單克隆抗體的制備演示文稿課件

動物細胞融合與動物細胞融合

目標(biāo)：1、舉例說出動物細胞融合的原理和應(yīng)用2、單克隆抗體的制備和應(yīng)用細胞A細胞B雜種細胞滅活的病毒物理法化學(xué)法仙臺病毒

一、動物細胞融合

2、過程：1、概念：用途誘導(dǎo)方法融合前處理方法原理動物細胞融合植物體細胞雜交比較項目比較項目植物、動物細胞融合的比較主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒物理法（離心、振蕩、電刺激）化學(xué)法（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法使細胞分散后誘導(dǎo)細胞融合去除細胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合融合前的處理方法細胞膜的流動性細胞膜的流動性、植物細胞全能性原理動物細胞融合植物體細胞雜交比較項目比較項目植物、動物細胞融合的比較單克隆抗體

（１）．B淋巴細胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。（２）．動物體內(nèi)的B淋巴細胞可以產(chǎn)生百萬種以上的抗體，每種抗體對特定的抗原具有特異性免疫作用。（３）．每一個淋巴細胞只能產(chǎn)生一種抗體。3、B淋巴細胞有什么特點？單克隆抗體及特點：單克隆抗體及特點：

由單個B淋巴細胞經(jīng)過無性繁殖（克隆），形成基因型相同的細胞群，這一細胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體稱為單克隆抗體。

特異性強、靈敏度高

遺憾的是……單克隆抗體制備過程？1、單克隆抗體：2、特點：單克隆抗體制備過程視頻\單克隆抗體的制備.flv思考：1、本過程利用了哪些技術(shù)？細胞融合技術(shù)和動物細胞培養(yǎng)技術(shù)2、為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與B細胞融合？這樣融合成的雜交瘤細胞，繼承了雙親細胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體3、整個制備過程為何要經(jīng)過兩次篩選?第一次篩選得到雜交瘤細胞（多種），第二次需先在多孔培養(yǎng)板上，在每孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。由于該細胞群是單個雜交瘤細胞克隆得來的，所以產(chǎn)生的抗體必然是化學(xué)性質(zhì)單一的，特異性強的單克隆抗體。這里的單克隆的確有單個細胞克隆的含義，只不過克隆的不是B淋巴細胞，而是雜交瘤細胞。小結(jié)動物細胞融合的原理和誘導(dǎo)方法單克隆抗體制備過程三個“一”一個誘導(dǎo)細胞融合的新方法－－一個新細胞－－一個優(yōu)勢－－滅活的病毒雜交瘤細胞單克隆抗體：特異性強、靈敏度高的優(yōu)勢1.動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是：（）A．動物細胞融合 B．胚胎移植C．動物細胞培養(yǎng)D．核移植教學(xué)目標(biāo)鞏固Ｃ２．在動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的是（）A．結(jié)果是相同的

B．雜種細胞的形成過程基本相同C．操作過程中酶的作用相同D．誘導(dǎo)融合的手段相同教學(xué)目標(biāo)鞏固Ｂ已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷，人淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細胞盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜交瘤細胞，請回答：

（1）試管中除融合的雜交瘤細胞外，還有_____________種融合細胞。

（2）設(shè)計一方法（不考慮機械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜交瘤細胞，并說明原理。

方法：原理：解析：

（1）試管中有人的淋巴細胞和小鼠骨髓瘤細胞，在促溶劑的作用下，可能出現(xiàn)以下3種細胞的融合情況，人的淋巴細胞和淋巴細胞融合，小鼠的骨髓瘤細胞和骨髓瘤細胞融合，人的淋巴細胞和小鼠的骨髓瘤細胞融合，實驗需要的是第3種細胞，即雜交瘤細胞；

（2）要將雜交瘤細胞分離出來，可以在培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細胞；加入氨基嘌呤后，