參照EP方案在不同檢測(cè)系統(tǒng)評(píng)價(jià)尿微量白蛋白試劑的分析性能(共6頁(yè))

1、PAGE PAGE 8參照(cnzho)EP方案在不同檢測(cè)(jin c)系統(tǒng)評(píng)價(jià)(pngji)尿微量白蛋白試劑的分析性能摘要：目的 通過(guò)不同檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定尿微量白蛋白的分析性能評(píng)價(jià)，以探討新成生物公司尿微量白蛋白測(cè)定試劑盒與英國(guó)朗道測(cè)定試劑盒在分析性能上的差異。方法 在同一臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀上，同時(shí)對(duì)兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)的正確度、精密度、最低檢測(cè)限、測(cè)定范圍、方法學(xué)比對(duì)共五項(xiàng)性能指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果 在正確度實(shí)驗(yàn)，新成和朗道試劑的相對(duì)偏差分別都小于10%。精密度試驗(yàn)，兩種試劑的批內(nèi)CV分別都小于5%。兩種試劑的檢測(cè)低限分別為：0.87mg/L、0.27mg/L。線(xiàn)性試驗(yàn)結(jié)果，新成試劑的回歸方程和相關(guān)系數(shù)分

2、別為： Y0.9827X+0.5455，R20.9987（濃度范圍0-400mg/L），朗道試劑的回歸方程和相關(guān)系數(shù)分別為：Y1.0356X-0.9091，R20.9996（濃度范圍0.0-202.8mg/L），新成試劑的測(cè)定范圍更廣。方法比對(duì)試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明兩種試劑相關(guān)性良好，回歸方程和相關(guān)系數(shù)分別為：Y1.2555X-1.6888，R20.9976。結(jié)論 兩種檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)尿微量白蛋白的測(cè)定能得到一致的結(jié)果，其性能指標(biāo)均能滿(mǎn)足臨床使用要求，無(wú)明顯差異。關(guān)鍵詞：尿微量白蛋白；分析性能評(píng)價(jià)；CLSI EP方案The evaluation of the analytical performance

3、 by CLSI EP protocols between two different detection system of microalbuminuria TIAN Xiujun(Department of Clinical Laboratory,the Fourth People,s hospital of zibo city,Shandong province 255000)Abstract :Purpose Through evaluate the analytical performance between two different detection systems of m

4、icroalbuminuria, to probe the analytical performance of sichuan xincheng conpanys detecting system,and find the differences between the xincheng detecting system and the England RANDOX detecting system. Methods On the same automatic biochemical analyzer, evaluate the two detection systems five indic

5、ators such as accuracy, precision, minimum detection limit, linear range and the method comparison. Results In the accuracy test, the two reagents relative deviation are less than 10%. In the precision test, the within run coefficient of variation are less than 5%. The two reagents minimum detection

6、 limit respectively are 1.03mg/L and 0.27mg/L. In the linear test,the linear regression equation and correlation coefficient of xinchengs reagent : Y0.9827X+0.5455，R20.9987(the linear range is 0-400mg/L); The linear regression equation and Correlation coefficient of RANDOXs reagent : Y1.0356X-0.9091

7、，R20.9996 (the linear range is0.0-202.8mg/L); the xincheng reagents linear range is wider than the RANDOXs. In the method comparison test, the test results show that the two reagents correlation is good, the linear regression equation and correlation coefficient Y1.2555X-1.6888，R20.9976.The Conclusi

8、on The determination of the microalbuminuria within xinchengs reagent and RANDOXs reagent can get the consistent result, all the performance indexs can meet the request of the clinical, theres no significant difference between the two kands of reagents.Key Words: microalbuminuria;The evaluation of t

9、he analytical performance; CLSI EP尿微量白蛋白（MAlb）是指尿中白蛋白在30一300mg/L范圍內(nèi)的臨床病理指征，即超出正常參考值上限(shngxin)而未檢出臨床蛋白尿的中間階段1。在正常(zhngchng)生理狀態(tài)下，腎小球?yàn)V過(guò)(l u)的濾液中僅僅含有極少量的白蛋白，且大部分被腎小管重吸收。因此尿白蛋白的異常增多對(duì)腎臟功能損傷的診斷有重要的參考價(jià)值。同時(shí)，MAlb是檢測(cè)血管損傷的重要指標(biāo)，是糖尿病、高血壓、心血管疾病、腎病血管損傷的指標(biāo)，對(duì)判斷疾病發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后有重要的參考價(jià)值。在過(guò)去的研究中臨床上重視糖尿病患者M(jìn)Alb的變化，但是近年的研究發(fā)現(xiàn)MA

