坐骨神經(jīng)干雙相動(dòng)作電位波形
9、報(bào)告坐骨神經(jīng)干雙相動(dòng)作電位波形圖,測(cè)出圖,測(cè)出閾刺激閾刺激和和最大刺激最大刺激。2. 2. 報(bào)告坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的神經(jīng)興奮的報(bào)告坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的神經(jīng)興奮的傳導(dǎo)速度傳導(dǎo)速度和和不應(yīng)期不應(yīng)期。【實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)方法】 二、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮的關(guān)系二、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮的關(guān)系 (制備(制備2 2個(gè)坐骨神經(jīng)干腓腸肌標(biāo)本)個(gè)坐骨神經(jīng)干腓腸肌標(biāo)本)分離的坐骨神經(jīng)干應(yīng)分離的坐骨神經(jīng)干應(yīng)盡可能長(zhǎng),避免傷及盡可能長(zhǎng),避免傷及神經(jīng)干;要保留一段神經(jīng)干;要保留一段股骨;任氏液浸泡股骨;任氏液浸泡5 51010分鐘。分鐘。視頻視頻3-2 3-2 坐骨神經(jīng)干坐骨神經(jīng)干- -腓腸肌標(biāo)本制備腓腸肌標(biāo)本制備標(biāo)本與儀器的連接
10、標(biāo)本與儀器的連接張力換能器神經(jīng)屏蔽盒刺激電極記錄電極連接絲線坐骨神經(jīng)干腓腸肌標(biāo)本與儀器的連接標(biāo)本與儀器的連接腓腸肌腓腸肌坐骨神經(jīng)干坐骨神經(jīng)干刺激電極刺激電極連線連接連線連接換能器換能器單擊單擊實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 選擇選擇肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn)肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn) “ “肌肉興奮收縮時(shí)相關(guān)系肌肉興奮收縮時(shí)相關(guān)系” 點(diǎn)擊點(diǎn)擊“刺激觸發(fā)方式刺激觸發(fā)方式” (調(diào)整刺激參數(shù)調(diào)整刺激參數(shù)),然后點(diǎn)擊),然后點(diǎn)擊 觀察單刺激(閾上刺激)坐骨神經(jīng)后,有無(wú)神經(jīng)動(dòng)觀察單刺激(閾上刺激)坐骨神經(jīng)后,有無(wú)神經(jīng)動(dòng)作電位和肌肉收縮出現(xiàn);二者之間的先后時(shí)間關(guān)系作電位和肌肉收縮出現(xiàn);二者之間的先后時(shí)間關(guān)系5 5、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系、神經(jīng)
11、興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系觀察項(xiàng)目(觀察項(xiàng)目(1 1):):參數(shù)設(shè)置參數(shù)設(shè)置5 5、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系通道通道1 1(動(dòng)作電位):(動(dòng)作電位):GG500500; T T0.01s0.01s;F F10kHz10kHz 掃描速度:掃描速度:5ms/div 5ms/div 通道通道2 2(肌張力):(肌張力):G G2020;T TDCDC;F F30Hz30Hz; 掃描速度掃描速度 5ms/div(5ms/div(與通道與通道1 1保持一致保持一致) )5 5、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系單擊單擊實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 選擇選擇肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn)肌
12、肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn) “ “肌肉興奮收縮時(shí)相關(guān)系肌肉興奮收縮時(shí)相關(guān)系” 點(diǎn)擊點(diǎn)擊“刺激觸發(fā)方式刺激觸發(fā)方式” 點(diǎn)擊點(diǎn)擊 用蘸有用蘸有1%1%普魯卡因普魯卡因的小棉球包裹在的小棉球包裹在刺激電極與記錄電極刺激電極與記錄電極之間的神經(jīng)干之間的神經(jīng)干上,調(diào)節(jié)刺激強(qiáng)度使所致動(dòng)作電位幅度最大,上,調(diào)節(jié)刺激強(qiáng)度使所致動(dòng)作電位幅度最大,每每5 5分鐘用上述強(qiáng)度刺激神經(jīng)一次,觀察神經(jīng)動(dòng)作電位和分鐘用上述強(qiáng)度刺激神經(jīng)一次,觀察神經(jīng)動(dòng)作電位和肌肉收縮曲線的變化,直至反應(yīng)消失肌肉收縮曲線的變化,直至反應(yīng)消失觀察項(xiàng)目(觀察項(xiàng)目(2 2):):5 5、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系單擊單擊實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
13、 選擇選擇肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn)肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn) “ “肌肉興奮收縮時(shí)相關(guān)系肌肉興奮收縮時(shí)相關(guān)系” 點(diǎn)擊點(diǎn)擊“刺激觸發(fā)方式刺激觸發(fā)方式” 調(diào)整調(diào)整刺激參數(shù)刺激參數(shù)后,點(diǎn)擊后,點(diǎn)擊 另取一坐骨神經(jīng)干另取一坐骨神經(jīng)干- -腓腸肌標(biāo)本,將標(biāo)本重新固定于肌槽腓腸肌標(biāo)本,將標(biāo)本重新固定于肌槽內(nèi),重復(fù)實(shí)驗(yàn)觀察(內(nèi),重復(fù)實(shí)驗(yàn)觀察(1 1)步驟)步驟參數(shù)設(shè)置參數(shù)設(shè)置5 5、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系通道通道1 1(動(dòng)作電位)(動(dòng)作電位):G:G500;500; T T0.01s; F0.01s; F10kHz/3.3k10kHz/3.3k 掃描速度:掃描速度:5ms/div-20ms/div5m
