普通生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)2013版試用

第一部 基礎(chǔ)實(shí) 實(shí)驗(yàn)一顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用方 實(shí)驗(yàn)二細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與代謝產(chǎn) 實(shí)驗(yàn)三細(xì)胞的多樣 實(shí)驗(yàn)四植物根和莖的結(jié) 實(shí)驗(yàn)五植物常規(guī)壓片技 實(shí)驗(yàn)六植物葉的結(jié) 實(shí)驗(yàn)七葉綠體色素的提取、分離和理化性 實(shí)驗(yàn)八煙草葉片的組織培 實(shí)驗(yàn)九的解 第二部 選做實(shí) 實(shí)驗(yàn)十家兔的解 實(shí)驗(yàn)十一植物花的結(jié)構(gòu)類型及花序類 實(shí)驗(yàn)十二植物的結(jié)構(gòu)及胚的形成和發(fā) 實(shí)驗(yàn)十三植物營養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)十四植物果實(shí)的結(jié)構(gòu)與類 實(shí)驗(yàn)十五血細(xì)胞計(jì)數(shù)及大小測(cè) 實(shí)驗(yàn)十六血細(xì)胞種類的觀察及血型鑒 實(shí)驗(yàn)十七紅細(xì)胞膜通透性觀 實(shí)驗(yàn)十八植物組織的水勢(shì)和滲透 實(shí)驗(yàn)十九花粉萌發(fā)及花粉管生長觀 實(shí)驗(yàn)二十番紅—固綠二重染制作百合子房永久切 實(shí)驗(yàn)二十一用PCR擴(kuò)增的方法鑒別不同物種來源的肌 實(shí)驗(yàn)二十二家雞的解 附 附 生物繪圖 附 常用顯微制片 附 動(dòng)物解剖的基本知 實(shí)驗(yàn)一一、目的與要(一)(二)二、材料與用三、實(shí)驗(yàn)操作與觀(一)微鏡，并學(xué)會(huì)最基本的和保養(yǎng)方法。鏡等。根據(jù)其成像技術(shù)可分為相差顯微鏡、顯微鏡、微分反差顯微1又可分為掃描電鏡、透射電鏡、高壓電鏡、隧道電鏡等。(二)機(jī)械部分：用于裝置與調(diào)節(jié)光學(xué)部分。包括以下結(jié)構(gòu)（1.14510×，40×，100×，載物臺(tái)：用于放置標(biāo)本有一鏡臺(tái)孔，臺(tái)上有一標(biāo)本夾，可夾固，載物臺(tái)縱向移動(dòng)手輪（Y軸載物臺(tái)橫向移動(dòng)手輪（X軸圖 NikonYS100顯微鏡機(jī)械部光學(xué)部分：包括成像的光學(xué)系統(tǒng)(目鏡、物鏡)和照明光學(xué)系統(tǒng)(1.2目鏡：一般光學(xué)顯微鏡均有2—3對(duì)放大率不同的目鏡，上面分別標(biāo)有5×、10×、16×，可根據(jù)觀察時(shí)的不同要求，更換放大率不同的目鏡。目4×、10×(低倍鏡)、40×(高倍鏡)100×(油鏡)10×40400400聚光器位于載物臺(tái)下由一到數(shù)塊透鏡組成用于將光線在被物光

目圖 NikonYS100顯微鏡光學(xué)部(三)5—6cm用10×物鏡對(duì)焦 將10×物鏡對(duì)準(zhǔn)鏡臺(tái)孔（當(dāng)旋轉(zhuǎn)到位時(shí)，物鏡會(huì)自動(dòng)卡位） 時(shí)調(diào)節(jié)聚光器的垂直位置等，直到整個(gè)視野中得到均勻、明亮的光度為止 （屈光度調(diào)節(jié)環(huán)（槽40×4×10次，正確調(diào)節(jié)視度。到視野。(1)四、思(一)(二顯微鏡的粗調(diào)焦手輪、微調(diào)焦手輪如何協(xié)調(diào)使用？如微調(diào)焦手輪不顯微鏡術(shù)數(shù)值孔徑在決定聚光器和物鏡的效率時(shí)，是個(gè)重要的因素。它用公式表示：N.A.=nsinαn表示物鏡和標(biāo)本間媒介的折光率（空氣=1，油≈1.5）10倍，目鏡視場(chǎng)直徑18mm實(shí)際視/焦焦深（μm）=nλ/(2×N.A.)+n×1000/(7×M×N.A.)上式為假定人眼辨率為2時(shí)，焦深的近似值。M實(shí)驗(yàn)二一、目的與要二、材料與用洋蔥鱗莖紫鴨跖草葉片紅辣椒(或胡蘿卜)馬鈴薯塊莖花生(或神經(jīng)節(jié)制片、大白鼠肝臟制片、馬蛔蟲制片、柿胚乳細(xì)胞的永久制片。蒸餾水、碘一碘化鉀溶液、蘇丹Ⅲ溶液、牙簽、0.1%甲基藍(lán)染液、0.9%氯化鈉溶液、0.02%B染液、甘油、載玻片、蓋玻片、吸詹納斯綠B50mgB5ml（30－40℃）1％。三、實(shí)驗(yàn)操作與觀(一)植物細(xì)胞的基本結(jié)1~2發(fā)現(xiàn)有的細(xì)胞核位于細(xì)胞的，仔細(xì)思考這是為什么？在觀察過程中，有染色0.蓋玻片一側(cè)，從另一側(cè)用小片吸水紙吸引，將染液引到標(biāo)本上，1~2（1鉀溶液染色，染色后，細(xì)胞核呈深黃色，細(xì)胞質(zhì)呈淡黃色。葉綠體：是含有葉綠素的綠色，能進(jìn)行光合作用，主要存在于植物體的綠色部分，尤其葉片中。取玉簪葉片片橫切，取葉肉部分做同，而呈黃色、橙色或橙紅色，常存在于成果肉細(xì)胞或黃紅色花瓣里。白色體：是不含色素的最小，無色，多存在于細(xì)胞或不細(xì)胞壁明顯增厚而細(xì)胞腔很小，其內(nèi)的原生往往被染成深色或在制片的為胞間連絲。它們把相鄰兩細(xì)胞的原生聯(lián)系起來。撕去辣椒果實(shí)的表皮一塊，并從果肉一側(cè)面刀片刮取果肉細(xì)胞，制(二)植物細(xì)胞的后含細(xì)胞在生長發(fā)育以及成過程中，由于代謝活動(dòng)而產(chǎn)生的一些代謝產(chǎn)用徒手切片法（119頁）將馬鈴薯塊莖切成小薄片，在載玻片上制成臨視野中可以看到不同大小的顆粒團(tuán)，選擇顆粒稀疏而且互不處，用高倍鏡觀察。淀粉粒卵圓形，大小不等并且有偏心輪紋（圖3，需要調(diào)節(jié)光亮度取花生(或向日葵)去皮用徒手切的方法切成小薄片制成臨時(shí)脂肪滴可被染成橙紅色（4許多種類的果實(shí)和中常含有貯藏的蛋白質(zhì)，常以無定形或結(jié)晶狀態(tài)取蓖麻去皮，切成小薄片，浸入盛有蒸餾水的培養(yǎng)皿中，用鑷子選臨時(shí)裝片。觀察時(shí)，仍先用低倍鏡，選擇較薄的地方移至視野。觀察菜？，（圖5，在糊粉粒中可以看到圓形的或晶體的結(jié)構(gòu)。為清楚地區(qū)分糊粉粒和20分鐘，待組織透明，片切成小片制成裝片，在顯微鏡下觀察可見閃亮的立方形晶體。pH值十分敏感，在酸性條件下呈紅色，堿性時(shí)呈藍(lán)色，可使植物的者在鏡下可見有色顆粒，而前者是均一的。紫皮的洋蔥鱗莖，則更為方(三)動(dòng)物細(xì)胞的結(jié)力過猛)0.9%氯化鈉0.1%甲基藍(lán)染液染色，方法同前。如此，可將細(xì)胞染成淺藍(lán)色，核染色較深。注意染液不可加得太多，以免妨礙觀察（2用滴管吸取10%詹納斯綠B染液，滴1－2滴于干凈的載玻片，同前刮取口腔上皮細(xì)胞置于染液中，3710－15min，然后加上蓋玻片，高爾基體（示范取脊神經(jīng)節(jié)鍍銀法制片，在低倍鏡下可見淡黃色神經(jīng)細(xì)胞有一的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，這便是高爾基體（圖6，在沒有看到細(xì)胞核的細(xì)胞中，高爾基中心體（示范中心體包括中心球及中心粒，取馬蛔蟲制片，在低倍鏡上觀察可見有許多圖象，在有絲中期，細(xì)胞長軸兩極各有一個(gè)不的球形透兩極均看不見(8)。