納豆激酶品種介紹課件

納豆激酶納豆激酶1、納豆激酶簡(jiǎn)介納豆激酶是第二代溶栓劑,是纖溶酶中的一種納豆激酶是在納豆發(fā)酵過(guò)程中由納豆菌(Bacillusnato)或納豆枯草桿菌(Bacillussubtilisnatto)產(chǎn)生的絲氨酸蛋白酶,它可分泌到細(xì)胞外。納豆激酶具有很強(qiáng)的纖溶活性,它不但能直接作用于纖維蛋白,而且還能激活體內(nèi)纖溶酶原,從而增加內(nèi)源性纖溶酶的量與作用,因此表現(xiàn)出較強(qiáng)的溶血栓作用。、納豆激酶簡(jiǎn)介2、納豆激酶理化性質(zhì)納豆激酶為一單鏈多肽,由275個(gè)氨基酸殘基組成氨基酸序列中含有8個(gè)賴氨酸殘基,不含半膚氨酸殘基。與其它枯草桿菌蛋白酶具有極高的同源性,與枯草桿菌BPN的同源性86%,與枯草桿菌蛋白酶DY和枯草桿菌蛋白酶Carlsberg也分別有70%和72%的同源性。理論分子量為27728Da。在實(shí)際測(cè)定中,測(cè)得的分子量結(jié)果卻因方法的不同而不同。提純的納豆激酶為白色粉末,無(wú)臭味。、納豆激酶理化性質(zhì)3、納豆激酶功效作用2.1溶解血栓納豆激酶可直接分解血栓,每克濕納豆溶栓效果相當(dāng)于尿激酶1600IU尿激酶只能注射,納豆激酶即可注射也可口服,而且可以在毛細(xì)血管中發(fā)揮作用2.2防止骨疏松納豆中包含大豆異黃酮和維生素K2。大豆異黃酮能防止骨中鈣的溶解,而維生素K2則能夠?qū)⑩}固定于骨中。大豆異黃酮和維生素K的組合能相互協(xié)力,起到強(qiáng)骨的作用。2.3抗菌作用納豆菌對(duì)抑制0-157同類的0-11130-144病原性大腸桿菌以及其它病原菌諸如,金黃色葡萄球菌、沙門氏桿菌、李斯特菌等同樣有抑制作用?？咕鷻C(jī)理在于納豆菌能夠產(chǎn)生殺菌物質(zhì)吡啶二羧酸■2.4調(diào)節(jié)腸胃、潤(rùn)腸通便、排毒養(yǎng)顏納豆菌所產(chǎn)生的吡啶二羧酸,有效殺滅、抑制腸道內(nèi)的有害菌和病毒使腸內(nèi)菌群達(dá)到一個(gè)有利健康的動(dòng)態(tài)平衡,迅速解決便秘、腸炎、腹瀉問(wèn)題,還你一個(gè)健康的腸道、納豆激酶功效作用42、納豆激酶功效作用■2.5明顯改善女性更年期綜合癥婦女更年期癥狀和絕經(jīng)后婦女易發(fā)的骨質(zhì)疏松,主要是由于體內(nèi)雌激素水平下降造成的。大豆類黃酮可以補(bǔ)充體內(nèi)雌激素不足,不但可以明顯改善更年期癥狀,而且可以防治女性骨質(zhì)疏松。再考慮到納豆排毒養(yǎng)顏和減肥作用,納豆對(duì)女性來(lái)說(shuō)是非?！?.6緩型減肥直觀降低餐后血糖納豆菌在腸內(nèi)大約能堅(jiān)持1周左右,可以促進(jìn)其它有益菌增殖。人體吸收的營(yíng)養(yǎng)就成為腸內(nèi)細(xì)菌的餌食而被吞噬,再加上納豆激酶可燃燒脂肪,由此就能減肥。還有納豆粘物質(zhì)發(fā)揮了浸溶、包裹的作用。因而納豆減肥是緩型有效的,不會(huì)反彈。然而餐后血糖值岀現(xiàn)明顯下降趨勢(shì),是非常直觀的。一是納豆菌吞噬葡萄糖和粘物質(zhì)的作用,二是納豆中的高彈性蛋白酶(或稱腴肽釃,Elastase),抑制了血糖增加。