細胞工程主題知識講座

（課標卷Ⅰ）40.【生物——選修3：當代生物科技專題】資料甲：科學家將牛生長激素基因導入小鼠受精卵中，得到了體型巨大“超級小鼠”；科學家采取農桿菌轉化法培育出轉基因煙草。資料乙：T4溶菌酶在溫度較高時易失去活性?？茖W家對編碼T4溶菌酶基因進行了改造，使其表示T4溶菌酶第3位異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?，在該半胱氨酸與第97位半胱氨酸之間形成了一個二硫鍵，提升了T4溶菌酶耐熱性。資料丙：兔甲和兔乙是同一物種兩個雌性個體，科學家將兔甲受精卵發(fā)育成胚胎移植到兔乙體內，成功產出兔甲后代，證實了同一物種胚胎可在不一樣個體體內發(fā)育?；卮鹨韵聠栴}：（1）資料甲屬于基因工程范圍。將基因表示載體導入小鼠受精卵中慣用___________

法。顯微注射細胞工程主題知識講座第1頁構建基因表示載體慣用工具酶是

_____________和_________。在培育有些轉基因植物時，慣用農桿菌轉化法，農桿菌作用是_______________________________________________。（2）資料乙屬于________工程范圍。該工程是指以分子生物學相關理論為基礎，經過基因修飾或基因合成，對__________進行改造，或制造一個__________技術。在該實例中，引發(fā)T4溶菌酶空間結構改變原因是組成該酶肽鏈

序列發(fā)生了改變。（3）資料丙屬于胚胎工程范圍。胚胎移植是指將取得早期胚胎移植到_______種、生理情況相同另一個雌性動物體內，使之繼續(xù)發(fā)育成新個體技術。在資料丙實例中，兔甲稱為

_______體，兔乙稱為______體。蛋白質

現(xiàn)有蛋白質新蛋白質氨基酸同

供受

限制性內切酶

DNA連接酶農桿菌可感染植物，將目基因轉移到受體細胞中細胞工程主題知識講座第2頁（課標卷Ⅱ）40.[生物——選修3：當代生物科技專題]（15分） 甲、乙是染色體數(shù)目相同兩種二倍體藥用植物，甲含有效成份A，乙含有效成份B。某研究小組擬培育同時含有A和B新型藥用植物。 回答以下問題：（1）為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙葉片，先用_____酶和_______酶去除細胞壁，取得含有活力______________，再用化學誘導劑誘導二者融合。形成融合細胞深入培養(yǎng)形成_______組織，然后經過__________形成完整雜種植株。這種培育技術稱為_____________________。纖維素果膠原生質體愈傷再分化植物體細胞雜交技術細胞工程主題知識講座第3頁（2）上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是___________________________________________。假設甲與乙有性雜交后代是不育，而上述雜種植株是可育，造成這種差異原因是__________________________________________________________。（3）這種雜種植株可經過制作人工種子方法來大量繁殖。經植物組織培養(yǎng)得到________________________________等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。體細胞中含有三個或三個以上染色體組個體在減數(shù)分裂過程中，前者染色體聯(lián)會異常，而后者染色體聯(lián)會正常胚狀體、頂芽、不定芽、腋芽細胞工程主題知識講座第4頁（安徽）6.下列圖為經過DNA分子雜交判定含有某特定DNA細菌克隆示意圖。以下敘述正確是（