肝糖原（示范1-2個(gè)核，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有許多紅色顆粒，即肝糖原，肝糖原有時(shí)偏于細(xì)胞一側(cè)(9)五、作2-32-32-3六、思實(shí)驗(yàn)三一、目的與二、材料與用片、神經(jīng)細(xì)胞分離裝片、哺乳動(dòng)物切片及涂片、人血涂片以及高爾三、實(shí)驗(yàn)操作與觀（一）分生組織具有細(xì)胞的能力，它們位于植物體生長的部位，如根尖、同構(gòu)成了根尖的分生區(qū)。分生組織細(xì)胞能力強(qiáng)，細(xì)胞體積小，多為等直薄壁組織細(xì)胞的特點(diǎn)是：細(xì)胞較大，壁薄，原生中有大液泡，一般另一種是成對(duì)的腎形細(xì)（組成氣孔器有明顯的葉綠體也有細(xì)胞核。輸導(dǎo)組織的功能是水分、有機(jī)物質(zhì)。輸導(dǎo)組織的細(xì)胞往往集在一起篩管旁有小形長細(xì)胞為伴胞，篩管作用為營養(yǎng)物質(zhì)。機(jī)械組織的作用主要是支持，它使植物有機(jī)體及其更具堅(jiān)固性和穩(wěn)（二）上皮組織細(xì)胞（單層扁平上皮（H·E染色單層柱狀上皮（青蛙小腸、H·E染色纖毛上皮（氣管內(nèi)皮、平滑肌分離裝片（小腸壁平滑肌細(xì)胞呈長梭形，細(xì)胞核橢圓形，位于纖維的最寬部份，大細(xì)胞全長的中段，不同的平滑肌纖維長度差異較大，20－500m不等。骨胳?。ㄨF礬蘇木精肌纖維內(nèi)有大量卵圓形細(xì)胞核（可多至幾十個(gè)，上百個(gè)）上閏盤折光強(qiáng)，，是心肌纖維相互嵌合的連接線。豬（貓）肝細(xì)胞多邊形的較大細(xì)胞，胞有一圓形核，有時(shí)可見2、3核的多核現(xiàn)象1／40。色素細(xì)胞（魚鱗不規(guī)則形細(xì)胞，有數(shù)個(gè)短而粗的突起，內(nèi)有圓形核（不易看清軟骨組織細(xì)胞（透明軟骨裝片：觀察切片及裝片，有短粗的頭（核物質(zhì)于四、示四、作(一)(二)五、思(一)(二)實(shí)驗(yàn)四一、目的與要（一）了解雙子葉植物及葉植物根的初生結(jié)構(gòu)和次生結(jié)構(gòu)（二）了解雙葉子植物及葉植物莖的初生結(jié)構(gòu)和次生結(jié)構(gòu)二、材料與用(一)取蠶豆幼根橫切制片(10)上占有較大比例；皮層最外層細(xì)胞與表接，排列整齊，為外皮層；靠近1～2（二）太明顯。注意中柱鞘的形成層產(chǎn)生的射線比較寬。根毛區(qū)域殘余的表皮下，可看到2-3層皮層細(xì)胞，細(xì)胞壁被栓質(zhì)，(三)(13)：髓：在莖，由一些較大的薄壁細(xì)胞組成，具有細(xì)胞間隙(四)化形成次生木質(zhì)部細(xì)胞，但后者要比前者分化形成的多。（五）葉植物根的結(jié)再加粗，所以只有初生構(gòu)造。取玉米根橫切制片由外向內(nèi)觀察(11)：導(dǎo)管口徑較大。在維管柱有薄壁細(xì)胞構(gòu)成的髓(六)葉植物莖的結(jié)制片(14)，在低倍鏡下由外向內(nèi)觀察可見：胞是細(xì)胞，旁邊的較大細(xì)胞為副衛(wèi)細(xì)胞。若選新鮮材料，可以直接刮取束較??；在莖的部分分布較少，但每個(gè)束較大，在橫切片中，皮層、維管柱及髓之間沒有明顯界限。每個(gè)維管束由三部分組成（153～4個(gè)導(dǎo)管組成，染成紅色。四、示（一）（二）取椴樹或木槿莖橫切制片從外向內(nèi)觀察，可見如下結(jié)構(gòu)(②木栓形成層細(xì)胞由外皮層細(xì)胞恢復(fù)能力以后形成的木栓形成層細(xì)胞在橫切面上扁平，細(xì)胞質(zhì)濃，只有一層細(xì)胞。向外分化形成木栓層，向內(nèi)分化形成栓內(nèi)層。1～2層，細(xì)胞質(zhì)較濃，一般染色較深。變化不大所以看上去象有4～5層之多形成層細(xì)胞均較小近方形。髓：在莖的，由薄壁細(xì)胞構(gòu)成，有時(shí)某些細(xì)胞中亦能看到晶體(三)被染成紅色，導(dǎo)管的螺紋清晰可見，注意螺紋形狀(17)。五、作(一)1/4(二)1/4(三)1/4(四)1/4六、思(一)(二)雙子葉植物根與葉植物根、莖在結(jié)構(gòu)上有何區(qū)別(三)（四）雙子葉植物莖 葉植物莖在結(jié)構(gòu)上有何主要區(qū)別實(shí)驗(yàn)五植物常規(guī)壓片技驗(yàn)?zāi)坑^察有絲過程中的動(dòng)態(tài)變化驗(yàn)原具有自我能力是生命的一個(gè)基本特征。單細(xì)胞生物可以通過細(xì)胞分裂直接自身，而多細(xì)胞生物從卵開始，經(jīng)過有絲使細(xì)胞不斷增殖并經(jīng)過一系列復(fù)雜的分化過程形成新一代。對(duì)于多細(xì)胞生物來說，無論是體細(xì)胞還是生殖細(xì)胞一般都是通過有絲實(shí)現(xiàn)細(xì)胞增殖的，而生殖細(xì)胞在形成配子時(shí)才經(jīng)歷減數(shù)的細(xì)胞形式。一般來說，只要是能夠進(jìn)行細(xì)胞的植物組織或是單個(gè)細(xì)胞都可以作織內(nèi)不斷進(jìn)行著細(xì)胞。只要我們適時(shí)取材、并加以固定、解離、染色等處理后制成玻片標(biāo)本，即可以利用顯微鏡對(duì)有絲分離和進(jìn)行觀驗(yàn)用具及驗(yàn)方球莖接觸水面，26℃1-2cm死，使蛋白質(zhì)沉淀，并盡量使其保持原有狀態(tài)。將生活的細(xì)胞固定義在實(shí)踐中，人們摸索出不同植物的根尖在某時(shí)刻會(huì)出現(xiàn)有絲高峰，在期取材效果最佳。下表列出了若干植物根尖取材的最佳時(shí)間表 幾種植物根尖的最佳取材時(shí)數(shù)目玉米(Zea豌豆(Pisum10:00-蠶豆(Vicia小麥(Triticum10:00-水稻(Oryza15:00-洋蔥(Allium10:00-11:00,15:00-大蒜(A.10:00-11:00,15:00-萵苣(Lactuca10:30-牡丹(Paeonia9:00-芍藥(P.14:30-8:00-①carnoy：1+315-20min1h24h，70%乙醇中保存，4℃冰箱放置可以長期保存。固定后的根尖是保存在70%乙醇中的解離時(shí)先用吸管吸出70%乙醇℃10min。Schiff試劑是孚爾根反應(yīng)（Feulgenreaction）的染色劑。他的基本原DNA嘌呤除去從而使脫氧核糖的醛基游離游離的醛基再與Schiff試劑反Schiff試劑的配制方法：將0.5g的堿性品紅溶于100ml煮沸的蒸餾水中，充分?jǐn)?2-24h一般情況下經(jīng)過固定的材料馬上染色效果較好染色清晰而且易于分散。若經(jīng)體積分?jǐn)?shù)70%的乙醇長期保存后，細(xì)胞質(zhì)也容易，并且染試劑，室溫下暗反應(yīng)10-15min。具體的染色時(shí)間要視根尖程度而定。需要在實(shí)驗(yàn)中摸索我們推薦法供大家參考用一個(gè)雙面刀片插到一般來說在制成的玻片標(biāo)本中染色清晰而且分散較好的中 ①在一張制片中有較多的處于期的細(xì)胞②分散而不④較深，細(xì)胞質(zhì)不或很淺，背景清晰無過多雜質(zhì)有絲各期觀有絲的全過程可分為間期、前期、中期、后期和末期等階段， ，（胞核內(nèi)出現(xiàn)了不均勻的狀態(tài)（即細(xì)微的的絲以后出現(xiàn)的小塊或顆粒（絲縮短變粗逐漸成為形態(tài)清楚的但成對(duì)現(xiàn)象不易觀察到。同時(shí)核膜、核仁存在或。，（，③中期：紡錘絲明顯可見到細(xì)胞，著絲點(diǎn)排列在赤道板上，常呈彎曲狀，并縱裂為兩個(gè)染色單體。