它有與豬胰臟所含的這種酶的作用,而豬胰腺的彈性蛋白酶已用于高血糖的治療藥物2.7解酒、保護(hù)肝臟納豆酶進(jìn)入人體后,通過(guò)三重渠道構(gòu)建酒精防護(hù)屏障,促進(jìn)解酒。此外,納豆中的多種活性物質(zhì)活化肝細(xì)胞,促進(jìn)肝細(xì)胞再生,提高肝功能,保護(hù)肝臟,有效預(yù)防改善脂肪肝2.8預(yù)防高血壓納豆菌食品中含有angiotensinconvertingenzyne(ACE)的inhibitor,它會(huì)阻止angiotensin變成activeform。目前對(duì)納豆激酶功效作用的研究熱點(diǎn)為溶栓作用2、納豆激酶功效作用5納豆激酶溶栓特點(diǎn)3.1溶栓劑研究介紹目前預(yù)防和治療血栓性疾病的方式主要有三種:是針對(duì)某些有高凝狀態(tài)的患者用藥物預(yù)防血栓形成;二是對(duì)己有血栓形成的患者給予抗凝治療,以阻止血栓的延伸、擴(kuò)大、避免栓塞并發(fā)癥三是采用手術(shù)或服用溶栓藥物,消除血栓、疏通血管、恢復(fù)正常血液流動(dòng),減少組織或臟器的損傷。前兩者對(duì)己形成血栓無(wú)法溶解,無(wú)法消除病患,屬于保守療法;而手術(shù)取栓技術(shù)難度和風(fēng)險(xiǎn)較大,費(fèi)用也高,除了急性栓塞造成嚴(yán)重堵塞外一般慎用,所以目前在治療諸如肺栓塞、急性心肌梗塞、腦血栓等嚴(yán)重血栓性疾病時(shí),臨床多采用溶栓劑。近年來(lái)對(duì)溶栓劑的研究方興未艾,取得了長(zhǎng)足進(jìn)步,己發(fā)展出三代溶栓劑。納豆激酶溶栓特點(diǎn)63、納豆激酶溶栓特點(diǎn)3.溶栓劑研究介紹第一代溶栓劑以尿激酶(UK)和鏈激酶(SK)為代表,50年代末和60年代初最先應(yīng)用于臨床。其主要特征是溶栓的效果較好,但纖溶特異性差,副作用大,易引發(fā)全身纖溶進(jìn),并伴有嚴(yán)重出血癥狀。。后又利用基因工程對(duì)SK肽鏈進(jìn)行改造得到了基因重組鏈激酶(Recombinantstreptokinase,tSK),其溶栓能力有所提高。。但rSK仍然是一種非選擇性纖維蛋白溶解劑第二代溶栓劑主要有單鏈尿激酶型纖溶酶原激活劑(singlechainurokinaseplasminogenactivator,Scu-PA)、組織型纖溶酶原激活劑(tissuetypeplasminogenactivator,t-PA),基因重組葡激酶(recombinantsylokinase,rSAK)和以納豆激酶于臨床,共同特征是具有它們雖然在具體溶栓性能上有所差異,但都具有相對(duì)選擇性降解纖維蛋白的作用,出血副作用較小第三代溶栓劑為提高溶栓劑的特異性,半衰期及溶栓效率,人們應(yīng)用現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)第一代和第二代溶栓劑進(jìn)行改進(jìn),得到了各方面效能有較大提高的新型溶栓劑。第三代溶栓劑主要包括突變體、嵌合體及導(dǎo)向體3大類。