標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 40187-2021 核酸適配體親和性和特異性評(píng)價(jià)技術(shù)導(dǎo)則》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),旨在為核酸適配體的親和性與特異性的評(píng)估提供一套標(biāo)準(zhǔn)化的技術(shù)指導(dǎo)。該標(biāo)準(zhǔn)適用于基于SELEX(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment)或其他類似方法篩選出的核酸適配體,在生物醫(yī)學(xué)研究、疾病診斷及治療等領(lǐng)域中的應(yīng)用前質(zhì)量控制。
根據(jù)文檔內(nèi)容,它首先定義了核酸適配體及其相關(guān)術(shù)語,并介紹了評(píng)價(jià)過程中可能遇到的基本概念。接著,詳細(xì)描述了用于測(cè)定核酸適配體對(duì)目標(biāo)分子親和力的方法,包括但不限于等溫滴定量熱法(ITC)、表面等離子共振(SPR)技術(shù)以及酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)等。這些方法能夠幫助研究人員準(zhǔn)確地量化適配體與其靶標(biāo)之間的結(jié)合強(qiáng)度。
此外,《GB/T 40187-2021》還特別強(qiáng)調(diào)了對(duì)于核酸適配體特異性進(jìn)行驗(yàn)證的重要性。通過比較不同條件下適配體與非特異性物質(zhì)之間的相互作用情況,可以有效區(qū)分出真正具有高度選擇性的候選者。這部分內(nèi)容通常涉及到交叉反應(yīng)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)以及數(shù)據(jù)分析策略。
最后,該文件也提供了關(guān)于如何報(bào)告實(shí)驗(yàn)結(jié)果的具體指南,確保所有測(cè)試過程透明且可重復(fù)。這不僅有利于促進(jìn)學(xué)術(shù)交流,也為后續(xù)開發(fā)工作奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
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....
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2021-05-21 頒布
- 2021-12-01 實(shí)施
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GB/T 40187-2021核酸適配體親和性和特異性評(píng)價(jià)技術(shù)導(dǎo)則-免費(fèi)下載試讀頁文檔簡(jiǎn)介
ICS07080
A20.
中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T40187—2021
核酸適配體親和性和特異性評(píng)價(jià)技術(shù)導(dǎo)則
Technicalguidanceforaffinityandspecificofaptamer
2021-05-21發(fā)布2021-12-01實(shí)施
國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布
國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)
GB/T40187—2021
前言
本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草
GB/T1.1—2009。
本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研究院歸口
。
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位河北省食品檢驗(yàn)研究院中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研究院江南大學(xué)合肥工業(yè)大學(xué)中國(guó)科技
:、、、、
大學(xué)河北農(nóng)業(yè)大學(xué)西南大學(xué)浙江工商大學(xué)河南大學(xué)北京食品科學(xué)研究院河北醫(yī)科大學(xué)
、、、、、、。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人張巖周巍馬愛進(jìn)王周平瞿昊羅昭鋒鄭磊王向紅陳佳馬良田益玲
:、、、、、、、、、、、
王贊張雅倫張濤康文藝王彥波傅玲琳孫勇陳偉呂品
、、、、、、、、。
Ⅰ
GB/T40187—2021
核酸適配體親和性和特異性評(píng)價(jià)技術(shù)導(dǎo)則
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了核酸適配體與目標(biāo)物結(jié)合親和性和特異性的評(píng)價(jià)規(guī)則和測(cè)定方法
。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于金屬離子小分子大分子細(xì)胞及顆粒物組織以及混合目標(biāo)物等不同層次目標(biāo)物體
、、、、
系的核酸適配體的親和性和特異性評(píng)價(jià)
。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件
。,()。
分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法
GB/T6682
實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品分子生物學(xué)檢測(cè)
GB/T27403
3術(shù)語和定義
下列術(shù)語和定義適用于本文件
。
31
.
親和性affinity
特定目標(biāo)物與核酸適配體之間相適應(yīng)而存在的引力它是特定目標(biāo)物與核酸適配體固有的結(jié)合力
,。
注親和性的強(qiáng)弱一般以平衡解離常數(shù)K來表示
:,D。
32
.
特異性specificity
相同測(cè)定方法相同物質(zhì)的量濃度等條件下測(cè)定核酸適配體對(duì)目標(biāo)物及其非目標(biāo)物的結(jié)合數(shù)
、,
量比
。
注當(dāng)結(jié)合數(shù)量比值越高說明特異性越好
:,。
33
.
平衡解離常數(shù)disocciationconstant
核酸適配體與目標(biāo)物結(jié)合達(dá)到解離平衡時(shí)各產(chǎn)物濃度的冪函數(shù)的乘積除以反應(yīng)物濃度的冪函數(shù)
。
注絕大多數(shù)情況下核酸適配體與目標(biāo)物是結(jié)合核酸適配體的平衡解離常數(shù)可以簡(jiǎn)化為溶液中游離狀態(tài)
:,1∶1,
的核酸適配體濃度與游離狀態(tài)的目標(biāo)物物質(zhì)濃度的乘積再除以兩者復(fù)合物的濃度數(shù)值上等于目標(biāo)物物質(zhì)被
。
核酸適配體結(jié)合一半時(shí)目標(biāo)物物質(zhì)的濃度KK值越小表明兩者相互作用越強(qiáng)
(D)。D,。
cc
K=AT
Dc
E
式中
:
K平衡解離常數(shù)
D———;
c核酸適配體的物質(zhì)的量濃度
A———;
c
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