青藤堿對大鼠心臟移植排斥反應(yīng)期間ICAM

1、青藤堿對大鼠心臟移植排擠反響期間ICAM楊帆,季剛,陳彥彬,王為忠【關(guān)鍵詞】心臟移植;,青藤堿;,移植物排擠;,大鼠TheeffetsfsineninentheexpresssinfIA1andIL2duringtherejetinfratardiaallgraftAbstratAI:Tbservethepathlgialharateristisftherejetinfratardiaallgraft,studytheeffetsandehanissfsineninentherejetinfratardiaallgraft.ETHDS:Theratdelfhetertpiardiaallgra

2、ftasestablished.Theratsererandlydividedintfurgrups:GrupA(ntrlgrupfhealthySDrats),GrupB(ardiaallgraftfSDtSDrats),Grup(ardiaallgraftfSDtistarrats)andGrupD(sineninetreatedgrupfardiaallgraftfSDtistarrats).ELISAandiunhistheialstainingerearrieduttestiatetheexpressinlevelfIL2andIA1inthegrafts.RESULTS:Littl

3、eIA1andIL2asbservedinbthGrupAandGrupBandtheinfiltratinflyphytesasntsbvius.Ingrup,IA1andIL2ereinreasedsignifiantlyandtheinfiltratinflyphytesasbviusly.IngrupD,inflaatryreatinandinfiltratinflyphytesereuhlessthanthseingrup,andIA1andIL2isexpressedeakly.NLUSIN:TheexpressinlevelfIA1andIL2asrelevantttheurre

4、neanddevelpentfgraftrejetin.Sinenineuldbviuslyreduetheexpressinfinterellularadhesinleuleandtheinfiltratinflyphytesinthegraftsandprlnggraftssurvivalsignifiantly.Keyrdshearttransplantatin;sinenine;graftrejetin;rat摘要目的:不雅察大鼠同種異位心臟移植排擠反響期間的病理特性,探究青藤堿對大鼠心臟移植排擠反響的影響及其產(chǎn)生氣制。要領(lǐng):SD康健大鼠為供體,istar大鼠為受體,創(chuàng)立大鼠異位心臟移

5、植模子。實行分4組:A組為康健SD大鼠心臟作比擬組,B組為SD大鼠到SD大鼠的同基因移植組,組為SD大鼠到istar大鼠異基因移植組,D組為清藤堿治療組。以ELISA、免疫構(gòu)造化學(xué)檢測移植心構(gòu)造中IL2和IA1的表達。效果:A、B組未見排擠反響產(chǎn)生,心臟構(gòu)造中的IA1和IL2表達程度很低;組有顯著的炎癥反響并見大量淋巴細(xì)胞浸潤,構(gòu)造中IA1和IL2的表達程度顯著升高(P005);D組炎癥反響有所減輕,同時少有淋巴細(xì)胞浸潤;構(gòu)造僅薄弱表達IA1和IL2。結(jié)論:移植心臟IA1和IL2的表達程度與排擠反響的產(chǎn)生和生長有關(guān),青藤堿能明顯按捺移植心IA1和IL2的表達和淋巴細(xì)胞的浸潤,減輕排擠反響,顯著

6、延伸移植物的存活。關(guān)鍵詞心臟移植;青藤堿;移植物排擠;大鼠青藤堿(sinenine,SIN)是從中藥青風(fēng)藤中提取的一種單體生物堿,具有抗炎、抗風(fēng)濕、免疫按捺、鎮(zhèn)痛、平靜等多方面的藥理作用1,臨床用于治療類風(fēng)濕性樞紐炎等身免疫性疾病療效較好,且副作用小2。為了進一步證明SIN的免疫按捺作用,探究SIN免疫按捺作用機制,為SIN的深條理開拓及在器官移植免疫按捺治療上的應(yīng)用提供理論根據(jù),以期SIN的利用淘汰sA的用量而減輕其毒副作用。我們通過創(chuàng)立大鼠心臟移植模子,研究SIN對移植心臟影響及機制,為青藤堿深條理開拓應(yīng)用提供實行根據(jù)。1質(zhì)料和要領(lǐng)1.1質(zhì)料康健雄性SD大鼠(質(zhì)量250280g)30只,為

7、心臟移植供體;康健雄性istar大鼠(質(zhì)量230250g)30只,為心臟移植供體,均購自第四軍醫(yī)大學(xué)實行動物中央。青藤堿鹽酸鹽粉劑,購自正清股份;檢測IL2的ELISA試劑盒購于美國Biasuse公司;IA1免疫組化試劑盒購于北京中山公司。1.2要領(lǐng)2效果2.1心臟移植受體鼠存活時間A組(n=6)存活時間不受限定;B組(n=6)受體均勻存活時間為(3015)d;組(n=6)受體為(701)d;和組比擬,D組(n=6)受體為(12012)d(P005)延伸了受體鼠的存活時間。此中組與A,B,D組比擬存活時間顯著收縮(P005)。2.2病理改變在術(shù)后第7天網(wǎng)羅移植心臟構(gòu)造,肉眼不雅:A組心臟形態(tài)正

