2025年仁愛(ài)科普版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年仁愛(ài)科普版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、培養(yǎng)人細(xì)胞與小鼠細(xì)胞的融合細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞會(huì)隨機(jī)丟失來(lái)自人細(xì)胞的染色體，在僅含有人的1號(hào)染色體的融合細(xì)胞中，合成出人的尿苷單磷酸激酶。下列有關(guān)敘述中，不合理的是A.與人或小鼠細(xì)胞相比，融合細(xì)胞發(fā)生了遺傳物質(zhì)的改變B.研究方法中需要選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基和細(xì)胞融合誘導(dǎo)技術(shù)C.在融合細(xì)胞中，人的1號(hào)染色體DNA與小鼠DNA發(fā)生了重組D.這種研究可能發(fā)現(xiàn)人的某一特定基因與特定染色體的關(guān)系2、動(dòng)物體內(nèi)的細(xì)胞之所以能夠維持正常的生命活動(dòng)，是因?yàn)闄C(jī)體給這些細(xì)胞提供了適宜的條件，包括充足的營(yíng)養(yǎng)、穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境。下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需條件的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)液中通常含有糖類、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等B.培養(yǎng)液需要定期更換，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害C.培養(yǎng)液需要適宜的溫度、pH和滲透壓，維持細(xì)胞生存D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境中需要O2，不需要CO23、如圖為蛋白質(zhì)工程操作的基本思路，下列敘述不正確的是（）

A.圖中①代表轉(zhuǎn)錄，②代表翻譯，④代表分子設(shè)計(jì)，⑤代表DNA合成B.因?yàn)榈鞍踪|(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜，所以蛋白質(zhì)工程是一項(xiàng)難度很大的工程C.蛋白質(zhì)工程的目標(biāo)是對(duì)基因的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計(jì)D.從圖中可以看出蛋白質(zhì)工程的基本途徑與中心法則是相反的4、已知固體培養(yǎng)基會(huì)因碳酸鈣存在而呈乳白色，且乳酸菌能分解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。某同學(xué)以新鮮的泡菜濾液為材料進(jìn)行了分離純化乳酸菌的實(shí)驗(yàn)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.分離純化所用的培養(yǎng)基都要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理B.分離純化乳酸菌時(shí)，應(yīng)挑選出具有透明圈的菌落作為候選菌C.分離純化乳酸菌時(shí)，需要用無(wú)菌水對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋D.加入碳酸鈣的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，且碳酸鈣作為唯一碳源5、下列關(guān)于生物武器的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是（）A.應(yīng)堅(jiān)決禁止研制生物武器B.不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器C.必要時(shí)可小范圍使用D.不只是對(duì)敵方人員有傷害6、人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和腦血栓的急救藥，改造后的t-PA蛋白能顯著降低出血副作用。下圖表示構(gòu)建含t-PA改良基因重組質(zhì)粒的過(guò)程示意圖。相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，選用的限制酶是XmaⅠ和BglⅡB.需要DNA聚合酶將t-PA改良基因與質(zhì)粒連接C.新霉素抗性基因的作用是便于將導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來(lái)D.在加入新霉素的培養(yǎng)基中選擇呈白色的菌落選育工程菌株評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)7、下列有關(guān)生物技術(shù)引起的安全性和倫理問(wèn)題的敘述，不正確的是（）A.基因編輯制造嬰兒的行為是不符合倫理道德的B.設(shè)計(jì)試管嬰兒是為了治療疾病，不會(huì)出現(xiàn)負(fù)面影響C.我國(guó)禁止生殖性克隆人和有關(guān)人胚胎干細(xì)胞的研究D.世界各國(guó)都應(yīng)該禁止在任何情況下生產(chǎn)、儲(chǔ)存和發(fā)展生物武器8、我國(guó)科學(xué)家提出的異種克隆大熊貓實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線如下圖。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.科學(xué)家通過(guò)對(duì)母兔注射孕激素，進(jìn)行超數(shù)排卵處理以獲得更多的卵母細(xì)胞B.異種重構(gòu)囊胚在體外培養(yǎng)時(shí)，為保證無(wú)毒無(wú)菌環(huán)境，往往需要在培養(yǎng)液中加入維生素C.囊胚由滋養(yǎng)層細(xì)胞和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)構(gòu)成，后者將來(lái)可發(fā)育成胎兒的各種組織D.兔子宮提供的生理環(huán)境與大熊貓差異大，異種重構(gòu)囊胚可能不能正常發(fā)育出大熊貓幼仔9、下列關(guān)于“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A.DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水B.洗滌劑能瓦解植物細(xì)胞壁并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度C.調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入冷酒精后過(guò)濾，都可以去除部分雜質(zhì)D.在酸性條件下，DNA與二苯胺會(huì)發(fā)生反應(yīng)，最終產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)10、下列有關(guān)哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.克隆羊、試管羊、轉(zhuǎn)基因羊的繁殖方式都是有性生殖B.胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)可維持只增殖不分化狀態(tài)C.受精時(shí)防止多精入卵的兩屏障是頂體反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)D.滋養(yǎng)層細(xì)胞在囊胚期發(fā)育成胎膜和胎盤并可用于性別鑒定11、化工廠污水池中含有一種有害的難以降解的有機(jī)化合物A；研究人員用化合物A；磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素等配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌（目的菌）實(shí)驗(yàn)的主要步驟如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.培養(yǎng)基中加入化合物A作為唯一碳源，目的是為了篩選目的菌B.實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)過(guò)程中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，可使目的菌和培養(yǎng)液充分接觸C.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)立即快速挑取菌落D.將固體培養(yǎng)基得到的目的菌重復(fù)多次上述實(shí)驗(yàn)的目的是獲得大量菌種12、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述中，正確的是（）A.我國(guó)已經(jīng)對(duì)轉(zhuǎn)基因食品和轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品強(qiáng)制實(shí)施了產(chǎn)品標(biāo)識(shí)制度B.國(guó)際上大多數(shù)國(guó)家都在轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)簽上警示性注明可能的危害C.開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，預(yù)警跟蹤和風(fēng)險(xiǎn)管理是保障轉(zhuǎn)基因生物安全的前提D.目前對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭(zhēng)論主要集中在食用安全性和環(huán)境安全性上13、廚余垃圾是指居民日常生活及食品加工、飲食服務(wù)、單位供餐等活動(dòng)中產(chǎn)生的垃圾。廢液中的淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì)，易腐爛變質(zhì)，滋生病原微生物等。若處理不當(dāng)，可能造成嚴(yán)重的污染。圓褐固氮菌和巨大芽孢桿菌組合可以將有機(jī)廚余垃圾迅速分解成水和二氧化碳，減輕環(huán)境污染。為制備分解有機(jī)廚余垃圾的微生物菌劑，某科研小組對(duì)兩菌種進(jìn)行了最佳接種量比的探究實(shí)驗(yàn)，并得出下圖的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下面敘述錯(cuò)誤的是（）

