食品中有害有毒物質(zhì)

1、第八章第八章 食品中有害有毒物質(zhì)食品中有害有毒物質(zhì)食品中的有毒有害物質(zhì)：食品中的有毒有害物質(zhì)：食品中內(nèi)源性有害成分食品中內(nèi)源性有害成分（過敏原、有害糖苷類、凝集素、皂素等）（過敏原、有害糖苷類、凝集素、皂素等）食品中外源性有害成分食品中外源性有害成分（重金屬、農(nóng)藥殘留、二噁英、獸藥等）（重金屬、農(nóng)藥殘留、二噁英、獸藥等）食物中的真菌毒素食物中的真菌毒素8.1 8.1 農(nóng)藥農(nóng)藥8.1.1農(nóng)藥殘留概述農(nóng)藥殘留概述v農(nóng)藥殘留物是指由于噴施農(nóng)藥后存留在環(huán)境和農(nóng)藥殘留物是指由于噴施農(nóng)藥后存留在環(huán)境和農(nóng)產(chǎn)品、食品、飼料、藥材中的農(nóng)藥及其降解農(nóng)產(chǎn)品、食品、飼料、藥材中的農(nóng)藥及其降解代謝產(chǎn)物、雜質(zhì)，還包括環(huán)境

2、背景中存有的污代謝產(chǎn)物、雜質(zhì)，還包括環(huán)境背景中存有的污染或持久性農(nóng)藥的殘留物再次在商品中行成的染或持久性農(nóng)藥的殘留物再次在商品中行成的殘留。殘留。v農(nóng)藥殘留物量是指農(nóng)藥本體物及其代謝物的殘農(nóng)藥殘留物量是指農(nóng)藥本體物及其代謝物的殘留量的總和，并構(gòu)成不同程度的毒性。留量的總和，并構(gòu)成不同程度的毒性。v農(nóng)藥的殘留毒性（殘毒）：殘留農(nóng)藥在食物上達(dá)農(nóng)藥的殘留毒性（殘毒）：殘留農(nóng)藥在食物上達(dá)到一定的濃度（即殘留量）后，人或其它高等動(dòng)到一定的濃度（即殘留量）后，人或其它高等動(dòng)物長期進(jìn)食這些食物，就會(huì)使農(nóng)藥在體內(nèi)積累起物長期進(jìn)食這些食物，就會(huì)使農(nóng)藥在體內(nèi)積累起來，引起慢性中毒。來，引起慢性中毒。v農(nóng)藥的殘毒的

3、三個(gè)來源：施用農(nóng)藥后藥劑對(duì)作物農(nóng)藥的殘毒的三個(gè)來源：施用農(nóng)藥后藥劑對(duì)作物的直接污染；作物對(duì)污染環(huán)境中農(nóng)藥的吸收；生的直接污染；作物對(duì)污染環(huán)境中農(nóng)藥的吸收；生物富集與食物鏈。物富集與食物鏈。v農(nóng)藥的殘毒所造成的污染是多方面的。農(nóng)藥的殘毒所造成的污染是多方面的。v在農(nóng)藥殘留的分析過程中，分離技術(shù)往往占主導(dǎo)在農(nóng)藥殘留的分析過程中，分離技術(shù)往往占主導(dǎo)地位。由于各種色譜檢測器的選擇性，針對(duì)不同地位。由于各種色譜檢測器的選擇性，針對(duì)不同類型的有機(jī)化合物常需要不同的前處理技術(shù)。類型的有機(jī)化合物常需要不同的前處理技術(shù)。8.1.2 8.1.2 農(nóng)藥的分類農(nóng)藥的分類 根據(jù)防治對(duì)象的不同，常將防治害蟲的農(nóng)藥稱為根據(jù)

4、防治對(duì)象的不同，常將防治害蟲的農(nóng)藥稱為殺蟲劑，防治紅蜘蛛的稱為殺螨劑，防治作物病殺蟲劑，防治紅蜘蛛的稱為殺螨劑，防治作物病菌的稱為殺菌劑，防治雜草的稱為除草劑，防治菌的稱為殺菌劑，防治雜草的稱為除草劑，防治鼠類的稱為殺鼠劑。鼠類的稱為殺鼠劑。 根據(jù)化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)可分為無機(jī)農(nóng)藥、有機(jī)農(nóng)藥根據(jù)化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)可分為無機(jī)農(nóng)藥、有機(jī)農(nóng)藥（例如有機(jī)氯、有機(jī)磷、有機(jī)砷、有機(jī)氟等）。（例如有機(jī)氯、有機(jī)磷、有機(jī)砷、有機(jī)氟等）。 主要介紹有機(jī)氯殺蟲劑、有機(jī)磷殺蟲劑、擬除蟲主要介紹有機(jī)氯殺蟲劑、有機(jī)磷殺蟲劑、擬除蟲菊酯殺蟲劑的殘留分析技術(shù)。菊酯殺蟲劑的殘留分析技術(shù)。8.1.3 8.1.3 有機(jī)氯殺蟲劑的殘留分析有機(jī)

5、氯殺蟲劑的殘留分析v有機(jī)氯農(nóng)藥（有機(jī)氯農(nóng)藥（organochlorine pesticides, ocps)是是具有殺蟲活性的氯代烴的總稱。具有殺蟲活性的氯代烴的總稱。vocps分為三種類型：六六六；分為三種類型：六六六； ddt及其類似物；及其類似物；環(huán)戊二烯衍生物。這三類不同的氯代烴均為神經(jīng)環(huán)戊二烯衍生物。這三類不同的氯代烴均為神經(jīng)毒性物質(zhì)，正常環(huán)境下不易分解。易通過食物鏈毒性物質(zhì)，正常環(huán)境下不易分解。易通過食物鏈在生物體脂肪中富集和積累。在生物體脂肪中富集和積累。v從從20世紀(jì)世紀(jì)70年代開始，許多工業(yè)化國家相繼限用年代開始，許多工業(yè)化國家相繼限用或禁用或禁用ddt、六六六及狄氏劑。、六

6、六六及狄氏劑。v有機(jī)氯殺蟲劑的殘留分析方法在農(nóng)藥殘留中有機(jī)氯殺蟲劑的殘留分析方法在農(nóng)藥殘留中是研究最早的。是研究最早的。v在有機(jī)氯農(nóng)藥（在有機(jī)氯農(nóng)藥（ocps）分析領(lǐng)域最為廣泛）分析領(lǐng)域最為廣泛使用的檢測技術(shù)是氣相色譜使用的檢測技術(shù)是氣相色譜/電子捕獲檢測器電子捕獲檢測器（gc-ecd），它具有靈敏度高、分離效果），它具有靈敏度高、分離效果好、定量準(zhǔn)確等特點(diǎn)，是一種經(jīng)典的分析方好、定量準(zhǔn)確等特點(diǎn)，是一種經(jīng)典的分析方法。色譜柱通常是弱極性至中級(jí)性柱，檢測法。色譜柱通常是弱極性至中級(jí)性柱，檢測器一般用器一般用ecd。ddtddt1874年年baeyer首次合成。首次合成。mller發(fā)現(xiàn)它的殺蟲作用

