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文檔簡介

第二講細(xì)_胞_工_程[教材知識(shí)問題化梳理]一、植物細(xì)胞工程1.植物組織培養(yǎng)理論基礎(chǔ):植物細(xì)胞的全能性。操作過程:①②―→植物體外植體――→A――→B圖中①脫分化,②再分化,A表示愈傷組織,B表示胚狀體或叢芽2.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)過程①為去除細(xì)胞壁獲取擁有活力的原生質(zhì)體,常用方法是酶解法,所用到的酶是纖維素酶和果膠酶。過程②是原生質(zhì)體的交融,人工引誘的物理方法包含離心、振動(dòng)、電刺激等;化學(xué)方法一般用聚乙二醇作引誘劑。過程③是原生質(zhì)體交融后重生出細(xì)胞壁,這是原生質(zhì)體交融成功的標(biāo)記。二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.觀點(diǎn)與操作流程2.培養(yǎng)條件無菌、無毒的環(huán)境。營養(yǎng):除糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素以外,還往常需加入血清等天然成分。(3)適合的溫度和pH:溫度為36.5℃±0.5℃,pH為7.2~7.4。(4)氣體環(huán)境:CO和O。O是細(xì)胞代謝所必要的,CO的主要作用是保持培養(yǎng)液的pH。2222三、體細(xì)胞核移植技術(shù)四、單克隆抗體制備過程:單克隆抗體的特色:特異性強(qiáng)、敏捷度高。[成效自評(píng)組合式設(shè)計(jì)]一、在小題集訓(xùn)中洞悉命題視角1.理論上,每個(gè)正?;罴?xì)胞都擁有全能性。(√)2.植物的每個(gè)細(xì)胞在植物體內(nèi)和體外都能表現(xiàn)出細(xì)胞的全能性。(×)3.愈傷組織是外植體脫分化和再分化后形成的。(×)4.原生質(zhì)體交融的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性。(√)5.重生出細(xì)胞壁是原生質(zhì)體交融成功的標(biāo)記。(√)6.傳代培養(yǎng)的細(xì)胞失掉接觸克制現(xiàn)象。(×)7.原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)都需要用胰蛋白酶辦理。(√)8.動(dòng)物細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞是卵細(xì)胞。(×)9.克隆動(dòng)物的性狀與供體動(dòng)物完整相同。(×)10.單克隆抗體擁有特異性強(qiáng)、敏捷度高的特色。(√)11.雜交瘤細(xì)胞既能無窮增殖,又能產(chǎn)生專一性抗體。(√)二、在回首教材圖表中加強(qiáng)學(xué)科能力據(jù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程回答以下問題:可否用胃蛋白酶辦理動(dòng)物組織塊,使之分別成單個(gè)細(xì)胞?為何?答案:不可以夠,由于培養(yǎng)液pH為7.2~7.4,胃蛋白酶的最適pH為1.8左右。細(xì)胞獲取不死性是在原代培養(yǎng)過程中,仍是在傳代培養(yǎng)過程中?答案:傳代培養(yǎng)過程中。(3)冷凍保留的細(xì)胞為何要選10代之內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞?答案:保持細(xì)胞正常的二倍體核型。植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較1.植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的異同項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)理論基礎(chǔ)植物細(xì)胞全能性細(xì)胞增殖種類固體或半固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維養(yǎng)成分水、礦質(zhì)元素、維生素、蔗糖、氨基酸、瓊脂生素、促生長因子、動(dòng)物血清基等動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡取材植物幼嫩部位或花藥等動(dòng)物的器官或組織外植體(離體根、莖、葉等)動(dòng)物胚胎或幼齡過程動(dòng)物的組織器官新的細(xì)胞系或細(xì)胞株,不形成結(jié)果新的組織或植株個(gè)體,能夠表現(xiàn)全能性個(gè)體,不表現(xiàn)全能性①植株迅速生殖①蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)②脫毒植株的培養(yǎng)②皮膚移植資料的培養(yǎng)目的③人工種子③檢測有毒物質(zhì)④生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等④生理、病理、藥理學(xué)研究⑤轉(zhuǎn)基因植物的培養(yǎng)①兩技術(shù)手段培養(yǎng)過程中都進(jìn)行有絲分裂,都是無性生殖,都可稱克隆,都不相同點(diǎn)波及減數(shù)分裂②均為無菌操作,需要適合的溫度、pH等條件2.有關(guān)觀點(diǎn)的辨析原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng):①原代培養(yǎng):可有兩種表述:a.細(xì)胞懸液第一次在瓶中培養(yǎng),沒有分瓶培養(yǎng)以前的細(xì)胞培養(yǎng);b.第1代細(xì)胞的培養(yǎng)與傳10代之內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。兩種表述沒有實(shí)質(zhì)差別。②傳代培養(yǎng):相同有兩種表述:a.細(xì)胞懸液培養(yǎng)一段時(shí)間后,分瓶再進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng);b.傳10代以后的細(xì)胞培養(yǎng),統(tǒng)稱為傳代培養(yǎng)。細(xì)胞株和細(xì)胞系:①細(xì)胞株:原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右會(huì)出現(xiàn)生長阻滯,衰老死亡,少量度過“危機(jī)”的細(xì)胞能傳50代左右,形成細(xì)胞株。