A.巨大芽孢桿菌生長(zhǎng)過(guò)程中需要氮源，圓褐固氮菌生長(zhǎng)過(guò)程中不需要氮源B.要統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)量可采用平板劃線法和稀釋涂布平板法C.將1mL菌液稀釋100倍，在3個(gè)平板上分別接0．1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為42、39和36。據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為3．9×105D.處理該類廚余垃圾廢液，兩菌種的最佳接種量比為1：114、下列關(guān)于用剛果紅培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌的敘述，正確的有（）A.剛建成的落葉植物公園土壤，可作為獲取菌種的最佳樣本B.剛果紅可抑制其他微生物的生長(zhǎng)，篩選出纖維素分解菌C.與細(xì)菌產(chǎn)生的胞內(nèi)酶相比，真菌分泌的纖維素酶更易從培養(yǎng)液中獲取D.纖維素酶的開(kāi)發(fā)和利用，能促進(jìn)人類對(duì)環(huán)境中一些廢棄物的循環(huán)利用15、研究人員用無(wú)機(jī)鹽、瓊脂和石油配制的培養(yǎng)基從被石油污染的土壤中篩選出了一種石油降解菌，下列相關(guān)表述正確的是（）A.培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對(duì)微生物的生長(zhǎng)越有利B.這種培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基C.利用這種石油降解菌可以降解石油，修復(fù)土壤D.相對(duì)于未被污染的土壤，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)16、在課題1中，我們學(xué)習(xí)了稀釋涂布平板法。這一方法常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中_________________的數(shù)目。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，____________________。17、酵母菌是______________微生物。酵母菌進(jìn)行有氧呼吸的反應(yīng)式如下：______________________；酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸的反應(yīng)式如下：_________________。18、目的基因是指：______19、將DNA粗提取液在____________℃的恒溫水浴箱中保溫10—15分鐘。20、隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的飛速發(fā)展；轉(zhuǎn)基因動(dòng)物；克隆動(dòng)物和試管動(dòng)物相繼問(wèn)世，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、克隆動(dòng)物和試管動(dòng)物培育過(guò)程中都要用到的生物技術(shù)包括______。

（2）核移植是動(dòng)物克隆的第一步，包括體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植，其中后者更易成功，原因是______。核移植常用處于______（填時(shí)期）的______為受體細(xì)胞。

（3）在“試管動(dòng)物”的培育過(guò)程中，常采用______（填激素名稱）處理可使雌性個(gè)體一次排出多枚卵母細(xì)胞。從雄性個(gè)體采集的精子需______后才能進(jìn)行受精作用；防止多精入卵的兩道屏障依次為_(kāi)_____；卵細(xì)胞膜反應(yīng)。

（4）若考慮環(huán)境承載力，轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、克隆動(dòng)物和試管動(dòng)物不宜放置到自然環(huán)境中，這遵循了生態(tài)工程的______原理。21、應(yīng)用：______（微型繁殖、作物脫毒、神奇的人工種子）、______、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。22、什么是生物武器？簡(jiǎn)述生物武器的危害。__________23、生物武器的致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲(chóng)等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，但對(duì)植物無(wú)害。（選擇性必修3P111）()24、最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成______，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取______，用相應(yīng)的______進(jìn)行______。評(píng)卷人得分四、判斷題(共4題，共12分)25、理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，就是聽(tīng)之任之，不管不問(wèn)（______）A.正確B.錯(cuò)誤26、從牛卵巢中采集的卵母細(xì)胞可直接用于體細(xì)胞核移植。（選擇性必修3P53）()A.正確B.錯(cuò)誤27、蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來(lái)的第二代基因工程。（選擇性必修3P93）()A.正確B.錯(cuò)誤28、如果轉(zhuǎn)基因植物的外源基因源于自然界，則不會(huì)存在安全性問(wèn)題。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共14分)29、GDNF是一種多肽類的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子；對(duì)損傷的神經(jīng)細(xì)胞有營(yíng)養(yǎng)和保護(hù)作用，可用于運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞損傷的治療。

（1）培養(yǎng)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞：接種前需對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行滅菌處理，培養(yǎng)過(guò)程中通常還需添加一定量的______，以防止污染；當(dāng)培養(yǎng)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞達(dá)到一定數(shù)量時(shí)，使用______處理；進(jìn)行傳代培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞，用于實(shí)驗(yàn)研究。

（2）研究GDNF對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響：將（1）得到的細(xì)胞；平均分成4組進(jìn)行處理，得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示．

GDNF對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。

。分組處理細(xì)胞突起的平均數(shù)量（個(gè)）細(xì)胞突起的平均長(zhǎng)度（μm）AGDNF0ng/mL176120．12BGDNF50ng/mL217141．60CGDNF100ng/mL241160．39DGDNF200ng/mL198147．68①該實(shí)驗(yàn)的對(duì)照組是_______。