7、，獲瑞士專利，并于發(fā)現(xiàn)它的殺蟲作用，獲瑞士專利，并于1948年獲諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。年獲諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。對(duì)溫血?jiǎng)游锛倍拘缘停瑢?duì)大白鼠的口服急性毒性對(duì)溫血?jiǎng)游锛倍拘缘?，?duì)大白鼠的口服急性毒性ld50為為250-500mg/kg，但，但ddt以及主要的代謝物以及主要的代謝物dde容易在動(dòng)物脂肪中積累。容易在動(dòng)物脂肪中積累。hccl3clclclclclclclcl六六六（六六六（bhcbhc）六六六的工業(yè)品是多種異構(gòu)體的混合物，其活性六六六的工業(yè)品是多種異構(gòu)體的混合物，其活性組分組分-bhc僅占僅占15%左右，其余均為無效組分。左右，其余均為無效組分。廣譜性殺蟲劑。廣譜性殺蟲劑。 -bhc積累體內(nèi)的危險(xiǎn)性

8、很小，對(duì)大白鼠口服急積累體內(nèi)的危險(xiǎn)性很小，對(duì)大白鼠口服急性毒性性毒性ld50為為76-200mg/kg，積累在動(dòng)物脂肪、奶，積累在動(dòng)物脂肪、奶中的中的bhc能很快排出體外。但工業(yè)品中能很快排出體外。但工業(yè)品中-bhc積積累的可能性和慢性中毒性很大。累的可能性和慢性中毒性很大。-bhcc lc lc lc lc lc l艾氏劑艾氏劑艾氏劑具有較高的蒸氣壓，可以以顆粒劑的形式艾氏劑具有較高的蒸氣壓，可以以顆粒劑的形式作為土壤殺蟲劑。大鼠口服急性毒性作為土壤殺蟲劑。大鼠口服急性毒性ld50為為67mg/kg，由于它在血液中有較高的溶解度，因，由于它在血液中有較高的溶解度，因此容易擴(kuò)散到所有的組織中，

9、特別是脂肪組織。此容易擴(kuò)散到所有的組織中，特別是脂肪組織。有機(jī)氯殺蟲劑殘留的分析方法有機(jī)氯殺蟲劑殘留的分析方法 有關(guān)有機(jī)氯殺蟲劑的殘留分析方法在農(nóng)藥有關(guān)有機(jī)氯殺蟲劑的殘留分析方法在農(nóng)藥殘留中是研究最早的，對(duì)于僅有殘留中是研究最早的，對(duì)于僅有bhc和和ddt農(nóng)藥的前處理可用濃硫酸磺化法處理，農(nóng)藥的前處理可用濃硫酸磺化法處理，對(duì)同時(shí)含有艾氏劑、狄氏劑等多種有機(jī)氯對(duì)同時(shí)含有艾氏劑、狄氏劑等多種有機(jī)氯殺蟲劑時(shí)，一般采用氟羅里硅土柱凈化。殺蟲劑時(shí)，一般采用氟羅里硅土柱凈化。選用的色譜柱通常是弱極性至中極性柱。選用的色譜柱通常是弱極性至中極性柱。檢測器一般用檢測器一般用ecd和和msd。 水果、蔬菜中多種

10、有機(jī)氯殘留農(nóng)藥的毛細(xì)管氣水果、蔬菜中多種有機(jī)氯殘留農(nóng)藥的毛細(xì)管氣相色譜測定方法：相色譜測定方法：1. 樣品的提取與凈化樣品的提取與凈化 水果、蔬菜類樣品置于組織搗碎機(jī)中高速搗碎，水果、蔬菜類樣品置于組織搗碎機(jī)中高速搗碎，作為試驗(yàn)樣品。稱取樣品作為試驗(yàn)樣品。稱取樣品20g于于250ml具塞三具塞三角燒瓶中，加入角燒瓶中，加入100ml石油醚丙酮（石油醚丙酮（4：1），振蕩），振蕩30min。用布氏漏斗抽濾，以適量。用布氏漏斗抽濾，以適量石油醚洗滌殘?jiān)?，濾液合并于石油醚洗滌殘?jiān)瑸V液合并于500ml分液漏斗分液漏斗中，用水洗滌除去丙酮。上層石油醚經(jīng)無水硫中，用水洗滌除去丙酮。上層石油醚經(jīng)無水硫酸鈉

11、脫水收集于三角瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至酸鈉脫水收集于三角瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至5ml。 在在2cm（id）25cm玻璃層析柱中，于底部玻璃層析柱中，于底部加入少許玻璃棉，依次加入加入少許玻璃棉，依次加入1cm高的無水硫酸高的無水硫酸鈉，鈉，5gflorisil和和1cm無水硫酸鈉。先以無水硫酸鈉。先以40ml無水乙醚石油醚液（無水乙醚石油醚液（15：85）預(yù)洗柱）預(yù)洗柱子，棄掉淋出液。把濃縮的樣液移入柱內(nèi)，以子，棄掉淋出液。把濃縮的樣液移入柱內(nèi)，以適量無水乙醚石油醚液（適量無水乙醚石油醚液（15：85）洗脫，收）洗脫，收集全部洗脫液，于集全部洗脫液，于40水浴上減壓濃縮至水浴上減壓濃縮至40ml，以

12、石油醚定容，供色譜分析。，以石油醚定容，供色譜分析。2. 色譜條件色譜條件 色譜柱：色譜柱：50m 0.25mm（內(nèi)徑）；膜厚（內(nèi)徑）；膜厚0.20um，固定相為，固定相為cp-sil 19cb，彈性石英，彈性石英毛細(xì)管柱。毛細(xì)管柱。 氮?dú)庾鳛榱鲃?dòng)相，進(jìn)樣溫度氮?dú)庾鳛榱鲃?dòng)相，進(jìn)樣溫度250，檢測器溫度，檢測器溫度300，采用不分流進(jìn)樣方式，進(jìn)樣量，采用不分流進(jìn)樣方式，進(jìn)樣量1ul，進(jìn)，進(jìn)樣樣0.75min后吹掃。后吹掃。 柱溫程序：柱溫柱溫程序：柱溫100，恒溫，恒溫4min以后以以后以8/min的速率程序升溫至的速率程序升溫至240，繼續(xù)恒溫，繼續(xù)恒溫20min至樣品全部流出。至樣品全部流出

13、。近幾年來有機(jī)氯農(nóng)藥殘留分析結(jié)果：近幾年來有機(jī)氯農(nóng)藥殘留分析結(jié)果：海鳥蛋，海豹，魚粉，魚油：毒殺芬海鳥蛋，海豹，魚粉，魚油：毒殺芬地表水，橄欖油：硫丹地表水，橄欖油：硫丹淡水魚：淡水魚：dde飲用水：飲用水：16種種ocps水果蔬菜：水果蔬菜：924種種ocps藥材：藥材：718種種ocps8.1.4 8.1.4 有機(jī)磷殺蟲劑殘留的分析有機(jī)磷殺蟲劑殘留的分析v 有機(jī)磷農(nóng)藥（有機(jī)磷農(nóng)藥（opps)是含有是含有c-p鍵或鍵或c-o-p、c-s-p、c-n-p鍵的有機(jī)化合物。鍵的有機(jī)化合物。v 大部分不溶于水，而溶于有機(jī)溶劑。在中性和酸性條件下大部分不溶于水，而溶于有機(jī)溶劑。在中性和酸性條件下穩(wěn)定，