）

A.依據(jù)培養(yǎng)皿中菌落數(shù)能夠準確計算樣品中含有活菌實際數(shù)目B.外源DNA必須位于重組質粒開啟子和終止子之間才能進行復制C.重組質粒與探針能進行分子雜交是因為DNA分子脫氧核糖和磷酸交替連接D.放射自顯影結果能夠顯示原培養(yǎng)皿中含有特定DNA細菌菌落位置D細胞工程主題知識講座第5頁（天津）9.（15分）花椰菜易受黑腐病菌危害而患黑腐病，野生黑芥含有黑腐病抗性基因。用一定劑量紫外線處理黑芥原生質體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此原生質體作為部分遺傳物質供體與完整花椰菜原生質體融合，以取得抗黑腐病雜種植株。流程以下列圖。細胞工程主題知識講座第6頁據(jù)圖回答以下問題：（1）過程①所需酶是____________________。（2）過程②后，在顯微鏡下觀察融合活細胞中有供體________存在，這一特征可作為初步篩選雜種細胞標志。（3）原生質體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度甘露醇以保持一定滲透壓，其作用是___________________。原生質體經過________再生，進而分裂和脫分化形成愈傷組織。纖維素酶和果膠酶葉綠體保持原生質體完整性細胞壁細胞工程主題知識講座第7頁（4）若分析再生植株染色體變異類型，應剪取再生植株和________植株根尖，經過、、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體形態(tài)和數(shù)目。（5）采取特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA進行PCR擴增，得到兩親本差異性條帶，可用于雜種植株判定。下列圖是用該引物對雙親及再生植株1—4進行PCR擴增結果。據(jù)圖判斷，再生植株1—4中一定是雜種植株有

。

雙親解離漂洗1、2、4細胞工程主題知識講座第8頁（6）對雜種植株進行

接種試驗，可篩選出含有高抗性雜種植株。黑腐病菌細胞工程主題知識講座第9頁（重慶）2．題2圖是單克隆抗體制備流程簡明示意圖。以下相關敘述，正確是（）A．①是從已免疫小鼠脾臟中取得效應T淋巴細胞B．②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細胞形成C．③同時含有脾臟細胞和鼠骨髓瘤細胞特征D．④是經篩選培養(yǎng)取得能分泌特異性抗體細胞群D細胞工程主題知識講座第10頁（山東）35．（8分）【生物—當代生物科技專題】科學家經過誘導黑鼠體細胞去分化取得誘導性多能干細胞（iPS），繼而利用iPS細胞培育出與黑鼠遺傳特征相同克隆鼠，流程以下：（1）從黑鼠體內取得體細胞后，對其進行首次培養(yǎng)稱為

，培養(yǎng)細胞在貼壁成長至鋪滿培養(yǎng)皿底時停頓分裂，這種現(xiàn)象稱為

。

（2）圖中2-細胞胚胎可用人工方法從灰鼠輸卵管內取得，該過程稱為

；也可從灰鼠體內取出卵子，經過

后進行早期胚胎培養(yǎng)取得。原代培養(yǎng)接觸抑制沖卵體外受精細胞工程主題知識講座第11頁（廣東）3.從某海洋動物中取得一基因，其表示產物為一個抗菌性和溶血性均較強多肽P1。當前在P1基礎上研發(fā)抗菌性強但溶血性弱多肽藥品，首先要做是（）A.合成編碼目標肽DNA片段 B.構建含目標肽DNA片段表示載體C.依據(jù)P1氨基酸序列設計多條模擬肽D.篩選出含有優(yōu)良活性模擬肽作為目標肽C細胞工程主題知識講座第12頁33．[生物-當代生物科技專題]必答題(10分)(2)在PCR過程中可檢測出cDNA中Bcl-2cDNA分子數(shù)，進而計算總mRNA中Bcl-2mRNA分子數(shù)，從而反應出Bcl-2基因轉錄水平。①圖中X表示

過程。②從基因組數(shù)據(jù)庫中查詢Bcl-2mRNA核苷酸序列，方便依據(jù)這一序列設計合成

用于PCR擴增，PCR過程第一輪循環(huán)模板是

。反轉錄引物Bcl-2cDNA細胞工程主題知識講座第13頁（浙江）6．試驗小鼠皮膚細胞培養(yǎng)（非克隆培養(yǎng)）基本過程如圖所表示。以下敘述錯誤是()