②由表格中的數(shù)據(jù)可知_______。

③基于上述研究和所學(xué)的生物學(xué)知識(shí)，你能為治療運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞損傷提供的方法有______。30、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導(dǎo)致的遺傳病?？蒲腥藛T對(duì)此病的治療進(jìn)行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因由于堿基對(duì)___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導(dǎo)致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過(guò)多的黏多糖無(wú)法及時(shí)清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對(duì)。在上述這一類突變基因的翻譯過(guò)程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導(dǎo)通讀獲得有功能的全長(zhǎng)蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進(jìn)行了相關(guān)研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實(shí)驗(yàn)組將___________基因?qū)胧荏w細(xì)胞，并采用___________技術(shù)檢測(cè)導(dǎo)入基因的表達(dá)情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，檢測(cè)肝臟細(xì)胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為_(kāi)____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共12分)31、德?tīng)査儺愔晔悄壳靶鹿诜窝讉鞑サ闹饕儺愔?；中?guó)研究員團(tuán)隊(duì)最新發(fā)現(xiàn)針對(duì)德?tīng)査儺愔暧行У膯慰寺】贵w，為治療新冠帶來(lái)新希望。如圖是單克隆抗體制備流程示意圖，回答下列問(wèn)題：

（1）上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠注射減毒或滅活的新冠病毒抗原，注射抗原的目的是_____

（2）骨髓瘤細(xì)胞與某些淋巴細(xì)胞融合，融合的方法除了電激外，還可以用_______。細(xì)胞融合完成后，融合體系中有__________種雜交細(xì)胞。

（3）單克隆抗體制備經(jīng)過(guò)了兩次篩選。利用HAT培養(yǎng)基進(jìn)行篩選①，能在該培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)的細(xì)胞的特點(diǎn)是_________________。因?yàn)橥环N抗原可能激活_____細(xì)胞，還需經(jīng)過(guò)篩選②才能獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，篩選所依據(jù)的基本原理是__________________。

（4）與普通抗體相比較，單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)在于它的__________。目前，單克隆抗體的主要用途有_______________(至少舉出兩例)，該技術(shù)也為新冠肺炎的治療提供了思路。32、三氯生是一種廣譜抑菌物質(zhì)；可用于基因工程中篩選含目的基因的受體菌。某科研團(tuán)隊(duì)通過(guò)先篩選出一種對(duì)三氯生抗性較強(qiáng)的重組質(zhì)粒(如圖1)，再將可以受溫度調(diào)控的基因插入該質(zhì)粒上，構(gòu)建了溫度調(diào)控表達(dá)質(zhì)粒。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)利用從細(xì)菌中提取的DNA通過(guò)PCR技術(shù)獲取fabV-A基因(或fabV-B基因)時(shí)，至少需經(jīng)過(guò)________次擴(kuò)增可獲得8個(gè)雙鏈等長(zhǎng)的目的基因。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，微量離心管中需加入的物質(zhì)有：模板、引物、原料、________________。下圖2為PCR產(chǎn)物的電泳結(jié)果，操作較理想的泳道有________條。

(2)圖1中，步驟Ⅰ需要的工具酶是________________；步驟Ⅱ常用的方法是用Ca2＋處理使細(xì)菌成為_(kāi)_______________；為達(dá)到步驟Ⅲ預(yù)期的篩選目的，所用物質(zhì)X最可能為_(kāi)_______。

(3)為獲得一種增強(qiáng)大腸桿菌對(duì)三氯生的抵抗作用效果較好的重組質(zhì)粒，將含有不同質(zhì)粒的大腸桿菌分別接種到相應(yīng)培養(yǎng)基中。培養(yǎng)一段時(shí)間后，結(jié)果如圖3，則適宜選作構(gòu)建溫度調(diào)控表達(dá)質(zhì)粒的是________。

(4)科研工作者對(duì)上述選出的質(zhì)粒進(jìn)行改造，獲得了圖4所示質(zhì)粒。其中S1和S2是啟動(dòng)子，P1和P2是終止子。H基因在高溫下會(huì)抑制S1，L基因在低溫下會(huì)抑制S2。

①如果將lacZ基因和GFP(綠色熒光蛋白)基因插入圖4質(zhì)粒中，且使得低溫下只表達(dá)GFP基因，高溫下只表達(dá)lacZ基因，則lacZ基因插在________之間，而GFP基因的插入位置及注意點(diǎn)是________________。

②若以大腸桿菌為受體細(xì)胞，篩選上述①中插入GFP基因成功的受體細(xì)胞的依據(jù)是：大腸桿菌能在含________的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，且__________________。33、科學(xué)家將CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)導(dǎo)入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒并進(jìn)行改造；通過(guò)同源重組實(shí)現(xiàn)目的基因的精確插入，利用該方法已培育出了耐寒的玉米新品種(轉(zhuǎn)入CXE-20耐寒基因)。下圖1表示構(gòu)建轉(zhuǎn)基因耐寒玉米重組質(zhì)粒的過(guò)程，其中Cas9-gRNA是CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)基因，HRA是抗除草劑基因，HR1和HR2是同源重組序列，圖2表示重組質(zhì)粒與受體細(xì)胞核DNA重組的過(guò)程。請(qǐng)回答問(wèn)題：

(1)過(guò)程①的原料是_______，需要_______催化。

(2)限制酶BamHⅠ、SacⅠ、HindⅢ、EcoRⅠ的識(shí)別序列分別是GGATCC、GAGC.AAGCTT、GAATTC，過(guò)程①所用引物如下，則過(guò)程②使用的限制酶是_______和_______。