3、納豆激酶溶栓特點(diǎn)73、納豆激酶溶栓特點(diǎn)3.2納豆激酶溶栓特點(diǎn)雖然第三代溶栓劑具有更優(yōu)良的應(yīng)用前景,但目前大多還處于實(shí)驗(yàn)室研究階段,離投入應(yīng)用還遙未有期;而且由于涉及復(fù)雜的技術(shù)并依賴基因工程菌進(jìn)行生產(chǎn),勢(shì)必供給有限、價(jià)格不菲。納豆激酶是目前發(fā)現(xiàn)的近200種具有口服溶纖作用的物質(zhì)中最具潛力的溶纖蛋白酶在體外試驗(yàn)中可以看到納豆激酶與纖維蛋白溶酶原共同作用可以明顯的溶解纖維蛋白凝塊。在以大鼠為對(duì)象的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)過(guò)靜脈注射發(fā)現(xiàn)納豆激酶的纖溶能力是血纖維蛋白溶酶(plasmin)的4倍以上。健康人口服納豆激酶的實(shí)驗(yàn)表明,納豆激酶可以明顯縮短優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間、增加血栓溶解面積和血栓分解產(chǎn)物。因此,納豆激酶不僅可用于靜脈注射,還有很好的口服效果。在眾多第二代溶栓劑中,納豆激酶以其來(lái)源廣泛、價(jià)廉易得,溶栓活性高、特異性強(qiáng)、副作用小,可口服,使用方便、安全的優(yōu)點(diǎn),得到了國(guó)內(nèi)外研究者的青睞,成為目前溶栓劑研究的熱點(diǎn)3、納豆激酶溶栓特點(diǎn)8、納豆激酶制備方法1、傳統(tǒng)的生產(chǎn)方法納豆的傳統(tǒng)制作方法是將精選黃豆浸泡并蒸熟,然后用稻草包扎起來(lái),維持一定的溫濕度,培養(yǎng)1-2天。發(fā)酵生成一種能拉成細(xì)長(zhǎng)絲的粘稠狀的物質(zhì)即為納豆。然后用生理鹽水對(duì)納豆進(jìn)行浸提,離心提純制取納豆激酶?jìng)鹘y(tǒng)的生產(chǎn)方法多采用固態(tài)發(fā)酵的方法生產(chǎn)納豆激酶,發(fā)酵過(guò)程中染菌、散熱等問(wèn)題未能得到很好解決,納豆激酶產(chǎn)率較低,這對(duì)納豆激酶產(chǎn)品的開發(fā)及推廣造成了一定的障礙。因此人們轉(zhuǎn)而探索液體發(fā)酵生產(chǎn)的方法。日本的方法液體培養(yǎng)的最適溫度為28.5℃左右,超過(guò)32℃幾乎不顯示活性;最適碳源為麥芽糖。付利等的研究結(jié)果顯示,發(fā)酵后4d酶活性達(dá)到最大,最適碳源為木糖,最適氮源是大豆蛋白胨,最適溫度為37℃、納豆激酶制備方法9、納豆激酶制備方法2、現(xiàn)代生產(chǎn)方法目前研究的納豆激酶包括液體深層發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種來(lái)源。無(wú)論采用哪種生產(chǎn)方法其大致流程均分為兩大步驟:一是納豆的制備,二是納豆激酶的分離提純納豆的制備納豆制備工藝流程:大豆→脫皮→浸洗→滅菌→接種→發(fā)酵→納豆。納豆激酶的提純納豆激酶的分離純化一般以納豆為原料,用生理鹽水浸提二次,合并提取液,用乙醇沉淀以除去粘性物質(zhì),然后用鹽析、超濾等方法進(jìn)一步提純。