10、lb對(duì)分析血管相關(guān)疾病的進(jìn)展具有十分重要的意義。因此擴(kuò)大MAlb檢查的應(yīng)用范圍，已經(jīng)作為心血管疾病、高血壓等疾病的常規(guī)檢查項(xiàng)目。通過(guò)這一檢查可以發(fā)現(xiàn)潛在病變，為疾病的早期診斷、早期治療提供有用的信息及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。現(xiàn)在尿微量白蛋白的檢測(cè)方法主要包括ELISA方法、Albustix法、免疫比濁法、RIA方法2，另外臨床上也有尿液白蛋白的簡(jiǎn)易試條半定量法。如Micral-Test、Clinitek Strips法等，用隨意尿標(biāo)本，結(jié)果以白蛋白/肌酐比值或白蛋白/比密比值表示，用于白蛋白尿的過(guò)篩。相比之下，免疫比濁法精度高，操作簡(jiǎn)便，在全自動(dòng)生化分析儀上就能進(jìn)行，在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用。本文就四川新

11、成生物科技有限責(zé)任公司尿微量白蛋白檢測(cè)試劑盒（免疫比濁法）和朗道尿微量白蛋白測(cè)定試劑盒（免疫比濁法）的分析性能進(jìn)行評(píng)價(jià)，以了解其差異。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：材料與方法1.檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)(jin c)系統(tǒng)1試劑(shj)：四川新成生物科技有限責(zé)任公司(n s)尿微量白蛋白測(cè)定試劑盒（免疫比濁法）及配套校準(zhǔn)品（批號(hào)：0309021）。檢測(cè)系統(tǒng)2試劑：朗道尿微量白蛋白測(cè)定試劑盒（免疫比濁法）及配套校準(zhǔn)品。（批號(hào)：141710）檢測(cè)系統(tǒng)1、2用儀器：日立7060全自動(dòng)生化分析儀（HITACH 7180）。檢測(cè)系統(tǒng)1、2用樣本：本院門(mén)診隨機(jī)尿液標(biāo)本40例。檢測(cè)系統(tǒng)1、2用質(zhì)控品：MAlb專(zhuān)用質(zhì)控品（四川新成生

12、物科技有限責(zé)任公司）Level-1: MAlb高值，靶值為127mg/L,批號(hào)：0409011，Level-2：MAlb低值，靶值為33 mg/L，批號(hào)：0409011。2. 實(shí)驗(yàn)方法有關(guān)正確度、精密度、最低檢測(cè)限、線(xiàn)性范圍評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)、方法比對(duì)實(shí)驗(yàn)等評(píng)價(jià)指標(biāo)參照相關(guān)CLSI EP方案及國(guó)內(nèi)外慣用方法進(jìn)行。2. 1實(shí)驗(yàn)參數(shù)實(shí)驗(yàn)參數(shù)設(shè)置按照試劑說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行編寫(xiě)。2.2 正確度參照在CLSI EP-10文件中對(duì)準(zhǔn)確度的定義，正確度表示測(cè)量結(jié)果與真值的一致程度。正確度往往通過(guò)相對(duì)偏差來(lái)衡量。在本次實(shí)驗(yàn)中，同時(shí)重復(fù)三次測(cè)定MAlb專(zhuān)用質(zhì)控品，以三次測(cè)定結(jié)果的平均值作為最終測(cè)定值，計(jì)算其與靶值之間的偏差來(lái)

