第十二章血液毒理學(共11頁)

1、毒理學基礎(chǔ)復習資料 PAGE 19第十二章 血液(xuy)毒理學 （以簡答題為主）1、對紅細胞生成(shn chn)的影響：紅細胞的生成依賴于血紅蛋白的高速(o s)合成；血紅蛋白的合成依賴于珠蛋白鏈和血紅素兩部分協(xié)調(diào)生成；外源毒物通過影響珠蛋白鏈合成和血紅素合成，導致血紅蛋白合成減少引起貧血。主要有鐵粒幼細胞性貧血、巨幼細胞性貧血、再生障礙性貧血、純紅細胞再生障礙性貧血、繼發(fā)性貧血2、鐵粒幼細胞性貧血：是由血紅素合成障礙引起的不同程度小細胞低色素性貧血；紅細胞鐵利用障礙性貧血。特點：1、血清鐵蛋白、骨髓外鐵及內(nèi)鐵，出現(xiàn)環(huán)形鐵粒幼細胞；2、乙醇、氯霉素、異煙肼、鋅中毒、鉛中毒等可干擾血紅素合成

2、過程而導致鐵粒幼細胞性貧血。3、巨幼細胞性貧血葉酸或維生素B12缺乏導致；維生素B12缺乏：如秋水仙堿、新霉素、乙醇葉酸缺乏：如苯妥英、苯巴比妥、磺胺嘧啶、卡馬西平4、再生障礙性貧血（Aplasia Anemia定義 ：由于各種原因引起的造血干細胞數(shù)量和功能異常，以致全血細胞（紅細胞、血水板、白細胞）減少而引起的一種綜合征。 各種病因造血干細胞損傷 骨髓增生不良 外周血全血細胞減少(Pancytopenia)， 臨床表現(xiàn)為貧血，出血和感染發(fā)熱。5、毒性高鐵血紅蛋白血癥正常人血紅蛋白分子含二價鐵 (Fe2+)，與氧結(jié)合為氧合血紅蛋白。當血紅蛋白中鐵喪失一個電子，被氧化為三價鐵 (Fe3+) 時，

3、即稱為高鐵血紅蛋白 (簡稱Met Hb)。 正常人血Met Hb僅占血紅蛋白總量的0.5%2%，并且較為恒定。當血中Met Hb量超過這個數(shù)值時，稱為高鐵血紅蛋白血癥 (methemoglobinemia)。 癥狀為呼吸困難，發(fā)紺 ；嚴重時可致器官缺氧受損, 智力受影響等后遺癥 。6監(jiān)測內(nèi)容：紅細胞參數(shù)：紅細胞、血紅蛋白、血細胞壓積、平均血細胞容積、平均血紅蛋白濃度；白細胞參數(shù)：白細胞絕對數(shù)、分類計數(shù)；血小板計數(shù)、凝血實驗、外周血細胞形態(tài)、骨髓細胞學、組織學檢查；潛在(qinzi)血液毒性檢查：網(wǎng)織紅細胞計數(shù)、海因茨體制備、紅細胞滲透脆性試驗等。第十三章 免疫(miny)毒理學1、外源性化學物

4、質(zhì)對免疫系統(tǒng)的影響(yngxing)：外源性化學物質(zhì)對免疫系統(tǒng)的影響表現(xiàn)在三個方面，即免疫抑制、超敏反應和自身免疫反應。2、免疫抑制外源化學物免疫抑制的主要表現(xiàn)：外源化學物免疫抑制的結(jié)果是宿主抵抗力降低，主要表現(xiàn)為抗感染能力降低和腫瘤易感性增加。3、超敏反應（hypersensitivity） 亦稱變態(tài)反應（allergy）指已致敏的機體再次接觸相同抗原后，發(fā)生的一種以生理功能紊亂或組織細胞病理損傷為主的異常特異性免疫應答。4、（三）自身免疫 自身免疫是指機體免疫系統(tǒng)對自身成分發(fā)生免疫應答的現(xiàn)象，自身免疫性疾病是因機體免疫系統(tǒng)對自身成分發(fā)生免疫應答而導致的疾病。 第十四章 生殖毒理學1、外源化

