醫(yī)學(xué)微生物學(xué)第二十三章 呼吸道感染病毒

1、 以呼吸道為侵入門戶,引起呼吸道局部病變,或伴全身癥狀的一群病毒。第二十三章 呼吸道感染病毒 （Respiratory Virus）常見種類正黏病毒科 流感病毒副黏病毒科 副流感病毒、呼吸道合胞病毒、 麻疹病毒、腮腺炎病毒等冠狀病毒科 冠狀病毒、SARS冠狀病毒披膜病毒科 風疹病毒小RNA病毒科 鼻病毒腺病毒科 腺病毒呼腸病毒科 呼腸病毒、第一節(jié) 正黏病毒（Orthomyxoviridae）對人或者某些動物細胞表面的粘蛋白（eg 唾液酸）有高度親和性、具有分階段RNA基因組的一類包膜病毒。流行性感冒病毒人流感病毒、禽流感病毒 流行性感冒病毒 (Influenza virus) 根據(jù)病毒的核衣殼

2、蛋白（nucleocapsid protein，NP）和基質(zhì)蛋白（matrix protein，M）分成甲、乙、丙三個型。甲型（A型）：感染人、動物（禽、豬）,易流行 乙型（B型） ：只感染人,致病性弱丙型（C型） ：感染人和豬，致人類輕度上呼吸道感染 流感病毒的結(jié)構(gòu)核心：分節(jié)段的（-）SSRNA核蛋白（NP）RNA多聚酶 基質(zhì)蛋白（M1蛋白）包膜：刺突血凝素HA神經(jīng)氨酸酶NAM2蛋白一、生物學(xué)性狀：以甲型為例形態(tài)結(jié)構(gòu)：球/絲狀，D=80-120nm流感病毒的電鏡照片流感病毒的基因組及其編碼的蛋白質(zhì)13：PB2、PBl和PA；4: HA；5: NP；6: NA；7: M1和M2；8: NSl和

3、NS2；12435678PB2PB1NPRNAM2M1NAHA分節(jié)段的 -ssRNAPA RNA多聚酶核糖核蛋白（RNP）流感病毒的結(jié)構(gòu)核衣殼 病毒分節(jié)段的RNA， 核蛋白NP 與復(fù)制和轉(zhuǎn)錄有關(guān)的RNA多聚酶 呈螺旋對稱?；|(zhì)蛋白（M蛋白） 覆蓋在核衣殼外面， 抗原性穩(wěn)定，具有型特異性。外膜 來自宿主細胞的脂質(zhì)雙層膜。流感病毒的表面結(jié)構(gòu)（膜蛋白）血凝素（HA）柱狀，三聚體，2個亞基，HA1和HA2吸附宿主細胞 ,介導(dǎo)病毒對宿主細胞的感染凝集紅細胞具抗原性：產(chǎn)生中和抗體 及血凝抑制抗體 HA流感病毒的表面結(jié)構(gòu)（膜蛋白）神經(jīng)氨酸酶（NA）蘑菇狀，四聚體，具有抗原性參與病毒釋放，促病毒擴散M2基質(zhì)蛋

4、白 四聚體，離子通道NAM2根據(jù)病毒HA和NA抗原性的差異，可將甲型（A型）流感病毒進一步分為不同的亞型。甲型流感病毒包括16個HA亞型(H1-H16)及9個NA亞型(N1-N9)。可感染人: H3N2 、 H3N8 、 H2N2 、H1N1 H5N1、H9N2 、 H7N9。 兩者抗原性極易變異，是劃分流感病毒亞型的依據(jù)。分型與變異 抗原漂移（antigenic drift）： 病毒HA基因點突變，變異幅度小，屬于量變，導(dǎo)致小規(guī)模流行。 抗原轉(zhuǎn)換（antigenic shift）： 病毒基因重組，表面抗原（H、N）發(fā)生變異，形成新亞型，屬于質(zhì)變，引起新型流感的大流行。流感病毒的變異 為什么流

5、感易爆發(fā)（或大流行）甲型流感病毒在不同流行年代的表面抗原的變化亞型名稱病毒亞型病毒代表株流行年代原甲型（A0）H0N1A/PR/8/34（HoN1）1918亞甲型（A1）H1N1A/FM/1/47/（H1N1）1947亞洲甲型（A2）H2N2A/Singapore/1/57（H2N2）1957香港亞型（A3）H3N2A/Hongkong/1/68（H3N2）1968新A1與A3交替型H3N2, H1N1A/USSR/90/77（H1N1）A/BeiJing/32/92(H3N21977甲型（A5）H5N1A/ HongKong/156/1997（H5N1）1997甲型（A1）H1N1A/Cal

