原料藥分析方法開發(fā)流程

1、原料藥分析方法開發(fā)流程分析方法在藥物的研發(fā)過程中起到的是 “燈塔 ”的作用，是原料藥 及制劑開發(fā)、 質量控制的標尺及眼睛， 因此分析方法在藥物開發(fā)過程 中起到了領航員的作用。 下面簡單的介紹一下原料藥分析方法的開發(fā) 流程。原料藥的分析方法開發(fā)一般分為兩大部分： 1、起始物料的分析方法 開發(fā)； 2、中間體及 API 的分析方法開發(fā)。按照正常的邏輯順序，應 該是起始物料的分析方法開發(fā)先行， 但是一般在實際操作過程中， 往 往是中間體及 API 的分析方法先行開發(fā)。 主要是因為， 在打通工藝路 線時期或者是文獻調研的階段， 主要是針對中間體及 API 的分析方法 的工作。 只有在工藝優(yōu)化的中期或者中

2、后期， 對起始物料廠家基本選 定時才會有針對性的啟動起始物料的分析方法開發(fā)工作。雖然如此， 考慮到邏輯順序，還是按照起始物料、中間體、 API 這樣的順序進行 逐一介紹。一、起始物料1、合成路線的獲取在啟動分析方法開發(fā)工作之前， 一定要獲得起始物料廠家提供的合成路線， 需要包括以 下幾點：起始物料、中間體、反應溶劑、后處理溶劑及關鍵催化劑等。如果廠家提供反應步 驟過長，一般選擇 3-5 步即可。2、雜質分析 結合起始物料廠家提供的工藝路線，對可能存在或者產生的各種雜質進行詳細的分析， 為分析方法開發(fā)的方向奠定一個基礎， 也好對所需要的儀器耗材有提前的準備。 一般涉及雜 質如下：雜質種類雜質主要

3、來源一般檢測手段一般所需耗材普通雜質起始物料、 中間體、副產物、HPLC普通 C18 柱、氨基 柱降解產物手性雜質含手性中心的化合物、 引入 手性的反應HPLC 、旋光儀手性柱GTI起始物料、 中間體、 副產物HPLC 、LC-MS 、 GC-MS普通 C18 柱、毛細 管柱重金屬催化劑原子吸收、 ICP-MS 、藥典通 用方法空心陰極燈、鉛標準溶液溶劑殘留反應溶劑、 后處理溶劑、 副 產物GC細管柱無機鹽縛酸劑、干燥劑、調節(jié) pH 的試劑比濁法、熾灼殘渣、比色法相應的分析溶劑3、分析方法的開發(fā)起始物料路線中所涉及的雜質種類，進行對應分析方法的開發(fā)。 以廠家 COA 及提供的分析方法為基礎，結

4、合自身工藝對起始物料質 量的要求，建立適合自己的起始物料內控方法。4、分析方法的驗證在 API 工藝進行逐級放大前， 取得起始物料供應商提供的不小于 3批的中試生產批量樣品，使用一批次進行分析方法驗證工作，其余 批次進行分析方法重現(xiàn)工作， 同時也是為了驗證廠家提供起始物料質 量的穩(wěn)定和可控。5、雜質限度制定的依據(jù)根據(jù)多批次起始物料的檢測結果， 以及 API 雜質限度的要求， 結 合工藝路線對雜質的清除能力， 制定起始物料中雜質的限度。 需重點 關注基因毒性雜質及毒性較大的試劑溶劑。物料名稱制定依據(jù)起始物料1、結合自身工藝対雜質的清除效率；2、結合自身工藝所涉及溶劑；3、相關起始物料所涉及 GT

5、I 及手性雜質的引入；中間體1、結合自身工藝対雜質的清除效率2、結合之后反應對水分及溶劑殘留的要求3、 GTI 及手性雜質的引入4、 API 中關鍵雜質的要求API1、結合反應體系中較大雜質和清除率較低的雜質情況2、結合指導原則要求3、結合所涉及溶劑及催化劑的情況、中間體中間體分為過程控制及質量控制， 過程控制主要監(jiān)控反應進行的 程度，質量控制是制定中間體的中控標準。1、過程控制方法1) 過程控制方法的開發(fā)根究反應液的具體情況以及涉及物料自身的性質， 中間體的過程 控制方法可以選擇 TLC 或者 HPLC 的手段進行控制。一般在反應過 程中主要關心的是原料的剩余及產物的生成情況， 所以確保在原