5、學物對生殖發(fā)育的影響干擾生殖發(fā)育的任何環(huán)節(jié)，并造成損害作用。（鉛、鎳、鎘中毒，農(nóng)藥、有機化合物與香煙等）可以通過對內(nèi)分泌系統(tǒng)，特別是對性腺的作用，發(fā)生間接的影響。神經(jīng)系統(tǒng)對內(nèi)分泌功能也有調(diào)節(jié)作用，通過下丘腦-垂體-睪丸軸(下丘腦-垂體-卵巢軸)兩條途徑作用于生殖發(fā)育過程 。 2、生殖毒理學(reproductive toxicology)主要研究外源化學物對生殖細胞發(fā)生、卵細胞受精、胚胎形成、妊娠、分娩和哺乳過程的損害作用及其評定，評定方法即為生殖毒性試驗。發(fā)育(fy)毒理學(developmental toxicology)主要研究外源化學物對胚胎發(fā)育、胎仔發(fā)育以及出生幼仔發(fā)育的影響及其評定

6、(pngdng)，評定方法稱為發(fā)育毒性試驗，其中主要為致畸試驗。 3、生殖毒性(d xn)的評價 觀察指標：受孕率（）:反映雌性動物生育能力以及雌性動物受孕情況 正常分娩率（）:反映雌性動物妊娠過程是否受到影響 幼仔出生存活率（）:反映雌性動物分娩過程是否正常 幼仔哺育成活率（）:反映雌性動物授乳哺育幼仔的能力 除上述個指標外，還應該注意出生幼仔是否有畸形存在，對死亡的幼仔應進行畸形檢查，可為下一步致畸試驗提供參考 第十五章，神經(jīng)與行為毒理學（一）神經(jīng)遞質(zhì)代謝的改變可卡因：抑制突觸前膜攝取單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的酶，增加突觸間隙多巴胺/去甲腎上腺素的濃度引起中毒。有機磷：抑制乙酰膽堿酯酶活性，造成突觸

7、間隙乙酰膽堿的大量蓄積引起中毒。（二）干擾神經(jīng)遞質(zhì)的儲存和/或釋放利血平：干擾儲存遞質(zhì)耗竭麻黃堿：促進兒茶酚胺類遞質(zhì)釋放肉毒桿菌毒素：抑制神經(jīng)肌肉接頭處突觸前膜釋放乙酰膽堿，引起遲緩性癱瘓。破傷風毒素：阻斷抑制性神經(jīng)元釋放氨基酸遞質(zhì)，導致肌肉強直。毒物可與受體分子發(fā)生相互作用，產(chǎn)生不同的生物學效應：（1）毒物分子可模擬內(nèi)源性配體，激活相應的受體，引起激動劑樣的作用；（2）毒物分子可能結(jié)合于受體，但并不引起激活效應，而是阻斷內(nèi)源性配體的作用(拮抗作用)；（3）毒物可能對受體產(chǎn)生變構(gòu)效應。結(jié)合與受體大分子的相鄰部位，引起構(gòu)象變化而影響復合體與神經(jīng)的結(jié)合。 第十六章 呼吸毒理學 1、外源毒物對呼吸系

8、統(tǒng)損害的類型： 急性：表現(xiàn)為呼吸道粘膜的刺激作用和急性肺炎、肺水腫 慢性：表現(xiàn)為肺氣腫、肺纖維化、哮喘、肺腫瘤等2、一、急性損傷（一）呼吸道損傷急性刺激：刺激性氣體如甲醛(ji qun)、氨、氯氣等水溶性氣體導致；急性炎癥(ynzhng)：水溶性化學物易引起上呼吸道炎癥；脂溶性毒物可引起支氣管和細支氣管炎癥；某些過敏原、有毒顆粒以及感染性微生物可進入到肺泡引起肺泡炎或肺炎。（二）壞死：吸入毒性強的毒物或吸入的毒物量大，引起氣管(qgun)組織的壞死。（三）肺水腫（肺急性損傷的標志）部位：呼吸膜 機制：肺泡-毛細血管屏障通透性增加后果：肺結(jié)構(gòu)和功能的急性損傷；水腫消退后遺留的異常。 評價指標：肺