5′-CGCGAGCTCATGAGAAAGGGCCCGTGG-3′

5′-CGGAATTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA-3′

(3)如圖表示Cas9-gRNA復(fù)合體切割DNA的示意圖，其靶序列是5′-CGAAAGCGTATCAGTATGCGTACGT-3′，根據(jù)圖中靶序列設(shè)計(jì)的gRNA中相應(yīng)序列是5′-_______-3′，Cas9-gRNA復(fù)合體切割DNA的_______鍵使其斷裂。

(4)用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化玉米幼胚后，在培養(yǎng)基中加入_______篩選出導(dǎo)入目的基因幼胚。提取培養(yǎng)后的植株DNA，設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR、電泳，基因長(zhǎng)度及結(jié)果如下圖。設(shè)計(jì)引物的依據(jù)是_______，其中_______號(hào)玉米中成功插入了外源基因，研究人員認(rèn)為這些植株自交后會(huì)發(fā)生性狀分離，其判斷依據(jù)是_______。

34、新冠病毒（＋RNA）的刺突蛋白S通過(guò)與人體黏膜細(xì)胞表面的ACE2受體結(jié)合而進(jìn)入細(xì)胞，是宿主抗體的重要作用位點(diǎn)。下圖1是科研人員利用新冠病毒的＋RNA提取S蛋白基因和S蛋白受體結(jié)合域RBD基因作為抗原基因序列，研制新冠病毒雙抗原疫苗的技術(shù)路線。已知PCR1與PCR2要分別進(jìn)行，然后將產(chǎn)物混合，使用引物1和引物4進(jìn)行PCR3，最終獲得大量S－RBD融合基因（1500bp）。

(1)PCR3過(guò)程中，片段1與片段2連接形成S－RBD融合基因，需要使用______酶。為使S－RBD融合基因能與pX質(zhì)粒相連接，并在工程菌中表達(dá)時(shí)先合成S蛋白，則PCR1過(guò)程中，應(yīng)在引物1的5'端添加的限制酶序列是______。

(2)為初步檢測(cè)過(guò)程B構(gòu)建是否成功，用EcoRⅠ、NdeⅠ、HindⅢ對(duì)重組pX系列質(zhì)粒進(jìn)行完全酶切，然后對(duì)重組pX系列質(zhì)粒及其酶切產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳檢測(cè)，結(jié)果如圖2，據(jù)圖可知，重組質(zhì)粒pX2和pX5構(gòu)建成功的依據(jù)是______。

(3)在工程菌的篩選時(shí)，可先后用兩種抗生素進(jìn)行影印培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)（即使用無(wú)菌的絨氈布?jí)涸谂囵B(yǎng)基A的菌落上，帶出少許菌種，平移并壓在培養(yǎng)基B上），在培養(yǎng)基B中存活的菌落是否含有目的基因_______（填“是”或“否”）。鑒定重組pX質(zhì)粒是否導(dǎo)入工程菌還可以采用的方法是_______。

(4)試從免疫學(xué)角度分析此種雙抗原疫苗比常規(guī)S蛋白疫苗更具優(yōu)勢(shì)的原因_______。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、C【分析】【分析】

【詳解】

A；融合細(xì)胞細(xì)胞會(huì)隨機(jī)丟失來(lái)自人細(xì)胞的染色體；這就發(fā)生遺傳物質(zhì)的改變，A正確；

B；適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基用來(lái)選擇融合細(xì)胞；常用PEG,滅活病毒和電激來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞融合，B正確；

C；在僅含有人的l號(hào)染色體的融合細(xì)胞中；合成出人的尿苷單磷酸激酶，表明人的l號(hào)染色體有人的尿苷單磷酸激酶基因，并無(wú)證據(jù)說(shuō)明人的1號(hào)染色體DNA與小鼠DNA發(fā)生了重組，C錯(cuò)；

D；因?yàn)槿诤霞?xì)胞會(huì)隨機(jī)丟失來(lái)自人細(xì)胞的染色體；可以借助此方法來(lái)研究某個(gè)細(xì)胞的特定性狀與特定染色體的關(guān)系，D正確。

故選C

【點(diǎn)睛】2、D【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：（1）無(wú)菌；無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液；以清除代謝廢物。（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）。

【詳解】

A；培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)通常含有糖類、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等；A正確；

B；培養(yǎng)液需要定期更換；以清除代謝廢物，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，B正確；

C；培養(yǎng)液需要適宜的溫度、pH和滲透壓；維持細(xì)胞生存，C正確；

D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境中需要95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）；D錯(cuò)誤。

故選D。3、C【分析】【分析】

1；蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。(基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì))

2；蛋白質(zhì)工程的基本原理：它可以根據(jù)人的需求來(lái)設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)；又稱為第二代的基因工程。

3；基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)；設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因，從而獲得所需要的蛋白質(zhì)。

【詳解】

A；圖中①代表轉(zhuǎn)錄；②代表翻譯，④代表分子設(shè)計(jì)，⑤代表DNA合成，A正確；

B；因?yàn)榈鞍踪|(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜；所以蛋白質(zhì)工程是一項(xiàng)難度很大的工程，B正確；

C；蛋白質(zhì)工程的目的是對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計(jì)；通過(guò)基因合成或修飾實(shí)現(xiàn)，C錯(cuò)誤；

D；從圖中可以看出蛋白質(zhì)工程的基本途徑與中心法則是相反的；D正確。

故選C。4、D【分析】【分析】

培養(yǎng)基的概念及營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成。

（1）概念：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出的供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；

（2）營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水；碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽；此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無(wú)氧的條件。

【詳解】

A；微生物實(shí)驗(yàn)中使用的培養(yǎng)基必須要經(jīng)過(guò)滅菌處理；以防止雜菌污染，確保實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蝽樌M(jìn)行，分離純化所用的培養(yǎng)基也要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理，A正確；

B；由題意可知；乳酸能分解培養(yǎng)基中碳酸鈣形成透明圈，故分離純化乳酸菌時(shí)，應(yīng)挑選出具有透明圈的菌落作為候選菌，B正確；

C；分離純化乳酸菌時(shí)；為了獲得單個(gè)菌落，需要用無(wú)菌水對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，將稀釋液均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落，C正確；

