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第第頁(yè)2024屆高三生物一輪復(fù)習(xí)導(dǎo)學(xué)案動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(無(wú)答案)選擇性必修三第2章動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

一、你從教材上找到的關(guān)鍵性語(yǔ)句:

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)概念:從動(dòng)物體中_取出_相關(guān)的_組織_,將它__分散成單個(gè)細(xì)胞_,然后在__適宜的培養(yǎng)條件_下,讓這些細(xì)胞_生長(zhǎng)_和_增殖_的技術(shù)。

2.原理:__細(xì)胞增殖__

3.地位:__動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)__

(一)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件

1.營(yíng)養(yǎng)

(1)成分

①已知成分

將細(xì)胞所需的__營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)_(糖類、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素等)按其_種類__和_所需量__嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基,稱為_合成培養(yǎng)基_。

②未知成分

使用合成培養(yǎng)基時(shí),通常需加入_血清_等一些天然成分。

(2)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)

培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞一般使用_液體培養(yǎng)基__,也稱為_培養(yǎng)液__。

2.無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境

①對(duì)_培養(yǎng)液_和_所有培養(yǎng)用具_(dá)進(jìn)行_滅菌_處理;②在_無(wú)菌環(huán)境__下進(jìn)行操作;③還需要__定期更換培養(yǎng)液__。

3.溫度、pH和滲透壓

(1)適宜的溫度:哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的溫度多以__36.5±0.5℃_為宜。

(2)適宜的pH:多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞生存的適宜pH為_7.2-7.4_。

(3)適宜的滲透壓:維持適宜滲透壓的目的_維持細(xì)胞正常的形態(tài)和功能__。

4.氣體環(huán)境

(1)組成:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有_O2_和_CO2_。

(2)氣體作用:①O2:_O2是細(xì)胞代謝所必需的_;②CO2:_CO2的主要作用持培養(yǎng)液的pH__。

(二)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程

①原代培養(yǎng):將__分瓶之前_的細(xì)胞培養(yǎng),即動(dòng)物組織經(jīng)處理后的__初次培養(yǎng)__稱為原代培養(yǎng)。

②傳代培養(yǎng):將_分瓶后_的細(xì)胞培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng);

③細(xì)胞貼壁:__大多數(shù)_體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要__貼附于某些基質(zhì)表面__才能生長(zhǎng)增殖,這類細(xì)胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的_瓶壁_上,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞貼壁;

④接觸抑制:當(dāng)_貼壁_細(xì)胞生長(zhǎng)到_表面相互接觸_時(shí),細(xì)胞通常會(huì)_停止分裂增殖__。

1.取動(dòng)物組織

(1)取材:__動(dòng)物胚胎__或__幼齡動(dòng)物__的組織、器官。

(2)取材原因:_細(xì)胞分化程度低,增殖能力強(qiáng),容易培養(yǎng)___。

2.制成細(xì)胞懸液

(1)將組織分散成單個(gè)細(xì)胞的原因:①?gòu)膭?dòng)物體取出的成塊組織中,細(xì)胞與細(xì)胞__靠在一起__,彼此__限制了生長(zhǎng)和增殖_;②能使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸,更易進(jìn)行物質(zhì)交換_。

(2)將組織分散成單個(gè)細(xì)胞的方法:①__機(jī)械法__;②用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理一段時(shí)間。

3.原代培養(yǎng)

將_細(xì)胞懸液__放入__培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶_內(nèi)

4.分瓶、傳代培養(yǎng)

懸浮生長(zhǎng)類:__直接用離心法收集_;貼壁生長(zhǎng)類:重新用胰蛋白酶等處理,使之分散成單個(gè)細(xì)胞,然后再用離心法收集;將收集的細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,分瓶培養(yǎng)。

(三)干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用

1.分布:

干細(xì)胞存在于_早期胚胎__、_骨髓_和__臍帶血__等多種組織和器官中。

2.分類:

(1)胚胎干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱ES細(xì)胞)

①分布:存在于_早期胚胎_中

②特點(diǎn):具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞,并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至個(gè)體的潛能___。

(2)成體干細(xì)胞

①分布:存在于_成體組織或器官內(nèi)__中

②類別:包括_骨髓__中的_造血干細(xì)胞__、_神經(jīng)系統(tǒng)_中的__神經(jīng)干細(xì)胞__、_睪丸_中的__精原干細(xì)胞_等。

③特點(diǎn):一般認(rèn)為,成體干細(xì)胞具有組織特異性,只能分化成特定的細(xì)胞或組織,不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力。

3.干細(xì)胞的應(yīng)用

(1)原理:干細(xì)胞有著_自我更新__能力及_分化_潛能的干細(xì)胞,與__組織、器官_的_發(fā)育、再生和修復(fù)_等密切相關(guān)。

(2)應(yīng)用:

造血干細(xì)胞:治療白血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病。

神經(jīng)干細(xì)胞:治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾?。ㄈ缗两鹕 柎暮D〉龋?。

誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞):

①科學(xué)家通過體外誘導(dǎo)小鼠____________,獲得了類似_________細(xì)胞的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)。

②iPS細(xì)胞可以來(lái)源于病人自身的______細(xì)胞,將它移植回病人體內(nèi)后,理論上可以避免______________。

③可治療小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血癥,在治療阿爾茲海默病、心血管疾病等領(lǐng)域。

三、判斷訓(xùn)練:

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中,細(xì)胞具有貼壁生長(zhǎng)以及接觸抑制的特點(diǎn),因此在培養(yǎng)中需要用胰蛋白酶處理貼壁的細(xì)胞并進(jìn)行分瓶培養(yǎng),分瓶后的培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。()

培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞。()

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的原理是動(dòng)物細(xì)胞的全能性。()

有些動(dòng)物細(xì)胞能懸浮在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)增殖。()

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。()

胚胎干細(xì)胞可以來(lái)源于早期胚胎,也可以來(lái)源于成熟個(gè)體。()

只有成纖維細(xì)胞才能轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞。()

體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞可分為兩類:懸浮生長(zhǎng)類細(xì)胞和貼壁生長(zhǎng)類細(xì)胞,都需定期用胰蛋白酶處理,分瓶后才能繼續(xù)增殖。()

幼齡動(dòng)物細(xì)胞比老齡動(dòng)物細(xì)胞更易于培養(yǎng)。()

進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,并將其置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。()

肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的CO2刺激細(xì)胞呼吸。()

造血干細(xì)胞可定向誘導(dǎo)分化成機(jī)體所有種類的細(xì)胞。()

各種組織干細(xì)胞分化形成不同組織細(xì)胞是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。()

三、邊練邊講

練習(xí)1:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

1、一般來(lái)說,動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足的條件有()

①無(wú)毒的環(huán)境②無(wú)菌的環(huán)境③培養(yǎng)液中需加血清④溫度與動(dòng)物體溫相近⑤需要O2⑥加CO2維持培養(yǎng)液的pH

A.①②③④⑤⑥B.①②③④C.①③④⑤⑥D(zhuǎn).①②③④⑥

2、下圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是()

A.步驟①的操作不需要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行

B.步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離

C.步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理

D.步驟④培養(yǎng)過程中不會(huì)發(fā)生基因突變

3、干細(xì)胞是一類未參與分化或未完全分化的細(xì)胞,分裂能力強(qiáng)。按照其來(lái)源分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞(如造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞)。下列關(guān)于干細(xì)胞的說法錯(cuò)誤的是()