8、常,觸診搏動強度為級;B組移植心紅潤,觸診搏動強度為級;組肉眼不雅察移植心有差異程度的腫大,質(zhì)地變硬,呈暗赤色或玄色,與四周中度粘連,呈急性排擠表示,觸診搏動強度為級;D組移植心顏色深紅,有少量炎性排泄液,與四周輕度粘連,觸診搏動強度為級。HE構(gòu)造切片,鏡下不雅察:A組心肌布局正常;B組移植心臟心肌布局正常,間質(zhì)有少量淋巴細(xì)胞浸潤,無急性排擠反響表示;組心肌構(gòu)造內(nèi)有大量淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤,末梢小血管內(nèi)血栓形成,顯著的心肌間質(zhì)水腫和出血,差異程度的心肌細(xì)胞變性壞死、心肌間質(zhì)纖維素排泄等血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷后的繼頒發(fā)現(xiàn),呈急性排擠變革;D組見血管輕度擴張滲血,少量中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞浸潤

9、,間質(zhì)少量細(xì)胞浸潤,伴有灶性心肌細(xì)胞損害,表白心臟移植的急性排擠反響受到按捺。2.3ELISA法檢測移植大鼠血清IL2的表達A組IL2表達程度極低,并且無顯著變革;B組和D組IL2術(shù)后表達程度高于A組P005,表1,組IL2表達顯著升高,與其他組比擬差異有統(tǒng)計學(xué)意義P005。表1大鼠心臟移植術(shù)后血清中IL2濃度的變革略Tab1ThelevelhangefIL2afterratardiaallgraftaP0.05vsgrupAandB;P0.05vsgrupD.2.4移植心臟構(gòu)造中的IA1的表達闡發(fā)免疫組化效果在放大200倍的顯微鏡下攝取圖象,用PIAS2500多媒體彩色圖文闡發(fā)體系丈量光密度

10、值,然后盤算光密度值的均值作為此組的代表值。A和B組移植心臟構(gòu)造IA1的表達薄弱,組可見移植心毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞IA1表達顯著圖1A,與AB組比力,差異有明顯性(P005,表2)。D組移植心IA1的表達薄弱(圖1B),與組比擬比力,差異有明顯性(P005)。各組移植心肌構(gòu)造IA1的表達灰度闡發(fā)值見表2。圖1大鼠心臟移植后心臟構(gòu)造中IA1免疫組化染色效果略Fig1TheiunhistheialresultfexpressinfIA1intheallgraft(200)表2各組大鼠心臟構(gòu)造中IA1的表達灰度闡發(fā)略Tab2AnanlysisfIA1averagegraysaleineahratardi

11、aallgraftgrupaP0.05vsgrupAandB;P0.05vsgrupD.3討論大鼠心臟移植模子普及應(yīng)用于急、慢性排擠反響機理、免疫耐受、免疫排擠反響監(jiān)測、抗心臟移植排擠反響藥物選擇等臨床底子實行研究5,排擠反響是心臟移植失敗的重要緣故原由。IA1在構(gòu)造內(nèi)漫衍普及,且與H類抗原的漫衍范疇同等,正常環(huán)境下IA1很少表達或不表達,排擠反響期間IA1表達增長6,7。本研究效果提示,istar大鼠擔(dān)當(dāng)SD大鼠的心臟移植后,組移植心構(gòu)造的IA1表達程度顯著升高,重要表達在移植心構(gòu)造的血管內(nèi)皮細(xì)胞。排擠反響期間IA1的表達程度顯著升高,提示IA1的表達程度與排擠反響的強弱有關(guān)。同種異體移植物

12、植入受體后,由于供、受體H編碼的抗原差異,誘發(fā)T細(xì)胞增殖、活化,天生TL,打擊粉碎移植物,產(chǎn)生排擠反響。IL2的表達程度與排擠反響的強弱有關(guān),青藤堿對排擠反響具有明顯的按捺作用8,9。本研究中我們不雅察到:青藤堿治療組D受體均勻存活時間為(12012)d,較組均勻存活時間(701)d顯著延伸;同時,移植心臟病理構(gòu)造學(xué)效果表現(xiàn),D組有部門受體于術(shù)后7d出現(xiàn)輕度急性排擠反響,而組術(shù)后7d全部出現(xiàn)中、重度急性排擠反響;D組術(shù)后IL2表達170001g/L低于620001g/L;D組IA1表達程度14762561低于組193431227,這表白,心臟移植后,青藤堿可顯著低落受體的免疫細(xì)胞的活性,淘汰急

13、性排擠反響的產(chǎn)生。本研究不雅察到青藤堿具有抗排擠作用,并從細(xì)胞因子方面臨其免疫按捺機理作了探究。我們以為青藤堿可從多環(huán)節(jié)按捺急性排擠反響,其作用機制仍有待進一步的研究。參考文獻:1LiangL,EberhardB,DennisB,etal.AeliratinfratexperientalthritisbytreatentiththealkalidsinenineJ.IntJIunphara,1996,l8(10):529-543.2余建強.正清風(fēng)痛寧治療風(fēng)濕病695例臨床總結(jié)J.湖南中醫(yī)雜志,1994,10(2):18-20.3nK,LindseyES.Iprvedtehniquefheart

14、transplantatininratsJ.SandJThraardivasSurg,1969,57:225-229.4ehraR,Jessup,GrndaE,etal.Ratinaleandpress:InternatinalSietyfrHeartandLungTransplantatinguidelinesfrthearefardiatransplantandidatesJ.JHeartLungTransplant,2022,25(9):1001-1002.5夏家紅,蔣雄剛,黃毅,等.D25單克隆抗體影響心臟移植排擠反響及細(xì)胞因子表達的驗研究J.中華實行外科雜志,2022,21(15):329-331.6顧云,黃益民,張永科,等.大鼠心臟移植后淋巴細(xì)胞5種免疫分子表達的變革J.細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2022,19(5):431-433.7Kri,NagataT,hiai,etal.RlefIA1andLFA1inardiaallgr