9、含水量的測定3、二、慢性損傷（一）肺纖維化病理特征：肺泡壁（包括呼吸性細支氣管）彌漫性慢性炎癥和間質(zhì)纖維化部位：肺泡間質(zhì)；小氣道（二）肺氣腫病理特征：肺氣腫是指終末細支氣管 (呼吸細支氣管、肺泡管、肺泡囊和肺泡)的管腔異常增大，彈性減退，過度膨脹，并伴有腔壁的破壞性改變而無明顯纖維化的一種病理狀態(tài)。部位：終末細支氣管 ；管腔多見于吸煙引起（三）哮喘：氣管、支氣管對刺激因子高度敏感，導致反復發(fā)作的氣短、呼吸困難、哮鳴等氣道梗阻的表現(xiàn)。（四）肺癌可能機制：1）活化的致癌劑或其代謝產(chǎn)物引起DNA損害；2）活性氧引起DNA損害研究手段：吸煙、氡氣；石棉纖維、砷、鎘等；硅、人造纖維、甲醛4、代表性肺毒性

10、藥物和毒物（1）博來霉素腫瘤化療藥；可引起急性化學性肺炎和慢性肺纖維化，甚至呼吸衰竭損害結(jié)果：毛細血管內(nèi)皮細胞和型肺泡細胞的壞死，形成水腫和出血，遲延性型肺泡上皮細胞的增殖，最后肺纖維化使肺泡壁增厚可能機制：肺缺少使博來霉素滅活的酶（2）環(huán)磷酰胺抗癌藥和免疫抑制劑；可引起出血性膀胱炎和肺纖維化可能機制：由細胞色素P450代謝成丙烯醛等活性代謝物，啟動脂質(zhì)過氧化作用（4）百草枯除草劑；肺臟蓄積作用強；被型和型肺上皮細胞攝取、活化，通過肺氧化性毒性機制引起肺損害；急性作用呈肺水腫，慢性作用呈肺纖維化；特征：彌散性間質(zhì)和肺泡內(nèi)纖維化5、支氣管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage,

11、BAL）用等滲的鹽溶液沖洗和灌注氣管和肺泡區(qū)表面(biomin)的過程，是一種采集支氣管和肺泡表面脫落細胞和液體的方法。第十七章 肝臟(gnzng)毒理學1、肝臟(gnzng)毒理學：利用毒理學的基本原理和方法，研究外源毒物對肝臟的損害作用及其機制的學科；是靶器官毒理學的主要研究領(lǐng)域；在毒理學研究領(lǐng)域，為了區(qū)別于病毒性肝炎，近年來將化學物引起的各種急性和慢性肝臟損害統(tǒng)稱為“化學性肝損害”（chemically induced liver injury）：短期暴露：肝細胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積、肝細胞壞死、肝膽功能障礙等長期暴露：肝硬化、瘤樣改變等2、（二）脂肪肝（fatty liver）概念：脂質(zhì)積聚含量

12、超過總重量5的肝臟；特點：肝急性中毒的常見反應；可逆；不引起肝細胞壞死3、（五）肝纖維化與肝硬化概念: 慢性肝損傷晚期，纖維組織逐漸增多，肝臟微循環(huán)變形引起細胞缺氧并重建，最終肝臟結(jié)構(gòu)由纖維組織壁包繞互連成為重建肝細胞結(jié)節(jié)4、對乙酰氨基酚的肝毒性機制（圖5） 細胞色素P450將其活化為N-乙酰-對苯醌（NAPOI），后者可耗竭谷胱甘肽或與肝蛋白結(jié)合，最終導致肝細胞死亡。5、實驗性肝損傷的體內(nèi)檢測：血清酶學檢測（谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶較簡便敏感，是應用最廣的肝損害檢測指標）肝臟排泄功能檢測肝臟化學組成成分改變的檢測肝臟組織病理學檢查第十八章 腎臟毒理學1、功能性指標：（1）腎小球濾過率（glom