A．甲過程需要對試驗小鼠進行消毒B．乙過程對皮膚組織可用胰蛋白酶消化C．丙過程得到細胞大多含有異倍體核型D．丁過程得到細胞含有異質性C細胞工程主題知識講座第14頁（綱領卷）2.關于動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)敘述，錯誤是（）A.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不一樣B.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶C.煙草葉片離體培養(yǎng)能產生新個體，小鼠雜交瘤細胞可離體培養(yǎng)增殖D.動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒B細胞工程主題知識講座第15頁（綱領卷）5.以下實踐活動包含基因工程技術是（）A.水稻F1花藥經培養(yǎng)和染色體加倍，取得基因型純合新品種B.抗蟲小麥與矮稈小麥雜交，經過基因重組取得抗蟲矮稈小麥C.將含抗病基因重組DNA導入玉米細胞，經組織培養(yǎng)取得抗病植株D.用射線照射大豆使其基因結構發(fā)生改變，取得種子性狀發(fā)生變異大豆C細胞工程主題知識講座第16頁（江蘇）15．以下關于轉基因生物安全性敘述中，錯誤是（）A．我國已經對轉基因食品和轉基因農產品強制實施了產品標識制度B．國際上大多數(shù)國家都在轉基因食品標簽上警示性注明可能危害C．開展風險評定、預警跟蹤和風險管理是保障轉基因生物安全前提D．當前對轉基因生物安全性爭論主要集中在食用安全性和環(huán)境安全性上B細胞工程主題知識講座第17頁（江蘇）22．小鼠雜交瘤細胞表示單克隆抗體用于人體試驗時易引發(fā)過敏反應，為了克服這個缺點，可選擇性擴增抗體可變區(qū)基因（目標基因）后再重組表示。以下相關敘述正確是()A．設計擴增目標基因引物時無須考慮表示載體序列B．用PCR方法擴增目標基因時無須知道基因全部序列C．PCR體系中一定要添加從受體細胞中提取DNA聚合酶D．一定要依據(jù)目標基因編碼產物特征選擇適當受體細胞BD細胞工程主題知識講座第18頁（海南）31.【生物——選修3：當代生物科技專題】（15分）單純皰疹病毒I型(HSV-I)可引發(fā)水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術制備出抗HSV-1單克隆抗體可快速檢測HSV-1。回答以下問題：（1）在制備抗HSV-I單克隆抗體過程中，先給小鼠注射一個純化HSV-1蛋白，一段時間后，若小鼠血清中抗_________抗體檢測呈陽性，說明小鼠體內產生了________反應，再從小鼠____中獲取B淋巴細胞。將該B淋巴細胞與小鼠_______細胞融合，再經過篩選、檢測，最終可取得所需雜交瘤細胞，該細胞含有特點是_______________________。

HSV-1蛋白體液免疫脾臟骨髓瘤無限增值且產生專一抗體細胞工程主題知識講座第19頁（海南）31.【生物——選修3：當代生物科技專題】（15分）單純皰疹病毒I型(HSV-I)可引發(fā)水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術制備出抗HSV-1單克隆抗體可快速檢測HSV-1?；卮鹨韵聠栴}：（2）若要大量制備抗該蛋白單克隆抗體，可將該雜交瘤細胞注射到小鼠_____中使其增殖，再從____中提取、純化取得。（3）經過上述方法得到單克隆抗體可準確地識別這種HSV-I蛋白，其原因是該抗體含有_______和_________等特征。腹腔腹水

純度高

特異性強

細胞工程主題知識講座第20頁（上海）（六）回答以下相關遺傳信息傳遞和表示問題。（9分）圖17表示利用致病病毒M表面蛋白基因和無害病毒N，經過基因工程制作重組M病毒疫苗部分過程。其中①～⑤表示操作流程，a～h表示分子或結構。據(jù)圖回答下列問題。細胞工程主題知識講座第21頁56．基因工程除了微生物基因工程外，還有_______________。在圖17所表示過程中，獲取目標基因步驟是流程___________（用圖中編號回答）；在流程③中必需實施步驟有_________。植物基因工程、動物基因工程①、②切割質粒、將質粒與目基因重組細胞工程主題知識講座第22頁57．在圖17所表示整個過程中，用作運載體DNA來自分子_____（用圖中字母回答）。58．以下關于質粒運載體說法正確是________（多項選擇）。A．使用質粒運載體是為了防止目標基因被分解B．質粒運載體只能在與目標基因重組后進入細胞C．質粒運載體可能是從細菌或者病毒DNA改造D．質粒運載體復制和表示也遵照中心法則E．質粒運載體只有把目標基因整合到受體細胞DNA中才能表示F．沒有限制酶就無法使用質粒運載體59．據(jù)圖比較結構g和結構