6、料及 產物峰周圍沒有干擾。 如果有需要特殊關注的雜質， 也需確保雜質的 分離度、峰純度等。2) 過程控制方法的驗證如果過程控制的方法只是定性的檢測， 在方法驗證時一般只需進 行：專屬性、檢測限、耐用性等方面的驗證工作。如果涉及定量檢測 的方法，則需要進行全面的分析方法驗證工作。2、質量控制方法1) 質量控制方法的開發(fā)對中間體的質量控制， 一方面根據(jù)工藝優(yōu)化的結果制定質量控制 的限度，另一方面需要根據(jù) API 質量的要求對中間體所涉及雜質的限 度進行定量的控制。當然， 質量控制方面不只是雜質限度的控制，如 果接下來的反應是無水反應， 上一步的中間體依然需要對水分的限度 進行嚴格的控制。中間體的制

7、備過程中， 也會涉及 GTI 、手性雜質及重金屬等雜質 的研究。一般情況，此類雜質最好放在中間體的質量標準中進行，如 果控制有難度或者在之后的反應過程中仍然會又引入及生成， 放在之 后的步驟控制或者 API 控制均可。2) 質量控制方法的驗證一般情況下， 中間體的質量控制均會涉及雜質的定量檢測， 因此 中間體質控方法的驗證均需要按照定量檢測的方法進行全面的分析 方法驗證工作。三、 API同起始物料分析方法開發(fā)基本一致， 在 API 分析方法的開發(fā)前期， 首先需要進行有關化合物或者相似化合物分析方法的調研工作， 其次 進行雜質的分析工作。 針對不同類型的雜質選擇有針對性的文獻報道 的方法為方法開

8、發(fā)的基礎， 結合工藝本身， 對分析方法進行逐步的優(yōu) 化。有關物質的制定， 可以根據(jù)靠近終反應步驟的雜質譜以及最后一 步反應的雜質體系進行制定。溶劑殘留的制定需要結合起始物料所涉及的溶劑， 如果有與起始 物料有差異的溶劑， 那么差異溶劑需要在起始物料中進行控制； 若能 包含起始物料所涉及溶劑， 可以將所用溶劑在終產品中進行控制， 起 始物料中只需進行干燥失重的檢測。 同時，還需要關注一些潛在的溶 劑，例如：反應中涉及苯的衍生物，也需要關注苯的殘留控制等。3、分析方法的開發(fā)根據(jù)不同的雜質種類， API 的分析方法涉及到普通雜質、手性雜 質、殘留溶劑、基因毒性雜質、重金屬等。普通雜質：一般采用 HP

9、LC 法，在進行分析方法開發(fā)之前， 首先 要進行充分的文獻調研工作，查詢各國藥典標準、文獻、專利中是否 收載了相同或同類化合物，以此為基礎進行分析方法的開發(fā)，結合 API 的理化性質以及對各步反應機理的分析， 進行分析方法的逐步優(yōu) 化。在分析方法優(yōu)化過程中， 應同時對 API 進行強制降解實驗， 評估 分析方法對潛在降解產物的分離能力。手性雜質：采用 HPLC法，選用手性色譜柱或手性流動相。 對有 多個手性中心的， 對映異構體需采用手性色譜進行分析， 非對映異構 體，一般可與普通雜質采用同一方法進行控制。殘留溶劑： 殘留溶劑采用 GC法，根據(jù)溶劑的種類，選擇不同極 性的色譜柱進行分離。 除要關注合成工藝中使用的溶劑外， 還需要關 注潛在的殘留溶劑，如使用了甲苯，需要對苯進行檢測與控制，使用 了甲基叔丁基醚， 需要關注叔丁醇的殘留， 酯鍵斷裂過程中產生的醇 類等?；蚨拘噪s質： 由于基因毒性雜質的限度較低， 對方法的靈敏度 要求較高，一般要用到 HPLC-MS 或 GC-MS，在分析方法開發(fā)中， 需重點關注檢測限是否能滿足質量控制的要求。重金屬： 對于一般的重金屬， 采用藥典通則的檢測方法即可，對 于 pd 等重金屬需要特殊研究。4、分析方