6、ifornia/04/2009(H1N1)2009甲型（A7）H7N9A/Shanghai/01/2013(H7N9)A/Anhui/1/2013(H7N9)2013流感病毒的復(fù)制吸附 HA介導(dǎo)穿膜 M2介導(dǎo)脫殼轉(zhuǎn)錄和復(fù)制組裝、成熟翻譯釋放 NA介導(dǎo)流感病毒的命名流感病毒毒株的命名規(guī)則： 完整的名稱包括：型別(A、B、C)或(甲、乙、丙)宿主來源(若為人，可省略)分離地點毒株序號分離年代，對于甲型流感病毒還需要將其所屬HA和NA亞型注明在括號內(nèi)。一株1968年在湖北的雞中分離到的A型流感受病毒命名A/CK/Hubei/1/1968 (H8N4)。一株于2002年在香港從人分離得到的甲型流感病毒

7、分離株YU22的標準命名是：AHongKongYU222002 (H5N1).流感病毒的培養(yǎng)特性細胞：MDCK 、 PMK， CPE不明顯 抵抗力 弱耐冷不耐熱，56 ， 30min 滅活 干燥 、日光、 紫外線敏感乙醚 、甲醛、乳酸 敏感 動物接種 ：雪貂雞胚： 常用二、致病性與免疫性致病性：傳染源-病人或病毒攜帶者，動物致病機理-病毒不入血（無病毒血癥）病毒-呼吸道-毒素樣物質(zhì)進入血液全身中毒癥狀局部粘膜上皮炎癥傳染途徑-飛沫，氣溶膠流行性感冒（Influenza）“流行性感冒”（Influenza） 1743英國人命名，意大利語中即“寒冷的影響”。主要發(fā)生在夏季、冬天和早春季節(jié)。每年都有

8、數(shù)以百萬計的人群受到感染。常見臨床癥狀全身癥狀畏寒、發(fā)熱（38-40 ） 、頭痛、肌肉酸痛、出汗、乏力呼吸道癥狀 流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛消化系統(tǒng)癥狀 嘔吐、腹痛、腹瀉、厭食抽搐 、譫妄（1）體液免疫：1）免疫物質(zhì)為sIgA及中和抗體（IgG 、IgM 2）同亞型有1-2年免疫力 （2）細胞免疫：CTL能溶解病毒感染的靶細胞 CD4+T 、 CD8+T （3）干擾素：病毒刺激機體產(chǎn)生IFN，IFN廣譜抗病毒， 在恢復(fù)早期對抑制病毒增殖、控制病毒 擴散有較大作用免疫性：三、微生物學(xué)檢查病毒分離 取患者咽漱液或鼻咽拭，接種雞胚或培養(yǎng)細胞(MDCK)血清學(xué)診斷 血凝抑制試驗、中和試驗、補體結(jié)合試驗（取

9、急性期和恢復(fù)期的雙份血清，如后者比前者的效價增加4倍或以上具有診斷意義）快速診斷 IFA或ELISA直接從病人呼吸道分泌物、脫落細胞中 檢測抗原 核酸雜交、PCR、序列分析四、流感的防治藥物治療 鹽酸金剛烷氨、干擾滴鼻素、板蘭根、大青葉接種疫苗 流感病毒滅活疫苗（老人和小孩） 病毒表面抗原疫苗 減毒活疫苗（成人）正黏病毒科，甲型流感病毒多形性，有包膜, 分節(jié)段單股負鏈RNA。感染人的亞型主要為H5N1、H9N2、H7N2、H7N7、H7N3、H7N9，其中感染H5N1、H7N9的患者病情重，病死率高。 禽流感病毒(avian influenza，AIV) 臨 床 分 型 根據(jù)致病性不同，將禽流

10、感病毒分為非致病性(NPAIV) 、低致病性(LPAIV)和高致病性(HPAIV)三大類。 NPAIV不會引起明顯癥狀，僅使染病的禽類體內(nèi)產(chǎn)生病毒抗體；LPAIV可使禽類出現(xiàn)輕度呼吸道癥狀，食量減少、產(chǎn)蛋量下降，出現(xiàn)少量死亡；HPAIV：可感染人，發(fā)病率和死亡率高。 致病性與免疫性H5N1：經(jīng)呼吸道和消化道感染，引起爆發(fā)性的急性呼吸衰竭，引起ARDS，高病死率H7N7主要引起眼角膜結(jié)膜炎H9N2引起嚴重的呼吸道感染H7N9引起重癥肺炎，高病死率臨床癥狀體溫：高于38（迅速）流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、頭痛水性腹瀉腹痛嘔吐胸膜疼痛鼻腔粘膜出血 肺炎呼吸窘迫(ARDS)禽流感病毒的遺傳變異與豬有關(guān)？