13、衡量正確度。2.3 精密度參照在CLSI EP-5A23文件中對(duì)準(zhǔn)確度的定義，精密度表示在測(cè)量結(jié)果中隨機(jī)誤差大小的程度，指在一定條件下進(jìn)行多次測(cè)定時(shí)，所測(cè)得結(jié)果之間的符合程度。精密度無(wú)法直接衡量，往往以不精密度表達(dá)，常用標(biāo)準(zhǔn)差（S）或變異系數(shù)（CV%）表示，較小的S或CV%表示具有較高的精密度。在本次實(shí)驗(yàn)中，分別抽取高值和低值的臨床混合尿液標(biāo)本，同時(shí)用兩種試劑重復(fù)測(cè)定20次，計(jì)算批內(nèi)精密度。2.4 最低檢測(cè)限最低檢測(cè)(jin c)限是指檢測(cè)系統(tǒng)(xtng)可檢出的最低分析物濃度，包括檢測(cè)低限(LLD)、生物(shngw)檢測(cè)限(BLD)和功能靈敏度(FS)。本實(shí)驗(yàn)最低檢測(cè)限即檢測(cè)低限。在同一條

14、件下，兩種試劑同時(shí)重復(fù)測(cè)定零濃度標(biāo)本20次，在99.7%可能性時(shí)，LLD=空白+3S空白。2.5 線(xiàn)性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)參照在CLSI EP6-A4文件中對(duì)線(xiàn)性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)的要求，取高低值混合尿液標(biāo)本各一份，按照0：10、1：9、2：8、3：7、4：6、5：5、6：4、7：3、8：2、9：1、10：0的比例混合，分別編號(hào)，隨機(jī)排列重復(fù)測(cè)定3次，計(jì)算平均值作為最終的測(cè)定值，與設(shè)定值做線(xiàn)性對(duì)比。2.6 方法比對(duì)實(shí)驗(yàn)參照在CLSI EP9-A5文件中方法比對(duì)實(shí)驗(yàn)試驗(yàn)的要求，選取新鮮的尿液標(biāo)本共40例，用兩種試劑同時(shí)進(jìn)行測(cè)定，將數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)算其相關(guān)系數(shù)和回歸方程。3.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用Excel統(tǒng)計(jì)軟件

15、進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。結(jié)果1.正確度兩種試劑同時(shí)分別測(cè)定兩個(gè)水平的MAlb專(zhuān)用質(zhì)控，通過(guò)結(jié)果的分析，兩種試劑相對(duì)偏差均滿(mǎn)足臨床要求（相對(duì)偏差10%）。2.精密度新成試劑和朗道試劑分別同時(shí)測(cè)定高、低值混合臨床尿液標(biāo)本，測(cè)定高值標(biāo)本時(shí)，批內(nèi)變異系數(shù)分別是：1.36%、1.88%；測(cè)定低值標(biāo)本時(shí)，批內(nèi)變異系數(shù)分別是：2.95%、3.69%。均滿(mǎn)足臨床要求。3.最低檢測(cè)限在同一條件下，兩種試劑同時(shí)重復(fù)測(cè)定零濃度標(biāo)本20次，99.7%可能性時(shí)，新成生物公司MAlb測(cè)定試劑盒的檢測(cè)低限為：1.03mg/L；朗道MAlb測(cè)定試劑盒的檢測(cè)低限為：0.27mg/L。4.檢測(cè)范圍高值標(biāo)本(biobn)和低值標(biāo)本按比例稀釋

16、后重復(fù)測(cè)定三次，取其平均值為最終的計(jì)算值，做線(xiàn)性回歸分析(fnx)。新成試劑相關(guān)(xinggun)方程及相關(guān)系數(shù)分別為Y0.9827X+0.5455，R20.9987（濃度范圍0-400mg/L）；朗道試劑相關(guān)方程及相關(guān)系數(shù)分別為Y1.0356X-0.9091，R20.9996（濃度范圍0.0-202.8mg/L）。5.方法學(xué)比對(duì)實(shí)驗(yàn)用兩種試劑同時(shí)測(cè)定新鮮臨床尿液標(biāo)本40例，做線(xiàn)性回歸分析, 計(jì)算出相關(guān)方程和相關(guān)系數(shù)為Y0.7946X+1.4677，R20.9976。討論尿微量白蛋白的分子量為69KD，是腎小球?yàn)V過(guò)膜所能通過(guò)的最小蛋白質(zhì)分子之一，占濾過(guò)蛋白總量的40%。經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)的蛋白質(zhì)幾乎