13、erular filtration ratio, GFR）：單位時間內(nèi)（每分鐘）兩腎生成的超濾液量。 正常值：125ml/min測定方法：菊粉、內(nèi)生肌酐意義：不僅反映腎小球的功能，而且還反映腎濃縮能力。2、（一）急性腎功能衰竭（ acute renal failure，ARF）：一種可逆的腎小球和腎小管排泄功能不全。其特征為GFR突然減少引起氮質(zhì)血癥。是腎臟(shnzng)對藥物毒性最常見的反應。例如(lr)：乙酰氨基酚、阿司匹林、布洛芬3、（四）汞環(huán)境中存在的元素汞（汞蒸氣(zhn q)）、無機汞鹽、有機汞化合物；腎臟的近曲小管是無機汞蓄積的主要靶器官；汞所致急性腎毒性主要特征：接觸2448

14、h內(nèi)，出現(xiàn)近曲小管壞死和急性腎衰竭，伴隨腎小球濾過率降低。第二十章 藥物臨床安全性評價概述藥品：是指用于預防、治療、診斷人體疾病的，有目的地調(diào)節(jié)人體生理機能并規(guī)定有適應證或者功能主治、用法和用量的物質(zhì)，包括中藥與天然藥、化學藥和生物制品。新藥臨床前安全性評價意義與局限性（一）意義 提供新藥對人類健康危害程度的科學依據(jù)，預測上市新藥對人體健康的有害程度，權(quán)衡藥物對人體的危險性，保證上市的藥物在臨床劑量下無毒或毒性很小，即安全、有效。（二）局限性 根據(jù)臨床前安全性評價來預測臨床的安全性是有一定風險的，一些新藥上市之后出現(xiàn)毒副作用的而被淘汰。 原因： 一方面是新藥本身，另一方面來自現(xiàn)有的毒理學評價手

15、段。（1）實驗動物和人對藥物反應的種屬差異。 甲醇對人眼毒性比強，而對動物眼睛比較輕（2）常規(guī)毒性實驗所用的動物多系實驗室培育的品種，反應較單一，而臨床病人很廣泛，對藥物的敏感性各不相同。（3）毒性實驗所用的動物多是健康的，而臨床用藥的病人則可能同時患有多種疾病，而某種疾病的存在往往會成為發(fā)生某種毒性反應的必須條件。（4）動物毒性試驗中采用大劑量的方法與臨床給藥相差太大，容易造成假象。（5）實驗動物數(shù)量有限，那些發(fā)生率低的毒性反應，在少量動物實驗中難以發(fā)現(xiàn)。一種苯噁洛芬的非甾體抗炎藥，以萬分之一的發(fā)生率使61人死亡。藥物非臨床安全性研究質(zhì)量管理規(guī)范 （Good Laboratory Pract

16、ice for Nonclinical Safety Studies，GLP） 國內(nèi)一般稱為“藥物非臨床安全性研究質(zhì)量管理規(guī)范”，或者“優(yōu)良實驗室規(guī)范”。系指嚴格實驗室管理的一整套規(guī)范化的規(guī)章制度。是一種法規(guī)性文件，是闡述保證所做的總結(jié)報告全部資料質(zhì)量及完整性的最低要求的方法和步驟。 GLP規(guī)范(gufn)的主要內(nèi)容硬件：實驗動物室和從事研究用的實驗室，必須按照GLP標準涉及施工(sh gng)和維護，保證空氣潔凈，減少各種微生物、灰塵對實驗室的影響。軟件：從事安全性研究人員的素質(zhì)和根據(jù)GLP規(guī)范指南制定的SOP及嚴格執(zhí)行SOP的要求。如：儀器設(shè)備使用前檢驗校正，用后做好記錄；實驗記錄不得涂改