14、不易水解，在堿性條件下易水解失效。穩(wěn)定，不易水解，在堿性條件下易水解失效。v 接觸可造成中毒，它們的毒性依賴于其結(jié)構(gòu)和功能團(tuán)。例接觸可造成中毒，它們的毒性依賴于其結(jié)構(gòu)和功能團(tuán)。例如，含如，含p=o鍵（如敵百蟲、對(duì)氧磷）的毒性通常比含鍵（如敵百蟲、對(duì)氧磷）的毒性通常比含p=s（如馬拉硫磷）大。這些化合物主要是抑制生物體內(nèi)膽堿（如馬拉硫磷）大。這些化合物主要是抑制生物體內(nèi)膽堿酯酶的酶活性，導(dǎo)致乙酰膽堿這種傳導(dǎo)介質(zhì)代謝紊亂，產(chǎn)酯酶的酶活性，導(dǎo)致乙酰膽堿這種傳導(dǎo)介質(zhì)代謝紊亂，產(chǎn)生遲發(fā)性神經(jīng)毒性，引起運(yùn)動(dòng)失調(diào)、昏迷、呼吸中樞麻痹生遲發(fā)性神經(jīng)毒性，引起運(yùn)動(dòng)失調(diào)、昏迷、呼吸中樞麻痹甚至死亡。甚至死亡。v 有

15、機(jī)磷殺蟲劑由于藥效高，易被水、酶及微生物所降解，有機(jī)磷殺蟲劑由于藥效高，易被水、酶及微生物所降解，很少殘留毒性等，因此目前在殺蟲劑的使用方面，它仍然很少殘留毒性等，因此目前在殺蟲劑的使用方面，它仍然起主要作用。起主要作用。 目前正式商品化的有機(jī)磷農(nóng)藥有上百種，如敵敵目前正式商品化的有機(jī)磷農(nóng)藥有上百種，如敵敵畏、敵百蟲、馬拉硫磷等。畏、敵百蟲、馬拉硫磷等。敵敵畏（敵敵畏（ddv） o，o-二甲基二甲基-o-（2，2-二氯）乙烯基磷酸酯二氯）乙烯基磷酸酯 無色液體，有芳香味，在水中約能溶無色液體，有芳香味，在水中約能溶1%，能與大，能與大部分有機(jī)溶劑相溶。部分有機(jī)溶劑相溶。 ddv是一種觸殺和胃毒

16、殺蟲劑。對(duì)蠅、蚊、飛蛾是一種觸殺和胃毒殺蟲劑。對(duì)蠅、蚊、飛蛾等擊倒速度很快。等擊倒速度很快。 對(duì)雄大鼠的口服急性毒性對(duì)雄大鼠的口服急性毒性ld50為為80mg/kg，在溫，在溫血?jiǎng)游矬w內(nèi)很快降解。血?jiǎng)游矬w內(nèi)很快降解。敵百蟲敵百蟲 o，o-二甲基二甲基-1-羥基羥基-2，2，3-三氯乙基磷三氯乙基磷酸酯酸酯 敵百蟲是一種觸殺和胃毒殺蟲劑。對(duì)雙翅敵百蟲是一種觸殺和胃毒殺蟲劑。對(duì)雙翅目昆蟲很有效。目昆蟲很有效。 敵百蟲本身對(duì)乙酰膽堿酯酶抑制力很弱，敵百蟲本身對(duì)乙酰膽堿酯酶抑制力很弱，但它在生理但它在生理ph條件下就能轉(zhuǎn)變成強(qiáng)抑制條件下就能轉(zhuǎn)變成強(qiáng)抑制劑劑ddv。樂果樂果 o,o-二甲基二甲基-s-（

17、n-甲基氨基甲酰甲基）二硫代甲基氨基甲酰甲基）二硫代磷酸酯磷酸酯 第一個(gè)對(duì)哺乳動(dòng)物低毒的有機(jī)磷內(nèi)吸殺蟲劑。第一個(gè)對(duì)哺乳動(dòng)物低毒的有機(jī)磷內(nèi)吸殺蟲劑。 樂果是一種觸殺性和內(nèi)吸性殺蟲殺螨劑。樂果是一種觸殺性和內(nèi)吸性殺蟲殺螨劑。 樂果在貯存中不很穩(wěn)定，特別在溫度高和存在樂果在貯存中不很穩(wěn)定，特別在溫度高和存在堿及二硫代磷酸二甲酯時(shí)會(huì)分解，主要是發(fā)生堿及二硫代磷酸二甲酯時(shí)會(huì)分解，主要是發(fā)生烷基化反應(yīng)。鐵可加速其分解。烷基化反應(yīng)。鐵可加速其分解。檢測方法 檢測有機(jī)磷的分析方法有波譜法、色譜法、酶檢測有機(jī)磷的分析方法有波譜法、色譜法、酶抑制法三大類。抑制法三大類。 波譜法是跟據(jù)有機(jī)磷農(nóng)藥中某些官能團(tuán)或水解、

18、波譜法是跟據(jù)有機(jī)磷農(nóng)藥中某些官能團(tuán)或水解、還原產(chǎn)物與特殊的顯色劑在一定的條件下，發(fā)還原產(chǎn)物與特殊的顯色劑在一定的條件下，發(fā)生氧化、磺酸化、酯化、配合等化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生氧化、磺酸化、酯化、配合等化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生特定波長的顏色反應(yīng)來進(jìn)行定性和定量測定，生特定波長的顏色反應(yīng)來進(jìn)行定性和定量測定，檢測限在檢測限在g級(jí)水平。級(jí)水平。色譜法色譜法(1) 薄層色譜法是一種比較成熟的、廣泛應(yīng)用的微量薄層色譜法是一種比較成熟的、廣泛應(yīng)用的微量快速檢測方法，檢出限達(dá)快速檢測方法，檢出限達(dá)0.10.01g。(2) gc aoac在在20世紀(jì)世紀(jì)80年代就對(duì)大部分有機(jī)磷農(nóng)藥建年代就對(duì)大部分有機(jī)磷農(nóng)藥建立了氣相色譜分析方法

19、，我國食品理化檢驗(yàn)國家立了氣相色譜分析方法，我國食品理化檢驗(yàn)國家標(biāo)準(zhǔn)方法也采用了氣相色譜檢測有機(jī)磷殺蟲劑。標(biāo)準(zhǔn)方法也采用了氣相色譜檢測有機(jī)磷殺蟲劑。隨著氣相色譜儀的普及，對(duì)可能存在有機(jī)磷農(nóng)藥隨著氣相色譜儀的普及，對(duì)可能存在有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的樣品，如食品、果蔬、飼料、水產(chǎn)品、土殘留的樣品，如食品、果蔬、飼料、水產(chǎn)品、土壤、水體及血液、化妝品等都建立了氣相色譜分壤、水體及血液、化妝品等都建立了氣相色譜分析方法。析方法。(3) hplc 對(duì)氣相色譜不能檢測的高沸點(diǎn)或熱不穩(wěn)定、易對(duì)氣相色譜不能檢測的高沸點(diǎn)或熱不穩(wěn)定、易裂解變質(zhì)的有機(jī)磷農(nóng)藥可以采用裂解變質(zhì)的有機(jī)磷農(nóng)藥可以采用hplc法檢測。法檢測。aoa