此時(shí)，僅著絲點(diǎn)連接，彼此松開，這時(shí)是觀察的形態(tài)和數(shù)目的最好時(shí)機(jī)。， 間 前 前中 中 后后 末 末細(xì)胞的兩極移動(dòng)成為兩組于是每個(gè)染色單體就成為獨(dú)立的因此，每組仍具有與母細(xì)胞數(shù)目相同的。⑤末期移到兩極后的成為密集的一團(tuán)并逐漸變成細(xì)長而離散，的過程結(jié)束了。五、思洋蔥根尖細(xì)胞有幾條？各的長短和著絲點(diǎn)位置是否有絲哪個(gè)階段對(duì)觀察數(shù)目和形態(tài)最為有利參考文楊繼等，植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，：高等教育，2000張貴友等，普通遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，：，2003實(shí)驗(yàn)六一、目的與要二、材料與用三、實(shí)驗(yàn)操作及觀(一)葉的初生保護(hù)組織——在表皮細(xì)胞之間有氣孔器，氣孔器是由成對(duì)的細(xì)胞和它們之間的開口共同組成的。細(xì)胞呈腎形（禾本科植物呈腎形，有細(xì)胞核，也有葉綠體，細(xì)胞的內(nèi)壁略厚，兩側(cè)細(xì)胞之間的窄縫構(gòu)成氣孔器的開口。細(xì)皮細(xì)胞呈縱向排列，細(xì)胞整齊；氣孔器除有細(xì)胞外，有時(shí)在其外側(cè)還有(二)等幾部分基本結(jié)構(gòu)(20)，然后再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察其詳細(xì)結(jié)構(gòu)。的細(xì)胞相對(duì)較小。在氣孔器的下方，有較大的細(xì)胞間隙，稱孔下室。2～3側(cè)脈和細(xì)脈。先在低倍鏡下觀察葉脈的分布狀況，高倍鏡仔細(xì)觀察主脈韌皮部。有的地方還可以觀察到葉脈的縱切面,為什么？如何判斷？(三)C4取玉米葉橫切制片，觀察如下結(jié)構(gòu)(環(huán)”狀結(jié)構(gòu)，這種結(jié)構(gòu)是C4植物的特征。C3圖(四)針葉植物葉的結(jié)構(gòu)（示范針葉植物具有早生植物的特征，取松葉橫切制片觀察(小的細(xì)胞。冬季取材松葉制片還可觀察到氣孔為樹脂所閉塞，其作用是壁向內(nèi)折陷，形成許多，增加了細(xì)胞壁表面積，有利于光合作用，細(xì)胞它們是子植物特有的組織。在維管束和內(nèi)皮層之間的細(xì)胞為轉(zhuǎn)輸組織，由間的有關(guān)。五、作（一）（二）六、思（一）雙子葉植物和葉植物葉的結(jié)構(gòu)有何不同（二）C3植物和C4（三）實(shí)驗(yàn)七Ⅰ．提一、實(shí)驗(yàn)?zāi)慷?shí)驗(yàn)原葉綠體中含有綠色素（ab）和黃色素（包括胡蘿類色素都不溶于水，而溶于，故可用乙醇、乙酸乙酯等提三、實(shí)驗(yàn)材料與用儀器設(shè)備天平、研缽，漏斗、三角瓶、剪刀，薄層色譜硅膠預(yù)制（V/V四、實(shí)驗(yàn)步（一）2研缽中加入少量CaCO3（綠豆粒大小2~3ml95%乙醇，研磨至糊狀，再加5ml95%乙醇。取濾紙1張，置漏斗中，用乙醇濕潤，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，殘?jiān)儆?ml95%乙醇沖洗，直至濾紙和殘?jiān)袩o綠色為如無新鮮葉片，也可用事先制好的葉干粉提取，先用105℃殺青，再在80℃下烘干研成粉末密閉用時(shí)稱葉粉1g放入小燒杯中加95%10-15ml（二）0.5cm到分離的各種色素；葉綠素a為藍(lán)綠色，葉綠素b為黃綠色，葉黃素為鮮并計(jì)算出各色素的Rf值。Rf圖1實(shí)驗(yàn)裝 圖2實(shí)驗(yàn)結(jié)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)?/p>

II.二、實(shí)驗(yàn)原

+H

+CH3OH+20

葉綠素中的鎂易被環(huán)境中的H+三、實(shí)驗(yàn)材料和用醋酸-50%100ml6g，再加蒸餾水4倍稀釋而成。KOH-甲醇溶液：20gKOH100ml甲醇中，過濾后盛于塞有橡皮四、實(shí)驗(yàn)步（一）11140min（二）110ml3ml濃的葉綠體色素乙醇提取液，在直射光（三）皂化作用（綠色素與黃色素的分離在做過熒光現(xiàn)象觀察的葉綠體色素乙醇提液的試管中，加入1.0ml20%KOH-（2）加入3ml苯，搖勻，再沿試管壁慢慢加入1ml左右蒸溜水，輕輕混ab（以（四）H+和Cu2+對(duì)葉綠素分子中Mg2+的取代作5ml5ml5%l變化。水浴加熱，5分鐘左右觀察并記錄葉片顏色的變化，半小時(shí)后再次觀察，直III葉綠素含量的測(cè)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)慷?、?shí)驗(yàn)原根據(jù)Beer-Lambert定律，一束單色光透過溶液時(shí)，光被吸收。吸收的程度即吸光度A與其中溶質(zhì)濃度CL成正比，即：A=式中：E為吸收系數(shù)。吸收系數(shù)常用兩種方式表示，即摩爾吸收系數(shù)和混合液在某一特定波長下的總吸光度等于其各吸光組分在此波長下吸光度的綜合，即吸光度具有加和性。所以，只要在三個(gè)特定波長下測(cè)定葉綠A、b卜素的干擾。根據(jù)Arnon法，葉綠素a、b的80%提取液在紅光區(qū)的最大吸收峰分別為663nm645nm，又知在波長663nm下，葉綠素a、b在該溶液中的吸光系數(shù)分別為82.049.27，在波長645nm下分別為16.7545.60，可根A663=82.04Ca+ A645=16.75Ca+ （1的吸光度，Ca、Cbab的濃度，以mg/L為單位。Ca=12.72A663- Cb=22.88A645- 將CaCbCT=Ca+Cb=20.29A645+ Lichtenthaler等對(duì)上述Arnon法進(jìn)行了修正，提出了80%提取液中Ca=12.21A663–2.81 Cb=20.13A646–5.03 1000A470–3.27Ca–CX·C 式中：Ca、Cbab的濃度；CX·C為類胡蘿卜素的總濃度；A663、A646和A470分別為葉綠體色素提取液在波長663nm、646nm470nm下的吸光度。有差異，計(jì)算公式也有所不同。葉綠素a、b在95%乙醇中最大吸收峰的波長分別為665nm和649nm，類胡蘿卜素為470nm，可按上述方法列出以下關(guān)系Ca=13.95A665– Cb=24.96A649– CX·C

1000A470–2.05Ca–

三、實(shí)驗(yàn)材料與用0.01g95%乙醇（或80%四、實(shí)驗(yàn)步1g波長665nm649nm和470nm下測(cè)定吸光度光光度計(jì)適合測(cè)定的吸光度值0.4-0.8，超出范圍時(shí)需對(duì)樣品進(jìn)行稀釋。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算與（mg/L

