放散試驗(yàn)課件

放散試驗(yàn)原理紅細(xì)胞上的抗原與血清中抗體在適合條件下發(fā)生凝集或致敏，這種結(jié)合是可逆的。如改變某些物理?xiàng)l件，抗體又可從結(jié)合的細(xì)胞上放散，再以相應(yīng)的紅細(xì)胞鑒定放散液內(nèi)抗體的種類并測(cè)定其強(qiáng)度，用以判定原來(lái)紅細(xì)胞上抗原的型別。這種方法常用于ABO亞型的鑒定、全凝集或多凝集紅細(xì)胞的定型、類B的鑒定以及新生兒溶血病的診斷等加熱放散法試劑操作注意事項(xiàng)加熱放散法試劑抗A和抗B分型血清。2%A型和B型試劑紅細(xì)胞鹽水懸液。受檢紅細(xì)胞。加熱放散法操作1.將受檢紅細(xì)胞以大量生理鹽水洗滌3次，末次洗滌后，將鹽水除盡，取壓實(shí)紅細(xì)胞l份，分別與2份抗A和抗B分型血清混合。置4℃lh，每隔10min將試管振搖1次，使充分混合。加熱放散法操作3.立刻以3000r/min離心，離心時(shí)套管內(nèi)放溫水，使溫度盡量保持在56℃，分離得的上清液即為放散液。4.將放散液用2%A型和B型試劑紅細(xì)胞鑒定抗體，即可檢出受檢紅細(xì)胞的血型。加熱放散法注意事項(xiàng)1.為了使放散液內(nèi)含有最多的抗體，吸收血清量應(yīng)加大。2.放散時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格注意溫度和時(shí)間。溫度過(guò)高紅細(xì)胞易溶解;溫度過(guò)低，抗體從紅細(xì)胞上放散不完全。3.直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性的紅細(xì)胞，如新生兒溶血病患兒或自身免疫性溶血性貧血患者，經(jīng)洗滌后即可作抗體放散試驗(yàn)。4.放散液中抗體易變性，故應(yīng)立刻進(jìn)行鑒定。若需保存，應(yīng)將抗體放散于選定的AB型血清或牛白蛋白液中。乙醚放散法試劑操作特點(diǎn)乙醚放散法試劑受檢者血清相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞(抗凝血)乙醚（分析試劑）AB血清乙醚放散法操作取具有相應(yīng)抗抗原的抗凝血，離心后吸去血漿，加大量生理鹽水，洗滌1次，離心，取壓實(shí)紅細(xì)胞備用。取受檢者血清5ml，加壓實(shí)紅細(xì)胞1ml，混勻后放在適當(dāng)溫度中1小時(shí)，在此期間要搖勻1-2次。離心。離心后取出，將上清液吸出另放1管，鑒定上清液中的抗體。乙醚放散法操作將紅細(xì)胞用鹽水洗滌3次，離心壓實(shí)紅細(xì)胞。取1體積壓實(shí)紅細(xì)胞，加1體積AB型血清或生理鹽水和2體積乙醚，顛倒搖勻10min，然后以3000r/min離心5min.離心后即分成3層，最上層是乙醚，中層是細(xì)胞基質(zhì)，下層是具有抗體的放散液，其色深紅。乙醚放散法特點(diǎn)本試驗(yàn)適用于鑒定Rh抗體。最大優(yōu)點(diǎn)用于檢查獲得性溶血性貧血，此種患者的紅細(xì)胞為