20、c中有近半數(shù)的有機(jī)磷農(nóng)藥都建立了中有近半數(shù)的有機(jī)磷農(nóng)藥都建立了hplc法，研究報(bào)道也較多。法，研究報(bào)道也較多。 當(dāng)使用當(dāng)使用gc或或hplc發(fā)現(xiàn)違規(guī)的農(nóng)藥殘留時(shí)，必發(fā)現(xiàn)違規(guī)的農(nóng)藥殘留時(shí)，必須使用其它方法來確認(rèn)。須使用其它方法來確認(rèn)。 可以利用可以利用gc借助其在借助其在兩根或多根極性不同的柱子上的保留時(shí)間來確認(rèn)，兩根或多根極性不同的柱子上的保留時(shí)間來確認(rèn)，也可以用也可以用gc/ms。 酶抑制法是利用有機(jī)磷殺蟲劑的毒理性質(zhì)建立的一種快酶抑制法是利用有機(jī)磷殺蟲劑的毒理性質(zhì)建立的一種快速檢測方法。速檢測方法。 由于有機(jī)磷能抑制乙酰膽堿酯酶的活性，使該酶分解乙由于有機(jī)磷能抑制乙酰膽堿酯酶的活性，使該酶

21、分解乙酰膽堿的速度減慢或停止，再利用一些特定的顏色反應(yīng)酰膽堿的速度減慢或停止，再利用一些特定的顏色反應(yīng)來反映被抑制程度，從而達(dá)到檢測目的。來反映被抑制程度，從而達(dá)到檢測目的。 操作簡單、速度快，不需昂貴儀器，特別適合現(xiàn)場檢測操作簡單、速度快，不需昂貴儀器，特別適合現(xiàn)場檢測以及大批量樣品的篩選。以及大批量樣品的篩選。 靈敏度、重復(fù)性和回收率相對(duì)較差。靈敏度、重復(fù)性和回收率相對(duì)較差。 新方法：酶抑制新方法：酶抑制-生物芯片分析法。生物芯片分析法。茶葉中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量測定方法：茶葉中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量測定方法： 提取提取 稱取稱取0.5g粉碎茶葉于試管中，加入粉碎茶葉于試管中，加入2ml蒸餾

22、水蒸餾水和無水硫酸鈉，在混勻器上混勻，加入和無水硫酸鈉，在混勻器上混勻，加入2ml乙乙酸乙酯，混勻，離心，取上清液。殘?jiān)靡宜崴嵋阴?，混勻，離心，取上清液。殘?jiān)靡宜嵋阴ズ驼和椋ㄒ阴ズ驼和椋?：1）混合液再提取一次，合）混合液再提取一次，合并兩次提取液，過活性炭小柱，用乙酸乙酯：并兩次提取液，過活性炭小柱，用乙酸乙酯：正己烷（正己烷（1：1）混合液洗脫，將洗脫液低溫濃）混合液洗脫，將洗脫液低溫濃縮至縮至0.5ml，供氣相色譜分析。外標(biāo)法峰面積，供氣相色譜分析。外標(biāo)法峰面積定量。定量。色譜條件色譜條件 色譜柱：色譜柱：hp-1石英毛細(xì)管柱，氮磷檢測器，石英毛細(xì)管柱，氮磷檢測器，流動(dòng)相：氮?dú)狻?/p>

23、氫氣和空氣。流動(dòng)相：氮?dú)狻錃夂涂諝狻?程序升溫：程序升溫：60（保持（保持0.5min），以），以10/min，至，至250（保持（保持3min）。）。 進(jìn)樣口溫度：進(jìn)樣口溫度：250。 檢測器溫度：檢測器溫度：300。 不分流進(jìn)樣：進(jìn)樣量不分流進(jìn)樣：進(jìn)樣量1ul。8.1.5 8.1.5 擬除蟲菊酯的殘留分析擬除蟲菊酯的殘留分析 擬除蟲菊酯（擬除蟲菊酯（pyrethroids)是一類重要是一類重要的殺蟲劑，具有高效、廣譜、低毒和生物的殺蟲劑，具有高效、廣譜、低毒和生物降解等特性。降解等特性。 擬除蟲菊酯在化學(xué)結(jié)構(gòu)上具有共同的特點(diǎn)擬除蟲菊酯在化學(xué)結(jié)構(gòu)上具有共同的特點(diǎn)之一是分子結(jié)構(gòu)中含有數(shù)個(gè)不對(duì)

24、稱碳原子，之一是分子結(jié)構(gòu)中含有數(shù)個(gè)不對(duì)稱碳原子，因而包含多個(gè)光學(xué)和立體異構(gòu)體。它們具因而包含多個(gè)光學(xué)和立體異構(gòu)體。它們具有不同的生物活性，即殺蟲效果也不大相有不同的生物活性，即殺蟲效果也不大相同。同。擬除蟲菊酯的檢測擬除蟲菊酯的檢測 在植物樣品中擬除蟲菊酯的測定要點(diǎn)：在植物樣品中擬除蟲菊酯的測定要點(diǎn)： 提取一般采用勻漿提取法，對(duì)于色素較深的樣品，可在勻提取一般采用勻漿提取法，對(duì)于色素較深的樣品，可在勻漿時(shí)加入活性炭再進(jìn)行。也有用索氏提取器用乙醚提取的漿時(shí)加入活性炭再進(jìn)行。也有用索氏提取器用乙醚提取的報(bào)道。報(bào)道。 提取溶劑多用丙酮。提取溶劑多用丙酮。 凈化通常采取液液分配加柱層析法，層析柱填料多

25、用氟羅凈化通常采取液液分配加柱層析法，層析柱填料多用氟羅里硅土和硅膠。里硅土和硅膠。 檢測儀器一般用氣相色譜帶電子捕獲檢測器，但也有用檢測儀器一般用氣相色譜帶電子捕獲檢測器，但也有用hplc/uv的報(bào)道。的報(bào)道。 氣相色譜測定一般采用非極性至弱極性柱。氣相色譜測定一般采用非極性至弱極性柱。除蟲菊酯農(nóng)藥熱穩(wěn)定性較高，使用毛細(xì)管色譜柱除蟲菊酯農(nóng)藥熱穩(wěn)定性較高，使用毛細(xì)管色譜柱在高溫區(qū)段（在高溫區(qū)段（250-280）有利于分離，雜質(zhì)）有利于分離，雜質(zhì)干擾較少，用干擾較少，用ecd檢測靈敏度較高，可以滿足食檢測靈敏度較高，可以滿足食品中擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留量的測定。品中擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留量的測定。將有機(jī)

