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肉毒堿對神經(jīng)—肌肉接頭處興奮傳遞的影響第1頁/共11頁一、實驗?zāi)康牧私饧彝玫慕馄式Y(jié)構(gòu)探究肉毒堿對神經(jīng)—肌肉接頭處興奮傳遞的影響第2頁/共11頁二、實驗原理肉毒堿為一種氨基酸衍生物,能夠選擇性的阻斷神經(jīng)肌肉接頭處突觸前膜乙酰膽堿的釋放,而抑制接頭處的興奮傳遞,因此肌肉不能接受興奮而松弛。本實驗采取沿家兔股靜脈注射的方法觀察肉毒堿對脛骨前肌神經(jīng)肌肉接頭處興奮傳遞的影響。第3頁/共11頁三、實驗對象:家兔哺乳動物手術(shù)器械一套、生物信號采集處理系統(tǒng)、張力換能器、兔手術(shù)臺、刺激電極、氣管插管、呼吸機、20%氨基甲酸乙酯溶液、任氏液、生理鹽水、10%肉毒堿溶液、乙酰膽堿四、實驗器材和藥品第4頁/共11頁
五試驗步驟流程圖麻醉固定氣管插管分離脛骨前肌,靜脈及其相關(guān)神經(jīng)連接相關(guān)裝置電刺激未處理的神經(jīng)注射肉毒堿后電刺激神經(jīng)在神經(jīng)接頭處滴加乙酰膽堿后,刺激神經(jīng)實驗結(jié)果實驗結(jié)論麻醉固定第5頁/共11頁六、實驗步驟麻醉固定:家兔稱重,耳緣靜脈注射20%氨基甲酸乙酯溶液(5ml/kg),待家兔麻醉后仰臥固定在兔臺上。手術(shù)操作:氣管插管:參照實驗十三“家兔呼吸運動的調(diào)節(jié)”脛骨前肌,股靜脈及相關(guān)神經(jīng)的處理:仰臥固定家兔,在股三角剪毛用手觸摸股動脈,沿股動脈走向做4~5cm切口,止血鉗分離皮下組織和筋膜,可見由外向內(nèi)依次為股神經(jīng),股動脈和股靜脈,其中動脈位于另兩者之后,先小心分離神經(jīng),再分離動靜脈之間的結(jié)締組織(注意勿傷血管小分支)分離出靜脈2~3cm備用,可直接用4號針頭注射給藥。脛骨前肌位于脛骨內(nèi)側(cè),皮膚切口從另一條腿膝關(guān)節(jié)向下至踝關(guān)節(jié)上(注意不要切斷皮下組織的幾支血管),切斷橫韌帶(在踝關(guān)節(jié)上)然后用鑷子挑起外側(cè)最上一根肌腱,穿一線結(jié)扎,在結(jié)扎線遠端的3mm處剪斷肌腱,向上分離以暴漏部分脛骨前肌,滴以任氏液,加以保護。然后分離同側(cè)坐骨神經(jīng)(大腿凹處,股二頭肌深層,分開肌肉),可見主干分成腘中神經(jīng)和腓總神經(jīng),分離后在腘中神經(jīng)的下方用線結(jié)扎,用任氏液保持濕潤,把電極連在腓總神經(jīng)上,將脛骨前肌結(jié)扎線水平穿過滑輪再垂直連于張力換能器鉤上,連接好換能器與生物信號采集處理系統(tǒng)。第6頁/共11頁3實驗項目1電刺激神經(jīng),觀察記錄到的張力曲線。2沿股靜脈注射10%肉毒堿溶液(0.2ml/kg),再電刺激神經(jīng),觀察張力曲線并與正常情況下的曲線對比分析。3在神經(jīng)肌肉接頭出滴加乙酰膽堿后再刺激神經(jīng),觀察張力曲線的變化并分析結(jié)果。第7頁/共11頁1、氣管
2、肺
3、心臟
4、橫隔膜
5、肝臟
6、膽囊
7、胃
8、小腸
9、盲腸
10、十二指腸
11、大腸
12、腎臟
13、輸尿管
14、膀胱15脛骨前肌15第8頁/共11頁七、預(yù)測結(jié)果注射肉毒堿一段時間后,觀察到張力曲線同正常情況下的相比幅值減少,頻率降低。再滴加乙酰膽堿可觀察到幅值和頻率恢復(fù)大致和正常情況相同。因此可證明肉毒堿可以影響神經(jīng)—肌肉接頭處乙酰膽堿的釋放而影響興奮的傳遞參考文獻:《醫(yī)學(xué)機能學(xué)實驗教程》第二版胡還忠《生理學(xué)》第七版《神經(jīng)肌肉接頭疾病》——沈揚《機能實驗科學(xué)
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