為了獲得單的酶,通常用凝膠過(guò)濾或?qū)游龇蛛x來(lái)純化3、基因工程的研究國(guó)外對(duì)納豆激酶基因的研究?jī)H限于Nakamura等利用鳥槍法得到了NK基因重組到Puc19質(zhì)粒上,轉(zhuǎn)化到E.colihB101受體菌中,該基因工程菌發(fā)酵產(chǎn)物具有胞外蛋白酶活性,但沒(méi)有檢測(cè)其溶栓活性單位國(guó)內(nèi)更多的進(jìn)行納豆激酶基因表達(dá)的報(bào)道多限于微生物反應(yīng)器,相對(duì)于微生物反應(yīng)器來(lái)講,用植物和動(dòng)物作為生物反應(yīng)器來(lái)表達(dá)納豆激酶蛋白具有更大的優(yōu)勢(shì),更易于產(chǎn)業(yè)化,而到現(xiàn)在為止,國(guó)內(nèi)只有一篇分別關(guān)于納豆激酶在植物生物反應(yīng)器和動(dòng)物生物反應(yīng)器中表達(dá)的相關(guān)報(bào)道、納豆激酶制備方法10納豆激酶品種介紹課件11納豆激酶品種介紹課件12納豆激酶品種介紹課件13納豆激酶品種介紹課件14納豆激酶品種介紹課件15納豆激酶品種介紹課件16納豆激酶品種介紹課件17納豆激酶品種介紹課件18納豆激酶品種介紹課件19納豆激酶品種介紹課件20納豆激酶納豆激酶21、納豆激酶簡(jiǎn)介納豆激酶是第二代溶栓劑,是纖溶酶中的一種納豆激酶是在納豆發(fā)酵過(guò)程中由納豆菌(Bacillusnato)或納豆枯草桿菌(Bacillussubtilisnatto)產(chǎn)生的絲氨酸蛋白酶,它可分泌到細(xì)胞外。納豆激酶具有很強(qiáng)的纖溶活性,它不但能直接作用于纖維蛋白,而且還能激活體內(nèi)纖溶酶原,從而增加內(nèi)源性纖溶酶的量與作用,因此表現(xiàn)出較強(qiáng)的溶血栓作用。、納豆激酶簡(jiǎn)介22、納豆激酶理化性質(zhì)納豆激酶為一單鏈多肽,由275個(gè)氨基酸殘基組成氨基酸序列中含有8個(gè)賴氨酸殘基,不含半膚氨酸殘基。與其它枯草桿菌蛋白酶具有極高的同源性,與枯草桿菌BPN的同源性86%,與枯草桿菌蛋白酶DY和枯草桿菌蛋白酶Carlsberg也分別有70%和72%的同源性。理論分子量為27728Da。在實(shí)際測(cè)定中,測(cè)得的分子量結(jié)果卻因方法的不同而不同。提純的納豆激酶為白色粉末,無(wú)臭味。、納豆激酶理化性質(zhì)23、納豆激酶功效作用2.1溶解血栓納豆激酶可直接分解血栓,每克濕納豆溶栓效果相當(dāng)于尿激酶1600IU尿激酶只能注射,納豆激酶即可注射也可口服,而且可以在毛細(xì)血管中發(fā)揮作用2.2防止骨疏松納豆中包含大豆異黃酮和維生素K2。大豆異黃酮能防止骨中鈣的溶解,而維生素K2則能夠?qū)⑩}固定于骨中。大豆異黃酮和維生素K的組合能相互協(xié)力,起到強(qiáng)骨的作用。2.3抗菌作用納豆菌對(duì)抑制0-157同類的0-11130-144病原性大腸桿菌以及其它病原菌諸如,金黃色葡萄球菌、沙門氏桿菌、李斯特菌等同樣有抑制作用?？咕鷻C(jī)理在于納豆菌能夠產(chǎn)生殺菌物質(zhì)吡啶二羧酸■2.4調(diào)節(jié)腸胃、潤(rùn)腸通便、排毒養(yǎng)顏納豆菌所產(chǎn)生的吡啶二羧酸,有效殺滅、抑制腸道內(nèi)的有害菌和病毒使腸內(nèi)菌群達(dá)到一個(gè)有利健康的動(dòng)態(tài)平衡,迅速解決便秘、腸炎、腹瀉問(wèn)題,還你一個(gè)健康的腸道、納豆激酶功效作用242、納豆激酶功效作用■2.5明顯改善女性更年期綜合癥婦女更年期癥狀和絕經(jīng)后婦女易發(fā)的骨質(zhì)疏松,主要是由于體內(nèi)雌激素水平下降造成的。