26、氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥同時(shí)測定，在一般情將有機(jī)氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥同時(shí)測定，在一般情況下，有機(jī)氯如況下，有機(jī)氯如bhc、ddt出峰在前，而擬除出峰在前，而擬除蟲菊酯出峰在后。蟲菊酯出峰在后。水果、蔬菜中擬除蟲菊酯殘留量測定水果、蔬菜中擬除蟲菊酯殘留量測定1.前處理前處理 稱取約稱取約20g試樣，至于錐形瓶中，加入適量丙酮，振蕩試樣，至于錐形瓶中，加入適量丙酮，振蕩40min，過濾。用丙酮洗滌殘?jiān)?，將濾液收集在，過濾。用丙酮洗滌殘?jiān)?，將濾液收集在100ml容量瓶中，并用丙酮定容。容量瓶中，并用丙酮定容。 吸取吸取5ml提取液于具塞離心管中，加入提取液于具塞離心管中，加入20ml2硫酸鈉硫酸鈉溶液，用正

27、己烷萃取兩次。合并萃取液，并通過無水硫酸溶液，用正己烷萃取兩次。合并萃取液，并通過無水硫酸鈉柱脫水并以少量正己烷洗滌柱。流出液合并后濃縮至鈉柱脫水并以少量正己烷洗滌柱。流出液合并后濃縮至1ml。在微型層析柱的下端填入少量脫脂棉，依次裝入。在微型層析柱的下端填入少量脫脂棉，依次裝入0.5cm高的無水硫酸鈉、高的無水硫酸鈉、1g硅膠和硅膠和1cm高的無水硫酸鈉。高的無水硫酸鈉。用用5ml正己烷預(yù)淋洗層析柱，棄去流出液。將濃縮液倒入正己烷預(yù)淋洗層析柱，棄去流出液。將濃縮液倒入柱內(nèi)，以二氯甲烷淋洗層析柱，收集洗脫液，濃縮至干，柱內(nèi)，以二氯甲烷淋洗層析柱，收集洗脫液，濃縮至干，再以正己烷定容，供氣相色譜

28、測定。再以正己烷定容，供氣相色譜測定。2. 色譜條件色譜條件色譜柱：色譜柱：hp-5ms石英毛細(xì)管柱石英毛細(xì)管柱氮?dú)猓旱獨(dú)猓?ml/min柱溫：柱溫：60（保持（保持0.5min），以），以10/min，至，至280（保持（保持20min）進(jìn)樣口溫度：進(jìn)樣口溫度：260檢測器檢測器ecd溫度：溫度：280進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣方式：不分流8.2 8.2 獸藥獸藥 在食用動(dòng)物飼養(yǎng)過程中廣泛使用藥物，會(huì)造成藥物殘留在可在食用動(dòng)物飼養(yǎng)過程中廣泛使用藥物，會(huì)造成藥物殘留在可食用產(chǎn)品中。動(dòng)物性食品的藥物殘留會(huì)對(duì)人類健康產(chǎn)生影響。食用產(chǎn)品中。動(dòng)物性食品的藥物殘留會(huì)對(duì)人類健康產(chǎn)生影響。 獸藥的檢測方法包括：篩

29、查，檢測和確認(rèn)。獸藥的檢測方法包括：篩查，檢測和確認(rèn)。 篩查方法是就某種基質(zhì)中一定濃度的某種藥物做出陽性或陰篩查方法是就某種基質(zhì)中一定濃度的某種藥物做出陽性或陰性反應(yīng)的試驗(yàn)方法：微生物抑制試驗(yàn)（用于對(duì)大批量樣品進(jìn)性反應(yīng)的試驗(yàn)方法：微生物抑制試驗(yàn)（用于對(duì)大批量樣品進(jìn)行抗生素篩查）、放射和酶免疫快速測試盒（對(duì)指定藥物的行抗生素篩查）、放射和酶免疫快速測試盒（對(duì)指定藥物的篩查）。只能分類，不能確認(rèn)是某種具體的化合物。篩查）。只能分類，不能確認(rèn)是某種具體的化合物。 如果樣品中確實(shí)存在違規(guī)的藥物殘留，就需要使用其它的分如果樣品中確實(shí)存在違規(guī)的藥物殘留，就需要使用其它的分析方法來確認(rèn)：薄層色譜法、析方法來

30、確認(rèn)：薄層色譜法、gcgc、hplchplc、gc/msgc/ms和和hplc/mshplc/ms。8.2.1 -8.2.1 -興奮劑的殘留分析興奮劑的殘留分析v -激動(dòng)劑，在化學(xué)上屬苯乙醇胺，為兒茶酚胺、腎上腺激動(dòng)劑，在化學(xué)上屬苯乙醇胺，為兒茶酚胺、腎上腺素和去甲腎上腺素的化學(xué)類似物。一般可分為含取代基素和去甲腎上腺素的化學(xué)類似物。一般可分為含取代基的苯胺型（如克倫特羅）和苯酚型（如沙丁胺醇）兩大的苯胺型（如克倫特羅）和苯酚型（如沙丁胺醇）兩大類。類。v 它能與肌體絕大多數(shù)組織細(xì)胞膜上它能與肌體絕大多數(shù)組織細(xì)胞膜上-受體發(fā)生作用。受體發(fā)生作用。v 某些合成的某些合成的-激動(dòng)劑，當(dāng)以高劑量飼養(yǎng)

31、動(dòng)物時(shí)，會(huì)導(dǎo)致激動(dòng)劑，當(dāng)以高劑量飼養(yǎng)動(dòng)物時(shí)，會(huì)導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)從脂肪組織向肌肉組織的轉(zhuǎn)移，使畜禽瘦肉增營養(yǎng)物質(zhì)從脂肪組織向肌肉組織的轉(zhuǎn)移，使畜禽瘦肉增加。由于這種用法造成的可是用組織中的藥物殘留在毒加。由于這種用法造成的可是用組織中的藥物殘留在毒理學(xué)等方面的種種問題，致使許多國家禁止在使用動(dòng)物理學(xué)等方面的種種問題，致使許多國家禁止在使用動(dòng)物中使用該類藥物。中使用該類藥物。測定方法測定方法 檢測檢測-興奮劑的樣品種類很多，有飼料、興奮劑的樣品種類很多，有飼料、尿、血漿、內(nèi)臟（肝、腎）、肌肉、毛發(fā)、尿、血漿、內(nèi)臟（肝、腎）、肌肉、毛發(fā)、視網(wǎng)膜等。其中最能積累視網(wǎng)膜等。其中最能積累-興奮劑的是內(nèi)興奮劑的

32、是內(nèi)臟、視網(wǎng)膜。所以，在上述樣品中，檢測臟、視網(wǎng)膜。所以，在上述樣品中，檢測是否違法使用是否違法使用-興奮劑作為生長促進(jìn)劑的興奮劑作為生長促進(jìn)劑的合適樣品是肝臟。另外，尿樣本前處理較合適樣品是肝臟。另外，尿樣本前處理較簡單，可實(shí)現(xiàn)快速檢測。簡單，可實(shí)現(xiàn)快速檢測。1. 樣品的前處理樣品的前處理樣品的前處理包括樣品提取、酶解（酸解）、樣品的前處理包括樣品提取、酶解（酸解）、凈化，如果采用凈化，如果采用gcgc檢測，還增加衍生化步驟。檢測，還增加衍生化步驟。-興奮劑檢測進(jìn)行酸解、酶解的必要性：因?yàn)榕d奮劑檢測進(jìn)行酸解、酶解的必要性：因?yàn)?興奮劑在樣品中往往會(huì)與其它成分形成結(jié)合興奮劑在樣品中往往會(huì)與其它