11、50%？微生物學(xué)檢查病毒分離鑒定 樣本收集：鼻咽喉拭子，鼻吸出液，氣管分泌物， 痰、 糞便、 腦脊液、 眼結(jié)膜拭子 BSL-3抗原檢測：EIA，ELISA，RT-PCR抗體檢測： 雙份血清，血凝及血凝抑制試驗防治原則 禽類接種疫苗 接觸者接種疫苗 建立原生物監(jiān)控系統(tǒng) 加強國際空間衛(wèi)生監(jiān)督 干擾素 金剛烷胺 神經(jīng)氨酸酶抑制：達菲（磷酸奧司他韋）治療預(yù)防第二節(jié) 副粘病毒（paramyxovirus）核酸不分節(jié)段，變異率低刺突：HN和F種類多：麻疹病毒、腮腺炎病毒、呼吸道合胞 病毒、副流感病毒和人類偏肺病毒麻疹病毒（measles virus）不分節(jié)段-ssRNA，有包膜，HA（血凝蛋白）和F（溶血

12、素，HL）培養(yǎng):傳代或元代細胞中增殖 多核巨細胞 、包涵體抗原性：一個血清型，8個基因群，23個基因型抵抗力：弱，56，30min滅活，脂溶劑、消毒劑、日光、紫外線敏感一、生物學(xué)性狀二、麻疹病毒的致病性與免疫性自然宿主：人試驗易感動物：猴子、狗、 小鼠傳染源：急性期患者傳播途徑：飛沫或鼻腔分泌物傳播 玩具、 用具或親密接觸發(fā)病季節(jié)：冬春季 ，0.5-5歲兒童易感麻疹病毒的致病機理 入侵（有核細胞的CD46為病毒受體）呼吸道上皮細胞內(nèi)增殖， 擴散至淋巴結(jié)入血（第一次病毒血癥）網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)增殖（淋巴組織和單核吞噬細胞）增殖后再次入血（第二次病毒血癥）多種組織、器官受累，表現(xiàn)為細胞融合成多核巨細胞，

13、核內(nèi)形成嗜酸性包涵體等麻疹的臨床表現(xiàn)麻疹病毒是麻疹的病原體高熱（體溫突然升高，達到4040.5度）、畏光三個主要的前驅(qū)癥狀：結(jié)膜炎、鼻炎、咳嗽口頰粘膜出現(xiàn)中心灰白小點，周圍紅色，稱柯氏斑（Koplik斑），隨后出現(xiàn)紅色斑丘疹，從耳部開始，23天后遍及全身4天后消退，脫屑柯氏斑麻疹的并發(fā)癥麻疹本身可自愈，但常引起嚴重的并發(fā)癥而導(dǎo)致死亡。呼吸道最為常見，如巨細胞肺炎、肺結(jié)核消化道：腹瀉、闌尾炎或盲腸炎營養(yǎng)失調(diào)中樞神經(jīng)系統(tǒng)：亞急性硬化性全腦炎（SSPE） 漸進性大腦衰退：遲鈍、癡呆、智力降低、癲癇、肌肉痙攣 、不自主運動、昏迷死亡免疫力牢固，抗H抗體和抗F抗體可抵御再感染恢復(fù)期主要為細胞免疫母親Ig

14、G抗體可保護新生兒免疫性三、麻疹的預(yù)防雞胚細胞麻疹病毒減毒活疫苗接種麻疹病毒、腮腺炎病毒和風疹病毒（MMR）三聯(lián)活疫苗我國初次種年齡為8個月，發(fā)達國家一般為15個月，7歲時再次免疫維生素A和利巴韋林腮腺炎病毒（mumps virus）有包膜，-ssRNA兩種表面包膜蛋白HN（血凝素和神經(jīng)氨酸酶的功能）和F蛋白（溶血素）傳播方式腮腺炎病毒是流行性腮腺炎的病原體，只有一個血清型，人是唯一宿主病毒通過飛沫或直接接觸傳播學(xué)齡兒童為易感人群，冬春季易感出現(xiàn)癥狀前23天及癥狀消失后9天仍有傳染性致病性潛伏期23周在上皮細胞和局部淋巴結(jié)內(nèi)增殖病毒隨血侵入腮腺及其它器官病程12周，主要癥狀為腮腺腫大，但約30