儀器型號(hào) 量量吸光度 123注意事1在低溫下發(fā)生皂化反應(yīng)的葉綠體色素溶液易而出現(xiàn)白色絮狀物，溶液渾濁，且不分層?？杉ち覔u勻，放在30~40℃水浴中加熱，溶液很快分層，絮狀物，溶液變得清澈透明。3、葉綠體色素提取液不能混濁?？稍?10nm或750nm波長下測(cè)量吸光a5%，否則應(yīng)重新過六、思用不含水的如無水乙醇、無水等提取植物材料，特別CaCO3實(shí)驗(yàn)八一、目的與學(xué)習(xí)用生長調(diào)節(jié)劑對(duì)植物發(fā)生的誘導(dǎo)方法二、實(shí)驗(yàn)原（或細(xì)胞的技術(shù)植物組織培養(yǎng)的理論依據(jù)是植物細(xì)胞具有全能性。生脫分化成為重新具有能力的細(xì)胞并能重新生長發(fā)育成完整的植株。愈傷組織是指一個(gè)離體的細(xì)胞、一塊組織或一個(gè)的細(xì)胞，通過脫分化不斷、增生子細(xì)胞，這些細(xì)胞快，結(jié)構(gòu)疏松，顏色淺而透明，逐 三、材料和30ml500ml100ml培養(yǎng)瓶、平皿膜、高壓橡皮筋、試紙（PH5.4-7，報(bào)紙等。試劑：MS培養(yǎng)基、0.5mol/LNaOH、1mol/LHCl。0.1mg/mlNAA、0.1mg/ml6-BA、0.1mg/ml2,4-D四、操作步（一）誘導(dǎo)培養(yǎng)基配制（見表MS儲(chǔ)液（儲(chǔ)液配置見附表建議加完大量元素后先加水（3/444瓶培養(yǎng)基（1組）的配置方案。 表 誘導(dǎo)培養(yǎng)基配制 成 實(shí)際稱取大量元素 蒸餾 微量元素 有機(jī)成分 鐵鹽 蔗

pH 瓊 （3%（m/v實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中包括1個(gè)對(duì)照組和3個(gè)處理組對(duì)照組（t0）30mlMS。誘導(dǎo)生根組（t1）30m+0.03ml6-BA儲(chǔ)液+0.15mlNAA儲(chǔ)液。誘導(dǎo)生芽組(t2)30m+0.15ml6-BA儲(chǔ)液+0.03mlNAA儲(chǔ)液。誘導(dǎo)生愈傷組(t3)30MS+0.03ml2,4-D促進(jìn)植物生長；乙烯抑制植物生長；脫落酸促進(jìn)成熟NAA2，4-D屬于人工合成的生長素類。6-BA屬于人工合成的細(xì)胞素類NAA可用1-2ml0.1mol/LNaOH助溶，加水至終濃度為0.1mg/ml。高溫高壓下穩(wěn)定，4-5℃暗處保存于棕色瓶。細(xì)胞素6-BA先加0.5或1mol/L的HCl助溶，加水定容至終濃度調(diào)pH=5.8pH（0.8%（m/v）（二）12015min30min用肥皂洗手和手腕。進(jìn)入無菌間，先用70%或新潔爾滅噴手。ba 圖 不同生長調(diào)節(jié)劑對(duì)煙草葉片生長的誘導(dǎo)結(jié)a、接種一周時(shí)的生長情況；b、接種4周誘導(dǎo)生根組；c4周誘導(dǎo)生芽組；d4周誘導(dǎo)愈（三）接坐在超凈工作臺(tái)前用70%棉球擦拭雙手培養(yǎng)瓶和超凈臺(tái)面待手上的干了，點(diǎn)燃燈將鑷子剪刀在燈外焰上灼燒冷卻后剪取葉片約1平方厘米，注意：無菌操作時(shí)不要，以免污染。用對(duì)雙手時(shí)，務(wù)必待徹底揮發(fā)后再靠近4周，25℃，16870%-80%3六思考題6-BA、NAA實(shí)驗(yàn)九的解一、目的與要1、認(rèn)識(shí)的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，從而了解兩棲綱動(dòng)物的一般特征2、學(xué)習(xí)解剖動(dòng)物的方法進(jìn)而了解動(dòng)物體各系統(tǒng)的整體和局部的關(guān)二、材料與用、、三、實(shí)驗(yàn)操作及觀(一)取(Bufobufo)觀察體分為頭軀干和四肢體表皮膚露，

70四肢：前肢四指，雄第1~3指基部有黑色橢圓形婚疣，交配時(shí)處死之前可觀察背側(cè)兩腿基部有一對(duì)后淋巴心在微微跳（圖淋巴心屬淋巴系統(tǒng)。(二)穿刺法，即用解剖針從的枕骨大孔插入，破壞其延腦致死。具體左手執(zhí)，以左手食指與中指兩前肢，用第四指與小指尖向前插入顱腔，并用針攪動(dòng)破壞其腦，然后將針抽回,再由枕骨大孔處向10g/LMS-222（魚安寧）的水溶液，將10-15(三)將處死后放在解剖蠟盤中，用剪刀沿腹壁中線稍偏右側(cè)剪開腹壁，官系統(tǒng)（72囊中，與體腔完全。心臟可分為以下四部分：①心室：一個(gè)，，壁較厚④靜脈竇：在心臟背面；為一呈三角形的囊，兩前角各接受一前大靜為左右三支，由內(nèi)向外為（73脈竇進(jìn)入右心房（74肝靜脈：，從肝臟通出，開口于后大靜脈接近靜脈竇的部位。4~6根，每根各自通入后大靜脈。生殖靜脈：雌體為靜脈，于一對(duì)。雄體為靜脈，于一對(duì)③前點(diǎn)的地方，便與腹靜脈匯合流入肝。成年為肺皮呼吸，肺呼吸的有鼻腔、口腔、喉氣管室和肺（77：鼻腔與口腔呼吸時(shí)空氣自外鼻孔進(jìn)入鼻腔經(jīng)內(nèi)鼻孔而達(dá)口：的消化系統(tǒng)由消化道及其附屬的組成，消化道包括口腔、食道、胃、腸和泄殖腔等；包括肝臟和胰腺。(1)①口腔：用剪刀剪開的口角，使口張大，令口腔全部露出，可觀察11對(duì)孔，與中耳腔相通。喉門：舌后方腹面隆起部分，有一裂縫即喉門。聲囊孔：在多數(shù)種類雄的口腔底部，耳咽管稍前方，有1對(duì)小孔即④腸：的腸分小腸與大腸。小腸又由十二指腸和回腸組成，起于胃大腸的部分為回腸。大大而陡直，開口于泄殖腔。⑤泄殖腔較大腸短小為匯納輸尿管和(雌)的管道。泄殖腔的腹面有開口。為雌雄異體，觀察時(shí)可互換不同的解剖材料75①腎臟：為1對(duì)暗紅色扁平，位于體腔的后部，貼近脊柱的兩側(cè)。一條細(xì)長之管道，為的。一總輸尿管后輸入泄殖腔背壁，此管兼充之用。與季節(jié)的不同而有差異。自發(fā)出的輸精小管與輸尿管相通。化很大，生殖季節(jié)脂肪體的體積很小，冬眠時(shí)期，其體積很大。：⑥畢氏管器前方有一綠豆大小，形狀不規(guī)則的，即畢氏：雌性泄殖系統(tǒng)雌的排泄系統(tǒng)與雄相似但其輸尿管只作輸送尿液之用。生殖系統(tǒng)包括1對(duì)，1對(duì)和（圖76極度膨大，內(nèi)有許多黑色球形卵，外壁向外有許多。底的旁邊，狀似漏斗；后端膨大成囊狀，稱為 ”開口于泄腔的背面。成熟之卵由壁破裂而出，經(jīng)體腔從喇叭口送入，在輸卵管中包上一種膠質(zhì)的膜，再輸入，俟積累有相當(dāng)數(shù)量時(shí)再由送入泄殖腔，排出體外。當(dāng)產(chǎn)卵時(shí)雄性抱住雌性，于水中，進(jìn)行體外四、示(一)在顯微鏡下觀察的皮膚切片，可見皮膚由表皮和真皮組成，皮膚下(二)取剛剛處死的，剝?nèi)テつw，置于解剖盤內(nèi)。觀察教師用電刺激有關(guān)()撕去皮膚的，按圖識(shí)別每塊肌肉，找出坐骨神經(jīng)的大腿部分。用玻璃針剝離，剪去神經(jīng)干上的所有分支，然后從脊柱根部將坐骨神經(jīng)剪下五、作注解剖六、思第二部分選做實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)十一、目的與要（一）了解動(dòng)物體各系統(tǒng)的局部與整體的關(guān)系（二）二、材料和用三、實(shí)驗(yàn)操作及觀胎生和哺乳，第二、具有發(fā)達(dá)的神經(jīng)系統(tǒng)和感覺，第三、恒溫，第四、整個(gè)機(jī)體代謝系統(tǒng)的水平最高，消化系統(tǒng)分化程度高，發(fā)達(dá)；呼吸器（一）家兔（Oryctolaguscuniculus(Linnaeus)）的身體分為頭、頸、軀干、尾（二），血管充盈明顯，然后取注射器吸入10ml空氣，沿血管向心方向自耳根，（1）（2）（三）離。若有部位，應(yīng)及時(shí)用棉線結(jié)扎或用止血鉗止血。的毛，然后用鑷子自開口稍前處，提起皮膚，沿腹中線自后向前將皮突，然后沿肋骨后緣向兩側(cè)橫向剪開，出腹腔，同時(shí)觀察腹腔內(nèi)各鎖骨及肋骨上的肌肉，完全出胸骨；再沿胸骨一側(cè)用骨剪剪斷肋骨；然端剪斷，方可打開全部胸腔。注意，剪至第一、二根肋骨時(shí)要十分，不大動(dòng)脈弓為一粗大的血管由伸出向前轉(zhuǎn)至左側(cè)后折向后方。