33、成分形成結(jié)合物，如在葡糖苷酸酶、硫酸酯蛋白相結(jié)合，所物，如在葡糖苷酸酶、硫酸酯蛋白相結(jié)合，所以樣品在提取氏要用酸或酶水解。以樣品在提取氏要用酸或酶水解。酶解、酸解的條件選擇：酶的品種、酶解的酶酶解、酸解的條件選擇：酶的品種、酶解的酶用量、酶解時(shí)間用量、酶解時(shí)間提取提取 提取的方法有液液萃取法、固相萃取法、超臨界提提取的方法有液液萃取法、固相萃取法、超臨界提取法。取法。凈化凈化 最常用的凈化手段是固相萃取法（最常用的凈化手段是固相萃取法（spespe），也有人），也有人采用免疫親和色譜法、液液凈化法。采用免疫親和色譜法、液液凈化法。 免疫親和色譜法：用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)出特異性抗體，免疫親和色譜法：用

34、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)出特異性抗體，抗體純化后被結(jié)合到瓊脂糖膠上制成柱，樣品上柱抗體純化后被結(jié)合到瓊脂糖膠上制成柱，樣品上柱后，后， -興奮劑就與這些柱上的抗體結(jié)合在一起而興奮劑就與這些柱上的抗體結(jié)合在一起而保留下來，然后再用溶劑洗脫?，F(xiàn)在已有商品化的保留下來，然后再用溶劑洗脫?，F(xiàn)在已有商品化的可重復(fù)使用的可重復(fù)使用的iaciac柱。柱。衍生化衍生化 gc/ms、gc/ftir確證前，采用衍生確證前，采用衍生化技術(shù)以提高檢測靈敏度。最常用的衍生化技術(shù)以提高檢測靈敏度。最常用的衍生化試劑有：三甲基硅烷（化試劑有：三甲基硅烷（tms）、環(huán)狀二）、環(huán)狀二甲基硅烷嗎啉（甲基硅烷嗎啉（dms）。另外還有碳酰氯）。

35、另外還有碳酰氯（cocl2）、甲基硼酸（）、甲基硼酸（mba）、五氟一）、五氟一丙酐。丙酐。2. 檢測檢測 gc/ms 這是這是-興奮劑檢測非常有效、靈敏、準(zhǔn)確的手段，興奮劑檢測非常有效、靈敏、準(zhǔn)確的手段，電離方式有電子轟擊電離方式有電子轟擊eiei、化學(xué)離子化、化學(xué)離子化cici兩種方式。兩種方式。 采用采用tmstms作衍生化試劑、作衍生化試劑、eiei電離方式電離某些電離方式電離某些-興奮劑的碎片如下：興奮劑的碎片如下：克倫特羅：克倫特羅：8686，262262，243243，333333，277277，187187沙丁胺醇：沙丁胺醇：8686，369369，350350，440440，

36、384384，294294特布他林：特布他林：8686，356356，336336，426426，370370，280280 hplc 常用的檢測器有紫外（常用的檢測器有紫外（uv）、熒光、電化學(xué)等。）、熒光、電化學(xué)等。 免疫分析法免疫分析法 放射免疫分析法、酶免疫分析法放射免疫分析法、酶免疫分析法 優(yōu)點(diǎn)：一次可處理多個(gè)樣品、有商品化試劑盒供優(yōu)點(diǎn)：一次可處理多個(gè)樣品、有商品化試劑盒供應(yīng)，檢測靈敏度高應(yīng)，檢測靈敏度高 薄層色譜法薄層色譜法 hplc/ms gc/ftir合成的合成的- -激動(dòng)劑激動(dòng)劑 瘦肉精瘦肉精克倫特羅；鹽酸克倫特羅；鹽酸雙氯醇克倫特羅；鹽酸克倫特羅；鹽酸雙氯醇胺；克喘素；氨哮

37、素；氨必妥；氨雙氯喘通；氨雙氯醇胺；克喘素；氨哮素；氨必妥；氨雙氯喘通；氨雙氯醇胺。胺。 化學(xué)名為化學(xué)名為“2-2-（叔丁氨基）甲基（叔丁氨基）甲基4-4-氨基氨基-3-3，5-5-二氯苯甲醇鹽酸鹽二氯苯甲醇鹽酸鹽”，是一種從天然兒茶酚胺衍生合，是一種從天然兒茶酚胺衍生合成的化合物；也稱羥甲叔丁腎上腺素成的化合物；也稱羥甲叔丁腎上腺素, 是一種強(qiáng)效興奮是一種強(qiáng)效興奮劑。劑。 上世紀(jì)上世紀(jì)80年代初，美國脂胺公司研究人員意外地發(fā)年代初，美國脂胺公司研究人員意外地發(fā)現(xiàn)，將一定量的鹽酸克倫特羅加入飼料中，能夠改變營現(xiàn)，將一定量的鹽酸克倫特羅加入飼料中，能夠改變營養(yǎng)物質(zhì)的代謝途徑，促進(jìn)動(dòng)物肌肉特別是骨

38、胳肌蛋白質(zhì)養(yǎng)物質(zhì)的代謝途徑，促進(jìn)動(dòng)物肌肉特別是骨胳肌蛋白質(zhì)的合成，同時(shí)抑制脂肪合成，從而促進(jìn)動(dòng)物生長，增加的合成，同時(shí)抑制脂肪合成，從而促進(jìn)動(dòng)物生長，增加瘦肉率。根據(jù)試驗(yàn)得出，在飼料中添加適量的鹽酸克倫瘦肉率。根據(jù)試驗(yàn)得出，在飼料中添加適量的鹽酸克倫特羅，可以提高飼料轉(zhuǎn)化率、生長速率、瘦肉相對(duì)增加特羅，可以提高飼料轉(zhuǎn)化率、生長速率、瘦肉相對(duì)增加10以上，以上，于是這項(xiàng)技術(shù)開始在養(yǎng)殖業(yè)中大行其道。于是這項(xiàng)技術(shù)開始在養(yǎng)殖業(yè)中大行其道。瘦肉精用于養(yǎng)殖的發(fā)現(xiàn)瘦肉精用于養(yǎng)殖的發(fā)現(xiàn)作用機(jī)理作用機(jī)理 它的主要作用機(jī)理是作為一種強(qiáng)效激動(dòng)劑，選它的主要作用機(jī)理是作為一種強(qiáng)效激動(dòng)劑，選擇性的作用于腎上腺素?fù)裥缘淖?/p>