細(xì)胞株的遺傳物質(zhì)并無發(fā)生改變。②細(xì)胞系:細(xì)胞株傳至50代此后,會(huì)出現(xiàn)第二次危機(jī),少量度過第二次危機(jī)的細(xì)胞能夠無窮傳代下去,形成細(xì)胞系。細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,帶有癌變細(xì)胞的特色。[例1]以下與細(xì)胞工程技術(shù)有關(guān)的表述中,不正確的選項(xiàng)是( ).A.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)能夠戰(zhàn)勝慣例的遠(yuǎn)緣雜交不親和阻礙B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基成分相同C.動(dòng)物細(xì)胞交融與植物原生質(zhì)體交融的基來源理相同D.植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性[分析]植物體細(xì)胞雜交能夠把來自不一樣植物的細(xì)胞交融在一同,戰(zhàn)勝了自然狀態(tài)下植物間遠(yuǎn)緣雜交不親和阻礙,交融后的細(xì)胞能培養(yǎng)成一個(gè)植物個(gè)體,表現(xiàn)了植物細(xì)胞全能性,細(xì)胞交融原理是膜的流動(dòng)性,但植物細(xì)胞培養(yǎng)基除基本成格外還需要植物激素,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液還需要?jiǎng)游镅濉答案]B植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞交融植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞交融原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞A、B去壁原生質(zhì)體A、B細(xì)胞A、B交融交融過程交融的原生質(zhì)體雜交細(xì)胞有絲分裂雜種細(xì)胞多個(gè)相同雜交細(xì)胞植物組織培養(yǎng)雜栽種株有關(guān)酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶交融方物理法:離心、電激、振動(dòng);除物理法和化學(xué)法外還能夠用滅活法化學(xué)法:聚乙二醇等試劑引誘的病毒引誘結(jié)果雜栽種株雜交細(xì)胞打破了有性雜交方法的限制,使遠(yuǎn)意義戰(zhàn)勝了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,獲取雜栽種株緣雜交成為可能[例2](2013·廣東名校質(zhì)檢)下邊是“白菜-甘藍(lán)”雜栽種株培養(yǎng)過程表示圖。以下表達(dá)正確的選項(xiàng)是( )A.如將純種的白菜和甘藍(lán)的卵細(xì)胞分別制成原生質(zhì)體,按相同的方法操作也可獲取與圖示相同基因型的雜栽種株B.能夠經(jīng)過察看在0.3g/mL蔗糖溶液中能否發(fā)生質(zhì)壁分別來判斷白菜原生質(zhì)體的死活C.該培養(yǎng)過程中可能發(fā)生細(xì)胞分化、染色體變異、基因突變或基因重組D.植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基、培養(yǎng)目的不完整相同,但引誘細(xì)胞或原生質(zhì)體交融的方法完整相同[分析]A項(xiàng)用卵細(xì)胞雜交獲取的植株細(xì)胞的遺傳物質(zhì)是體細(xì)胞雜交的一半。B項(xiàng)白菜的原生質(zhì)體已經(jīng)去掉了細(xì)胞壁,不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分別。C項(xiàng)培養(yǎng)過程中可能發(fā)生細(xì)胞分化、染色體變異、基因突變或基因重組。D項(xiàng)植物組織培養(yǎng)是獲取植株或細(xì)胞產(chǎn)物,而動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是獲取大批的細(xì)胞;細(xì)胞交融的方法也不完整相同,動(dòng)物細(xì)胞交融可用滅活的病毒。[答案]C易誤點(diǎn)不可以正確掌握單克隆抗體的制備過程失誤種類知識(shí)理解類失誤[認(rèn)知糾偏]1.單克隆抗體的制備過程2.兩次挑選的目的不一樣第一次挑選是將未交融的B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞以及BB交融、瘤瘤交融的細(xì)胞經(jīng)過選擇培養(yǎng)基裁減,挑選出B瘤交融的細(xì)胞。第二次挑選是將產(chǎn)生特定抗體的B瘤細(xì)胞經(jīng)過細(xì)胞培養(yǎng)用相應(yīng)抗原檢測的方法挑選出來。由于從體內(nèi)取免疫過的B淋巴細(xì)胞時(shí)拿出好多種,形成的雜交瘤細(xì)胞有好多種,因此需挑選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。[設(shè)誤角度]高考命題常從以下角度設(shè)置圈套給出單克隆抗體的制備過程,考察對(duì)有關(guān)過程的理解與掌握。聯(lián)合基因工程、細(xì)胞工程等知識(shí),綜合考察單克隆抗體的制備方法。1.關(guān)于下邊制備單克隆抗體過程表示圖,不.正確的表達(dá)是( )A.①表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠的脾臟中提取的B.④中的挑選是經(jīng)過抗原、抗體反響進(jìn)行的C.②促使細(xì)胞交融的方法能夠利用聚乙二醇作介導(dǎo)D.⑤能夠無窮增殖分析:選A單克隆抗體是利用B淋巴(漿)細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞交融獲取,交融方法能夠有化學(xué)方法如聚乙二醇,生物方法如滅活病毒;假如要挑選能夠經(jīng)過檢測抗原、抗體反應(yīng),假如有反響說明表達(dá)了抗體;交融細(xì)胞擁有雙親特色,即能無窮增殖又能產(chǎn)生單調(diào)抗體。骨髓瘤細(xì)胞是體外培養(yǎng)的。2.(2013·南京一模)以下方案中不可以制備出抗H1N1流感病毒單克隆抗體的是( )A.將H1N1流感病毒抗原的基因?qū)牍撬枇黾?xì)胞,并使該基因表達(dá)B.將抗H1N1流感病毒抗

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