肺動(dòng)脈：由發(fā)出，隨后即分為兩支，分別進(jìn)入左右兩肺弓由發(fā)出，稍前伸即向左彎折后方。在貼近背壁中線，經(jīng)過胸部86右總頸動(dòng)脈。右鎖骨下動(dòng)脈：到達(dá)腋部時(shí)可成為腋動(dòng)脈，上臂后形成右①2cm③前腸系膜動(dòng)脈：位于腹腔動(dòng)脈的下面，由前腸系膜動(dòng)脈再分支至腸的各部和胰腺等上。④腎動(dòng)脈一對(duì)右腎動(dòng)脈腸系膜動(dòng)脈的上方左腎動(dòng)脈在后腸系⑤動(dòng)脈：一對(duì)，雄性分布到上；雌性分布到上⑥后腸系膜動(dòng)脈：為背大動(dòng)脈后端向腹面偏右側(cè)伸出的一支小血管，⑨靜脈系統(tǒng)管匯合而成（87內(nèi)頸靜脈：位于，細(xì)小，匯集腦顱、舌和頸部的血液流回心臟（此③肝門靜脈肝門靜脈匯合內(nèi)臟各的靜脈進(jìn)入肝（收集胰脾、（1）門（88近在兩側(cè)下頜的內(nèi)表面位于下頜的一對(duì)肌肉的下面必須將肌肉切開，挖下去才能找到（89、90在環(huán)狀軟骨（中間最大的一塊）官，位于心臟兩側(cè)的胸腔內(nèi)（91。的扁圓形的腎上腺，每側(cè)的腎都有一條白色的輸尿管通向。為一個(gè)囊狀體，位于腹腔的后端，雄兔的位于直腸的腹面，雌兔的位于直腸和的腹面有（♀）或尿生殖道（♂）通出體外（圖92、93。。雌兔有一對(duì)，卵圓形，大小略近于黃豆，位于腹腔背壁兩側(cè)開口于的外側(cè)開口處膨大而有的喇叭口前端細(xì)小而彎曲，后端膨大而成。兔的胚胎在中發(fā)育，左右的后端合并成。的末端與合并而成尿生殖道，開口于的前方雄兔的為一對(duì)白色的卵圓形的。在繁殖期下降到陰囊中；非繁殖期則縮入腹腔內(nèi)。端部及背面緊貼著一些細(xì)管盤曲成的，由伸出的白色管即為。經(jīng)后面進(jìn)入而通體外。四、思（一）（二）哺乳動(dòng)物后肢產(chǎn)生的代謝廢物通過哪些血管和排出體外（三）繪液循環(huán)（雙循環(huán)）示意實(shí)驗(yàn)十一一、目的與要二、材料與用三、實(shí)驗(yàn)操作及觀(一)25觀察完以上部分后，沿花的腹中線將花萼、花冠，或解剖針在培養(yǎng)皿中解剖開，觀察群和群。群：串紅4條，二強(qiáng)花絲附在花冠上，花藥兩室，兩，此二強(qiáng)呈弧狀向下彎曲，這樣有利于蟲媒傳粉。另有兩條小而的群：在花的，由子房、花柱和柱頭三部分組成。子房上位，24室，稱為子房四深裂，在每室內(nèi)有一個(gè)(二)3-4一般為不育花，花形為舌狀或近管狀，花冠較長；花序一般為可育化，，，冠愈合略有殘存；花冠發(fā)達(dá)全部亦，殘存子房、花柱、，，為聚合花藥；1個(gè)，子房下位，由2個(gè)心皮構(gòu)成，一室一胚珠，基底胎座，柱頭二裂。(26)。(三)一小穗解剖觀察。(27)2可育花和不可育花：穎片以內(nèi)有3-5朵互生花，但一般僅基部2-3朵花為可育花，能正常結(jié)實(shí)；上部的幾朵花發(fā)育不完全，無雄、，為不可和：在可育花中，每朵可育花有3個(gè)和1個(gè)，柱頭羽毛狀。不可育花無雄、。和(四)花的結(jié)構(gòu)類型（示范）兩性花：一朵花中的雌都發(fā)育，如油菜花單性花一朵花的和只有一個(gè)發(fā)育如黃瓜花和楊柳花)的類型(分離多數(shù)植物的是分離的一般在同一朵花中花絲是等長的，但也有長短不等的。如十字花科植物的是4長2短，叫四強(qiáng)，唇形科和玄參科植物的多2長2短，叫二強(qiáng)。二體；花絲分為兩組，9個(gè)連合，1個(gè)分離，如豌豆、洋槐、紫多體：花絲連合成多束，如蓖麻、金絲桃等的類型(單：由一個(gè)心皮向內(nèi)折合形成。如豆科植物離生由數(shù)個(gè)心皮形成彼此分離的如草莓牡丹和飛燕合生：由數(shù)個(gè)心互連合形成的，如棉花、百合等子房的位置((胚珠在子內(nèi)著生的地方叫胎座。胎座一般都發(fā)生在心皮的邊緣相結(jié)：邊緣胎座由單心皮構(gòu)成子房一室胚珠著生在心皮的腹縫線：：側(cè)膜胎座由兩個(gè)以上的心皮構(gòu)成各心皮邊緣相互合生胚珠：中軸胎座：由2個(gè)以上的心皮構(gòu)成，各心皮的一部分卷向子房室內(nèi)在連合形成隔膜分為與心皮數(shù)相等的室數(shù)胚珠著生在中軸上，特立胎座由兩個(gè)以上心皮構(gòu)成可能是由中軸胎座演化而來，隔膜和中軸的上部，子房一室，但中軸下部仍然存在，胚珠著生在(五)花程式（flowerformula）是由簡(jiǎn)單的符號(hào)及數(shù)字寫成一定公式以表示花P——表示花被，是拉丁文PerianthiumKKelch的縮寫（CaCalyx的縮寫表示花冠A——表示，是拉丁文Androecium的縮寫G——表示，是拉丁文Gynoecium的縮寫以數(shù)字表示花各部分?jǐn)?shù)目寫在代表字母右下方以∞表示數(shù)目在十個(gè)以上，或數(shù)目不定；以0表示區(qū)少或；之后，如果有三個(gè)123個(gè)表示每室胚珠數(shù)（12個(gè)數(shù)字（G；若子房下位，則寫在G的上方如G；若子房半下位，則寫成G（兩性花的符號(hào)有時(shí)略而不寫紹K、C、A、G，并在字母右下方寫明數(shù)字以表示花各個(gè)部分?jǐn)?shù)目。：蘋果花*K(5)C5A∞G(5:5:：表示兩性花；輻射對(duì)稱；萼片5枚，合生；花瓣5枚，分離；多數(shù)，分離子房下位，由5枚心皮連合形成5個(gè)子，每室2個(gè)胚珠豌豆花：K(5)C1+2+2A(9)+1G1:1:，表示兩性花兩側(cè)對(duì)稱；萼片5枚，合生花瓣5枚分離排成三輪10枚，?；ǎ骸?P4A4；♀*P4G(21，子房尚未，二心皮合生，一室，1個(gè)胚珠。，P♂K♀CAG G：子房半下*或→ 0＋表示輪數(shù)或↖︶∞5、5：5:5心皮，5室，每花圖式（flowerdiagram）即花橫斷面的投影圖。系按花的各部分排列式，相互位置，形狀及數(shù)目及胎座類型等實(shí)際情況繪制（花圖式繪制規(guī)則：（六）無限花序(圖32)：花序軸下部或周圍的花先開放，然后逐漸向上或狀排列。如天竺葵、蔥、等。()，如玉米的雄花、水稻和珍珠梅等。復(fù)穗狀花有限花序(圖33)：即聚傘花序類，花序頂端或的花先成熟、先六、思何鳳仙等，植物學(xué)實(shí)驗(yàn)，：高等教育，2000沈顯生等，植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，合肥：中國科學(xué)技術(shù)大 ，2003實(shí)驗(yàn)十二植物的結(jié)構(gòu)及胚的形成和發(fā)一、目的與要(一)了解植物的結(jié)構(gòu)(二)二、材料與用三、實(shí)驗(yàn)操作及觀(一)雙子葉植物無胚乳取浸泡過的蠶豆先觀察外形（擠，可看到種孔，為珠孔發(fā)育而來。觀察完外形將種皮剝落。雙子葉植物無胚乳實(shí)驗(yàn)材料還可用花生。花生種皮薄，土紅色；兩片子葉肥大，胚位于基部，夾在兩片子葉之間，胚也由胚根、胚軸和胚(二)雙子葉植物有胚乳取浸泡過的蓖麻觀察(圖38)色海綿狀突起，為種阜，可吸水，有利于萌發(fā)，種阜內(nèi)側(cè)就是種臍。種(三)葉植物有胚乳取小麥穎果()縱切制片在顯微鏡下觀察(圖39)下面為胚芽及其生長錐；胚的是胚軸；下部是突出的胚根；胚根外有一(四)1室在兩心連的腹縫線處伸出一隔膜由于此隔膜不是心皮彎折形成的，串胚珠，為側(cè)膜胎座(40)。