大豆類黃酮可以補(bǔ)充體內(nèi)雌激素不足,不但可以明顯改善更年期癥狀,而且可以防治女性骨質(zhì)疏松。再考慮到納豆排毒養(yǎng)顏和減肥作用,納豆對(duì)女性來(lái)說(shuō)是非?！?.6緩型減肥直觀降低餐后血糖納豆菌在腸內(nèi)大約能堅(jiān)持1周左右,可以促進(jìn)其它有益菌增殖。人體吸收的營(yíng)養(yǎng)就成為腸內(nèi)細(xì)菌的餌食而被吞噬,再加上納豆激酶可燃燒脂肪,由此就能減肥。還有納豆粘物質(zhì)發(fā)揮了浸溶、包裹的作用。因而納豆減肥是緩型有效的,不會(huì)反彈。然而餐后血糖值岀現(xiàn)明顯下降趨勢(shì),是非常直觀的。一是納豆菌吞噬葡萄糖和粘物質(zhì)的作用,二是納豆中的高彈性蛋白酶(或稱腴肽釃,Elastase),抑制了血糖增加。它有與豬胰臟所含的這種酶的作用,而豬胰腺的彈性蛋白酶已用于高血糖的治療藥物2.7解酒、保護(hù)肝臟納豆酶進(jìn)入人體后,通過(guò)三重渠道構(gòu)建酒精防護(hù)屏障,促進(jìn)解酒。此外,納豆中的多種活性物質(zhì)活化肝細(xì)胞,促進(jìn)肝細(xì)胞再生,提高肝功能,保護(hù)肝臟,有效預(yù)防改善脂肪肝2.8預(yù)防高血壓納豆菌食品中含有angiotensinconvertingenzyne(ACE)的inhibitor,它會(huì)阻止angiotensin變成activeform。目前對(duì)納豆激酶功效作用的研究熱點(diǎn)為溶栓作用2、納豆激酶功效作用25納豆激酶溶栓特點(diǎn)3.1溶栓劑研究介紹目前預(yù)防和治療血栓性疾病的方式主要有三種:是針對(duì)某些有高凝狀態(tài)的患者用藥物預(yù)防血栓形成;二是對(duì)己有血栓形成的患者給予抗凝治療,以阻止血栓的延伸、擴(kuò)大、避免栓塞并發(fā)癥三是采用手術(shù)或服用溶栓藥物,消除血栓、疏通血管、恢復(fù)正常血液流動(dòng),減少組織或臟器的損傷。前兩者對(duì)己形成血栓無(wú)法溶解,無(wú)法消除病患,屬于保守療法;而手術(shù)取栓技術(shù)難度和風(fēng)險(xiǎn)較大,費(fèi)用也高,除了急性栓塞造成嚴(yán)重堵塞外一般慎用,所以目前在治療諸如肺栓塞、急性心肌梗塞、腦血栓等嚴(yán)重血栓性疾病時(shí),臨床多采用溶栓劑。近年來(lái)對(duì)溶栓劑的研究方興未艾,取得了長(zhǎng)足進(jìn)步,己發(fā)展出三代溶栓劑。納豆激酶溶栓特點(diǎn)263、納豆激酶溶栓特點(diǎn)3.溶栓劑研究介紹第一代溶栓劑以尿激酶(UK)和鏈激酶(SK)為代表,50年代末和60年代初最先應(yīng)用于臨床。其主要特征是溶栓的效果較好,但纖溶特異性差,副作用大,易引發(fā)全身纖溶進(jìn),并伴有嚴(yán)重出血癥狀。。后又利用基因工程對(duì)SK肽鏈進(jìn)行改造得到了基因重組鏈激酶(Recombinantstreptokinase,tSK),其溶栓能力有所提高。。