39、用于腎上腺素2 2受體上，激活腺苷酸環(huán)化受體上，激活腺苷酸環(huán)化酶酶(camp(camp) )，使環(huán)磷腺苷增加，加強(qiáng)脂肪分解，促進(jìn)，使環(huán)磷腺苷增加，加強(qiáng)脂肪分解，促進(jìn)蛋白質(zhì)合成，實(shí)現(xiàn)動(dòng)物營養(yǎng)再分配，故又將瘦肉精蛋白質(zhì)合成，實(shí)現(xiàn)動(dòng)物營養(yǎng)再分配，故又將瘦肉精稱作稱作“生長促進(jìn)劑生長促進(jìn)劑(growth promoter)”(growth promoter)”和營養(yǎng)和營養(yǎng)“重重分配劑分配劑(repartitioning agent)”(repartitioning agent)”。 為提高豬肉的瘦肉率，瘦肉精作為飼料添加劑，為提高豬肉的瘦肉率，瘦肉精作為飼料添加劑，使用劑量是人用藥劑量的使用劑量是人用

40、藥劑量的10倍以上。它用量大、使用倍以上。它用量大、使用的時(shí)間長、代謝慢，所以屠宰后上市的豬肉中瘦肉精殘的時(shí)間長、代謝慢，所以屠宰后上市的豬肉中瘦肉精殘留量很大。同時(shí)該藥化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，一般加熱方法不能留量很大。同時(shí)該藥化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，一般加熱方法不能將其破壞。殘留藥物通過食物進(jìn)入人體，大量積蓄使人將其破壞。殘留藥物通過食物進(jìn)入人體，大量積蓄使人中毒。如果一次攝入量過大，會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重中毒。中毒。如果一次攝入量過大，會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重中毒。瘦肉精的危害瘦肉精的危害對(duì)人的危害的主要表現(xiàn)對(duì)人的危害的主要表現(xiàn)反復(fù)使用會(huì)產(chǎn)生耐受性，對(duì)支氣管擴(kuò)張作用減弱及反復(fù)使用會(huì)產(chǎn)生耐受性，對(duì)支氣管擴(kuò)張作用減弱及持續(xù)時(shí)間縮短。持續(xù)時(shí)

41、間縮短。 克倫特羅還可通過胎盤屏障進(jìn)入胎兒體內(nèi)產(chǎn)生蓄積，克倫特羅還可通過胎盤屏障進(jìn)入胎兒體內(nèi)產(chǎn)生蓄積，從而影響子代。從而影響子代。易引起急性中毒易引起急性中毒：表現(xiàn)為心悸，面頸、四肢肌肉顫表現(xiàn)為心悸，面頸、四肢肌肉顫抖，頭暈、乏力。心動(dòng)過速，室性早博，心電圖示抖，頭暈、乏力。心動(dòng)過速，室性早博，心電圖示s-ts-t段壓低與段壓低與t t波倒置。波倒置。與糖皮質(zhì)激素合用可引起低血鉀，從而導(dǎo)致心律失與糖皮質(zhì)激素合用可引起低血鉀，從而導(dǎo)致心律失常。常。 8.3 8.3 食品中動(dòng)植物毒素食品中動(dòng)植物毒素 生物毒素（生物毒素（biotoxin)是一大類生物活性物是一大類生物活性物質(zhì)的總稱，包括動(dòng)物毒素、

42、植物毒素和微生質(zhì)的總稱，包括動(dòng)物毒素、植物毒素和微生物毒素。物毒素。 生物毒素已經(jīng)對(duì)食品安全和人類健康構(gòu)成了生物毒素已經(jīng)對(duì)食品安全和人類健康構(gòu)成了威脅，因此，食品威脅，因此，食品/飼料中生物毒素的研究飼料中生物毒素的研究也日益顯現(xiàn)出其必要性和迫切性。也日益顯現(xiàn)出其必要性和迫切性。8.3.1 8.3.1 真菌毒素真菌毒素 真菌毒素（真菌毒素（mycotoxins）是某些絲狀真菌產(chǎn)生的）是某些絲狀真菌產(chǎn)生的具有生物毒性的次級(jí)代謝產(chǎn)物，這些毒性真菌包具有生物毒性的次級(jí)代謝產(chǎn)物，這些毒性真菌包括曲霉、青霉、鐮刀霉、鏈格孢酶、棒孢酶和毛括曲霉、青霉、鐮刀霉、鏈格孢酶、棒孢酶和毛殼酶等。殼酶等。 最先被分

43、離純化的真菌毒素是麥角生物堿（最先被分離純化的真菌毒素是麥角生物堿（ergot alkaloid, 1875)和青霉酸（和青霉酸（penicillic acid, 1913)。然而，對(duì)真菌毒素的真正研究卻是從然而，對(duì)真菌毒素的真正研究卻是從1962年黃曲年黃曲霉毒素的發(fā)現(xiàn)開始的。霉毒素的發(fā)現(xiàn)開始的。8.3.2 海洋藻類毒素 海洋藻類毒素是由海洋中的微藻或海洋細(xì)菌產(chǎn)生的一海洋藻類毒素是由海洋中的微藻或海洋細(xì)菌產(chǎn)生的一類生物活性物質(zhì)的總稱。由于這些毒素通常是通過海類生物活性物質(zhì)的總稱。由于這些毒素通常是通過海洋貝類或魚類等生物媒介造成人類中毒的，因此這些洋貝類或魚類等生物媒介造成人類中毒的，因此這

44、些毒素常被稱作貝毒或魚毒。毒素常被稱作貝毒或魚毒。 常見的貝毒有麻痹性貝毒，常見的貝毒有麻痹性貝毒， 腹瀉性貝毒，記憶缺失性腹瀉性貝毒，記憶缺失性貝毒，神經(jīng)性貝毒等。貝毒，神經(jīng)性貝毒等。 我國浙江、福建、廣東等地曾多次發(fā)生貝類中毒，導(dǎo)我國浙江、福建、廣東等地曾多次發(fā)生貝類中毒，導(dǎo)致中毒的貝類有蚶子、花蛤、香螺、織紋螺等常食用致中毒的貝類有蚶子、花蛤、香螺、織紋螺等常食用的貝類。的貝類。麻痹性貝毒麻痹性貝毒麻痹性貝毒是分布最廣，危害最大的一類毒素。麻痹性貝毒是分布最廣，危害最大的一類毒素。它是由甲藻產(chǎn)生的一類四氫嘌呤毒素的總稱。它是由甲藻產(chǎn)生的一類四氫嘌呤毒素的總稱。主要癥狀表現(xiàn)為面部、肢端麻木

45、，嚴(yán)重的會(huì)因呼主要癥狀表現(xiàn)為面部、肢端麻木，嚴(yán)重的會(huì)因呼吸肌麻痹而導(dǎo)致死亡。吸肌麻痹而導(dǎo)致死亡。腹瀉性貝毒腹瀉性貝毒腹瀉性貝毒毒素主要來自甲藻中的鰭藻屬和原甲腹瀉性貝毒毒素主要來自甲藻中的鰭藻屬和原甲藻屬。藻屬。主要癥狀為嘔吐和腹瀉，長期毒性效應(yīng)可能導(dǎo)致主要癥狀為嘔吐和腹瀉，長期毒性效應(yīng)可能導(dǎo)致癌癥。癌癥。記憶缺失性貝毒記憶缺失性貝毒記憶缺失性貝毒的活性成分為軟骨藻酸。記憶缺失性貝毒的活性成分為軟骨藻酸。中毒者表現(xiàn)出腸道癥狀和神經(jīng)紊亂，嚴(yán)重的有短中毒者表現(xiàn)出腸道癥狀和神經(jīng)紊亂，嚴(yán)重的有短暫的記憶喪失現(xiàn)象。暫的記憶喪失現(xiàn)象。神經(jīng)性貝毒神經(jīng)性貝毒神經(jīng)性貝毒是到目前為止危害范圍較小的一類毒神經(jīng)性貝毒