，2薺菜幼胚縱切制片的觀察薺菜幼胚內(nèi)的兩串胚珠將來要形成，為“反足細(xì)胞實(shí)際應(yīng)認(rèn)為是珠心增生組織的合子即在珠孔處開始發(fā)育，尋找不同發(fā)育時(shí)期的胚珠，觀察薺菜胚的發(fā)育過程(41)，3基細(xì)胞為大型細(xì)胞以后又形成一列小細(xì)胞共同組成胚柄可將頂細(xì)胞經(jīng)過多次細(xì)胞先形成球形原胚，以后繼續(xù)分化出子葉和兩片大的子葉；子葉之間有一小突起為胚芽。隨著胚的形成，胚乳，被發(fā)育為種皮，整個(gè)胚珠形成四、示(一)取百合花藥橫切制片觀察花藥結(jié)構(gòu)和花粉粒的形成(1、花藥結(jié)構(gòu)：成花藥一般由4個(gè)花粉囊組成，左右各半，中間有：1-3絨氈層：是花藥壁最內(nèi)層細(xì)胞，細(xì)胞長柱狀，核大，質(zhì)濃，如同腺2體，形成花粉母細(xì)胞；花粉母細(xì)胞以后再進(jìn)行第一次減數(shù)，形成二分孢子之后再進(jìn)行第二次減數(shù)形成四分孢子體分離后形成單核花粉粒。質(zhì)化加厚，所以又稱為纖維層。絨氈層細(xì)胞隨著花藥的發(fā)育，一般逐漸。(二)取百合子房橫切制片觀察百合子房結(jié)構(gòu)及胚囊發(fā)育(43)3胚囊的形成胚囊母細(xì)胞連續(xù)兩次形成4個(gè)細(xì)胞隨后近珠孔3個(gè)細(xì)胞，里邊的一個(gè)形成大個(gè)單核細(xì)胞，即胚囊胚囊核此胚囊細(xì)胞連續(xù)進(jìn)行三次細(xì)胞核而細(xì)胞質(zhì)并不分2核、48核的大胚囊。胚囊的成熟8核胚囊兩端各有4個(gè)核以后兩端各有1核移至成為極核；近合點(diǎn)端的3核形成反足細(xì)胞；近珠孔的3核中間一個(gè)較大，發(fā)以后通過雙作用，兩個(gè)精細(xì)胞核及營養(yǎng)核進(jìn)入胚囊，營養(yǎng)核；五、作(一)繪蠶豆縱切圖(二)六、思(一)雙子葉植物與葉植物在結(jié)構(gòu)上有何異同(二)實(shí)驗(yàn)十三植物營養(yǎng)的一、目的與要（一）認(rèn)識(shí)各種根、莖、葉的不同類（二）了解植物根、莖、葉后的形態(tài)結(jié)構(gòu)及生理功能二、材料與用三、實(shí)驗(yàn)操作及觀一些植物的營養(yǎng)——根、莖、葉，為適應(yīng)環(huán)境條件在形態(tài)、構(gòu)造或生理功能上都發(fā)生一些很大的變化，稱為，這種的性狀形成后，一（一）根的氣生根：為不定根，生長在空氣中，有多種不同功能攀緣根：常春藤長出的不定根，能分泌粘液，有固著作用呼吸根：海邊紅樹林莖下部長出的不定根功能，兼有固著作用。吊蘭氣生根也功能。(二)莖的莖上面頂芽及螺旋排列的芽跡，說明它們是的莖。鱗莖是扁平或圓盤狀的莖節(jié)間極度縮短頂端有一個(gè)頂芽、不定根及的鱗片，主要用于貯藏營養(yǎng)物質(zhì)。根狀莖：匍匐生長于土壤中，是很象根的一種莖。藕、蘆葦、竹根狀莖，具有節(jié)、節(jié)間及的鱗片，節(jié)間上還有芽，用于貯藏營養(yǎng)莖卷須：葡萄、黃瓜莖端，形成莖卷須，用于攀緣其它物體枝刺由莖成具有保護(hù)功能的刺如山楂皂莢等的枝刺(三)葉的2～3對(duì)小葉捕蟲葉：豬籠草葉呈瓶狀，頂部還有一小蓋，用于捕食昆蟲葉柄：新鮮水葫蘆(鳳眼蓮)葉柄呈囊狀，用于貯藏空氣四、作將本實(shí)驗(yàn)所觀察的營養(yǎng)類型按下表進(jìn)行總五、思(一)營養(yǎng)的有何意義(二)舉例說明什么是“同源”？什么是“同功實(shí)驗(yàn)十四一、目的與要二、材料與用實(shí)、果實(shí)、油菜果實(shí)、白菜果實(shí)、薺菜果實(shí)、獨(dú)行菜果實(shí)、向日葵、蕎三、實(shí)驗(yàn)操作及觀皮為木質(zhì)化硬殼；果皮內(nèi)為，由胚珠發(fā)育而來，種皮由珠被發(fā)育而來。，房與花被或花托等一起形成的果實(shí)，如蘋果、梨等。取蘋果縱切觀察，食用部分主要是花筒肉質(zhì)化膨大部分，三層果皮被包在在里面(圖，(二)蘋果(5心皮合生)。2、聚合果：一朵花中有許多分離的心皮（，以后每個(gè)心皮均形成單個(gè)瘦果（圖35，所以從本質(zhì)上看，草莓果也是假果；從結(jié)構(gòu)上看，稱其為3()(36)，無花果，以肉質(zhì)化的凹陷的花序軸為可食部分。(三)第一類為裂果，果實(shí)成熟實(shí)開裂開裂如豆科類植物的但莢果也有特殊情況有時(shí)不開裂如落花生；蒴果由兩個(gè)或兩個(gè)以上心皮組成的果實(shí)是合生發(fā)育而來的孔裂：在果實(shí)心皮頂部?jī)H裂一小孔，如。第二類為閉果：果實(shí)成熟實(shí)不開裂瘦果：果皮與種皮分離，果內(nèi)只含一枚，如向日葵、蕎麥穎果：果皮與種皮愈合，果亦只含一枚，如玉米、稻、麥堅(jiān)果果皮堅(jiān)硬內(nèi)含一枚如板粟外邊為褐色堅(jiān)硬的果皮四、作五、思(一)(二)實(shí)驗(yàn)十五一、目的與1、2二、實(shí)驗(yàn)原血細(xì)胞計(jì)數(shù)板由一塊長約7.5cm、寬3.5cm的厚玻璃制成，在中部1/3面積處有4條槽，內(nèi)側(cè)兩條槽之間還有1條橫槽相通，在中部構(gòu)成2塊長方0.1mm。平臺(tái)中部各有一個(gè)計(jì)數(shù)室，每1mm1mm2四角的大格被劃分為16個(gè)中方格一般用作白細(xì)胞血小板及組織培養(yǎng)的細(xì)胞計(jì)數(shù)。的大方格則由雙線劃分為25個(gè)中方格，每個(gè)中方格面積為4.1血細(xì)胞計(jì)數(shù)板10mV＝4/3ab2（ab）可求出細(xì)20－21mm10mm，10101004.2目鏡測(cè)微尺的種類刻度的標(biāo)尺，為直線式標(biāo)尺，全長1mm，分為10大格，每大格又分10小格，1000.01mm10m。4.3物鏡測(cè)微尺三、材料和用75％四、操作與觀①用1mL移液器準(zhǔn)確吸取0.38mL白細(xì)胞稀釋液放入一支干凈的小試管內(nèi)，加塞備用。用5mL移液器準(zhǔn)確吸取3.98mL紅細(xì)胞稀釋液，放入一支干凈用棉球蘸75％乙醇左手無名指或耳垂邊緣，待揮發(fā)后用采血針刺入皮膚2-3mm深讓血液自然流出（注意必須待揮發(fā)后才能采血否則流出的血液不成滴無法吸取用干棉球拭去第1滴血220l10l1－2min以免產(chǎn)生。泡，應(yīng)洗凈計(jì)數(shù)板和蓋玻片，干燥后重新8數(shù)紅細(xì)胞時(shí)發(fā)現(xiàn)各中方格的紅細(xì)胞相差

圖 紅細(xì)胞數(shù)：將大方格的四角和共五個(gè)中方格內(nèi)數(shù)得的紅10000，即得每立方毫米血液內(nèi)的紅細(xì)胞總數(shù)。為什么？按目前臨血細(xì)胞計(jì)數(shù)采用的通用單位，將以上結(jié)果換算為123412345124.54.568/50×10=13.6m。代入公式求體積。測(cè)量完畢后取下目鏡測(cè)微尺，包裝后放回盒內(nèi)。形，其體積V＝4/3R3（R為半徑。為減少誤差，同一標(biāo)本需測(cè)5個(gè)細(xì)胞的思考參考文1、黃詩箋等動(dòng)物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)高等教育2001，2 趙剛等醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)與習(xí)題科學(xué)，1999，3 沈顯生等，植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，中國科學(xué)技術(shù)大 ，2003實(shí)驗(yàn)十六一、目的與學(xué)習(xí)血涂片，觀察血液的基本有形成分ABO二、實(shí)驗(yàn)原采用最基本的紅細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn)鑒定ABO血型系統(tǒng)中最常見的四種表型ABA型、B型和O這四種血型分型的主要依據(jù)是紅細(xì)胞上A、B兩種抗原的存在與否，而三、材料和號(hào)筆,移液器。