D；題意顯示；乳酸能分解培養(yǎng)基中碳酸鈣，故分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用是中和乳酸菌代謝過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸，形成透明圈，有利于乳酸菌的鑒別，該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基，且乳酸菌不能利用碳酸鈣作為碳源，D錯(cuò)誤。

故選D。5、C【分析】【分析】

我國(guó)對(duì)生物武器的態(tài)度：不發(fā)展；不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器；并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散。

【詳解】

AC；生物武器幾乎對(duì)所有人都具有殺傷力；應(yīng)堅(jiān)決禁止研制和使用生物武器，A正確，C錯(cuò)誤；

B；我國(guó)對(duì)生物武器的態(tài)度：不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器；并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散，B正確；

D；生物武器不只是對(duì)敵方人員有傷害；對(duì)使用者本身也會(huì)造成傷害，D正確。

故選C。6、B【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲?。焕肞CR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因等。載體具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存，②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入，③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；根據(jù)圖中目的基因兩端的黏性未端以及各種限制酶的的切制位點(diǎn)可知；在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，選用限制酶Xmal和BglⅡ切割質(zhì)粒，才能與目的基因t-PA改良基因高效連接，A正確；

B；將t-PA改良基因與質(zhì)粒連接的酶是DNA連接酶；不是DNA聚合酶，B錯(cuò)誤；

C；在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)；其中的新霉素抗性基因沒(méi)有被破壞，因此可以根據(jù)對(duì)新霉素的抗性將成功導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來(lái)，即該基因的作用是便于將成功導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來(lái)，C正確；

D；重組質(zhì)粒已經(jīng)破壞了mlacZ基因；其不會(huì)表達(dá)產(chǎn)物，即細(xì)胞呈白色。所以，在加入新霉素的培養(yǎng)基中選擇呈白色的菌落選育工程菌株，D正確。

故選B。二、多選題(共9題，共18分)7、B:C【分析】【分析】

人們現(xiàn)在的倫理道德觀念還不能接受克隆人﹔設(shè)計(jì)試管嬰兒是為了治療疾病；但有可能被濫用，如用于設(shè)計(jì)嬰兒性別等，可能會(huì)出現(xiàn)負(fù)面影響﹔進(jìn)行基因檢測(cè)時(shí)，可通過(guò)基因進(jìn)行檢測(cè)，也可通過(guò)測(cè)定基因的表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)來(lái)進(jìn)行;對(duì)于基因歧視現(xiàn)象，可通過(guò)正確的科學(xué)知識(shí)傳播；倫理道德教育和立法得以解決。

【詳解】

A；基因編輯制造嬰兒的行為不符合倫理道德；A正確；

B；設(shè)計(jì)試管嬰兒如專門用來(lái)設(shè)計(jì)嬰兒性別是不符合倫理道德的；可能會(huì)存在負(fù)面影響，B錯(cuò)誤；

C；我國(guó)禁止生殖性克隆人；但允許人胚胎干細(xì)胞的研究在有關(guān)規(guī)定下進(jìn)行，C錯(cuò)誤；

D；生物武器危害巨大；世界各國(guó)都應(yīng)禁止生物武器，D正確。

故選BC。8、A:B【分析】【分析】

分析圖解：異種克隆大熊貓的培育首先通過(guò)核移植技術(shù)獲得重組細(xì)胞；然后經(jīng)過(guò)早期胚胎培養(yǎng)獲得異種重構(gòu)囊胚，再利用胚胎移植技術(shù)將重構(gòu)囊胚移植如代孕兔體內(nèi)。

【詳解】

A；科學(xué)家通過(guò)對(duì)母兔注射促性腺激素；進(jìn)行超數(shù)排卵處理以獲得更多的卵母細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；異種重構(gòu)囊胚在體外培養(yǎng)時(shí)；往往需要在培養(yǎng)液中加入抗生素，從而保證無(wú)毒無(wú)菌環(huán)境，B錯(cuò)誤；

C；囊胚由滋養(yǎng)層細(xì)胞和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)構(gòu)成；其中滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育為胎盤和胎膜，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胚胎的各種組織，C正確；

D；目前；異種重構(gòu)囊胚在代孕兔的子宮內(nèi)能正常著床，但是不能正常發(fā)育生產(chǎn)出大熊貓幼仔，很可能是代孕兔提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不能讓異種重構(gòu)囊胚正常發(fā)育，D正確。

故選AB。

【點(diǎn)睛】9、A:C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：

1；DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液；但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。

2；DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。

3；DNA的鑒定：在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。

【詳解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但DNA既溶于2mol/L的NaCl溶液，也溶于蒸餾水，A正確；

B；洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜；但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度，B錯(cuò)誤；

C；DNA在濃度為0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最低；因此用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14mol/L或加入冷酒精后過(guò)濾，都可以去除部分雜質(zhì)，C正確；

D；在酸性條件下；DNA與二苯胺試劑反應(yīng)，最終產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，因此常用二苯胺試劑鑒定DNA，D正確。

故選ACD。10、A:C:D【分析】【分析】

哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞；是由早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)的一類細(xì)胞。ES細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上，表現(xiàn)為體積??；細(xì)胞核大、核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，即可以分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)條件下，ES可以增殖而不發(fā)生分化。ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上，或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中能夠維持不分化狀態(tài)。

【詳解】

A；試管羊、轉(zhuǎn)基因羊的繁殖方式都是有性生殖；克隆羊的繁殖方式屬于無(wú)性生殖，A錯(cuò)誤；

B；胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)可維持只增殖不分化狀態(tài)；B正確；

C；受精時(shí)防止多精入卵的兩屏障是透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)；C錯(cuò)誤；

D；囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞可用于性別鑒定；將來(lái)可以發(fā)育成胎膜和胎盤，D錯(cuò)誤。