A.胚胎干細(xì)胞不具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能

B.胚胎干細(xì)胞的分化程度小于造血干細(xì)胞

C.骨髓移植治療白血病就是利用了造血干細(xì)胞能分化成各種血細(xì)胞的能力

D.將帶有遺傳標(biāo)記的胚胎干細(xì)胞植入早期胚胎,通過組織化學(xué)染色可追尋胚胎發(fā)育中細(xì)胞分化和器官形成的規(guī)律

4、科學(xué)家將人體皮膚細(xì)胞改造成了誘導(dǎo)多能干細(xì)胞——iPS細(xì)胞,人類“iPS細(xì)胞”可以形成神經(jīng)元等人體多種組織細(xì)胞。以下有關(guān)“iPS細(xì)胞”的說法,正確的是()(多選)

A.“iPS細(xì)胞”分化為神經(jīng)細(xì)胞的過程體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性

B.“iPS細(xì)胞”有細(xì)胞周期,它分化形成的神經(jīng)細(xì)胞一般不具有細(xì)胞周期

C.“iPS細(xì)胞”可分化形成多種組織細(xì)胞,是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果

D.“iPS細(xì)胞”分化成人體多種組織細(xì)胞,是因?yàn)樗哂胁煌谄渌?xì)胞的特定基因

5、下列有關(guān)干細(xì)胞培養(yǎng)及應(yīng)用的說法錯(cuò)誤的是()

A.胚胎干細(xì)胞具有分化為任何一種類型的細(xì)胞甚至形成個(gè)體的潛能

B.成體干細(xì)胞具有組織特異性,但在體外誘導(dǎo)分化也可發(fā)育成完整個(gè)體

C.iPS細(xì)胞用于自體器官移植,可以避免免疫排斥反應(yīng)

D.神經(jīng)干細(xì)胞可治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病

6、下列屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)區(qū)別的是()

A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基與植物細(xì)胞培養(yǎng)基的成分有所不同

B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行

C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可發(fā)生遺傳物質(zhì)改變,而植物組織培養(yǎng)不能

D.植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)都體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性

講解1:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要點(diǎn)提示:

⑴容器A中放置的一般是幼齡動(dòng)物的器官或組織,原因是其細(xì)胞分裂能力強(qiáng)。

⑵動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液為什么要加動(dòng)物血清等天然成分?

由于人們對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)尚未全部研究清楚,而血清等天然成分中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等物質(zhì),而且還含有多種未知的促生長(zhǎng)因子,能促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和貼附。

⑶培養(yǎng)前為什么要將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞?

分散后細(xì)胞能與培養(yǎng)液充分接觸,更易進(jìn)行物質(zhì)交換。

⑷動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,用胰蛋白酶處理的時(shí)間是不是越長(zhǎng)越好?可不可以用胃蛋白酶處理?

不是;時(shí)間過長(zhǎng)胰蛋白酶會(huì)催化分解細(xì)胞膜蛋白等,對(duì)細(xì)胞有損傷。不可以;大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4,而胃蛋白酶的適宜pH約為1.5,當(dāng)pH大于6時(shí),胃蛋白酶會(huì)失去活性。

⑸動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中酶“兩次”處理的目的

第一次使用的目的是使組織細(xì)胞分散開;第二次使用的目的是使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來(lái),便于分散后繼續(xù)培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞更好的得到所需營(yíng)養(yǎng)和排出代謝廢物。

⑹懸浮培養(yǎng)

體外培養(yǎng)的細(xì)胞,一類細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)增殖,即懸浮培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞不會(huì)發(fā)生接觸抑制,但會(huì)因細(xì)胞密度過大、有害代謝物積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻。在進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí),懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集即可。

2、植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較

比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

理論基礎(chǔ)植物細(xì)胞全能性細(xì)胞增殖

區(qū)別培養(yǎng)基類型固體或半固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基

成分水、礦質(zhì)元素、維生素、植物激素、蔗糖、氨基酸、瓊脂等葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、促生長(zhǎng)因子、動(dòng)物血清等

取材離體植物器官、組織、細(xì)胞動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織

關(guān)鍵環(huán)節(jié)細(xì)胞的脫分化和再分化細(xì)胞增殖和癌

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