46、是到目前為止危害范圍較小的一類毒素。素。表現(xiàn)出神經(jīng)中毒的癥狀。表現(xiàn)出神經(jīng)中毒的癥狀。腹瀉性貝毒檢測腹瀉性貝毒檢測 腹瀉性貝毒的分析主要采用熒光化合物腹瀉性貝毒的分析主要采用熒光化合物adam標(biāo)標(biāo)記反相高效液相色譜分析的方法。由于記反相高效液相色譜分析的方法。由于adam不穩(wěn)定，而且不易獲得，因此又有了一些改進(jìn)的不穩(wěn)定，而且不易獲得，因此又有了一些改進(jìn)的方法，包括采用不同的衍生劑和提取方法。但由方法，包括采用不同的衍生劑和提取方法。但由于目前樣品前處理及色譜過程，對(duì)于目前樣品前處理及色譜過程，對(duì)dsp結(jié)構(gòu)類似結(jié)構(gòu)類似物不能有效分離，因此物不能有效分離，因此hplc法測定法測定dsp效果不效果不是

47、很理想。目前是很理想。目前hplc-ms技術(shù)已用于技術(shù)已用于dsp的分的分析，成為析，成為dsp液相色譜法的重要補(bǔ)充。液相色譜法的重要補(bǔ)充。麻痹性貝類毒素檢測麻痹性貝類毒素檢測 麻痹性貝毒（麻痹性貝毒（psp）是一類四氫嘌呤化合）是一類四氫嘌呤化合物，這類毒素通常是非結(jié)晶、高極性、難物，這類毒素通常是非結(jié)晶、高極性、難揮發(fā)的物質(zhì)，檢測方法主要采用液相色譜揮發(fā)的物質(zhì)，檢測方法主要采用液相色譜法。由于法。由于psp本身生色基團(tuán)很弱，不易被本身生色基團(tuán)很弱，不易被檢測，因此檢測前須氧化修飾，將檢測，因此檢測前須氧化修飾，將psp分分子的環(huán)結(jié)構(gòu)氧化成熒光生色基團(tuán)。子的環(huán)結(jié)構(gòu)氧化成熒光生色基團(tuán)。lc/m

48、s和毛細(xì)管電泳和毛細(xì)管電泳/質(zhì)譜（質(zhì)譜（ce/ms）聯(lián)用技術(shù)）聯(lián)用技術(shù)已用于麻痹性貝毒分析。已用于麻痹性貝毒分析。神經(jīng)性貝毒檢測神經(jīng)性貝毒檢測 神經(jīng)性貝毒（神經(jīng)性貝毒（nsp）色譜分析包括薄層層）色譜分析包括薄層層析法（析法（tlc）和）和hplc。tlc不夠靈敏，不夠靈敏，目前已很少應(yīng)用。目前已很少應(yīng)用。hplc法由于流出物背法由于流出物背景干擾，在檢測靈敏度和選擇性方面存在景干擾，在檢測靈敏度和選擇性方面存在問題。近年來，問題。近年來，hplc-ms聯(lián)用技術(shù)開始聯(lián)用技術(shù)開始應(yīng)用于神經(jīng)性貝毒分析。應(yīng)用于神經(jīng)性貝毒分析。河豚毒素河豚毒素(tetrodotoxin(tetrodotoxin) )

49、 河豚河豚(spheroides vermicularis)又名鈍魚，又名鈍魚，它的某些臟器及組織中均含有毒素，是一種神經(jīng)它的某些臟器及組織中均含有毒素，是一種神經(jīng)毒，其毒性穩(wěn)定（毒，其毒性穩(wěn)定（220），經(jīng)炒煮、鹽淹和日），經(jīng)炒煮、鹽淹和日曬等均不能被破壞，可使神經(jīng)中樞和神經(jīng)末梢發(fā)曬等均不能被破壞，可使神經(jīng)中樞和神經(jīng)末梢發(fā)生麻痹。中毒癥狀始發(fā)于使用后生麻痹。中毒癥狀始發(fā)于使用后10秒，先是口腔秒，先是口腔麻木和刺痛，繼發(fā)為虛弱、麻痹、血壓降低和脈麻木和刺痛，繼發(fā)為虛弱、麻痹、血壓降低和脈搏快而弱，如不及時(shí)治療可出現(xiàn)死亡。搏快而弱，如不及時(shí)治療可出現(xiàn)死亡。nnoohhoo-hohh2n+hoo

50、hohtetrodotoxin治療：治療：1、盡快排除毒物：催吐、洗胃、導(dǎo)瀉。、盡快排除毒物：催吐、洗胃、導(dǎo)瀉。2、應(yīng)用吸附劑減少毒物的吸收。、應(yīng)用吸附劑減少毒物的吸收。3、補(bǔ)液、利尿，可給予葡萄糖、維生素、輔酶、補(bǔ)液、利尿，可給予葡萄糖、維生素、輔酶、等，促進(jìn)毒素的排泄。等，促進(jìn)毒素的排泄。4、使用腎上腺皮質(zhì)激素，如地塞米松，提高組織對(duì)毒素的耐、使用腎上腺皮質(zhì)激素，如地塞米松，提高組織對(duì)毒素的耐受性。受性。5、對(duì)癥治療：防治呼吸衰竭。、對(duì)癥治療：防治呼吸衰竭。 河豚毒素中毒目前無特殊解毒劑，但由于毒素存在體內(nèi)解河豚毒素中毒目前無特殊解毒劑，但由于毒素存在體內(nèi)解毒和排泄很快，如果發(fā)病后小時(shí)未死

51、亡，多能恢復(fù)，因此，毒和排泄很快，如果發(fā)病后小時(shí)未死亡，多能恢復(fù)，因此，一旦發(fā)現(xiàn)中毒，應(yīng)盡快給予各種排毒和對(duì)癥處理的措施，讓一旦發(fā)現(xiàn)中毒，應(yīng)盡快給予各種排毒和對(duì)癥處理的措施，讓病人度過危急期。病人度過危急期。 河豚毒素測定方法河豚毒素測定方法小鼠生物試驗(yàn)法小鼠生物試驗(yàn)法免疫化學(xué)測定法免疫化學(xué)測定法毛細(xì)管等速電泳電壓檢測法毛細(xì)管等速電泳電壓檢測法熒光法熒光法tlc/火焰離子檢測法火焰離子檢測法tlc/快原子轟擊質(zhì)譜法快原子轟擊質(zhì)譜法hplchplc/mshplc-ms測定河豚魚中河豚魚毒素測定河豚魚中河豚魚毒素1.前處理前處理 將河豚魚肉或皮中的河豚魚毒素用乙醇乙將河豚魚肉或皮中的河豚魚毒素用乙醇乙酸水（酸水（75：1：14）提取，過濾后，提）提取，過濾后，提取液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，用離子交換樹脂凈取液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，用離子交換樹脂凈