但rSK仍然是一種非選擇性纖維蛋白溶解劑第二代溶栓劑主要有單鏈尿激酶型纖溶酶原激活劑(singlechainurokinaseplasminogenactivator,Scu-PA)、組織型纖溶酶原激活劑(tissuetypeplasminogenactivator,t-PA),基因重組葡激酶(recombinantsylokinase,rSAK)和以納豆激酶于臨床,共同特征是具有它們雖然在具體溶栓性能上有所差異,但都具有相對(duì)選擇性降解纖維蛋白的作用,出血副作用較小第三代溶栓劑為提高溶栓劑的特異性,半衰期及溶栓效率,人們應(yīng)用現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)第一代和第二代溶栓劑進(jìn)行改進(jìn),得到了各方面效能有較大提高的新型溶栓劑。第三代溶栓劑主要包括突變體、嵌合體及導(dǎo)向體3大類。3、納豆激酶溶栓特點(diǎn)273、納豆激酶溶栓特點(diǎn)3.2納豆激酶溶栓特點(diǎn)雖然第三代溶栓劑具有更優(yōu)良的應(yīng)用前景,但目前大多還處于實(shí)驗(yàn)室研究階段,離投入應(yīng)用還遙未有期;而且由于涉及復(fù)雜的技術(shù)并依賴基因工程菌進(jìn)行生產(chǎn),勢(shì)必供給有限、價(jià)格不菲。納豆激酶是目前發(fā)現(xiàn)的近200種具有口服溶纖作用的物質(zhì)中最具潛力的溶纖蛋白酶在體外試驗(yàn)中可以看到納豆激酶與纖維蛋白溶酶原共同作用可以明顯的溶解纖維蛋白凝塊。在以大鼠為對(duì)象的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)過(guò)靜脈注射發(fā)現(xiàn)納豆激酶的纖溶能力是血纖維蛋白溶酶(plasmin)的4倍以上。健康人口服納豆激酶的實(shí)驗(yàn)表明,納豆激酶可以明顯縮短優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間、增加血栓溶解面積和血栓分解產(chǎn)物。因此,納豆激酶不僅可用于靜脈注射,還有很好的口服效果。在眾多第二代溶栓劑中,納豆激酶以其來(lái)源廣泛、價(jià)廉易得,溶栓活性高、特異性強(qiáng)、副作用小,可口服,使用方便、安全的優(yōu)點(diǎn),得到了國(guó)內(nèi)外研究者的青睞,成為目前溶栓劑研究的熱點(diǎn)3、納豆激酶溶栓特點(diǎn)28、納豆激酶制備方法1、傳統(tǒng)的生產(chǎn)方法納豆的傳統(tǒng)制作方法是將精選黃豆浸泡并蒸熟,然后用稻草包扎起來(lái),維持一定的溫濕度,培養(yǎng)1-2天。發(fā)酵生成一種能拉成細(xì)長(zhǎng)絲的粘稠狀的物質(zhì)即為納豆。然后用生理鹽水對(duì)納豆進(jìn)行浸提,離心提純制取納豆激酶?jìng)鹘y(tǒng)的生產(chǎn)方法多采用固態(tài)發(fā)酵的方法生產(chǎn)納豆激酶,發(fā)酵過(guò)程中染菌、散熱等問(wèn)題未能得到很好解決,納豆激酶產(chǎn)率較低,這對(duì)納豆激酶產(chǎn)品的開發(fā)及推廣造成了一定的障礙。因此人們轉(zhuǎn)而探索液體發(fā)酵生產(chǎn)的方法。日