17、；實驗報告要有實驗者、專題負責人姓名和日期；實驗試劑和實驗動物要有品名來源(liyun)等等。GLP實驗室人員和組織機構(gòu)1. 人員分類中心負責人、專題負責人、實驗操作人員、質(zhì)量保證人員、其他人員2. 組織機構(gòu)GLP實驗室運行方式第二十一章藥物臨床安全性評價基本內(nèi)容（新藥物臨床前毒理研究）第一節(jié) 新藥物臨床前毒理研究的內(nèi)容第二節(jié) 毒理學實驗(shyn)的基本原則一、實驗設(shè)計的三原則(yunz)（一）重復(chngf)：相同的實驗條件下實驗結(jié)果相同1. 原則與含義：重現(xiàn)性；重復數(shù) 2. 重現(xiàn)性與重復數(shù)的辨正關(guān)系：在保證有統(tǒng)計學意義的重現(xiàn)性的前提下盡量減少重復數(shù) 。3.實驗重復數(shù)的數(shù)量與質(zhì)量的辨證關(guān)

18、系 ：同時、同地、同條件、同種、同批、同病情。4.實驗條件的嚴密性和代表性的關(guān)系條件越嚴密，結(jié)論越確切，但實驗的代表性就可能越差。（二）隨機：使每個實驗對象都有相等的機會接受處理1. 隨機不是隨便。2. 均衡隨機（分層隨機）優(yōu)于絕對隨機。（三）對照：沒有對照就沒有比較，也沒有鑒別1. 對照應復合齊同可比原則 除了處理因素外，其他所有的條件都一致。2. 對照能產(chǎn)生監(jiān)控條件變化的作用 陽性對照、陰性對照 。二、主要影響外推的因素（一）種屬差異及外推1.致畸作用的種屬差異（反應停）2.毒物致癌作用的種屬差異（1）自發(fā)腫瘤發(fā)病率的種屬差異（2）對致癌劑的敏感程度的種屬差異 家兔和小鼠對煤焦油敏感 大鼠

19、和豚鼠不敏感（3）致癌劑作用的靶器官的種屬差異 芳香胺（二）高劑量效應與低劑量效應的差異與外推1、高劑量和低劑量下效應性質(zhì)可能不同 CS2，高濃度導致末梢神經(jīng)炎，低濃度危害血脂和心血管系統(tǒng) 長期高劑量乳糖引起的鈣性腎病2、高劑量向低劑量外推的線形關(guān)系的不確定性很多新的物質(zhì)的劑量效應關(guān)系或劑量反應關(guān)系不是很明確。新 藥 藥 理 學 研 究概述藥理學研究(ynji)，是指利用生物（整體動物、麻醉動物、離體器官、組織、細胞或微生物培養(yǎng)等）在嚴格控制的試驗條件下，觀察(gunch)藥物的療效及藥動學等，包括主要(zhyo)藥效學研究、一般藥理學研究、藥代動力學研究三方面。第一節(jié) 主要藥效學概念：藥物效

20、應動力學簡稱藥效學，是研究藥物的生化、生理效應及機制以及劑量與效應之間的關(guān)系。藥理學實驗設(shè)計的基本原則1、隨機2、對照3、重復第二節(jié) 一般藥理學研究一、概述廣義的一般藥理學（General Pharmacology）是指對主要藥效學作用以外進行的廣泛的藥理學研究，包括安全藥理學（Safety Pharmacology）和次要藥效學（Secondary Pharmacodynamic）研究。安全藥理學主要是研究藥物在治療范圍內(nèi)或治療范圍以上的劑量時，潛在的不期望出現(xiàn)的對生理功能的不良影響，即觀察藥物對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的影響。第二十二章生物技術(shù)藥物臨床安全性評價一、非臨床安全性評