15、%的感染無癥狀并發(fā)癥有睪丸炎、卵巢炎及病毒性腦炎病后可獲牢固的免疫力腮腺炎的預(yù)防臨床癥狀直接，不需要微生物檢查接種麻疹病毒、腮腺炎病毒和風疹病毒（MMR）三聯(lián)活疫苗中藥：普濟消毒飲和連翹敗毒散呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）包膜刺突為G蛋白、 F蛋白和SH在嬰幼兒中，下呼吸道感染，引起（1歲以內(nèi)）毛細支氣管炎和支氣管肺炎，再次感染在兒童和成人引起上呼吸道感染通過手、污染物品和呼吸道傳播，易在冬季流行是醫(yī)源性感染的重要病原體致病機制侵入呼吸道后在上皮細胞內(nèi)增殖病毒不入血病理免疫造成細胞損傷支氣管壞死物與粘液、纖維蛋白粘連在一起，易導(dǎo)致氣道阻塞可并發(fā)

16、嚴重的細支氣管炎和肺炎副流感病毒（parainfluenza virus，PIV）PIV是引起嬰幼兒和兒童上呼吸道感染和嚴重下呼吸道感染的重要病原體PIV1是與哮吼相關(guān)突出的致病因子，6個月-3歲為好發(fā)年齡PIV3引起1歲以內(nèi)嬰幼兒毛細支氣管炎和肺炎，發(fā)病率僅次于呼吸道合胞病毒，占第二PIV感染后以IFN和局部抗體為主要保護因子生物學(xué)性狀 形態(tài)結(jié)構(gòu)： 球形，D=120160nm，+ssRNA，包膜糖蛋白- S：吸附位點，結(jié)合受體細胞，誘導(dǎo)膜融合- E: 包膜相關(guān)蛋白- M：跨膜蛋白，與病毒的出芽和包膜形成-血凝素-酯酶（HE）第三節(jié) 冠狀病毒（coronavirus）SARS冠狀病毒（seve

17、re acute respiratory syndrome，SARS）傳染性非典型肺炎+ssRNA，有包膜屬于第四組冠狀病毒S、E、M蛋白為主要蛋白嚴重急性呼吸道綜合癥荷蘭的一個實驗室進行病毒分離鑒定證明SARS的病原是冠狀病毒。許多WHO的實驗室已在用CDC提供的分子實驗方法確認，來自不同國家病人的標本中存在冠狀病毒。 形態(tài)結(jié)構(gòu)：圓形，D=120-160nm，+ssRNA,有包膜糖蛋白S：結(jié)合受體細胞 誘導(dǎo)細胞膜融合 誘導(dǎo)中和抗體產(chǎn)生 介導(dǎo)細胞免疫反應(yīng)糖蛋白M：病毒包膜形成 病毒釋放SARS病毒結(jié)構(gòu) 培養(yǎng)： 病毒 接種細胞CPE 抵抗力： 對熱、乙醚、酸敏感；糞、尿中存活1-2天致病性與免疫

18、性： 致病性： 傳染源：患者 傳播途徑與方式： 近距離飛沫傳播，氣溶膠 口、鼻、眼 糞 口接觸患者呼吸道分泌物傳播？ 臨床表現(xiàn)：潛伏期4-5天, 目前采用14天隔離制發(fā)熱（38 ）、頭痛、關(guān)節(jié)痛 干咳、胸悶、氣短 呼吸窘迫 肺部X光片 陰影急性呼吸窘迫、進行性呼吸衰竭、休克、DIC、心律紊亂等 平均死亡率11%，老年患者40-50%出現(xiàn)發(fā)展免疫性： 體液免疫：中和抗體，對機體有保護作用 細胞免疫：有T細胞亞群、細胞因子變化 免疫病理損傷：致T細胞、B細胞迅速凋亡 微生物學(xué)檢查： 病毒分離培養(yǎng):Vero-E6細胞 核酸檢測：RT-PCR 血清學(xué)檢查:ELISA 防治原則： 一般性預(yù)防： 切斷傳播

19、途徑：隔離患者 保護易感人群 疫苗：滅活疫苗、基因工程疫苗（安全試驗） 治療： 支持療法；抗病毒藥、抗菌藥；恢復(fù)期血清治療第四節(jié) 其他呼吸道病毒包括：腺病毒、風疹病毒、鼻病毒、 呼腸病毒腺病毒（adenovirus） 一、生物學(xué)性狀： 球形，dsDNA，裸病毒，抵抗力強二、致病性：多途徑傳播，致多種疾病 糞-口途徑呼吸道傳播接觸傳播：手-眼途徑性接觸 傳播途徑腺病毒（adenovirus） 所致疾病 呼吸道傳播：急性發(fā)熱性咽炎 咽結(jié)膜熱 肺炎 急性呼吸道感染 接觸傳播眼部感染 濾泡性結(jié)膜炎 流行性角膜炎 消化道傳播： 胃腸炎：由40、41、42型所致 又稱腸道腺病毒 兒童急性出血性膀胱炎(11,12型) 女性宮頸炎、男性尿道炎(37型)：性傳播 病毒性肝炎(1,5,7型)其他