75％乙醇、瑞氏、KH2PO4-Na2HPO4緩沖液、標(biāo)準(zhǔn)A、B、蒸四、操作與（一）血液的涂片方法先用75％棉球手指或耳垂待揮發(fā)后采血針刺入皮膚2－3mm深讓血液自然流（注意必須待揮發(fā)后才能玻片的邊緣與血滴接觸，使血液展成線狀，再將玻片以45可，染3一4分鐘，此時(shí)，液面上可浮現(xiàn)一層金黃色的金屬樣物質(zhì)。用蒸餾紅細(xì)胞呈雙凹圓盤狀，無核，細(xì)胞的部分比邊緣透明有粒細(xì)胞又因顆粒不同分為三種4—5葉，葉間有細(xì)絲相連。24％，胞質(zhì)內(nèi)充滿粗大圓58％，體積大，胞質(zhì)呈淡藍(lán)色，核有圓25％，細(xì)胞大小不一，核呈紫色，很大。有， 為碎片狀顆粒，體積很小有小的嗜堿性顆粒，染成紫，5.11.23.4.5.6.（二）ABO用記號(hào)筆在一雙凹載玻片左上角寫AB將標(biāo)準(zhǔn) 滴一滴于雙凹載玻片左端，標(biāo)準(zhǔn) 滴一滴于平面上，然后置室溫下5min后觀察結(jié)果。如果室溫較高，可將一培養(yǎng)皿倒扣五、思考參考文黃詩箋等，動(dòng)物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，：高等教育，2001趙剛等，醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)與習(xí)題，：科學(xué)，1999緩沖液(pH6.4)：KH2PO46.63g，Na2HPO42.56g1L實(shí)驗(yàn)十七一、目的與要二、實(shí)驗(yàn)原胞外，所以液體很快進(jìn)入細(xì)胞，使細(xì)胞，血紅蛋白逸出，即發(fā)生溶血。三、材料和（一）材料：10%5mL乙醇、0.32M、蒸餾水。四、操作與取一干凈的試管向其中加入4ml紅細(xì)胞懸觀察發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞懸液觀察紅細(xì)胞在低滲溶液中的溶血現(xiàn)象。在0試管中加入0.3mL紅細(xì)胞懸液，再加入3mL蒸餾水，輕輕搖勻，注意溶液顏色的變化，隔著試管10.3mL3mL0.17M20.3mL3mL0.17M分別在另外8種等滲溶液中進(jìn)行同樣實(shí)驗(yàn)，步驟同（20123456789五、思考填表記錄溶血實(shí)驗(yàn)的結(jié)果并分析原因，哪些溶液中含有非通透參考文趙剛等，醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)與習(xí)題，科學(xué)，1999楊漢民等，細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)（第二版，高等教 ，1997實(shí)驗(yàn)十八一、目的與二、實(shí)驗(yàn)原織吸水從而使外液濃度變大，增加；反之，若植物組織的水勢(shì)高于外液的滲透勢(shì)，則組織失水使得外液濃度變小，降低；若兩者相等，則水分交換保持動(dòng)態(tài)平衡外液濃度保持不變因此要測(cè)定植物組織的水勢(shì)，放入植物組織前后不變則可認(rèn)為其與植物組織之間水分保持動(dòng)態(tài)平衡，（ψπW）(waterpotential)。ψW=ψπ=-P=-因?yàn)樵€有細(xì)胞壁限制原生的膨脹，同時(shí)細(xì)胞內(nèi)的親水膠體又有吸水的本領(lǐng)，因此典型細(xì)胞水勢(shì)ψWψW=ψπ+ψP其中ψπP（質(zhì)壁分離時(shí)（劇烈蒸騰時(shí)ψM可忽略不計(jì)。ψPψMψπ（ψπ（一）（二）帶塞青霉素小瓶30個(gè)、帶針頭的注射器、鑷子、打孔器、記號(hào)筆、培養(yǎng)（三）（1）1mol/L608034.2g,70ml100ml，1M（2）0.03%1mol/L蔗糖水溶液依C1V1=C2V2公式配制不同濃度的蔗糖溶液（具體范圍可根據(jù)材0.55mol/L、0.60mol/L、0.65mol/L、0.70四、實(shí)驗(yàn)步（一）取干燥潔凈的青霉素瓶60.100.60mol/L蔗糖溶液約4ml（約為青霉素瓶的2/3處6個(gè)干燥潔凈的青霉素瓶為乙組，各瓶中分別加入0.100.60mol/L蔗糖溶液4ml和微取待測(cè)樣品的功能葉數(shù)片，用打孔器打取約50片，放至培養(yǎng)皿中，混合均勻。用鑷子分別夾入58個(gè)到盛有不同濃度的甲烯藍(lán)蔗40min，為加速水分平衡，應(yīng)經(jīng)常搖動(dòng)小瓶。（入對(duì)應(yīng)濃度甲組青霉素瓶溶液中部，地放出少量液流，觀察藍(lán)色液流的升降每次測(cè)定均要用待測(cè)濃度的甲烯藍(lán)蔗糖溶液幾次注射針頭如此方法檢查各瓶中液流的升降。若液流上升，說明浸過的蔗糖（ψW=ψπ=-式中：ψW（MPa）；ψπ（MPa）C為溶液濃度(mol/L)；R為氣體常數(shù)，0.008314L·MPa/(mol·K);T對(duì)溫度(K)；i（蔗糖=1，CaCl2=2.60。注意事項(xiàng)管中溶液的均加大。（二）用鑷子剝?nèi)」┰嚥牧舷卤砥せ蚱稳⊙笫[表皮，大小0.5cm2為宜。吸去切片表面水分，立即浸入上述不同濃度的蔗糖溶液中，450.03%5min2030min，同時(shí)記錄室溫，取出放于載玻片50%以上細(xì)胞發(fā)生初始質(zhì)壁分離（即原生剛從細(xì)胞壁的角隅分離）的濃度，每一制片觀察的細(xì)胞不應(yīng)少于100個(gè)。如果在兩個(gè)相鄰濃度的切片中，一個(gè)切50%，則這兩（ψπψπ=ψπ0=-=1，CaCl2=2.60五、思123參考文楊繼等，植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn) ：高等教 ，2000實(shí)驗(yàn)十九一、實(shí)驗(yàn)?zāi)慷?、?shí)驗(yàn)原重要特征就是其正的花，被子植物因此也被稱為有花植物。開花、傳粉和是被子植物生命史中重要的生理過程。在被子植物的有性繁殖過程中，當(dāng)花粉落到柱頭上后，花粉開始萌發(fā)并且生長出花粉管?；ǚ酃艽┢渲幸粋€(gè)與卵細(xì)胞融合為卵，另一個(gè)與極核融合形成極核。這個(gè)過程被稱為雙，雙是被子植物特有的生理過程。花粉萌發(fā)和花粉管生三、材料和Thunb.，稱量紙空氣恒溫振蕩器錐形瓶玻璃棒培養(yǎng)皿紙移液（5ml，1ml，50ul，（三）試劑：Ca(NO3)2，乙二胺四乙酸二鈉(EthyleneDiamineTetraaceticAcidDisodiumsalt,EDTA?Na2)，硼酸，蔗糖。四、實(shí)驗(yàn)步花粉每日清晨尚未開裂的百合花藥，陽光照射約1小時(shí)，放入干燥器中過夜。次日，花藥完全開裂并明顯萎縮，花粉全部在外。用干箱中（Lietal.,1983將活花粉放入-80℃環(huán)境中可長期保持其。為了使花粉從-80℃2按照5mg/ml的比例將花粉加入到液體培養(yǎng)用玻璃棒攪拌去除54ml100rpm25℃下振5100mMCa(NO3)2、100mMEDTA?Na21%在花粉培養(yǎng)液中加入適量?jī)?chǔ)液以配制各種培養(yǎng)條件。每個(gè)培養(yǎng)條件做兩個(gè)平行樣品。培養(yǎng)條件下的花粉管萌況。在某些培養(yǎng)條件下可以觀察到有花粉聚微鏡4倍或者10倍物鏡下觀察花粉的萌況（不要用40倍物鏡，這百合花粉液體培養(yǎng)基（Dickinson1968） 1.29mM 0.99 0.16mM(~0.01%10%的蔗糖。