21、價的差異二、生物技術(shù)藥物非臨床安全性評價中應注意的問題（自己適當簡化）1、安全性問題藥理作用的放大或延伸。 如胰島素引起的低血糖休克。免疫毒性，包括免疫原性、免疫抑制和刺激反應及過敏反應。 免疫毒性與超敏性、細胞(xbo)轉(zhuǎn)化及中和抗體的產(chǎn)生有關(guān)。雜質(zhì)(zzh)或污染物引起的毒性。 宿主細胞的污染(wrn) 過敏反應及其它免疫病理效應 核酸污染物 整合入宿主基因組2、受試物的質(zhì)量用于藥理和毒理試驗的藥物應與擬用于臨床試驗的藥物具有可比性。表達蛋白宿主細胞（如細菌、酵母、哺乳動物細胞等）的污染（殘留蛋白、核酸）可能會導致潛在的危險，這些由雜質(zhì)或污染物引起的安全性問題應盡可能地通過純化等質(zhì)量控制手

22、段來解決。3、組織交叉反應在首次進入臨床試驗前，所有抗體類藥品都應該完成體外組織交叉反應試驗用于組織交叉反應的人體和動物組織 FDA推薦的組織（如腎上腺、膀胱、骨髓、脾臟、肺、肝臟等）。陽性和陰性對照對結(jié)果的解釋非常重要 缺乏對照組，無法判定抗體的特異性結(jié)合。4、相關(guān)動物種屬的選擇所謂相關(guān)種屬，是指受試品在該類動物上，由于表達有受試物作用的受體或抗原決定簇(對單抗而言)，能產(chǎn)生藥理活性。 例如 細胞因子在安全性評價使用中的動物種屬上可與相應細胞因子受體結(jié)合，其親和力應與其在人相應受體上的表現(xiàn)相似，并且產(chǎn)生與預期人體反應相似的藥理反應。體外親合力試驗、競爭結(jié)合試驗及細胞功能試驗等方法是篩選相關(guān)動

23、物的常用方法。安全評價方案常包括二種相關(guān)動物種屬，但是在非相關(guān)種屬動物中的毒性試驗結(jié)果可能會誤導，所以在證明合理的情況下,一種相關(guān)動物即可。 即使短期毒性試驗必須應用兩種動物，但隨后的長期毒性試驗也可能使用一種動物。 若不存在相關(guān)動物，可以考慮應用表達人源受體的轉(zhuǎn)基因動物或使用同系蛋白進行安全性研究。5、給藥途徑與劑量盡可能與臨床擬用的給藥途徑與頻率相同，如果在受試動物體內(nèi)藥物的活性成分清除較快或溶解度偏低，可適當增加給藥次數(shù)或給藥容量。如受到生物利用度、給藥途徑或動物生理狀態(tài)等限制，也可以采用與臨床不同的給藥途徑。 給藥劑量應包括中毒劑量和未觀察到不良反應的劑量(NOAEL)，以反應劑量效應

24、關(guān)系。對某些毒性很小或無毒的生物技術(shù)藥物，需根據(jù)藥物預期的藥理或生理作用、受試物的易得程度以及臨床適應癥選擇合理的給藥劑量。目前國外通常采用的為預期最大人體暴露量的510倍以上。6、免疫原性生物技術(shù)(jsh)藥物通常對動物具有免疫原性，產(chǎn)品的很多特性會影響免疫原性：一級結(jié)構(gòu)、糖基化、雜質(zhì)、宿主細胞、純化、制劑和儲藏。在重復給藥的毒性實驗中要對免疫原性進行評價，抗體反應(fnyng)特征(如抗體滴度、出現(xiàn)抗體的動物數(shù)、中和或非中和抗體)應予以鑒別。除非在多數(shù)動物中抗體中和了生物技術(shù)藥物的藥理學和/或毒理學效應，否則抗體的檢出不能作為提前(tqin)終止臨床前安全性評價或調(diào)整試驗設(shè)定觀察時間的唯一標準。動物身上出現(xiàn)的免疫原性，并不能推測在人體是否會產(chǎn)生抗體。人體也可能產(chǎn)生抗人源蛋白的血清抗體，但往往在抗體出現(xiàn)后仍存在治療作用。7、藥代動力學（pharmacok