故選ACD。11、C:D【分析】【分析】

分析題干信息：該實(shí)驗(yàn)的目的是篩選出高效降解化合物A的細(xì)菌；在以化合物A為唯一碳源的培養(yǎng)基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A為碳源和氮源生長(zhǎng)繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，無(wú)法生長(zhǎng)繁殖。

【詳解】

A；本實(shí)驗(yàn)的目的是“篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌”；因此培養(yǎng)基中加入化合物A作為唯一碳源，目的是為了篩選目的菌，A正確；

B；實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)過(guò)程中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)；可使目的菌和培養(yǎng)液充分接觸，B正確；

C；為了防止污染；接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后需要冷卻后再挑取菌落，否則會(huì)導(dǎo)致高溫使菌種死亡，C錯(cuò)誤；

D；在以化合物A為唯一碳源的培養(yǎng)基中只有能降解化合物A的微生物才能生長(zhǎng)繁殖；不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，無(wú)法生長(zhǎng)繁殖，將固體培養(yǎng)基得到的目的菌重復(fù)多次上述實(shí)驗(yàn)的目的是對(duì)菌種“純化”，D錯(cuò)誤。

故選CD。

【點(diǎn)睛】12、A:C:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。轉(zhuǎn)基因食品、產(chǎn)品上都要標(biāo)注原料來(lái)自轉(zhuǎn)基因生物；如“轉(zhuǎn)基因××”“轉(zhuǎn)基因××加工品（制成品）”“加工原料為轉(zhuǎn)基因××”“本產(chǎn)品為轉(zhuǎn)基因××加工制成”．對(duì)于轉(zhuǎn)基因食物潛在隱患要進(jìn)行開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警跟蹤等措施多環(huán)節(jié)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)陌踩栽u(píng)價(jià)，保障了現(xiàn)代生物技術(shù)的安全性。

【詳解】

A；為了加強(qiáng)對(duì)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物的標(biāo)識(shí)管理；保護(hù)消費(fèi)者的知情權(quán)，我國(guó)對(duì)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實(shí)行了標(biāo)識(shí)制度，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因食品上只標(biāo)明原料來(lái)自轉(zhuǎn)基因生物；并未標(biāo)明其危害，B錯(cuò)誤；

C；為了保障現(xiàn)代生物技術(shù)的安全性；需要開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警跟蹤等措施，C正確；

D；生物安全是指擔(dān)心轉(zhuǎn)基因生物會(huì)影響到生物多樣性；D正確。

故選ACD。13、A:B:C:D【分析】【分析】

微生物接種的方法很多；最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。若要對(duì)微生物進(jìn)行取樣計(jì)數(shù)，接種方法只能是稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。

【詳解】

A；微生物的生長(zhǎng)需要碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽等物質(zhì)；只是有些固氮菌由于能利用氮?dú)庾鳛榈?，不需要在培養(yǎng)基中添加氮源，A錯(cuò)誤；

B；平板劃線法不能用于計(jì)數(shù)；B錯(cuò)誤；

C、將1mL菌液稀釋100倍，在3個(gè)平板上分別接0．1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為42、39和36。據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為（42+39+36）÷3÷0．1×100×1000=3．9×107；C錯(cuò)誤；

D；根據(jù)圖示可知；兩菌種的接種量比為1:1時(shí)比兩菌種的接種量比為2:1時(shí)效果好，但由于該實(shí)驗(yàn)設(shè)置的兩菌種的接種量比例的組數(shù)過(guò)少，所以無(wú)法判斷處理該類廚余垃圾廢液的兩菌種的最佳接種量比，D錯(cuò)誤。

故選ABCD。14、C:D【分析】【分析】

在篩選纖維素分解菌的過(guò)程中；剛果紅可與培養(yǎng)基中纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

【詳解】

A；剛建成公園落葉少；土壤中的纖維素分解菌少，不利于獲得菌種，A錯(cuò)誤；

B；剛果紅不能抑制其它微生物的生長(zhǎng)；剛果紅可鑒別出纖維素分解菌，B錯(cuò)誤；

C；與細(xì)菌產(chǎn)生的胞內(nèi)酶相比；真菌分泌的纖維素酶更易從培養(yǎng)液中獲取，因?yàn)槔w維素酶可以分泌出來(lái)，C正確；

D；纖維素酶的開(kāi)發(fā)和利用；可用于分解秸稈、棉質(zhì)衣物等，能促進(jìn)人類對(duì)環(huán)境中一些廢棄物的循環(huán)利用，D正確。

故選CD。15、B:C:D【分析】【分析】

在微生物學(xué)中；將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無(wú)機(jī)鹽。

【詳解】

A；培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致微生物不能從培養(yǎng)基中吸水；將出現(xiàn)失水過(guò)多而死亡的現(xiàn)象，對(duì)生長(zhǎng)不利，A錯(cuò)誤；

B；這種培養(yǎng)基以石油為唯一碳源；只有石油降解菌可在該培養(yǎng)基上正常存活，因此是一種選擇培養(yǎng)基，B正確；

C；被石油污染的土壤通氣性極差；利用這種石油降解菌可以降解石油，修復(fù)土壤，C正確；

D；根據(jù)生物與其生存環(huán)境相適應(yīng)的特點(diǎn)；未被污染的土壤中幾乎不含石油分解菌，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌，D正確。

故選BCD。三、填空題(共9題，共18分)16、略

【解析】①.活菌②.培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】兼性厭氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO218、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】是人們所需要轉(zhuǎn)移或改造的基因19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】60—7520、略

【分析】【分析】

1；動(dòng)物核移植的概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體，核移植得到的動(dòng)物稱克隆動(dòng)物；

2；早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分；除無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分，并需添加動(dòng)物血清等天然成分。

【詳解】

（1）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物；試管動(dòng)物和克隆動(dòng)物分別在體外得到早期胚胎后；都要通過(guò)胚胎移植獲得新個(gè)體。