五、作一、目的與二、驗(yàn)原能清晰地顯示出細(xì)胞結(jié)構(gòu)。番紅為堿性，能使細(xì)胞核及木質(zhì)化的細(xì)胞壁染成紅色；固綠為酸性，能使細(xì)胞質(zhì)及纖維素的細(xì)胞壁染成綠色。三、料和用100%FAA==50%乙醇89ml+冰醋酸5ml+6ml四、實(shí)驗(yàn)步取材取大小百合將花被花柄剝?nèi)ブ涣粝伦臃壳谐?-8固定：將FAA5-7（第一天工作結(jié)束50%30.5-1（如果固定好的較50%乙醇中保存?zhèn)溆?。（無水乙醇兩次1透明：1/2+1/2，1.5，1（1：1/2（第二天工作結(jié)束5-10粘片：片切下合適的蠟片，用鑷子夾著，放入水槽，用載玻片撈起，在放入44度的溫水中展片，注意不要顛倒蠟片的上下面。一面）靠近蠟片，注意調(diào)整位置，讓蠟片正對(duì)載玻片，然后快是恰巧沒有切到，較完整的樣品應(yīng)有3-6個(gè)胚珠保留，過胚囊的橫切有的能看到頂細(xì)胞、卵細(xì)胞、反足細(xì)胞、2?？酒哼x擇較好的樣品，置于烤片機(jī)上，65，101/2純乙醇+1/2經(jīng)無水乙醇、95%、90%、80%、70%、50%、30%5min；5min；1%101/2純乙醇+1/2二甲苯，5min自然風(fēng)干玻片后鏡檢觀察切片，選擇出切得較正較好的子房胚囊發(fā)育階段。百合子房橫切（40倍 百合子房橫切（100倍百合子房橫切（400倍 百合子房縱切（40倍五、作（一）六、思（四）（五）（六）參考資王灶安植物顯微技術(shù)農(nóng)業(yè)李正理植物組織制片 1996徐 植物石蠟切片雙重染色技術(shù)的改 農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)（2）1999實(shí)驗(yàn)二十一PCR擴(kuò)增的方法鑒別不同物種來源的肌、目的與要掌握PCRDNA學(xué)習(xí)瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR二、PCR擴(kuò)增DNA片片段的法，為最常用的分子生物學(xué)技術(shù)之一。典型的PCR由（1）高溫變性（2）（3）合適的復(fù)性溫度下分別與目的兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合，兩個(gè)引物在模板上結(jié)DNA聚合酶（Taq酶）72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的為模板從5’→3’方向延伸，合成DNA的新PCR能快速特異擴(kuò)增任何已知目的或DNA片段，并能輕易在皮克（pg）僅可以用于的分離、克隆和核苷酸序列分析，還可以用于突變體和重組體的構(gòu)建，表達(dá)調(diào)控的研究，多態(tài)性的分析，遺傳病和傳染病的診斷，腫瘤機(jī)制的探索，法醫(yī)鑒定等諸多方面。通常，PCRDNA分析中有著以下多DNA由少量mRNAcDNA從cDNA中克隆某些DNARAPD、AFLP、RFLPDNA近年來，在物種鑒定方面，PCR技術(shù)的應(yīng)用也得到了長足的發(fā)展，已經(jīng)成為物DNA鑒定方法包括：限制性長度（RFLP（RAPDRP是根據(jù)DNA序列上不同限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)分布的相對(duì)位置不同以及位點(diǎn)之間的序列同源性，將大分子量的DNARAD以PCRDNADNARAD重復(fù)性欠佳。ALP是在RLP和RAPD的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的序列中堿基的插入和缺失會(huì)引起酶切位點(diǎn)的改變用內(nèi)切酶酶切會(huì)產(chǎn)生不同的片段，從而出現(xiàn)多態(tài)性。AFP通過PCR的方法將這種多態(tài)性的信號(hào)放大，通過凝膠電泳ALP克服了RFLP和RADPCR-RFLP也是將限制性酶切用PCR改進(jìn)的法，該方法首先通過PCR的方法得到某一段序列，再將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行限制性酶切，酶切圖譜可顯示出物種差別。目前比較常用的擴(kuò)增片段是細(xì)胞色素b(Cytb)片段和12SrRNA片段。物種特異性引物擴(kuò)增是依據(jù)各物種的序列存在一定的差異某種動(dòng)物中存在某一段特異序列再根據(jù)此序直接法是直接測(cè)定樣品中某部分的序列通過比對(duì)該序列確定具體物種的方法該方法用于物種的鑒定可操作性強(qiáng)，與CR技術(shù)相結(jié)合可用于微量樣品的檢測(cè)，對(duì)于未知樣品只需用通用引物擴(kuò)增，再進(jìn)序就可獲得相應(yīng)的序列片段但是設(shè)備昂貴且只能測(cè)定樣品的一段或幾段序列僅憑這些序列的分析比對(duì)來確定物種容易出現(xiàn)差錯(cuò)。DNA為模板，用物種特異性的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，只有在模板DNA成分。DNA模板（DNA、牛肉DNA、兔肉Pork1：Pork2：Beef1：Beef2：10×PCRTris-HCl(pH20020010020dNTPmix(2.5mM無菌PCRPCR按以積將各成分分別加入一做好標(biāo)記的無菌PCR管中，配制50μlPCR反應(yīng)體系，注意酶要最后加，加完后將PCR管放置在冰上。10×PCR555555dNTPmix（2.5mM444444DNA22------22------222-2-2-2-2-2--2-2-2-2-2-20.250.250.250.250.250.2534.75設(shè)定好PCR儀的反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，蓋預(yù)變性 變性 退火50℃ 循環(huán)30次延伸72℃ 后延伸 反應(yīng)結(jié)束后，終止程序，將PCR管從PCR4℃待電泳檢三、瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)(pH8.0-8.3)中，其1×TAE 40 26× 30甘 36%溴酚 0.05核酸GoldenDNA分子量marker100bpDNA水平電泳儀及水平凝膠模2.4g250ml120ml1×TAE緩沖液，40s直至煮沸，搖動(dòng)錐形瓶使瓊脂糖分散，2次，直到溶液清澈透明，看不到瓊脂糖顆粒。60℃左，瓊脂糖凝膠完全凝固之后，輕輕地垂直拔出梳子不要將膠孔破壞，，10μlPCR2μl6×上樣緩沖液混合均勻，加入到凝膠樣品孔中，要先記下加樣的順序)5μl的marker。180V，樣品由負(fù)極(黑色)向正極1/3時(shí)，停止電泳。電泳完畢后，取出凝膠，在紫外燈下觀察，DNA存在則顯示出綠色熒光條試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌雖未發(fā)現(xiàn)GoldenView有作用，但各種核酸的作用學(xué)術(shù)界一直存在爭(zhēng)議，且GoldenView對(duì)皮膚和眼睛有一定的刺激作用，為安全起見，強(qiáng)烈建議在操附：各動(dòng)物組織組DNA的提DNAEasyPureTMGenomicDNAKit將≤25mg切碎的動(dòng)物組織（去除脂肪組織）1.5ml離2-3次如果需要去除RNA20μlRNaseA212000rpm510μl10%SDS5