14、s/div-20ms/div;通道通道2 2(肌張力):(肌張力):G G2020;T TDCDC;F F30kHz30kHz; 掃描速度掃描速度 5ms/div(5ms/div(與通道與通道1 1保持一致保持一致) )5 5、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系單擊單擊實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 選擇選擇肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn)肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn) “ “肌肉興奮收縮時(shí)相關(guān)系肌肉興奮收縮時(shí)相關(guān)系” 點(diǎn)擊點(diǎn)擊“刺激觸發(fā)方式刺激觸發(fā)方式” 調(diào)整調(diào)整刺激參數(shù)刺激參數(shù)后,點(diǎn)擊后,點(diǎn)擊 取另一個(gè)標(biāo)本,將取另一個(gè)標(biāo)本,將腓腸肌浸泡腓腸肌浸泡在高滲甘油任氏液中在高滲甘油任氏液中10-10-20min 20min ,(
15、浸泡期間,可間歇用(浸泡期間,可間歇用鋅銅弓刺激神經(jīng)鋅銅弓刺激神經(jīng),若肌,若肌肉無(wú)反應(yīng))將標(biāo)本固定于裝置中,重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)觀察(肉無(wú)反應(yīng))將標(biāo)本固定于裝置中,重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)觀察(1 1)步驟。觀察神經(jīng)動(dòng)作電位和肌肉收縮曲線的變化。步驟。觀察神經(jīng)動(dòng)作電位和肌肉收縮曲線的變化。觀察項(xiàng)目(觀察項(xiàng)目(3 3):):1 1、分離神經(jīng)干分離盡可能長(zhǎng)一些,分離過(guò)程中勿、分離神經(jīng)干分離盡可能長(zhǎng)一些,分離過(guò)程中勿 損傷神經(jīng);損傷神經(jīng);實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)經(jīng)常滴加任氏液,防止標(biāo)本干燥,失去興實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)經(jīng)常滴加任氏液,防止標(biāo)本干燥,失去興奮性;奮性;2 2、神經(jīng)干的兩端不要碰在屏蔽盒上,也不要把神經(jīng)兩端折疊、神經(jīng)干的兩端不要
16、碰在屏蔽盒上,也不要把神經(jīng)兩端折疊在電極上,以免影響動(dòng)作電位的大小和波形;在電極上,以免影響動(dòng)作電位的大小和波形;3 3、用高滲甘油浸泡肌肉時(shí),勿將神經(jīng)浸入甘油中;、用高滲甘油浸泡肌肉時(shí),勿將神經(jīng)浸入甘油中;4 4、肌肉和神經(jīng)標(biāo)本連接于儀器時(shí),注意盡量不要觸摸牽拉損、肌肉和神經(jīng)標(biāo)本連接于儀器時(shí),注意盡量不要觸摸牽拉損傷標(biāo)本;傷標(biāo)本;5 5、每次刺激后必須讓肌肉有一定的休息時(shí)間(、每次刺激后必須讓肌肉有一定的休息時(shí)間(0.50.51min1min)。)。【注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)】 【實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果】1.1. 記錄神經(jīng)動(dòng)作電位與肌肉收縮的先后時(shí)間關(guān)系;記錄神經(jīng)動(dòng)作電位與肌肉收縮的先后時(shí)間關(guān)系;2.2.
17、 當(dāng)用普魯卡因阻斷神經(jīng)興奮傳導(dǎo)后,肌肉有無(wú)當(dāng)用普魯卡因阻斷神經(jīng)興奮傳導(dǎo)后,肌肉有無(wú)收縮;收縮;3.3. 用高滲甘油浸泡肌肉與神經(jīng)接頭處后,神經(jīng)興用高滲甘油浸泡肌肉與神經(jīng)接頭處后,神經(jīng)興奮和肌肉收縮關(guān)系如何奮和肌肉收縮關(guān)系如何【實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論】正常曲線正常曲線普魯卡因普魯卡因阻斷神經(jīng)阻斷神經(jīng)傳導(dǎo)傳導(dǎo)【實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論】正常曲線正常曲線浸泡高滲浸泡高滲甘油后甘油后【思考題思考題】 1 1、坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位為什么不是、坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位為什么不是“全或全或無(wú)無(wú)” ” ,而是在一定范圍內(nèi)隨刺激強(qiáng)度增加而增,而是在一定范圍內(nèi)隨刺激強(qiáng)度增加而增大?大?2 2、神經(jīng)肌接頭興奮傳遞的過(guò)程。、神經(jīng)肌接頭興奮傳遞的過(guò)程。3 3、骨骼肌興奮收縮耦聯(lián)的機(jī)制。、骨骼肌興奮收縮耦聯(lián)的機(jī)制。4 4、高滲甘油阻斷興奮收縮耦聯(lián)的機(jī)制、高滲甘油阻斷興奮收縮耦聯(lián)的機(jī)制【討論討論】 坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位為什么不是坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位為什么不是“全或無(wú)全或無(wú)”的,的,而是在一定范圍內(nèi)隨刺激強(qiáng)度增加而增大?而是在一定范圍內(nèi)隨刺激強(qiáng)度增加而增大? 單一細(xì)胞的動(dòng)作電位是單一細(xì)胞的動(dòng)作電位是“全或無(wú)全或無(wú)”的,而坐骨神經(jīng)干是的,而坐骨神
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