（2）核移植包括體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植；其中后者更易成功，原因是胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易，而體細(xì)胞分化程度高，全能性不易表達(dá)；核移植常用的減數(shù)第二次分裂中期的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，其中去核的目的是避免原細(xì)胞核中遺傳物質(zhì)對(duì)克隆動(dòng)物的影響，保證克隆動(dòng)物的核遺傳物質(zhì)來(lái)自供體細(xì)胞。

（3）促性腺激素處理可促使雌性個(gè)體超數(shù)排卵；即使良種母牛一次排出多枚卵母細(xì)胞。精子需要經(jīng)過(guò)獲能處理才能受精；防止多精入卵的兩道屏障依次為透明帶反應(yīng)；卵細(xì)胞膜反應(yīng)。

（4）要考慮環(huán)境承載力；處理好生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡，這體現(xiàn)了生態(tài)工程的協(xié)調(diào)與平衡原理。

【點(diǎn)睛】

本題考查細(xì)胞工程、胚胎工程和生態(tài)工程的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生理解能力、獲取信息的能力和綜合運(yùn)用能力。【解析】胚胎移植（或胚胎的早期培養(yǎng)和胚胎移植）胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易MⅡ中期去核卵母細(xì)胞促性腺激素獲能透明帶反應(yīng)協(xié)調(diào)與平衡21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】植物繁殖的新途徑作物新品種的培育（單倍體育種、突變體利用）22、略

【分析】【詳解】

生物武器種類：包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等，以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等。生物武器致病力強(qiáng)、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲(chóng)等散布，經(jīng)由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，也能損害植物，若用與戰(zhàn)爭(zhēng)，則可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果?！窘馕觥可镂淦鞣N類：包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等，以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等。生物武器致病力強(qiáng)、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲(chóng)等散布，經(jīng)由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，也能損害植物。23、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲(chóng)等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，同時(shí)可毀壞植物，該說(shuō)法錯(cuò)誤?！窘馕觥垮e(cuò)誤24、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)抗體抗原－抗體雜交四、判斷題(共4題，共12分)25、B【分析】【詳解】

理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，正確的做法是趨利避害，而不能因噎廢食，所以本題錯(cuò)誤。26、B【分析】【詳解】

從牛卵巢中采集到卵母細(xì)胞后；接著對(duì)其進(jìn)行的操作是先在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，再通過(guò)顯微操作去除卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核，獲得去核的卵母細(xì)胞，再經(jīng)核移植獲得重組的受體細(xì)胞。

故該表述錯(cuò)誤。27、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是在分子水平上通過(guò)基因修飾或基因合成來(lái)完成的，是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來(lái)的第二代基因工程。故該說(shuō)法正確。28、B【分析】【詳解】

來(lái)源于自然界的目的基因?qū)胫参矬w后，可能破壞原有的基因結(jié)構(gòu)，具有不確定性，外源基因也可能通過(guò)花粉傳播，使其他植物成為“超級(jí)植物"等，所以如果轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來(lái)源于自然界，也可能存在安全性問(wèn)題。本說(shuō)法錯(cuò)誤。五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共14分)29、略

【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的具體過(guò)程：取胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織--剪碎組織--用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞--制成細(xì)胞懸液--轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)--貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞；制成細(xì)胞懸液--轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．

（1）

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中；接種前需對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行滅菌處理，培養(yǎng)過(guò)程中通常還需添加一定量的抗生素，以防止污染；當(dāng)培養(yǎng)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞達(dá)到一定數(shù)量時(shí)，使用胰蛋白酶處理，進(jìn)行傳代培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞，用于實(shí)驗(yàn)研究。

（2）

①分析表格可知；A組的GDNF濃度為0，作為實(shí)驗(yàn)的對(duì)照組。

②由表格中的數(shù)據(jù)可知；與對(duì)照組比較可知，實(shí)驗(yàn)組中的細(xì)胞突起的平均數(shù)量和平均長(zhǎng)度都更大，在一定范圍內(nèi)，且隨GDNF濃度增加，細(xì)胞突起的平均數(shù)量和平均長(zhǎng)度都在增加，因此由表格中的數(shù)據(jù)可知，GDNF對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)有促進(jìn)作用；在一定范圍內(nèi)，隨GDNF濃度增加，促進(jìn)作用增強(qiáng)，超過(guò)最適濃度，促進(jìn)作用減弱；GDNF濃度在100ng/ml時(shí)促進(jìn)作用最明顯。

③從實(shí)驗(yàn)可知；GDNF對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用，因此在治療運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞損傷時(shí)，可以通過(guò)藥物/注射治療；基因治療、動(dòng)物細(xì)胞融合制備單抗等方法治療運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞損傷。

【點(diǎn)睛】

本題考查了動(dòng)物細(xì)胞工程的有關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程，能夠利用對(duì)照實(shí)驗(yàn)的觀點(diǎn)分析表格數(shù)據(jù)，難度適中。【解析】（1）抗生素胰蛋白酶（膠原蛋白酶）

（2）A組GDNF對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)有促進(jìn)作用；在一定范圍內(nèi)，隨GDNF濃度增加，促進(jìn)作用增強(qiáng)，超過(guò)最適濃度，促進(jìn)作用減弱；GDNF濃度在100ng/ml時(shí)促進(jìn)作用最明顯藥物/注射治療、基因治療、動(dòng)物細(xì)胞融合制備單抗等30、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對(duì)的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過(guò)程，該過(guò)程還需要tRNA來(lái)運(yùn)轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個(gè)氨基酸的三個(gè)相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過(guò)程。

基因工程中檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度不變，說(shuō)明其沒(méi)有發(fā)生堿基對(duì)的增添和缺失，因?yàn)檫@兩者改變會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度改變，因此推測(cè)其基因突變是由于堿基對(duì)替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導(dǎo)致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導(dǎo)核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長(zhǎng)蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)；功能相同，據(jù)此推測(cè)該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對(duì)使翻譯過(guò)程繼續(xù)。