17、全部被近曲小管以主動(dòng)方式回吸收，因此正常情況下尿中只有極微量白蛋白。但在病理狀況下6，如各種炎癥、代謝異常和免疫損傷，使腎小球血流動(dòng)力學(xué)異常，腎小球?yàn)V過(guò)膜損害是造成尿微量白蛋白排出量增加的重要原因。由于長(zhǎng)期高血糖使非酶糖酞化速率增加，導(dǎo)致缺氧，血液勃度增高，同時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞釋放內(nèi)皮素和一氧化氮等血管活性物質(zhì)使腎小球毛細(xì)血管張力改變，進(jìn)而引起腎血流動(dòng)力學(xué)變化，使腎小球處于高濾過(guò)狀態(tài)并導(dǎo)致腎損害。尿微量白蛋白的檢測(cè)就能較早且較敏感的指示腎臟功能的早期損害，對(duì)阻止和延緩糖尿病腎病的發(fā)展具有十分重要的臨床意義。同時(shí)，大量的臨床研究與觀(guān)察還表明7，尿微量白蛋白的發(fā)生與高血壓、糖尿病、心血管疾病都有一定的聯(lián)系

18、。目前國(guó)際上十分重視MAlb的檢測(cè)，認(rèn)為這項(xiàng)指標(biāo)對(duì)早期治療原發(fā)性疾病、分析病程進(jìn)展、評(píng)價(jià)相關(guān)危險(xiǎn)因素具有重要的意義。但是8，目前尿微量白蛋白檢測(cè)還缺乏“金標(biāo)準(zhǔn)”，各家收集尿液的方法互不統(tǒng)一。有24 h尿、夜尿、隨機(jī)尿等。測(cè)定結(jié)果的單位也不統(tǒng)一，有g(shù)/min、mg/d、mg/L等。今后在朝著統(tǒng)一方法、統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)的目標(biāo)努力過(guò)程中，還需要做很多的工作。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，新成生物公司尿微量白蛋白測(cè)定試劑盒和朗道公司尿微量白蛋白測(cè)定試劑盒在測(cè)定正確度上均滿(mǎn)足臨床上相對(duì)偏差10%的要求，在測(cè)定高值質(zhì)控（靶濃度為127mg/L）時(shí)，兩者的相對(duì)偏差分別是：4.72%、-8.82%；測(cè)定低值質(zhì)控（靶濃度為33mg/L

19、）時(shí)，兩者相對(duì)偏差分別是：6.06%、-0.09%。在精密度指標(biāo)上，測(cè)定高值樣品時(shí)，兩者的批內(nèi)變異系數(shù)分別為：1.36%、1.88%；測(cè)定低值樣品時(shí)，兩者的批內(nèi)變異系數(shù)分別是：2.95%、3.69%，均滿(mǎn)足臨床使用要求。新成試劑的檢測(cè)低限為0.87mg/L，朗道試劑的檢測(cè)低限為0.27mg/L。測(cè)定范圍，新成試劑相關(guān)方程及相關(guān)系數(shù)分別為Y0.9827X+0.5455，R20.9987（濃度范圍0-400mg/L）；朗道試劑相關(guān)方程及相關(guān)系數(shù)分別為Y1.0356X-0.9091，R20.9996（濃度范圍0.0-202.8mg/L），兩者在測(cè)定范圍上均滿(mǎn)足臨床使用要求，新成試劑測(cè)定范圍更廣。方法學(xué)比對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，相關(guān)方程和相關(guān)系數(shù)為Y1.2555X-1.6888，R20.9976，表明兩者測(cè)定相關(guān)性良好，無(wú)明顯差異。兩種檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定尿微量白蛋白能得到一致的結(jié)果，分析性能能滿(mǎn)足臨床分析的要求。參考文獻(xiàn)1卜競(jìng)舟，聶滿(mǎn)成尿微量白蛋白測(cè)定方法的探討(tnto)J醫(yī)學(xué)(yxu)創(chuàng)新研究，2008，5 (15)：1482潘靜，魏明競(jìng)尿微量白蛋白的研究(ynji)近況J臨床檢驗(yàn)雜志，2003，21(5)：316-3173 NCCLS.Evaluation of Precision Performance of Clinical Chem