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1、一、操作規(guī)范1量程選擇為確保更好的準(zhǔn)確性和精度,建議移液量在吸頭的20(10)%-100%量程范圍內(nèi),建議適當(dāng)使用量程范圍如表1:表1移液槍建議有效使用范圍量程(.1L)啟效范圍(心100.5-10202201002010020050200100020010005000100050002吸頭安裝把白套筒頂端插入吸頭(無論是散裝吸頭還是盒裝吸頭都一樣)。輕輕用力下壓的同時把手中的移液槍按逆時針方向旋轉(zhuǎn)180度。切忌用力過猛,更不能用剁吸頭的方法來進行安裝,因為那樣做會對移液槍造成不必要的損傷。槍頭卡緊的標(biāo)志是略微超過O型環(huán),并可以看到連接部分形成清晰地密封圈。另外,吸取一定量的液體后垂直靜置移液
2、槍,如果沒有液體往下滴也表明槍頭密封良好。3容量設(shè)定正確的容量設(shè)定分為兩個步驟:是粗調(diào),即通過排放按鈕將容量值迅速調(diào)整至接近自己的預(yù)想值;二是細調(diào),當(dāng)容量值接近自己的預(yù)想值以后,應(yīng)將移液槍垂直放置在眼前,平視,慢慢將容量值調(diào)至自己的預(yù)想值,從而避免視覺誤差造成的影響。在容量設(shè)定時,從大值調(diào)整到小值時,剛好就行;但從小值調(diào)整到大值時,需要超過1/3圈后再返回,因為計數(shù)器里面有一定的空隙,需要彌補。4預(yù)洗槍頭從理論上講,安裝了新的吸頭或增大了容量值以后,應(yīng)該把需要轉(zhuǎn)移的液體吸取、排放2-3次,這樣做是為了讓吸頭內(nèi)壁形成一道同質(zhì)液膜,確保移液工作的精度和準(zhǔn)度,使整個移液過程具有極高的重現(xiàn)性。注意:對
3、常溫樣品,吸頭潤洗有助于提高準(zhǔn)確性,但對于高溫或低溫樣品,吸頭潤洗然而降低操作準(zhǔn)確性。5吸液與放液5.1 前進移液法用大拇指將按鈕按下至第一停點,吸頭浸入液體中(浸入傾斜度控制在20度之內(nèi),保持豎直為佳;浸入深度如表2),然后慢慢松開按鈕回原點,松開時一定要保持平穩(wěn),速度適中。過快的吸液速度容易導(dǎo)致跳液現(xiàn)象,造成樣品浸入套柄,帶來活塞和密封圈的損傷以及樣品的交叉污染。接著將按鈕按至第一停點排出液體,稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。將槍頭移出液體后在松開按鈕。表2吸頭浸入深度移液槍規(guī)格吸頭浸入深度2人和10人<1mm205和100pL2-3mm200人和1,0003-6mm5,
4、000人和10,000人6-10mm5.2 反向移液法此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘度液體,生物活性液體,易起泡液體或極微量的液體,其原理就是先吸入多于設(shè)置量程的液體,轉(zhuǎn)移液體的時候不用吹出殘余液體。具體操作如下:先按下按鈕至第二停點,慢慢松開按鈕至原點,接著將按鈕按至第一停點排出設(shè)置好量程的液體,繼續(xù)保持按住按鈕位于第一停點,取下有殘余液體的槍頭,棄之。為避免液體浸入槍體,不建議在滿量程情況下進行此項操作。6卸掉吸頭使用完畢的吸頭打掉或手動卸除。使用過的吸頭一定不能和未使用的新吸頭混放,以免導(dǎo)致交叉污染。5ml的吸頭須回收(電泳操作中吸取丙烯酰胺的吸頭直接棄置),1ml及以下規(guī)格的吸頭均為一次性使用。
5、5ml槍頭需經(jīng)超聲清洗,并用超純水潤洗干凈,自然晾干或在烘箱中以不高于35c的溫度烘干。洗凈干燥的槍頭立即裝入塑封袋中保存,避免在空氣中長期放置染灰。移液槍使用完畢后需將量程調(diào)至最大值,使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈簧,同時將移液槍垂直放置在移液槍架上,由于槍架位置有限,也可將帶指鉤的移液槍垂直掛在槍架附近的試劑架上。二、移液槍使用過程中的注意事項1)勿將移液槍浸入溶液中;2)轉(zhuǎn)移揮發(fā)性液體,如醋酸、鹽酸、乙醇、電泳染色液、脫色液等,請使用移液管;3)不可吸取溫度過高(70C)的液體,以免蒸汽浸入槍體腐蝕活塞;4)套有吸頭的移液槍,不論吸頭中是否有液體,請保持槍體垂直,請勿傾斜或平放甚至導(dǎo)致,謹(jǐn)防液體流入活塞室腐蝕移液槍活塞;5)移液槍操作時請保持姿勢正確,不要時刻緊握移液槍,使用帶指鉤的移液槍有助于緩解手部疲勞,有可能的
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