（3）本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖潜容^攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾），同時(shí)保證在不同的實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實(shí)驗(yàn)組中受體細(xì)胞中應(yīng)該含有導(dǎo)入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個(gè)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導(dǎo)了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，即進(jìn)行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對(duì)照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細(xì)胞中表達(dá)的全長(zhǎng)IDUA蛋白量比其他實(shí)驗(yàn)組都多，說(shuō)明其能有效恢復(fù)細(xì)胞中全長(zhǎng)IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實(shí)驗(yàn)可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導(dǎo)核糖體對(duì)突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進(jìn)行通讀，進(jìn)而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA突變基因純合小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時(shí)，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細(xì)胞內(nèi)都沒(méi)有相應(yīng)mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無(wú)法發(fā)揮作用，最終導(dǎo)致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無(wú)明顯差異?！窘馕觥?1)替換減少。

(2)識(shí)別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過(guò)程繼續(xù)。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復(fù)細(xì)胞中全長(zhǎng)IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無(wú)明顯差異六、綜合題(共4題，共12分)31、略

【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過(guò)程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原；從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。

（1）

注射抗原的目的是誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生能夠分泌抗新冠病毒抗體的B淋巴細(xì)胞；然后用于制作雜交瘤細(xì)胞。

（2）

骨髓瘤細(xì)胞與某些淋巴細(xì)胞融合；融合的方法除了電激外，還可以用聚乙二醇（PEG）或滅活病毒。融合體系中有3種雜交細(xì)胞，為骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞雜交；淋巴細(xì)胞與淋巴細(xì)胞融合，以及所需的骨髓瘤細(xì)胞與淋巴細(xì)胞融合。

（3）

獲得能分泌所需單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞至少需要兩次篩選；第一次篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。在HAT培養(yǎng)基上存活的細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞，特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一抗體。同一種抗原可能激活多種B細(xì)胞，還需經(jīng)過(guò)兩次篩選，才能獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，篩選所依據(jù)的基本原理是抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性。

（4）

單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)在于它的特異性強(qiáng)；靈敏度高，可大量制備。因?yàn)閱慰寺】贵w的特異性強(qiáng)，主要用途有作為診斷試劑；用于治療疾病和運(yùn)載藥物。

【點(diǎn)睛】

單克隆抗體的制備是常見(jiàn)的考點(diǎn)也是難點(diǎn)，生產(chǎn)上應(yīng)用也非常多，要在理解其原理的基礎(chǔ)上熟悉相應(yīng)的制備步驟?！窘馕觥浚?）誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生能夠分泌抗新冠病毒抗體的B淋巴細(xì)胞。

（2）聚乙二醇（PEG）或滅活病毒3

（3）既能迅速大量繁殖；又能產(chǎn)生專一抗體多種B抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性。

（4）特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備作為診斷試劑、用于治療疾病和運(yùn)載藥物32、略

【分析】【分析】

1；基因工程又叫DNA重組技術(shù)；是指按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取，②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，④目的基因的檢測(cè)與鑒定。

2；PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；PCR技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，原理是DNA復(fù)制，前提條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物，條件還包括模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。具體過(guò)程為：

（1）變性：當(dāng)溫度上升到90℃以上時(shí)；氫鍵斷裂，雙鏈DNA解旋為單鏈。

（2）復(fù)性：當(dāng)溫度降低到50℃左右是；兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合。

（3）延伸：溫度上升到72℃左右；溶液中的四種脫氧核苷酸，在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈。

3；據(jù)圖1分析；圖中過(guò)程Ⅰ表示構(gòu)建基因表達(dá)載體，是基因工程的核心步驟；過(guò)程Ⅱ表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；過(guò)程Ⅲ表示篩選含目的基因的受體菌的過(guò)程。

【詳解】

（1）結(jié)合PCR技術(shù)過(guò)程分析；其原理是雙鏈DNA復(fù)制，且Taq酶不能從頭開(kāi)始合成DNA，只能從引物的3′端延伸DNA鏈，則第3次擴(kuò)增才會(huì)出現(xiàn)2個(gè)雙鏈等長(zhǎng)的目的基因，第4次擴(kuò)增才會(huì)出現(xiàn)8個(gè)雙鏈等長(zhǎng)的目的基因；實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，微量離心管中需加入的物質(zhì)有：模板；引物、原料、緩沖液、Taq酶；結(jié)合圖2分析可知，操作比較理想的泳道有4條。

（2）根據(jù)以上分析已知；圖1中過(guò)程Ⅰ表示構(gòu)建基因表達(dá)載體，該過(guò)程需要限制酶和DNA連接酶的催化；步驟Ⅱ表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，若受體細(xì)胞為細(xì)菌（微生物），可以用鈣離子處理使之成為感受態(tài)；根據(jù)題干信息分析，圖1中要先篩選出一種對(duì)三氯生抗性較強(qiáng)的重組質(zhì)粒，因此步驟Ⅲ中所用的物質(zhì)X應(yīng)該是三氯生。

（3）根據(jù)題中信息及曲線圖分析可知；在培養(yǎng)12h之后，pEA組（含三氯生）與pE2組（無(wú)三氯生）菌液濃度相差不大，而明顯比pE2組（含三氯生）菌液濃度高，說(shuō)明pEA組（含三氯生）對(duì)三氯生的抵抗作用效果最好，因此要“獲得一種增強(qiáng)大腸桿菌對(duì)三氯生的抵抗作用效果較好的重組質(zhì)?！保赃m宜選作構(gòu)建溫度調(diào)控表達(dá)質(zhì)粒的是pEA。

（4）①根據(jù)題意和圖4分析，已知S1和S2是啟動(dòng)子，P1和P2是終止子，且H基因在高溫下會(huì)抑制